2024年3月13日发(作者：太史一瑾)
ＭｘＡ蛋白抗病毒机制及其应用前景
苏州市第五人民医院吴妹英
综述
杨吉成审校
摘要本文主要论述了ＭｘＡ基因在Ｉ型干扰素（ＩＦＮ—ａ／ｐ）或病毒诱导下可表达具广谱
抗病毒作用的Ｍｘ蛋白（小鼠为Ｍｘｌ，人类为ＭｘＡ），并介绍了ＭｘＡ蛋白的抗病毒谱及其机
制，论述了ＭｘＡ表达与病毒（ＨＩＶ一１、ＨＢＶ、ＨＣＶ等）感染性疾病发生和发展的相关性，以及
在判定ＩＦＮ疗效中的应用。既有理论意义，又有广阔的应用前景。
毒机制
国外大量的研究资料表明ＭｘＡ蛋白主
要对ＲＮＡ病毒敏感。实验证明，１０ｎｇ／ｍｌ的
纯品ＭｘＡ可以抵抗２０ＴＣＩＤ。。的ＨＳＶ一１和
Ａｄ３ＤＮＡ病毒对细胞的感染，说明ＭｘＡ为
ＤＮＡ病毒也有抑制作用。
ＭｘＡ蛋白有两种构型，一种是非活性的
ＧＤＰ结合形式，另一种是活性的ＧＴＰ酶结
合形式。ＭｘＡ和Ｍｘｌ基因均具有与ＧＴＰ酶
结构中Ｇ××××ＧＫｓ、Ｄ×Ｘ
Ｇ和ＴＫＤ×
（Ｘ代表某种氨基酸位点）两个相一致的结合
位点，ＭｘＡ蛋白只有在与病毒的核糖蛋白体
（ＲＮＰ）中的ＮＰ（核衣壳）紧密结合后，方可
使ＭｘＡ的构形发生改变，而使ＭｘＡ蛋白活
化，活化的构型又可受到ＧＴＰＴｓ的稳定作用
（ＧＴＰＴｓ是ＧＴＰ的非水解类似物）活化的
ＭｘＡ发挥对核衣壳的水解作用后，释放出的
病毒核酸，很快就会被胞质中的核酸内切酶
降解。ＧＴＰ酶发挥水解作用后，又可转换成
非活化的ＧＤＰ形式，继续发挥作用。
大量实验证明，纯品ＭｘＡ蛋白在体内
外能独立发挥强有力的抗病毒效应，此时无
需ＩＦＮ诱导和协同［３］。
三、ＭｘＡ蛋白的表达
１．ＭｘＡ蛋白在细胞中的诱导表达
用
ＭｘＡ是由ＩＦＮ—ａ邝诱导人细胞所产生
的７８×１０３的抗病毒蛋白，是继发现由ＩＦＮｓ
诱导细胞产生２．５Ａ寡腺苷酸合成酶和蛋白
激酶之后新发现的新型抗病毒蛋白。Ｍｘ基
因是Ｌｉｎｄｅｎｍａｎｎ研究Ａ２Ｇ小鼠能耐受对
其他小鼠致死剂量的流感病毒感染时发现
的，这种特性是从小鼠１６号染色体上单一显
性等位基因遗传获得的，因能抵抗粘液病毒
（流感）而命名为Ｍｘ。体内外研究表明，这种
抗流感病毒作用是受ＩＦＮ—ａ／ｐ调节，而不受
ＩＦＮ一丫调节。Ｈｏｒｉｓｈｅｒｇｅｒ等发现Ｍｘ＋细胞
经ＩＦＮ—ａ诱导后与Ｍｘ一细胞的差别是多出
一第７５×１０３的多肽，而且这种多肽也只有
在ＩＦＮ—ａ／８诱导后产生，ＩＦＮ—ｙ不能产生，将
这种多肽统一命名为Ｍｘ蛋白。
一、Ｍｘ基因类型和蛋白诱导表达
近来研究发现小鼠的Ｍｘ基因分Ｍｘｌ、
Ｍｘ２两类，也有Ｍｘ３的报告，但能发挥抗病
毒作用的是由Ｍｘｌ基因编码的７５×１０３的
Ｍｘｌ蛋白，在体内外能抵抗流感病毒感染。
Ｍｘ２、Ｍｘ３未发现有抗病毒功能［２］。人的Ｍｘ
基因包括ＭｘＡ和ＭｘＢ两类。ＭｘＡ基因位
于人２１号染色体长臂上，经ＩＦＮ—Ｂ处理可诱
导产生７８×１０３的ＭｘＡ蛋白，分布于细胞的
胞质内，这种胞质蛋白可直接发挥对流感病
毒和滤泡性口炎病毒（ＶＳＶ）的抗病毒效应，
而ＭｘＢ未发现有抗病毒活性。
二、ＭｘＡ蛋白对病毒的敏感性及其抗病
万方数据
ＩＦＮ—ａ邝处理人胚肺细胞（如ＨＥＩ。）或Ａ５４９
癌肺细胞、Ｗｉｓｈ细胞、Ｄａｎｄｉ细胞、ＣＥＳＳ细
胞［４］、人眼角膜细胞、人神经细胞等均可表达
６
ＭｘＡ蛋白。ＭｘＡ蛋白的诱导剂除了ＩＦＮ—ｄ／
ｐ外，还有病毒及双链ＲＮＡ。实验证明ｌｐｆｕ／
ｍｌ的病毒或１ＩＵ／ｍｌ的ｌＦＮ（ＩＦＮ—ａ邝）均可
诱导产生可测出的ＭｘＡ蛋白。但ＴＮＦ—ａ、
ＩＩ。一６单独或与ＩＦＮ—ａ联合应用均不能影响
ＭｘＡ
ｍＲＮＡ水平在细胞中的表达［５］。
２．ＭｘＡ基因的转基因表达ＭｘＡ基因
转染３Ｔ３细胞后可抵抗流感病毒感染［１］，也
能抵抗ＶＳＶ的感染；在转染的Ｕ９３７人单核
细胞中，可显著抑制麻疹病毒和ＶＳＶ的感
染，均可在细胞中持续表达ＭｘＡ蛋白，使感
染细胞中所释放出的病毒滴度比未转染
ＭｘＡ基因的对照组下降１００倍。
３．ＭｘＡ蛋白的基因克隆和重组表达
Ｓｔａｅｈｌｌ于１９８６年克隆了鼠ＭｘｌｃＤＮＡ，转
染Ｍｘ一细胞后，获得了Ｍｘ蛋白表达，并能
发挥抗流感病毒作用，为Ｍｘ基因的表达提
供了实验依据。４年后Ｎａｋａｙｍａ等将克隆的
Ｍｘｌ
ｃＤＮＡ在大肠埃希菌（大肠杆菌）中获
得了表达，并用纯化的Ｍｘｌ蛋白证明了抗病
毒效应。
ＭｘＡ
ｃＤＮＡ克隆和序列分析是由Ｈｏ—
ｒｉｓｂｅｒｇｅｒ等完成的［６］，随后在大肠杆菌中获
得了重组表达。一种是以带有组氨酸（Ｈｉｓ）分
泌型进行表达，纯化的Ｈｉｓ—ＭｘＡ蛋白可呈
现特异的ＧＴＰ酶活性，并具有抗病毒效
应［７］。另一种是以包涵体形式表达经几步层
析纯化后可获得纯品，试验证明该蛋白能与
ＭｘＡ单克隆抗体发生特异结合，呈现抗病毒
活性。这就为采用ＥＬｌＳＡ测定全血细胞或由
ＩＦＮ诱导细胞所产生的ＭｘＡ蛋白量，为临
床诊断试剂盒的开发和应用打下了基础。
真核表达的ＭｘＡｃＤＮＡ来源于ＩＦＮ—ａ
诱导人单核细胞和Ａ５４９肺癌细胞的
ｍＲＮＡ，经ＲＴ—ＰＣＲ克隆出ＭｘＡ
ｃＤＮＡ。用
棒状病毒载体在昆虫细胞中进行了表达，通
过纯化制备出ＭｘＡ蛋白纯品，该纯品对
ＭｘＡ的单克隆抗体具有高度的特异性［８］。
万
四、ＭｘＡ蛋白的临床应用及展望
方数据
１．病毒感染与ＭｘＡ表达水平的关系
体外试验证明，ＨＩＶ单独感染人单核细胞
后，一般在６ｈ可产生ＭｘＡ蛋白，１４ｄ可达高
峰。体外也能发挥抗病毒作用［９～，而且这种表
达往往不依赖于ＩＦＮ—ａ的存在。体内研究表
明，由ＨＩＶ一１感染者所产生ＩＦＮ—ｄ与健康人
产生的ＩＦＮ—ａ的生物学特性可能不同，有待
进一步研究Ｄｏ］。
在ＨＢＶ引起的慢性乙型肝炎中，由于
可削弱免疫细胞活性和影响对ｌＦＮ—ａ的反
应能力而直接影响ＩＦＮ—ａ的疗效［１１。，后来研
究发现这可能与由ＨＢＶ所产生的缺陷性颗
粒（病毒衣壳蛋白）有关。这是由于缺陷性
ＨＢＶ基因组所表达的缺陷颗粒在细胞内大
量集聚，选择性地抑制了ＭｘＡ启动子，进而
抑制ＭｘＡ蛋白表达及其抗病毒能力［１２３。由
此可见ＭｘＡ蛋白表达水平可能与慢性乙型
肝炎转归有关。
ＭｘＡ与病毒的感染密切相关。对病毒反
应也非常敏感，甚至ｌｐｆｕ／ｍｌ的病毒量即可
使细胞表达可测出的ＭｘＡ蛋白，因此可用
于病毒的早期和急性感染的诊断。鉴于细菌
及其他微生物感染细胞并不能诱导表达
ＭｘＡ蛋白，因此ＭｘＡ表达水平的测定也可
用于病毒感染与细菌及其他微生物感染的鉴
别诊断。
２．自身免疫性疾病与ＭｘＡ表达的关系
经测定系统性红斑狼疮患者外周血细胞均
可大量表达ＭｘＡ蛋白，有病毒感染的可能
性。但在１５例ＣＶＩＤ的长期低丙种球蛋白血
症患者外周血细胞中，ＭｘＡ蛋白表达均为阴
性。后经ＩＦＮ—ａ诱导，细胞中可产生正常量
的ＭｘＡ蛋白。因此对ＣＶＩＤ患者的病毒感
染或自身免疫的致病机制尚存争议。
３．ＭｘＡ蛋白与ＩＦＮ—ａ效价测定和疗效
判定的关系鉴于ＭｘＡ蛋白在细胞内的表
达量与ＩＦＮ—ａ／Ｂ呈剂量依赖性，因此可采用
ＥＩ。ＩＳＡ测定ＭｘＡ蛋白含量，来代替当今繁
琐的ＩＦＮ生物活性检测法。（下转第１１页）
７
药性筛选工作中的应用情况表明，分析感染我们国情的基因芯片技术。相信不暇时日，经
病毒基因的多态性与病毒一宿主细胞系统病过努力，在一些领域我们会迎头赶上，让希望
毒基因与细胞基因的表达改变，有助于人们
变为现实。
了解病毒的感染发病机制与抗药性机制ｉ利
参考文献
用细菌基因组与抗药性基因、致病岛基因等
重要基因的基因芯片通过单一的杂交试验就［１
Ｇｒａｖｅｓ
ＤＪ．Ｔｒｅｎｄｓ
ｉｎＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏ—
可以完成感染细菌或分离菌株的基因分型与
ｇＹ，１９９９；１７（３）：１２７～１３４［２３Ｋｚａｌ
ＭＪ
ｅｔ
菌种鉴定，快速诊断、鉴定致病细菌与非致病
ａ１．Ｎａｔｕｒｅ
Ｍｅｄ，１９９６；２（７）：７５３～７５９［３３
菌，指导临床治疗；对细菌基因组多个基因表
Ｈｕａ
Ｚ
ｅｔ
ａ１．Ｐｒｏｃ
ＮａｔｌＡｃａｄ
ＳｃｉＵＳＡ，１９９８；
达同时进行定量分析，为研究细菌对环境信９５（２４）：１４４７０＂－＇－－１４４７５［４］Ｇｉｎｇｅｒａｓ
ＴＲ
ｅｔ
号或药物的反应、研究细菌侵袭力的发生提
ａ１．Ｇｅｎｏｍｅ
Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１９９８；８（５）：４３５～４４８
供了一种直接、高效的检测方法。Ｅ５ＪＴｒｏｅｓｃｈ
Ａ
ｅｔ
ａ１．Ｊ
Ｃｌｉｎ
Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，１
９９９；
目前，基因芯片技术在医学、分子生物学３７（１）：４９～５５１６］Ｃｈａｍｂｅｒｓ
Ｊ
ｅｔ
ａ１．Ｊ
Ｖｉｒｏｌ，
领域应用已经越来越广泛，受到人们的普遍１９９９；７３（７）：５７５７～５７６６［７］Ｈｅａｄ
ＳＲ
ｅｔ
ａ１．
重视，但研究成本相对较高，待测定的靶探针
Ｍｏｌ
Ｃｅｌｌ
Ｐｒｏｂｅｓ，１９９９；１３（２）：８１～８７［８］
标记方法也比较繁琐，国内研究还只是处予
ＡｎｔｏｉｎｅＤＳ
ｅｔ
ａ１．ＮａｔｕｒｅＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，１９９８；
起步阶段。但这项研究是一种实力的较量，要
１６（１）：４５～４８
想在基因功能分析领域取得更新、更高、更有
（１９９９年１０月２２日收稿）
价值的成绩。必须集中人力、物力来研制适合
－＋一＋一—卜・・・－卜－—・卜一—卜－—卜
（上接第７页）ＥＩ。ＩＳＡ具简便、快速，而且敏
（６）：４９２５～４９３０１３］Ｈｅｆｔｉ
ＨＰ
ｅｔ
ａ１．Ｊ
Ｖｉｒｏｌ，
感性高，可测出０．１～３０ＩＵ／ｍｌ的ＩＦＮ一吐活
１９９９；７３（８）：６９８４～６９８８［４］Ｒｏｎｎｉ
Ｔ
ｅｔ
ａ１．
性，但此法只能用于测定ＩＦＮ－ａ／ｆｌ，但不能用
Ｊ
Ｉｍｍｕｎｏｌ，１９９３；１５０（５）：１７１５～１７２０［５］
于测定ＩＦＮ一丫。
ＫｏｃｈｓＧ
ａｎｄ
ＨａｌｌｅｒＯ．ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉ
４．ＭｘＡ抗病毒蛋白制剂的应用前景ＵＳＡ，１９９９；９６（５）：２０８２～２０８４［６］Ｈｏｒｉｓ—
鉴于低浓度（１ＩＵ／ｍ１）ＩＦＮ—ｎ／Ｂ诱导细胞可产
ｂｅｒｇｅｒ
ＭＡ
ｅｔ
ａ１．Ｊ
Ｖｉｒｏｌ，１９９０；６４（３）：１１７１
生较高浓度的ＭｘＡ蛋白，ＭｘＡ蛋白在体外～１１７６［７］Ｒｉｃｈｅｒ
ＭＦ
ｅｔ
ａ１．Ｊ
ＢｉｏｌＣｈｅｍ，
又具有广谱的抗病毒效应，特别是对ＲＮＡ１９９５；２７０（２２）：１３５１２～１３５１４［８］Ｃｈｅｓｔｅｒｓ
病毒作用显著，而且比ＩＦＮ抗病毒作用更为
ＰＭ
ｅｔ
ａ１．ＤＮＡ，１９９７；７（３～４）：２３９～２４１
直接。此外ＭｘＡ的ＧＴＰ酶抗病毒活性呈现［９］Ｂａｃａ
Ｉ。Ｍ
ｅｔ
ａ１．Ｊ
Ｉ。ｅｕｋｏｃ
Ｂｉｏｌ，１９９４；５５
ＧＴＰ—ＧＤＰ—ＧＴＰ重复转换效率，具放大效
（３）：２９９～３０１［１０］Ｃｈｅｈａｄｅｈ
Ｗ
ｅｔ
ａ１．
应，加之国外ＭｘＡ蛋白的基因重组均已获
Ｓｃａｎｄ
ＪＩｍｍｕｎｏｌ，１９９９；４９（６）：６６０～６６３
得成功，蛋白本身又很稳定，因此ＭｘＡ抗病
［１１］Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ
Ｍ
ｅｔ
ａ１．Ｊ
Ｍｅｄ
Ｖｉｒｏｌ，１９９７；
毒蛋白制剂有可能在临床获得广泛应用。５１（４）；３３２～３３６［１２］Ｒｏｓｍｏｒｄｕｅ
Ｏ
ｅｔ
ａ１．Ｊ
Ｇａｎ
参考文献
Ｖｉｒｏｌ，１９９９；８０（Ｐｔ５）：１２５３～１２５８［１３］
Ｒｕｍｐ
ＪＡ
ｅｔ
ａ１．Ｃｌｉｎ
Ｅｘｐ
Ｉｍｍｕｎｏｌ，１９９５；
［１］Ｓｔａｅｈｌｉ
Ｐ
ｅｔ
ａ１．Ｃｅｌｌ，１９８６；４４（１）：
１０１（１）：８９～９４
１４７～１５２［２］Ｊｉｎ
ＨＫ
ｅｔ
ａｌ。Ｊ
Ｖｉｒｏｌ，１９９９；７３
（２０００年９月１４日修回、合并）
万 方数据
2024年3月13日发(作者：太史一瑾)
ＭｘＡ蛋白抗病毒机制及其应用前景
苏州市第五人民医院吴妹英
综述
杨吉成审校
摘要本文主要论述了ＭｘＡ基因在Ｉ型干扰素（ＩＦＮ—ａ／ｐ）或病毒诱导下可表达具广谱
抗病毒作用的Ｍｘ蛋白（小鼠为Ｍｘｌ，人类为ＭｘＡ），并介绍了ＭｘＡ蛋白的抗病毒谱及其机
制，论述了ＭｘＡ表达与病毒（ＨＩＶ一１、ＨＢＶ、ＨＣＶ等）感染性疾病发生和发展的相关性，以及
在判定ＩＦＮ疗效中的应用。既有理论意义，又有广阔的应用前景。
毒机制
国外大量的研究资料表明ＭｘＡ蛋白主
要对ＲＮＡ病毒敏感。实验证明，１０ｎｇ／ｍｌ的
纯品ＭｘＡ可以抵抗２０ＴＣＩＤ。。的ＨＳＶ一１和
Ａｄ３ＤＮＡ病毒对细胞的感染，说明ＭｘＡ为
ＤＮＡ病毒也有抑制作用。
ＭｘＡ蛋白有两种构型，一种是非活性的
ＧＤＰ结合形式，另一种是活性的ＧＴＰ酶结
合形式。ＭｘＡ和Ｍｘｌ基因均具有与ＧＴＰ酶
结构中Ｇ××××ＧＫｓ、Ｄ×Ｘ
Ｇ和ＴＫＤ×
（Ｘ代表某种氨基酸位点）两个相一致的结合
位点，ＭｘＡ蛋白只有在与病毒的核糖蛋白体
（ＲＮＰ）中的ＮＰ（核衣壳）紧密结合后，方可
使ＭｘＡ的构形发生改变，而使ＭｘＡ蛋白活
化，活化的构型又可受到ＧＴＰＴｓ的稳定作用
（ＧＴＰＴｓ是ＧＴＰ的非水解类似物）活化的
ＭｘＡ发挥对核衣壳的水解作用后，释放出的
病毒核酸，很快就会被胞质中的核酸内切酶
降解。ＧＴＰ酶发挥水解作用后，又可转换成
非活化的ＧＤＰ形式，继续发挥作用。
大量实验证明，纯品ＭｘＡ蛋白在体内
外能独立发挥强有力的抗病毒效应，此时无
需ＩＦＮ诱导和协同［３］。
三、ＭｘＡ蛋白的表达
１．ＭｘＡ蛋白在细胞中的诱导表达
用
ＭｘＡ是由ＩＦＮ—ａ邝诱导人细胞所产生
的７８×１０３的抗病毒蛋白，是继发现由ＩＦＮｓ
诱导细胞产生２．５Ａ寡腺苷酸合成酶和蛋白
激酶之后新发现的新型抗病毒蛋白。Ｍｘ基
因是Ｌｉｎｄｅｎｍａｎｎ研究Ａ２Ｇ小鼠能耐受对
其他小鼠致死剂量的流感病毒感染时发现
的，这种特性是从小鼠１６号染色体上单一显
性等位基因遗传获得的，因能抵抗粘液病毒
（流感）而命名为Ｍｘ。体内外研究表明，这种
抗流感病毒作用是受ＩＦＮ—ａ／ｐ调节，而不受
ＩＦＮ一丫调节。Ｈｏｒｉｓｈｅｒｇｅｒ等发现Ｍｘ＋细胞
经ＩＦＮ—ａ诱导后与Ｍｘ一细胞的差别是多出
一第７５×１０３的多肽，而且这种多肽也只有
在ＩＦＮ—ａ／８诱导后产生，ＩＦＮ—ｙ不能产生，将
这种多肽统一命名为Ｍｘ蛋白。
一、Ｍｘ基因类型和蛋白诱导表达
近来研究发现小鼠的Ｍｘ基因分Ｍｘｌ、
Ｍｘ２两类，也有Ｍｘ３的报告，但能发挥抗病
毒作用的是由Ｍｘｌ基因编码的７５×１０３的
Ｍｘｌ蛋白，在体内外能抵抗流感病毒感染。
Ｍｘ２、Ｍｘ３未发现有抗病毒功能［２］。人的Ｍｘ
基因包括ＭｘＡ和ＭｘＢ两类。ＭｘＡ基因位
于人２１号染色体长臂上，经ＩＦＮ—Ｂ处理可诱
导产生７８×１０３的ＭｘＡ蛋白，分布于细胞的
胞质内，这种胞质蛋白可直接发挥对流感病
毒和滤泡性口炎病毒（ＶＳＶ）的抗病毒效应，
而ＭｘＢ未发现有抗病毒活性。
二、ＭｘＡ蛋白对病毒的敏感性及其抗病
万方数据
ＩＦＮ—ａ邝处理人胚肺细胞（如ＨＥＩ。）或Ａ５４９
癌肺细胞、Ｗｉｓｈ细胞、Ｄａｎｄｉ细胞、ＣＥＳＳ细
胞［４］、人眼角膜细胞、人神经细胞等均可表达
６
ＭｘＡ蛋白。ＭｘＡ蛋白的诱导剂除了ＩＦＮ—ｄ／
ｐ外，还有病毒及双链ＲＮＡ。实验证明ｌｐｆｕ／
ｍｌ的病毒或１ＩＵ／ｍｌ的ｌＦＮ（ＩＦＮ—ａ邝）均可
诱导产生可测出的ＭｘＡ蛋白。但ＴＮＦ—ａ、
ＩＩ。一６单独或与ＩＦＮ—ａ联合应用均不能影响
ＭｘＡ
ｍＲＮＡ水平在细胞中的表达［５］。
２．ＭｘＡ基因的转基因表达ＭｘＡ基因
转染３Ｔ３细胞后可抵抗流感病毒感染［１］，也
能抵抗ＶＳＶ的感染；在转染的Ｕ９３７人单核
细胞中，可显著抑制麻疹病毒和ＶＳＶ的感
染，均可在细胞中持续表达ＭｘＡ蛋白，使感
染细胞中所释放出的病毒滴度比未转染
ＭｘＡ基因的对照组下降１００倍。
３．ＭｘＡ蛋白的基因克隆和重组表达
Ｓｔａｅｈｌｌ于１９８６年克隆了鼠ＭｘｌｃＤＮＡ，转
染Ｍｘ一细胞后，获得了Ｍｘ蛋白表达，并能
发挥抗流感病毒作用，为Ｍｘ基因的表达提
供了实验依据。４年后Ｎａｋａｙｍａ等将克隆的
Ｍｘｌ
ｃＤＮＡ在大肠埃希菌（大肠杆菌）中获
得了表达，并用纯化的Ｍｘｌ蛋白证明了抗病
毒效应。
ＭｘＡ
ｃＤＮＡ克隆和序列分析是由Ｈｏ—
ｒｉｓｂｅｒｇｅｒ等完成的［６］，随后在大肠杆菌中获
得了重组表达。一种是以带有组氨酸（Ｈｉｓ）分
泌型进行表达，纯化的Ｈｉｓ—ＭｘＡ蛋白可呈
现特异的ＧＴＰ酶活性，并具有抗病毒效
应［７］。另一种是以包涵体形式表达经几步层
析纯化后可获得纯品，试验证明该蛋白能与
ＭｘＡ单克隆抗体发生特异结合，呈现抗病毒
活性。这就为采用ＥＬｌＳＡ测定全血细胞或由
ＩＦＮ诱导细胞所产生的ＭｘＡ蛋白量，为临
床诊断试剂盒的开发和应用打下了基础。
真核表达的ＭｘＡｃＤＮＡ来源于ＩＦＮ—ａ
诱导人单核细胞和Ａ５４９肺癌细胞的
ｍＲＮＡ，经ＲＴ—ＰＣＲ克隆出ＭｘＡ
ｃＤＮＡ。用
棒状病毒载体在昆虫细胞中进行了表达，通
过纯化制备出ＭｘＡ蛋白纯品，该纯品对
ＭｘＡ的单克隆抗体具有高度的特异性［８］。
万
四、ＭｘＡ蛋白的临床应用及展望
方数据
１．病毒感染与ＭｘＡ表达水平的关系
体外试验证明，ＨＩＶ单独感染人单核细胞
后，一般在６ｈ可产生ＭｘＡ蛋白，１４ｄ可达高
峰。体外也能发挥抗病毒作用［９～，而且这种表
达往往不依赖于ＩＦＮ—ａ的存在。体内研究表
明，由ＨＩＶ一１感染者所产生ＩＦＮ—ｄ与健康人
产生的ＩＦＮ—ａ的生物学特性可能不同，有待
进一步研究Ｄｏ］。
在ＨＢＶ引起的慢性乙型肝炎中，由于
可削弱免疫细胞活性和影响对ｌＦＮ—ａ的反
应能力而直接影响ＩＦＮ—ａ的疗效［１１。，后来研
究发现这可能与由ＨＢＶ所产生的缺陷性颗
粒（病毒衣壳蛋白）有关。这是由于缺陷性
ＨＢＶ基因组所表达的缺陷颗粒在细胞内大
量集聚，选择性地抑制了ＭｘＡ启动子，进而
抑制ＭｘＡ蛋白表达及其抗病毒能力［１２３。由
此可见ＭｘＡ蛋白表达水平可能与慢性乙型
肝炎转归有关。
ＭｘＡ与病毒的感染密切相关。对病毒反
应也非常敏感，甚至ｌｐｆｕ／ｍｌ的病毒量即可
使细胞表达可测出的ＭｘＡ蛋白，因此可用
于病毒的早期和急性感染的诊断。鉴于细菌
及其他微生物感染细胞并不能诱导表达
ＭｘＡ蛋白，因此ＭｘＡ表达水平的测定也可
用于病毒感染与细菌及其他微生物感染的鉴
别诊断。
２．自身免疫性疾病与ＭｘＡ表达的关系
经测定系统性红斑狼疮患者外周血细胞均
可大量表达ＭｘＡ蛋白，有病毒感染的可能
性。但在１５例ＣＶＩＤ的长期低丙种球蛋白血
症患者外周血细胞中，ＭｘＡ蛋白表达均为阴
性。后经ＩＦＮ—ａ诱导，细胞中可产生正常量
的ＭｘＡ蛋白。因此对ＣＶＩＤ患者的病毒感
染或自身免疫的致病机制尚存争议。
３．ＭｘＡ蛋白与ＩＦＮ—ａ效价测定和疗效
判定的关系鉴于ＭｘＡ蛋白在细胞内的表
达量与ＩＦＮ—ａ／Ｂ呈剂量依赖性，因此可采用
ＥＩ。ＩＳＡ测定ＭｘＡ蛋白含量，来代替当今繁
琐的ＩＦＮ生物活性检测法。（下转第１１页）
７
药性筛选工作中的应用情况表明，分析感染我们国情的基因芯片技术。相信不暇时日，经
病毒基因的多态性与病毒一宿主细胞系统病过努力，在一些领域我们会迎头赶上，让希望
毒基因与细胞基因的表达改变，有助于人们
变为现实。
了解病毒的感染发病机制与抗药性机制ｉ利
参考文献
用细菌基因组与抗药性基因、致病岛基因等
重要基因的基因芯片通过单一的杂交试验就［１
Ｇｒａｖｅｓ
ＤＪ．Ｔｒｅｎｄｓ
ｉｎＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏ—
可以完成感染细菌或分离菌株的基因分型与
ｇＹ，１９９９；１７（３）：１２７～１３４［２３Ｋｚａｌ
ＭＪ
ｅｔ
菌种鉴定，快速诊断、鉴定致病细菌与非致病
ａ１．Ｎａｔｕｒｅ
Ｍｅｄ，１９９６；２（７）：７５３～７５９［３３
菌，指导临床治疗；对细菌基因组多个基因表
Ｈｕａ
Ｚ
ｅｔ
ａ１．Ｐｒｏｃ
ＮａｔｌＡｃａｄ
ＳｃｉＵＳＡ，１９９８；
达同时进行定量分析，为研究细菌对环境信９５（２４）：１４４７０＂－＇－－１４４７５［４］Ｇｉｎｇｅｒａｓ
ＴＲ
ｅｔ
号或药物的反应、研究细菌侵袭力的发生提
ａ１．Ｇｅｎｏｍｅ
Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１９９８；８（５）：４３５～４４８
供了一种直接、高效的检测方法。Ｅ５ＪＴｒｏｅｓｃｈ
Ａ
ｅｔ
ａ１．Ｊ
Ｃｌｉｎ
Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，１
９９９；
目前，基因芯片技术在医学、分子生物学３７（１）：４９～５５１６］Ｃｈａｍｂｅｒｓ
Ｊ
ｅｔ
ａ１．Ｊ
Ｖｉｒｏｌ，
领域应用已经越来越广泛，受到人们的普遍１９９９；７３（７）：５７５７～５７６６［７］Ｈｅａｄ
ＳＲ
ｅｔ
ａ１．
重视，但研究成本相对较高，待测定的靶探针
Ｍｏｌ
Ｃｅｌｌ
Ｐｒｏｂｅｓ，１９９９；１３（２）：８１～８７［８］
标记方法也比较繁琐，国内研究还只是处予
ＡｎｔｏｉｎｅＤＳ
ｅｔ
ａ１．ＮａｔｕｒｅＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，１９９８；
起步阶段。但这项研究是一种实力的较量，要
１６（１）：４５～４８
想在基因功能分析领域取得更新、更高、更有
（１９９９年１０月２２日收稿）
价值的成绩。必须集中人力、物力来研制适合
－＋一＋一—卜・・・－卜－—・卜一—卜－—卜
（上接第７页）ＥＩ。ＩＳＡ具简便、快速，而且敏
（６）：４９２５～４９３０１３］Ｈｅｆｔｉ
ＨＰ
ｅｔ
ａ１．Ｊ
Ｖｉｒｏｌ，
感性高，可测出０．１～３０ＩＵ／ｍｌ的ＩＦＮ一吐活
１９９９；７３（８）：６９８４～６９８８［４］Ｒｏｎｎｉ
Ｔ
ｅｔ
ａ１．
性，但此法只能用于测定ＩＦＮ－ａ／ｆｌ，但不能用
Ｊ
Ｉｍｍｕｎｏｌ，１９９３；１５０（５）：１７１５～１７２０［５］
于测定ＩＦＮ一丫。
ＫｏｃｈｓＧ
ａｎｄ
ＨａｌｌｅｒＯ．ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉ
４．ＭｘＡ抗病毒蛋白制剂的应用前景ＵＳＡ，１９９９；９６（５）：２０８２～２０８４［６］Ｈｏｒｉｓ—
鉴于低浓度（１ＩＵ／ｍ１）ＩＦＮ—ｎ／Ｂ诱导细胞可产
ｂｅｒｇｅｒ
ＭＡ
ｅｔ
ａ１．Ｊ
Ｖｉｒｏｌ，１９９０；６４（３）：１１７１
生较高浓度的ＭｘＡ蛋白，ＭｘＡ蛋白在体外～１１７６［７］Ｒｉｃｈｅｒ
ＭＦ
ｅｔ
ａ１．Ｊ
ＢｉｏｌＣｈｅｍ，
又具有广谱的抗病毒效应，特别是对ＲＮＡ１９９５；２７０（２２）：１３５１２～１３５１４［８］Ｃｈｅｓｔｅｒｓ
病毒作用显著，而且比ＩＦＮ抗病毒作用更为
ＰＭ
ｅｔ
ａ１．ＤＮＡ，１９９７；７（３～４）：２３９～２４１
直接。此外ＭｘＡ的ＧＴＰ酶抗病毒活性呈现［９］Ｂａｃａ
Ｉ。Ｍ
ｅｔ
ａ１．Ｊ
Ｉ。ｅｕｋｏｃ
Ｂｉｏｌ，１９９４；５５
ＧＴＰ—ＧＤＰ—ＧＴＰ重复转换效率，具放大效
（３）：２９９～３０１［１０］Ｃｈｅｈａｄｅｈ
Ｗ
ｅｔ
ａ１．
应，加之国外ＭｘＡ蛋白的基因重组均已获
Ｓｃａｎｄ
ＪＩｍｍｕｎｏｌ，１９９９；４９（６）：６６０～６６３
得成功，蛋白本身又很稳定，因此ＭｘＡ抗病
［１１］Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ
Ｍ
ｅｔ
ａ１．Ｊ
Ｍｅｄ
Ｖｉｒｏｌ，１９９７；
毒蛋白制剂有可能在临床获得广泛应用。５１（４）；３３２～３３６［１２］Ｒｏｓｍｏｒｄｕｅ
Ｏ
ｅｔ
ａ１．Ｊ
Ｇａｎ
参考文献
Ｖｉｒｏｌ，１９９９；８０（Ｐｔ５）：１２５３～１２５８［１３］
Ｒｕｍｐ
ＪＡ
ｅｔ
ａ１．Ｃｌｉｎ
Ｅｘｐ
Ｉｍｍｕｎｏｌ，１９９５；
［１］Ｓｔａｅｈｌｉ
Ｐ
ｅｔ
ａ１．Ｃｅｌｌ，１９８６；４４（１）：
１０１（１）：８９～９４
１４７～１５２［２］Ｊｉｎ
ＨＫ
ｅｔ
ａｌ。Ｊ
Ｖｉｒｏｌ，１９９９；７３
（２０００年９月１４日修回、合并）
万 方数据