2024年3月25日发(作者：仪夏烟)
·
３７２
·
ＪＣｌｉｎＰｓｙｃｈｉａｔｒｙ２０２３Ｖｏｌ３３Ｎｏ．５
，，，
梁静文，余卓恒，刘宜欢，叶彩虹，许瑞环
精神分裂症患者血浆外泌体微小
ＲＮＡ
差异
表达谱及其生物信息学分析
·论著·
目的
：探讨精神分裂症患者及正常人群血浆外泌体微小
ＲＮＡ
（
ｍｉＲＮＡ
）的差异表达，初步了
摘要：
采用高通量测序技术检测
４８
例精神分解差异表达
ｍｉＲＮＡ
在精神分裂症病程发展中的作用。
方法
：
构建
ｍｉＲＮＡ
差异表达谱。预测表达差裂症患者和
４８
名健康对照者的血浆外泌体
ｍｉＲＮＡ
的表达水平，
异显著的
ｍｉＲＮＡ
的靶基因，再对靶基因进行
ＧＯ
功能注释和
ＫＥＧＧ
通路分析，确定差异表达
ｍｉＲＮＡ
的
主要生物学功能及其可能参与的信号通路。
结果
：与对照组相比，精神分裂症患者血浆外泌体共筛选
１９６
个表达下调。通过
ＧＯ
富集和
ＫＥＧＧ
分析，其中
１５７
个表达上调，上出
３５３
个
ｍｉＲＮＡ
显著异常表达，
述差异表达的
ｍｉＲＮＡｓ
主要涉及神经元细胞体、谷氨酸能突触、神经元间突触、突触前和突触膜等细胞
组成，并主要参与轴突新生、化学突触传递调节、跨突触信号调节等生物过程，可能通过
ＭＡＰＫ
信号通
ＰＩ３ＫＡｋｔ
信号通路、
ＴＮＦ
信号通路、
Ｗｎｔ
信号通路、
ＦｏｘＯ
信号通路、路、多巴胺能突触及
Ｈｉｐｐｏ
等信号通
经药治疗精神分裂症患者血浆外泌体中
ｍｉＲＮＡｓ
存在显路参与精神分裂症的发生和发展过程。
结论
：
著的差异性表达，
ｍｉＲＮＡ２０６
、
ｍｉＲ１４２５ｐ
、
ｍｉＲ１３９５ｐ
、
ｍｉＲ１３３ｂ
等
ｍｉＲＮＡ
可能通过
ＭＡＰＫ
信号通路、
ＰＩ３ＫＡｋｔ
信号通路等在精神分裂症的发生发展过程中发挥重要作用。
关键词：
精神分裂症；
血浆；
外泌体；
微小
ＲＮＡ
；
生物信息学分析
Ｒ７４９．４
文献标识码：
Ａ
文章编号：
１００５３２２０
（
２０２３
）
０５０３７２０５
中图分类号：
ＤｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐｒｏｆｉｌｅａｎｄｂｉｏｉｎｆｏｍａｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓｏｆｐｌａｓｍａｅｘｏｓｏｍａｌｍｉＲＮＡｉｎｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ
ＬＩＡＮＧＪｉｎｇｗｅｎＹＵＺｈｕｏｈｅｎｇＬＩＵＹｉｈｕａｎＹＥＣａｉｈｏｎｇＸｕＲｕｉｈｕａｎ．ＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙＬｏｎｇｇａｎｇＤｉｓ
ｔｒｉｃＣｅｎｔｒａｌＨｏｓｐｉｔａｌＳｈｅｎｚｈｅｎ５１８１７２Ｃｈｉｎａ
Ａｂｓｔｒａｃｔ ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｐｌａｓｍａｅｘｏｓｏｍａｌｍｉｃｒｏＲＮＡｉｎｔｈｅｓｃｈｉｚｏ
ｐｈｒｅｎｉｃｐａｔｉｅｎｔｓａｎｄｎｏｒｍａｌｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓａｎｄｔｏｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｔｈｅｒｏｌｅｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄｍｉＲＮＡ
ｉｎｔｈｅｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎｏｆｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ． ＭｅｔｈｏｄＨｉｇｈｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅ
ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆｅｘｏｓｏｍａｌｍｉＲＮＡｉｎｐｌａｓｍａｓａｍｐｌｅｓｆｒｏｍ４８ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉｃｐａｔｉｅｎｔｓｂｙｍｅｄｉｃａｔｉｏｎａｎｄ４８
ｈｅａｌｔｈｙｃｏｎｔｒｏｌｓａｎｄｔｏｃｏｎｓｔｒｕｃｔｍｉＲＮＡｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌ．Ｐｒｅｄｉｃｔｔａｒｇｅｔｇｅｎｅｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙｅｘ
ｐｒｅｓｓｅｄｍｉＲＮＡｓａｎｄｔｈｅｎＧｅｎｅＯｎｔｏｌｏｇｙＧＯａｎｄＫｙｏｔｏＥｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａｏｆＧｅｎｅｓａｎｄＧｅｎｏｍｅｓＫＥＧＧｐａｔｈ
ｗａｙａｎａｌｙｓｉｓｗｅｒｅｐｅｒｆｏｒｍｅｄｏｎｔｈｅｔａｒｇｅｔｇｅｎｅｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｍａｊｏｒｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｆｕｎｃｔｉｏｎｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙｅｘ
ｐｒｅｓｓｅｄｍｉＲＮＡａｎｄｔｈｅｉｒｐｏｓｓｉｂｌｅｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｓ． ＲｅｓｕｌｔｓＣｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｎｏｒｍａｌｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓｔｈｅｒｅｗｅｒｅ
３５３ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄｍｉＲＮＡｓｉｎｐｌａｓｍａｏｆｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉｃｐａｔｉｅｎｔｓｏｆｗｈｉｃｈ１５７ｗｅｒｅｕｐｒｅｇ
ｕｌａｔｅｄａｎｄ１９６ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｅｄ．ＴｈｒｏｕｇｈＧＯｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔａｎｄＫＥＧＧａｎａｌｙｓｉｓｔｈｅｍｉＲＮＡｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｎｅｕｒｏｎａｌ
，
：
，
，
：
，
，，，
：
，
，
（）
，
（）
：
，，，，
ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ
，
ａｎｄｐａｒｔｉｃｉｐａｔｅｄｉｎｍｕｌｔｉｐｌｅｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｐｒｏｃｅｓｓｅｓｓｕｃｈａｓａｘｏｎｏｇｅｎｅｓｉｓ
，
ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎｏｆｃｈｅｍｉｃａｌｓｙｎ
ａｐｔｉｃｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎａｎｄｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｔｒａｎｓｓｙｎａｐｔｉｃｓｉｇｎａｌｉｎｇ．Ｍｏｒｅｏｖｅｒ
，
ｔｈｅｍｉＲＮＡｓｍａｙｐａｒｔｉｃｉｐａｔｅｄｉｎｔｈｅｏｃ
ｃｕｒｒｅｎｃｅａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａｔｈｒｏｕｇｈＭＡＰＫｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ
，
ＰＩ３ＫＡｋｔｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ
，
ＴＮＦｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ
，
Ｗｎｔｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ
，
ＦｏｘＯｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ
，
ｄｏｐａｍｉｎｅｒｇｉｃｓｙｎａｐｓｅｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈ
ｗａｙａｎｄＨｉｐｐｏｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ
：
Ｔｈｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆｐｌａｓｍａｅｘｏｓｏ
ｃｅｌｌｂｏｄｙｇｌｕｔａｍａｔｅｒｇｉｃｓｙｎａｐｓｅｐｒｅｓｙｎａｐｓｅｓｙｎａｐｔｉｃｍｅｍｂｒａｎｅｎｅｕｒｏｎｔｏｎｅｕｒｏｎｓｙｎａｐｓｅａｎｄｏｔｈｅｒｃｅｌｌｕｌａｒ
ｍａｌｍｉｃｒｏＲＮＡｉｎｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉｃｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｍｉＲＮＡｓｓｕｃｈａｓｍｉＲＮＡ
２０６ｍｉＲ１４２５ｐｍｉＲ１３９５ｐａｎｄｍｉＲ１３３ｂｍａｙｐｌａｙａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｔｈｅｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆ
ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａｔｈｒｏｕｇｈＭＡＰＫｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙａｎｄＰＩ３ＫＡｋｔｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ ｐｌａｓｍａ ｅｘｏｓｏｍａｌ ｍｉＲＮＡ ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ
，
，
，
，，
：；；；；
基金项目：深圳市龙岗区
２０１９
年度医疗卫生科技计划项目
ＬＧＫＣＹＬＷＳ２０１９０００３３４
）（
５１８１７２
深圳市龙岗中心医院检验科（作者单位：梁静文）；北
京中医药大学深圳医院（龙岗）（余卓恒）；深圳市康宁医院检验科
（刘宜欢，叶彩虹）；香港中文大学（深圳）附属第二医院（许瑞环）
ＥＭａｉｌ
：
３３１２７２９４７＠ｑｑ．ｃｏｍ
通信作者：余卓恒，
ＤＯＩ
：
１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００５３２２０．２０２３．０５．００９
精神分裂症是高致残、高致死性的重性精神障
碍之一，其发生发展涉及遗传因素、环境因素、大脑
实质改变等多个因素。其发病机制仍不清楚，临床
上缺乏客观诊断和治疗监测的实验室指标。因此，
寻找精神分裂症客观的生物标志物，对获取临床诊
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临床精神医学杂志
２０２３
年第
３３
卷第
５
期
断及治疗的客观标准有很大的帮助。
近年来，越来越多的证据表明微小
ＲＮＡ
（
ｍｉＲ
在神经分化、突触可塑性和认知功能等神经发
ＮＡ
）
育方面发挥关键作用。与健康人群相比，阿尔茨海
默症
［］
、精神分裂症
［］
、抑郁症
［］
等患者的
ｍｉＲＮＡ
表达存在差异，这些研究结果提示
ｍｉＲＮＡ
可作为各
种神经精神疾病的潜在生物标志物。
外泌体是一种直径为
４０～１００ｎｍ
的脂质小囊
泡，可释放外泌体的细胞种类繁多
［］
。外泌体能够
传递多种信号分子，如蛋白质、信使
ＲＮＡ
（
ｍＲＮＡ
）和
可通过
ｍｉＲＮＡ
。
ｍｉＲＮＡ
是外泌体的关键功能原件，
抑制或促进靶基因的表达来影响细胞生物学功
能
［］
，甚至可能参与调控这些靶基因涉及的所有细
胞通路。因此，外泌体
ｍｉＲＮＡ
也被认为是疾病进
展、药物治疗监测、疾病预后等潜在的生物学标志
物，但关于精神分裂症的外泌体
ｍｉＲＮＡ
的研究非常
有限。为此，本研究拟采用高通量测序技术筛选出
经药治疗精神分裂症发病期患者血浆外泌体差异表
达的
ｍｉＲＮＡ
，并采用软件、数据库对差异表达
ｍｉＲ
ＮＡ
进行靶基因预测、
ＧＯ
分析和
ＫＥＧＧ
通路预测，
初步了解差异表达
ｍｉＲＮＡ
的功能，为研究精神分裂
症的发病机制提供新的思路。
１
对象和方法
１．１
对象
精神分裂症组来自深圳市康宁医院在
２０１９
年
９
月至
２０２０
年
４
月收治住院的精神分裂症患者
４８
例，主要经抗精神病药氯氮平系统治疗
≥
１
年，病
程
≥
６
年，其中男
２７
例，女
２１
例，年龄
２３～５６
岁，平
岁。纳入标准：符合美国《精神障均（
４０．１５±９．１６
）
碍诊断和统计手册第
４
版》精神分裂症的诊断标准，
由
２
名精神科医生（至少
１
名医生为副主任医师以
上职称）诊断一致；排除脑器质性和躯体其他疾病所
致的精神障碍、其他精神疾病、有酗酒和药物滥用
史者。
健康对照组选择同期在深圳市龙岗中心医院的
其中男
２７
名，女
２１
名；年龄
２３～４８
名正常志愿者，
平均（岁。纳入标准：
４３．５２±１４．２７
）
６８
岁，
①
由
１
名
精神科医师单独进行访谈并排除精神类疾病；
②
无
精神病家族史；
③
未服用与精神病相关的任何药物；
性别分别与患者匹配。本研究方案获得深
④
年龄、
圳市龙岗中心医院伦理委员会审批通过。
１．２
方法
１．２．１
血浆样本的收集
将采集的全血置于含
混匀，然后以
２０００ｘｇ
，
ＥＤＴＡＫ２
抗凝管，
４℃
离心
５ｍｉｎ
，取上清即为血浆，再
１００００ｘｇ
，
４℃
离心
１２３
４
５
·
３７３
·
最后将得到的血浆分装到
１．５ｍｌ
的
ＥＰ
管
１０ｍｉｎ
，
内，于
－８０℃
低温冰箱冷冻储存。
１．２．２
血浆外泌体的提取
血浆外泌体的分离按
照
ＲｉｂｏＴＭＥｘｏｓｏｍｅＩｓｏｌａｔｉｏｎＲｅａｇｅｎｔ
（
ｆｏｒｐｌａｓｍａｏｒ
试剂盒的说明书进行。首先将血浆样本从低
ｓｅｒｕｍ
）
温环境中取出，以去除残
２０００ｘｇ
室温离心
２０ｍｉｎ
，
留细胞及碎片，转移上清至新管，
１００００ｘｇ
室温离
心
２０ｍｉｎ
，转移上清至新管，加入
１／３
体积的
Ｒｉ
ｆｏｒｐｌａｓｍａｏｒｓｅｒｂｏＴＭｅｘｏｓｏｍｅＩｓｏｌａｔｉｏｎｒｅａｇｅｎｔ
（
，完全混匀样本，放入
４℃
冰箱静置
３０ｍｉｎ
，
ｕｍ
）
用移液器小心吸去上清，
１５０００ｘｇ
，
４℃
离心
２ｍｉｎ
，
离心获得的沉淀，即为外泌体样本。
１．２．３
外泌体
ｍｉＲＮＡ
高通量测序
外泌体
ｍｉＲＮＡ
抽提按照核酸提取试剂盒（
ＭａｇｅｎＨｉＰｕｒｅＬｉｑｕｉｄ
说明书的方案一进行。同时，采用
ＱｕｂｉｔｍｉＲＮＡＫｉｔ
）
２．０
检测
ＲＮＡ
样品浓度，
Ａｇｉｌｅｎｔ２２００Ｂｉｏａｎａｌｙｚｅｒ
检
测
ＲＮＡ
样品分布范围。质检结果合格后，将提取血
浆外泌体的总
ＲＮＡ
按照
ＮＥＢＮｅｘｔＭｕｌｔｉｐｌｅｘＳｍａｌｌ
ＲＮＡＬｉｂｒａｒｙＰｒｅｐＳｅｔｆｏｒＩｌｌｕｍｉｎａ
试剂盒说明书构建
文库，主要步骤为：提取的
ｓＲＮＡ
片段纯化后，连接
３
’端和
５
’的接头，反转录呈
ｃＤＮＡ
，再进行
ＰＣＲ
扩
增。随后切胶回收目的的片段文库，用
Ａｇｉｌｅｎｔ２２００
ＴａｐｅＳｔａｔｉｏｎ
进行文库质检，最后用
Ｉｌｌｕｍｉｎａ
ＨｉｓｅｑＴＭ２５００
测序仪运行
ＳＥ５０
模式进行测序。测
序所得的原始数据，首先进行过滤：取出
ｒｅａｄｓ
两端
的接头，取出片段长队
＜１７ｎｔ
的
ｒｅａｄｓ
和低质量的
完成数据的初步过滤并获得高质量数据。
ｒｅａｄｓ
等，
我们将过滤得到的
ｒｅａｄｓ
与权威
ｍｉＲＮＡ／ｒＲＮＡ／ｔＲ
ＮＡ／ｓｎＲＮＡ／ｓｎｏＲＮＡ
数据库进行比对，进而注释出
包括
ｍｉＲＮＡ
、已知的
ｎｃＲＮＡ
，
ｒＲＮＡ
、
ｔＲＮＡ
、
ｓｎＲＮＡ
、
ｓｎｏＲＮＡ
。
１．２．４
外泌体
ｍｉＲＮＡ
的差异表达分析
本研究通
过
ｍｉＲＤｅｅｐ２
与
ｍｉＲＢａｓｅ．ｖ２２
数据库对
ｍｉＲＮＡ
成熟
体序列进行比对，并计算
ｍｉＲＮＡ
的表达量。
ｍｉＲＮＡ
差异分析采用
ＤＥＳｅｑ２
程序包对正常志愿者和精神
分裂症患者之间的差异表达水平进行统计学分析，
通过差异倍数（
｜ｌｏｇ
（和显著水平
ＦｏｌｄＣｈａｎｇｅ
）
｜＞１
）
（
两个水平筛选差异表达
ｍｉＲＮＡ
。
Ｐ＜０．０５
）
１．２．５ ｍｉＲＮＡ
靶基因的预测以及功能分析
本研
究采用
ｍｉＲＴａｒＢａｓｅ
、
ｍｉＲＤＢ
、
ｍｉＲＷａｌｋ
、
ＴａｒｇｅｔＳｃａｎ
四
个软件对差异表达的
ｍｉＲＮＡ
进行靶基因预测，同时
对四个软件的预测结果进行进一步筛选整理，并以
ｍｉＲＴａｒＢａｓｅ
预测结果或者同时为
ｍｉＲＤＢ
、
ｍｉＲＷａｌｋ
、
ＴａｒｇｅｔＳｃａｎ
三个软件的预测结果作为外泌体
ｍｉＲＮＡ
的候选靶基因。通过超几何分布方法等统计学分析
对靶基因进行
ＧＯ
分析，以
ＧＯ
注释富集程度的
Ｐ＜
２
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·
３７４
·
分析结果显示基因主要涉及细胞
０．０５
为显著阈值，
组成、分子功能以及生物过程三个方面。对
ｍｉＲＮＡ
的靶基因进行
ＫＥＧＧ
分析，通过
ＦｉｓｈｅｒＥｘａｃｔＴｅｓｔ
计
算
Ｐ
值以
ＫＥＧＧ
通路富集程度的
Ｐ＜０．０５
为显著
性阈值，得到分析结果。
２
结果
注释与分类
２．１
非编码
ＲＮＡ
（
ｎｃＲＮＡ
）
所有精神分裂症标本与正常志愿者标本测序得
到的
ｒｅａｄｓ
与各类权威
ＲＮＡ
数据库进行比对及注
释，具体使用的数据库如下：
ｍｉＲＮＡ
数据库来自
ｍｉＲＮＡＩＤ
ｈａｓｍｉＲＮＡ３６５ａ３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ３６５ｂ３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ６５１１ｂ５ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ２０６
ｈａｓｍｉＲＮＡ１２４３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ３７５３Ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ１２ｂ５ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ９２ａ３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ１０７
ｈａｓｍｉＲＮＡ４９９ａ５ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ１３９５ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ１８２５Ｐ
ＳＣＺ
２９．８０
２９．８０
１０２．９８
１２１．５７
１４．５１
６９３９．８５
１００３４．２０１
１５０３４８．７４
４８９６．５１
１３３．４４
１７６７．０８
８５２．５９
ｎ＝４８
）组（
ｎ＝４８
）对照组（
０
０
１．５６
６．１０
０．７８
５５８．４０
９６９．８６
２１５１６
１４８６．４０
４１．０７
５８０．８０
１８２．２７
ＪＣｌｉｎＰｓｙｃｈｉａｔｒｙ２０２３Ｖｏｌ３３Ｎｏ．５
，，，
；、、、数
ｐｉＲＮＡ
数据库来自
ｐｉｒｎａｂａｎｋ
，据库来自
Ｒｆａｍ１２．１
；
并对结果进行统计及制图。数据显示，精神分裂症
组的
ｍｉＲＮＡ
比例比正常对照组的高。其平均占比
达
４６．１２％
。
２．２
外泌体
ｍｉＲＮＡ
差异表达的筛选
本实验筛选出样品间的差异表达
ｍｉＲＮＡ
（
ｄｉｆ
共
３５３
个，其中
ｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄｍｉＲＮＡ
，
ＤＥＭ
）
１５７
个
ＤＥＭ
上调，
１９６
个
ＤＥＭ
下调。我们通过绘制
火山图，图中红色圆点表示有显著性上调
ＤＥＭ
，绿
色圆点表示显著下调
ＤＥＭ
。见表
１
，见表
２
，见图
１
。
ｍｉＲＢａｓｅｖｅｒｓｉｏｎ２２ｔＲＮＡｒＲＮＡｓｎＲＮＡｓｎｏＲＮＡ
珋
ｘ±ｓ
）
表
１
两组部分上调表达的外泌体
ｍｉＲＮＡ
分子比较（
基因表达差异倍数
７．２０７３８１
７．２０７３８１
５．７４３９６８
４．２３２４８１
３．９３９９３１
３．６３４０９１
３．３７０５５９
２．８０４７６
１．７１９１２
１．６７５５４７
１．６０３３９９
２．１９７６５
Ｐ
３．９０×１０
－７
３．９０×１０
－７
３．７９×１０
－１１
９．３６×１０
－１０
０．００３３
１．０８×１０
－１２
３．２９×１０
－１１
２．８３×１０
－８
９．９３×１０
－５
０．００８５９
０．０００９５
９．７１×１０
－７
值
Ｕｐ／Ｄｏｗｎ
Ｕｐ
Ｕｐ
Ｕｐ
Ｕｐ
Ｕｐ
Ｕｐ
Ｕｐ
Ｕｐ
Ｕｐ
Ｕｐ
Ｕｐ
Ｕｐ
ｍｉＲＮＡＩＤ
ｈａｓｍｉＲＮＡ１８１ｃ３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ１４２５Ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ４４３３ｂ３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ３８２３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ３２６
ｈａｓｍｉＲＮＡ１３３ｂ
ＳＣＺ
１２．８７
７７６４．５７
１２７．６８
１．１６
５７．０１
２．０４
ｎ＝４８
）组（
表
２
部分下调表达的外泌体
ｍｉＲＮＡ
分子
ｎ＝４８
）对照组（基因表达差异倍数
２００．９０
２３１２６．００
１２８４４．２８
７１．８５
１６２３．９８
２５．９２
－３．９９２３４
－１．５７４４５
－６．６５２０７
－６．００３４９
－４．８２４８８
－３．６２２９９
Ｐ
２．３６×１０
－１１
０．００４５４
１．０１×１０
－２６
１．３４×１０
－９
１．８３×１０
－２５
０．０００３１６
值
Ｕｐ／Ｄｏｗｎ
Ｄｏｗｎ
Ｄｏｗｎ
Ｄｏｗｎ
Ｄｏｗｎ
Ｄｏｗｎ
Ｄｏｗｎ
注：红色圆点为有显著上调
ｍｉＲＮＡ
，绿色圆点为显著下调
ｍｉＲＮＡ
图
１
外泌体
ｍｉＲＮＡ
基因表达差异倍数
ｌｏｇ
Ｆｏｌｄｃｈａｎｇｅ
）（火山图
２
差异表达外泌体
ｍｉＲＮＡ
的生物信息学分析
基因主要参与轴突生成、化学突触传递调节、跨
突出信号的调节等生物过程，涉及神经元细胞体、谷
氨酸能突触、神经元间突触、突触前和突触膜等细胞
主要参与多巴胺能突组成。
ＫＥＧＧ
通路分析显示，
触、
ＰＩ３ＫＡｋｔ
信号通路、
ＭＡＰＫ
信号通路、
Ｗｎｔ
信号
通路等与精神分裂症相关的信号通路。见表
３
。
３
讨论
本研究对比经药治疗精神分裂症患者和健康人
群血浆外泌体中差异表达的
ｍｉＲＮＡ
，经
Ｉｌｌｕｍｉｎａ
ＨｉｓｅｑＴＭ２５００
测序平台分析两组的血浆外泌体
ｍｉＲ
共筛选出
３５３
个显著差异表达
ｍｉＲＮＡ
，
ＮＡ
表达谱，
１９６
个表达下调。这一数据其中
１５７
个表达上调，
说明，经药治疗精神分裂症患者的血浆外泌体
ｍｉＲ
ＮＡ
表达谱较健康人群仍存在显著的变化。
２．３
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临床精神医学杂志
２０２３
年第
３３
卷第
５
期
ｍｉＲＮＡＩＤ
ｈａｓｍｉＲＮＡ３６５ａ３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ３６５ｂ３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ６５１１ｂ５ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ２０６
ｈａｓｍｉＲＮＡ１２４３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ３７５３Ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ１２ｂ５ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ９２ａ３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ１０７
ｈａｓｍｉＲＮＡ４９９ａ５ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ１３９５ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ１８１ｃ３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ１４２５Ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ４４３３ｂ３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ４４３３ａ３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ３８２３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ３２６
ｈａｓｍｉＲＮＡ３８２５ｐ
ＨａｓｍｉＲＮＡ１３３ｂ
·
３７５
·
Ｗｎｔ
信号通路
×
×
×
×
×
×
×
×
×
×
√
×
√
×
√
√
×
×
√
ＰＩ３ＫＡｋｔ
信号通路
×
×
×
√
×
×
×
√
×
×
√
×
×
×
√
×
×
√
√
ＴＮＦ
信号通路
×
×
×
×
×
×
×
×
×
×
√
×
√
×
√
√
×
×
√
ＦＯＸＯ
信号通路
×
×
×
×
×
×
×
√
×
×
×
√
√
×
×
×
×
×
√
Ｈｉｐｐｏ
信号通路
√
×
×
×
×
×
×
×
×
×
×
×
√
×
×
×
×
√
×
表
３
部分差异表达外泌体
ｍｉＲＮＡ
靶向相关的
ＫＥＧＧ
通路
ＭＡＰＫ
信号通路
√
√
×
√
×
×
×
√
×
√
√
×
√
√
×
√
√
×
×
多巴胺
信号通路
×
×
×
×
√
×
×
√
×
×
√
×
√
×
×
×
√
×
×
我们对差异表达的
ｍｉＲＮＡ
进行靶基因筛选，发
现部分差异表达的
ｍｉＲＮＡ
能靶向精神分裂症相关
基因，与精神分裂症病程发展有着紧密的联系。进
一步对靶基因进行
ＧＯ
分析，结果显示基因主要定
位神经元细胞体、谷氨酸能突触、神经元间突触、突
触前和突触膜，主要涉及轴突新生、化学突触传递调
节、跨突触信号调节等生物过程，这些证据提示，这
些差异表达的
ｍｉＲＮＡ
在突触功能及神经元活动的
调控中起重要作用。
Ａｄａｍｓ
等
［］
通过分析
１０７
例精
５７
名亲属和
１０８
名健康对照的脑电神分裂症患者、
图数据，发现精神分裂症异常的脑电图是由突触形
成减少造成的，这意味着精神分裂症相关症状很有
可能是因为突触功能的中断，或神经元之间的交流
方式异常，进而使兴奋性和抑制性传递之间的不平
衡导致的。本研究中，经药治疗精神分裂症组
ｍｉＲ
这些差异表达的
ＮＡ
表达量明显高于健康人群组，
进而影
ｍｉＲＮＡ
很有可能导致基因转录水平的紊乱，
响突触功能甚至是导致神经元之间的信号传递异
常，从而参与精神分裂症的病程发展。
本研究
ＫＥＧＧ
分析结果显示，富集显著的通路
主要为
ＭＡＰＫ
、
ＰＩ３ＫＡｋｔ
、
ＴＮＦ
、
Ｗｎｔ
、
ＦｏｘＯ
、
Ｈｉｐｐｏ
和
多巴胺能突触等在多种神经系统疾病的发病发展过
程中起关键作用的信号通路。其中，
ＭＡＰＫ
、
ＰＩ３Ｋ
Ａｋｔ
、
ＴＮＦ
、
Ｗｎｔ
、
Ｈｉｐｐｏ
等
５
条信号通路均被报道其通
过不同的生物过程激活
ｃａｓｐａｓｅ
蛋白，参与介导神经
元的损伤、凋亡。
ＦｏｘＯ
家族还受
ＰＩ３ＫＡｋｔ
信号通
路的调控，参与调控细胞周期、分化、代谢和凋亡等
重要生命过程，还可以调节下游靶基因的表达
［］
。
这与精神分裂症存在凋亡通路的异常，导致神经元
和神经胶质细胞的凋亡活动发生改变的观点一致。
６
７
本研究对差异表达的外泌体
ｍｉＲＮＡ
靶基因进
行预测发现，共同调
ｍｉＲＮＡ２０６
作为关键
ｍｉＲＮＡ
，
控靶基因参与
ＭＡＰＫ
、并对脑
ＰＩ３ＫＡｋｔ
等信号通路，
源性神经营养因子（
ｂｒａｉｎｄｅｒｉｖｅｄｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ
，
的表达存在靶向调控作用。
ＢＤＮＦ
是神经元
ＢＤＮＦ
）
生长必不可少的神经营养因子之一，与
ＴｒｋＢ
结合能
够促进神经元存活与发育，并能够抑制或缓解神经
元受损死亡
［］
。近年来国内外研究均发现
ＢＤＮＦ
与
精神分裂症的临床症状有一定的关联性，低于正常
人水平表达的
ＢＤＮＦ
可能会引起神经发育障碍进而
李志远教授团队证实了引发精神分裂症
［］
。近期，
ｍｉＲ２０６
靶向
ＢＤＮＦ
并负调控
ＢＤＮＦ
表达
［］
。
Ｄｕ
等
［］
的研究发现首发精神分裂症患者全血外泌体
其对应的血浆
ＢＤＮＦ
表
ｍｉＲ２０６
表达上调最显著，
达亦显著下降。本研究发现经药治疗后的精神分裂
症发病期患者血浆外泌体
ｍｉＲ２０６
表达亦显著上
调，这一发现说明，外泌体
ｍｉＲ２０６
很有可能与精神
分裂症的发病相关。综合上述数据，我们推测上调
的
ｍｉＲ２０６
很有可能通过干扰
ＢＤＮＦ
基因表达，导
加速神经可塑性受损、神经元致
ＢＤＮＦ
的功能失调，
细胞丢失甚至死亡，从而导致患者出现认知障碍等
相关临床症状，这一推测与目前精神分裂症的神经
营养素假说一致，
ｍｉＲ２０６ＢＤＮＦ
很有可能成为精神
分裂症的发病机制中的一个新的信号通路。
在经药治疗精神分裂症组，
ｍｉＲ１４２５ｐ
、
ｍｉＲ
１３９５ｐ
等关键
ｍｉＲＮＡ
调控关键靶基因参与
ＭＡＰＫ
、
多巴胺能突触等与神经系统疾病相关的
Ｗｎｔ
、
ＴＮＦ
、
ＮＲＧ１
）通路，并对神经调节素
１
（的表达存在靶向调
控作用。
ｍｉＲ１４２５ｐ
是多种细胞损伤的保护因子，
有研究
［］
发现癫痫大鼠神经细胞中的
ｍｉＲ１４２５ｐ
８
９
１０
１１
１２
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·
３７６
·
表达水平显著升高，干扰
ｍｉＲ１４２５ｐ
的表达后癫痫
大鼠神经细胞抗氧化系统酶类升高，氧化系统酶类
含量降低，这一数据提示高表达
ｍｉＲＮＡ１４２５ｐ
很
有可能通过促进神经细胞氧化应激反应而使神经元
损伤。
ｍｉＲ１３９５ｐ
是神经干细胞增殖和神经分化
的负调控因子。有研究团队
［］
将重度抑郁症患者
的血液外泌体注射到小鼠的尾静脉，发现小鼠产生
了明显的抑郁样行为，相反，将健康人群的血液外泌
体注射到有抑郁样行为的小鼠体内，发现小鼠的抑
郁样症状有所减轻，这一研究结果提示
ｍｉＲ１３９５ｐ
水平的上调可能介导应急诱导抑郁样行为的产生。
本研究发现精神分裂症患者血浆外泌体
ｍｉＲ１４２５ｐ
和
ｍｉＲ１３９５ｐ
表达显著上调，它们很可能同时对精
神分裂症相关基因
ＮＲＧ１
存在靶向调控作用。
丛启杰等
［］
通
ＮＲＧ１
是精神分裂症的易感基因
［］
，
过脑立体定位注射技术对小鼠大脑前额皮质进行
发现小鼠出现自发活动量增加、焦
ＮＲＧ１
基因敲除，
虑为特征的精神分裂症样行为。我们猜测
ｍｉＲ１４２
很有可能抑制患者
５ｐ
和
ｍｉＲ１３９５ｐ
水平上调，
从而导致抑制性和兴奋性神经
ＮＲＧ１
的表达水平，
递质转运蛋白平衡失调，结果尚需进一步验证。
本研究结果还显示，
ｍｉＲ１３３ｂ
在精神分裂症样
本中表达下调，根据靶基因预测，发现其可能对结蹄
组织生长因子（
ＣＴＧＦ
）的表达存在靶向作用。研究
发现，中脑多巴胺能神经元可特异性表达
ｍｉＲ
１３３ｂ
，反映其在中脑多巴胺能神经元的成熟、功能和
存活起着重要作用
［］
。研究人员
Ｐｅｉ
等
［］
利用大
ｍｉＲ１３３ｂ
的上调可负反馈鼠的动物实验结果发现，
ＣＴＧＦ
的表达水平，从而抑制抑郁大鼠海马神经元
凋亡，抑制炎症反应，保护抑郁大鼠海马神经元免于
凋亡和炎症的损伤。本研究发现经药治疗精神分裂
症发病期患者
ｍｉＲ１３３ｂ
水平下调，与
ＣＴＧＦ
之间很
有可能存在一个负反馈调控网络，导致神经元在细
胞凋亡机制和炎症机制的作用下受损甚至凋亡。
综上，本研究发现经药治疗精神分裂症患者和
正常人群血浆外泌体
ｍｉＲＮＡ
表达仍存在显著差异。
精神分裂症患者血浆外泌体表达的
ｍｉＲＮＡ２０６
、
ｍｉＲ１４２５ｐ
、
ｍｉＲ１３９５ｐ
、
ｍｉＲ１３３ｂ
等
ｍｉＲＮＡ
可能
是精神分裂症发生发展潜在的诊断生物标记物，这
对进一步认识
ｍｉＲＮＡ
在精神分裂症发病机制的作
用具有一定的参考意义。
１３
１４１５
１６１７
ＪＣｌｉｎＰｓｙｃｈｉａｔｒｙ２０２３Ｖｏｌ３３Ｎｏ．５
４９１４９６．
，（）：
２
］
ＭａｆｆｉｏｌｅｔｔｉＥ
，
ＣａｔｔａｎｅｏＡ
，
ＲｏｓｓｏＧ
，
ｅｔａｌ．Ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｗｈｏｌｅｂｌｏｏｄ
［
２０１２２３５２
Ｊ
］
．ＪＡｆｆｅｃｔＤｉｓｏｒｄ
，
２０１６
，
２００
：
２５０２５８．
［
３
］
ＷｅｉＨ
，
ＹｕａｎＹＢ
，
ＬｉｕＳ
，
ｅｔａｌ．ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇｍｉＲＮＡｌｅｖ
［
ｅｌｓｉｎｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ
［
Ｊ
］
．ＡｍＪＰｓｙｃｈｉａｔｒｙ
，
２０１５
，
１７２
（
１１
）
１１４１
：
ｍｉｃｒｏＲＮＡａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓｉｎｍａｊｏｒｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｂｉｐｏｌａｒｄｉｓｏｒｄｅｒ
，，，
［
４
］
ＺｈａｎｇＪ
，
ＬｉＳ
，
ＬｉＬ
，
ｅｔａｌ．ＥｘｏｓｏｍｅａｎｄｅｘｏｓｏｍａｌｍｉｃｒｏＲＮＡ
：
ｔｒａｆ
ｓｏｒｔｉｎｇ
，
ａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎ
［
Ｊ
］
．ＧｅｎｏｍｉｃｓＰｒｏｔｅｏｍｉｃｓＢｉｏｉｎｆｏｒｍａｆｉｃｋｉｎｇ
，
ｔｉｃｓ
，
２０１５
，
１３
（
１
）
１７２４．
：
５
］
ＷａｎｇＹ
，
ＡｍｄａｎｅｅＮ
，
ＺｈａｎｇＸ．Ｅｘｏｓｏｍｅｓｉｎｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ
：［
Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ
，
ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ
，
ａｎｄｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｔａｒ
６５
（
１
）
ｅ６１
：
１９．ｇｅｔｓ．ＥｕｒＰｓｙｃｈｉａｔｒｙ．２０２２
，，
６
］
ＡｄａｍｓＲＡ
，
ＰｉｎｏｔｓｉｓＤ
，
ＴｓｉｒｌｉｓＫ
，
ｅｔａｌ．Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌｍｏｄｅｌｉｎｇｏｆ
［
ｅｌｅｃｔｒｏｅｎｃｅｐｈａｌｏｇｒａｐｈｙａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｍａｇｎｅｔｉｃｒｅｓｏｎａｎｃｅｉｍａｇｉｎｇ
２０２２１５．
，，（）：
７
］
ＬｉｎｋＷ．ＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎｔｏＦＯＸＯｂｉｏｌｏｇｙ
［
Ｊ
］
．ＭｅｔｈｏｄｓＭｏｌＢｉｏｌ
，［
２０１９
，
１８９０
：
１９．
８
］
ＡｎｇｅｌｕｃｃｉＦ
，
ＢｒｅｎèＳ
，
ＭａｔｈéＡＡ．ＢＤＮＦｉｎｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ
，
ｄｅｐｒｅｓ
［
ｓｉｏｎａｎｄｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌｓ
［
Ｊ
］
．ＭｏｌＰｓｙｃｈｉａｔｒｙ
，
２００５
，
１０
（
４
）
３４５３５２．
：
９
］
ＴｉｇａｒｅｔＣＭ
，
ＬｉｎＴＣＥ
，
ＭｏｒｒｅｌｌＥＲ
，
ｅｔａｌ．Ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒａｃｔｉ
［
ｉｎｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａＪ．ＢｉｏｌＰｓｙｃｈｉａｔｒｙ２０２２９１２
ｖａｔｉｏｎｒｅｓｃｕｅｓｃｏｇｎｉｔｉｖｅａｎｄｓｙｎａｐｔｉｃａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓｃａｕｓｅｄｂｙｈｅｍ
ｉｚｙｇｏｓｉｔｙｏｆｔｈｅｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃｒｉｓｋｇｅｎｅＣａｃｎａ１ｃＪ．ＭｏｌＰｓｙｃｈｉａｔｒｙ
ｐａｒａｄｉｇｍｓｉｎｄｉｃａｔｅｓａｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔｌｏｓｓｏｆｐｙｒａｍｉｄａｌｃｅｌｌｓｙｎａｐｔｉｃｇａｉｎ
１１４７．
［］
１７４８１７６０．
，（）：
１０
］
ＺｈａｎｇＹＹ
，
ＤｅｎｇＷＹ
，
ＷａｎｇＷ
，
ｅｔａｌ．ＭｉｃｒｏＲＮＡ２０６ｄｏｗｎｒｅｇｕ
［
２０２１２６６
ｌａｔｅｄｈｕｍａｎｕｍｂｉｌｉｃａｌｃｏｒｄｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓａｌｌｅｖｉａｔｅｃｏｇ
３０４．
，，（）：
１１
］
ＤｕＹ
，
ＹｕＹ
，
ＨｕＹ
，
ｅｔａｌ．Ｇｅｎｏｍｅｗｉｄｅ
，
ｉｎｔｅｇｒａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓｉｍ
［
Ｄｉｓｃｏｖ２０２２８１
ｎｉａＪ．ＳｃｈｉｚｏｐｈｒＢｕｌｌ２０１９４５６
［］，
ｎｉｔｉｖｅｄｅｃｌｉｎｅｉｎＤｇａｌａｃｔｏｓｅｉｎｄｕｃｅｄａｇｉｎｇｍｉｃｅＪ．ＣｅｌｌＤｅａｔｈ
［］
１２５７１２６６．
［］，，（）：
１２
］赵利，［李海燕
．ｍｉＲ１４２５ｐ
对癫痫发作后神经元损伤的作用
Ｊ
］
．
分子诊断与治疗杂志，
２０２０
，
１２
（
７
）
９６８９７３．
机制［：
１３
］
ＷｅｉＺＸ
，
ＸｉｅＧＪ
，
ＭａｏＸ
，
ｅｔａｌ．Ｅｘｏｓｏｍｅｓｆｒｏｍｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｍａｊｏｒ
［
ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎｃａｕｓｅｄｅｐｒｅｓｓｉｖｅｌｉｋｅｂｅｈａｖｉｏｒｓｉｎｍｉｃｅｗｉｔｈｉｎｖｏｌｖｅ
１０５０１０５８．
，，（）：
１４
］陈彦霖，［陈诚，李泽平，等
．ＮＲＧ１／ＥｒｂＢ４
信号通路与精神疾病
．
中国现代医学杂志，
２０２０
，
３０
（
１５
）
４４
：关联的研究进展［
Ｊ
］
ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ２０２０４５６
１５
］丛启杰，［曾荣森，刘耘溪，等
．
大脑前额皮质
Ｎｒｇ１
基因敲低对
小鼠精神分裂症样行为形成的影响［
Ｊ
］
．
江苏大学学报（医学
２０２２
，
３２
（
３
）
２１３２１８．
版），：
１６
］
ＫｉｍＪ
，
ＩｎｏｕｅＫ
，
ＩｓｈｉｉＪ
，
ｅｔａｌ．ＡｍｉｃｒｏＲＮＡｆｅｅｄｂａｃｋｃｉｒｃｕｉｔｉｎ
［
ｍｉｄｂｒａｉｎｄｏｐａｍｉｎｅｎｅｕｒｏｎｓ
［
Ｊ
］
．Ｓｃｉｅｎｃｅ
，
２００７
，
３１７
（
５８４２
）：
１７
］
ＰｅｉＧＹ
，
ＸｕＬＧ
，
ＨｕａｎｇＷＨ
，
ｅｔａｌ．ＴｈｅｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｒｏｌｅｏｆｍｉｃｒｏＲ
［
ＮＡ１３３ｂｉｎｒｅｓｔｒｉｃｔｉｎｇｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌｎｅｕｒｏｎｓａｐｏｐｔｏｓｉｓａｎｄｉｎ
ｆｌａｍｍａｔｏｒｙｉｎｊｕｒｙｉｎｒａｔｓｗｉｔｈｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎｂｙｓｕｐｐｒｅｓｓｉｎｇＣＴＧＦ
Ｊ
］
．ＩｎｔＩｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ
，
２０２０
，
７８
：
１０６０７６．
［
２０２３０７２３
）（收稿日期：
２０２２１１０６
修回日期：
１２２０１２２４．
４９．
ｍｅｎｔｏｆｍｉＲ１３９５ｐｒｅｇｕｌａｔｅｄｎｅｕｒｏｇｅｎｅｓｉｓＪ．Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏ
ｐｌｉｃａｔｅｓｅｘｏｓｏｍｅｄｅｒｉｖｅｄｍｉｃｒｏＲＮＡｄｙｓｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｉｎｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅ
［］
参考文献：
１
］
ＧｅｅｋｉｙａｎａｇｅＨ
，
ＪｉｃｈａＧＡ
，
ＮｅｌｓｏｎＰＴ
，
ｅｔａｌ．ＢｌｏｏｄｓｅｒｕｍｍｉＲＮＡ
：［
ｎｏｎｉｎｖａｓｉｖｅｂｉｏｍａｒｋｅｒｓｆｏｒＡｌｚｈｅｉｍｅｒ＇ｓｄｉｓｅａｓｅ
［
Ｊ
］
．ＥｘｐＮｅｕｒｏｌ
，
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2024年3月25日发(作者：仪夏烟)
·
３７２
·
ＪＣｌｉｎＰｓｙｃｈｉａｔｒｙ２０２３Ｖｏｌ３３Ｎｏ．５
，，，
梁静文，余卓恒，刘宜欢，叶彩虹，许瑞环
精神分裂症患者血浆外泌体微小
ＲＮＡ
差异
表达谱及其生物信息学分析
·论著·
目的
：探讨精神分裂症患者及正常人群血浆外泌体微小
ＲＮＡ
（
ｍｉＲＮＡ
）的差异表达，初步了
摘要：
采用高通量测序技术检测
４８
例精神分解差异表达
ｍｉＲＮＡ
在精神分裂症病程发展中的作用。
方法
：
构建
ｍｉＲＮＡ
差异表达谱。预测表达差裂症患者和
４８
名健康对照者的血浆外泌体
ｍｉＲＮＡ
的表达水平，
异显著的
ｍｉＲＮＡ
的靶基因，再对靶基因进行
ＧＯ
功能注释和
ＫＥＧＧ
通路分析，确定差异表达
ｍｉＲＮＡ
的
主要生物学功能及其可能参与的信号通路。
结果
：与对照组相比，精神分裂症患者血浆外泌体共筛选
１９６
个表达下调。通过
ＧＯ
富集和
ＫＥＧＧ
分析，其中
１５７
个表达上调，上出
３５３
个
ｍｉＲＮＡ
显著异常表达，
述差异表达的
ｍｉＲＮＡｓ
主要涉及神经元细胞体、谷氨酸能突触、神经元间突触、突触前和突触膜等细胞
组成，并主要参与轴突新生、化学突触传递调节、跨突触信号调节等生物过程，可能通过
ＭＡＰＫ
信号通
ＰＩ３ＫＡｋｔ
信号通路、
ＴＮＦ
信号通路、
Ｗｎｔ
信号通路、
ＦｏｘＯ
信号通路、路、多巴胺能突触及
Ｈｉｐｐｏ
等信号通
经药治疗精神分裂症患者血浆外泌体中
ｍｉＲＮＡｓ
存在显路参与精神分裂症的发生和发展过程。
结论
：
著的差异性表达，
ｍｉＲＮＡ２０６
、
ｍｉＲ１４２５ｐ
、
ｍｉＲ１３９５ｐ
、
ｍｉＲ１３３ｂ
等
ｍｉＲＮＡ
可能通过
ＭＡＰＫ
信号通路、
ＰＩ３ＫＡｋｔ
信号通路等在精神分裂症的发生发展过程中发挥重要作用。
关键词：
精神分裂症；
血浆；
外泌体；
微小
ＲＮＡ
；
生物信息学分析
Ｒ７４９．４
文献标识码：
Ａ
文章编号：
１００５３２２０
（
２０２３
）
０５０３７２０５
中图分类号：
ＤｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐｒｏｆｉｌｅａｎｄｂｉｏｉｎｆｏｍａｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓｏｆｐｌａｓｍａｅｘｏｓｏｍａｌｍｉＲＮＡｉｎｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ
ＬＩＡＮＧＪｉｎｇｗｅｎＹＵＺｈｕｏｈｅｎｇＬＩＵＹｉｈｕａｎＹＥＣａｉｈｏｎｇＸｕＲｕｉｈｕａｎ．ＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙＬｏｎｇｇａｎｇＤｉｓ
ｔｒｉｃＣｅｎｔｒａｌＨｏｓｐｉｔａｌＳｈｅｎｚｈｅｎ５１８１７２Ｃｈｉｎａ
Ａｂｓｔｒａｃｔ ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｐｌａｓｍａｅｘｏｓｏｍａｌｍｉｃｒｏＲＮＡｉｎｔｈｅｓｃｈｉｚｏ
ｐｈｒｅｎｉｃｐａｔｉｅｎｔｓａｎｄｎｏｒｍａｌｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓａｎｄｔｏｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｔｈｅｒｏｌｅｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄｍｉＲＮＡ
ｉｎｔｈｅｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎｏｆｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ． ＭｅｔｈｏｄＨｉｇｈｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅ
ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆｅｘｏｓｏｍａｌｍｉＲＮＡｉｎｐｌａｓｍａｓａｍｐｌｅｓｆｒｏｍ４８ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉｃｐａｔｉｅｎｔｓｂｙｍｅｄｉｃａｔｉｏｎａｎｄ４８
ｈｅａｌｔｈｙｃｏｎｔｒｏｌｓａｎｄｔｏｃｏｎｓｔｒｕｃｔｍｉＲＮＡｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌ．Ｐｒｅｄｉｃｔｔａｒｇｅｔｇｅｎｅｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙｅｘ
ｐｒｅｓｓｅｄｍｉＲＮＡｓａｎｄｔｈｅｎＧｅｎｅＯｎｔｏｌｏｇｙＧＯａｎｄＫｙｏｔｏＥｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａｏｆＧｅｎｅｓａｎｄＧｅｎｏｍｅｓＫＥＧＧｐａｔｈ
ｗａｙａｎａｌｙｓｉｓｗｅｒｅｐｅｒｆｏｒｍｅｄｏｎｔｈｅｔａｒｇｅｔｇｅｎｅｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｍａｊｏｒｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｆｕｎｃｔｉｏｎｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙｅｘ
ｐｒｅｓｓｅｄｍｉＲＮＡａｎｄｔｈｅｉｒｐｏｓｓｉｂｌｅｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｓ． ＲｅｓｕｌｔｓＣｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｎｏｒｍａｌｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓｔｈｅｒｅｗｅｒｅ
３５３ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄｍｉＲＮＡｓｉｎｐｌａｓｍａｏｆｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉｃｐａｔｉｅｎｔｓｏｆｗｈｉｃｈ１５７ｗｅｒｅｕｐｒｅｇ
ｕｌａｔｅｄａｎｄ１９６ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｅｄ．ＴｈｒｏｕｇｈＧＯｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔａｎｄＫＥＧＧａｎａｌｙｓｉｓｔｈｅｍｉＲＮＡｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｎｅｕｒｏｎａｌ
，
：
，
，
：
，
，，，
：
，
，
（）
，
（）
：
，，，，
ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ
，
ａｎｄｐａｒｔｉｃｉｐａｔｅｄｉｎｍｕｌｔｉｐｌｅｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｐｒｏｃｅｓｓｅｓｓｕｃｈａｓａｘｏｎｏｇｅｎｅｓｉｓ
，
ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎｏｆｃｈｅｍｉｃａｌｓｙｎ
ａｐｔｉｃｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎａｎｄｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｔｒａｎｓｓｙｎａｐｔｉｃｓｉｇｎａｌｉｎｇ．Ｍｏｒｅｏｖｅｒ
，
ｔｈｅｍｉＲＮＡｓｍａｙｐａｒｔｉｃｉｐａｔｅｄｉｎｔｈｅｏｃ
ｃｕｒｒｅｎｃｅａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａｔｈｒｏｕｇｈＭＡＰＫｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ
，
ＰＩ３ＫＡｋｔｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ
，
ＴＮＦｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ
，
Ｗｎｔｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ
，
ＦｏｘＯｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ
，
ｄｏｐａｍｉｎｅｒｇｉｃｓｙｎａｐｓｅｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈ
ｗａｙａｎｄＨｉｐｐｏｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ
：
Ｔｈｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆｐｌａｓｍａｅｘｏｓｏ
ｃｅｌｌｂｏｄｙｇｌｕｔａｍａｔｅｒｇｉｃｓｙｎａｐｓｅｐｒｅｓｙｎａｐｓｅｓｙｎａｐｔｉｃｍｅｍｂｒａｎｅｎｅｕｒｏｎｔｏｎｅｕｒｏｎｓｙｎａｐｓｅａｎｄｏｔｈｅｒｃｅｌｌｕｌａｒ
ｍａｌｍｉｃｒｏＲＮＡｉｎｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉｃｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｍｉＲＮＡｓｓｕｃｈａｓｍｉＲＮＡ
２０６ｍｉＲ１４２５ｐｍｉＲ１３９５ｐａｎｄｍｉＲ１３３ｂｍａｙｐｌａｙａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｔｈｅｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆ
ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａｔｈｒｏｕｇｈＭＡＰＫｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙａｎｄＰＩ３ＫＡｋｔｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ ｐｌａｓｍａ ｅｘｏｓｏｍａｌ ｍｉＲＮＡ ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ
，
，
，
，，
：；；；；
基金项目：深圳市龙岗区
２０１９
年度医疗卫生科技计划项目
ＬＧＫＣＹＬＷＳ２０１９０００３３４
）（
５１８１７２
深圳市龙岗中心医院检验科（作者单位：梁静文）；北
京中医药大学深圳医院（龙岗）（余卓恒）；深圳市康宁医院检验科
（刘宜欢，叶彩虹）；香港中文大学（深圳）附属第二医院（许瑞环）
ＥＭａｉｌ
：
３３１２７２９４７＠ｑｑ．ｃｏｍ
通信作者：余卓恒，
ＤＯＩ
：
１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００５３２２０．２０２３．０５．００９
精神分裂症是高致残、高致死性的重性精神障
碍之一，其发生发展涉及遗传因素、环境因素、大脑
实质改变等多个因素。其发病机制仍不清楚，临床
上缺乏客观诊断和治疗监测的实验室指标。因此，
寻找精神分裂症客观的生物标志物，对获取临床诊
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临床精神医学杂志
２０２３
年第
３３
卷第
５
期
断及治疗的客观标准有很大的帮助。
近年来，越来越多的证据表明微小
ＲＮＡ
（
ｍｉＲ
在神经分化、突触可塑性和认知功能等神经发
ＮＡ
）
育方面发挥关键作用。与健康人群相比，阿尔茨海
默症
［］
、精神分裂症
［］
、抑郁症
［］
等患者的
ｍｉＲＮＡ
表达存在差异，这些研究结果提示
ｍｉＲＮＡ
可作为各
种神经精神疾病的潜在生物标志物。
外泌体是一种直径为
４０～１００ｎｍ
的脂质小囊
泡，可释放外泌体的细胞种类繁多
［］
。外泌体能够
传递多种信号分子，如蛋白质、信使
ＲＮＡ
（
ｍＲＮＡ
）和
可通过
ｍｉＲＮＡ
。
ｍｉＲＮＡ
是外泌体的关键功能原件，
抑制或促进靶基因的表达来影响细胞生物学功
能
［］
，甚至可能参与调控这些靶基因涉及的所有细
胞通路。因此，外泌体
ｍｉＲＮＡ
也被认为是疾病进
展、药物治疗监测、疾病预后等潜在的生物学标志
物，但关于精神分裂症的外泌体
ｍｉＲＮＡ
的研究非常
有限。为此，本研究拟采用高通量测序技术筛选出
经药治疗精神分裂症发病期患者血浆外泌体差异表
达的
ｍｉＲＮＡ
，并采用软件、数据库对差异表达
ｍｉＲ
ＮＡ
进行靶基因预测、
ＧＯ
分析和
ＫＥＧＧ
通路预测，
初步了解差异表达
ｍｉＲＮＡ
的功能，为研究精神分裂
症的发病机制提供新的思路。
１
对象和方法
１．１
对象
精神分裂症组来自深圳市康宁医院在
２０１９
年
９
月至
２０２０
年
４
月收治住院的精神分裂症患者
４８
例，主要经抗精神病药氯氮平系统治疗
≥
１
年，病
程
≥
６
年，其中男
２７
例，女
２１
例，年龄
２３～５６
岁，平
岁。纳入标准：符合美国《精神障均（
４０．１５±９．１６
）
碍诊断和统计手册第
４
版》精神分裂症的诊断标准，
由
２
名精神科医生（至少
１
名医生为副主任医师以
上职称）诊断一致；排除脑器质性和躯体其他疾病所
致的精神障碍、其他精神疾病、有酗酒和药物滥用
史者。
健康对照组选择同期在深圳市龙岗中心医院的
其中男
２７
名，女
２１
名；年龄
２３～４８
名正常志愿者，
平均（岁。纳入标准：
４３．５２±１４．２７
）
６８
岁，
①
由
１
名
精神科医师单独进行访谈并排除精神类疾病；
②
无
精神病家族史；
③
未服用与精神病相关的任何药物；
性别分别与患者匹配。本研究方案获得深
④
年龄、
圳市龙岗中心医院伦理委员会审批通过。
１．２
方法
１．２．１
血浆样本的收集
将采集的全血置于含
混匀，然后以
２０００ｘｇ
，
ＥＤＴＡＫ２
抗凝管，
４℃
离心
５ｍｉｎ
，取上清即为血浆，再
１００００ｘｇ
，
４℃
离心
１２３
４
５
·
３７３
·
最后将得到的血浆分装到
１．５ｍｌ
的
ＥＰ
管
１０ｍｉｎ
，
内，于
－８０℃
低温冰箱冷冻储存。
１．２．２
血浆外泌体的提取
血浆外泌体的分离按
照
ＲｉｂｏＴＭＥｘｏｓｏｍｅＩｓｏｌａｔｉｏｎＲｅａｇｅｎｔ
（
ｆｏｒｐｌａｓｍａｏｒ
试剂盒的说明书进行。首先将血浆样本从低
ｓｅｒｕｍ
）
温环境中取出，以去除残
２０００ｘｇ
室温离心
２０ｍｉｎ
，
留细胞及碎片，转移上清至新管，
１００００ｘｇ
室温离
心
２０ｍｉｎ
，转移上清至新管，加入
１／３
体积的
Ｒｉ
ｆｏｒｐｌａｓｍａｏｒｓｅｒｂｏＴＭｅｘｏｓｏｍｅＩｓｏｌａｔｉｏｎｒｅａｇｅｎｔ
（
，完全混匀样本，放入
４℃
冰箱静置
３０ｍｉｎ
，
ｕｍ
）
用移液器小心吸去上清，
１５０００ｘｇ
，
４℃
离心
２ｍｉｎ
，
离心获得的沉淀，即为外泌体样本。
１．２．３
外泌体
ｍｉＲＮＡ
高通量测序
外泌体
ｍｉＲＮＡ
抽提按照核酸提取试剂盒（
ＭａｇｅｎＨｉＰｕｒｅＬｉｑｕｉｄ
说明书的方案一进行。同时，采用
ＱｕｂｉｔｍｉＲＮＡＫｉｔ
）
２．０
检测
ＲＮＡ
样品浓度，
Ａｇｉｌｅｎｔ２２００Ｂｉｏａｎａｌｙｚｅｒ
检
测
ＲＮＡ
样品分布范围。质检结果合格后，将提取血
浆外泌体的总
ＲＮＡ
按照
ＮＥＢＮｅｘｔＭｕｌｔｉｐｌｅｘＳｍａｌｌ
ＲＮＡＬｉｂｒａｒｙＰｒｅｐＳｅｔｆｏｒＩｌｌｕｍｉｎａ
试剂盒说明书构建
文库，主要步骤为：提取的
ｓＲＮＡ
片段纯化后，连接
３
’端和
５
’的接头，反转录呈
ｃＤＮＡ
，再进行
ＰＣＲ
扩
增。随后切胶回收目的的片段文库，用
Ａｇｉｌｅｎｔ２２００
ＴａｐｅＳｔａｔｉｏｎ
进行文库质检，最后用
Ｉｌｌｕｍｉｎａ
ＨｉｓｅｑＴＭ２５００
测序仪运行
ＳＥ５０
模式进行测序。测
序所得的原始数据，首先进行过滤：取出
ｒｅａｄｓ
两端
的接头，取出片段长队
＜１７ｎｔ
的
ｒｅａｄｓ
和低质量的
完成数据的初步过滤并获得高质量数据。
ｒｅａｄｓ
等，
我们将过滤得到的
ｒｅａｄｓ
与权威
ｍｉＲＮＡ／ｒＲＮＡ／ｔＲ
ＮＡ／ｓｎＲＮＡ／ｓｎｏＲＮＡ
数据库进行比对，进而注释出
包括
ｍｉＲＮＡ
、已知的
ｎｃＲＮＡ
，
ｒＲＮＡ
、
ｔＲＮＡ
、
ｓｎＲＮＡ
、
ｓｎｏＲＮＡ
。
１．２．４
外泌体
ｍｉＲＮＡ
的差异表达分析
本研究通
过
ｍｉＲＤｅｅｐ２
与
ｍｉＲＢａｓｅ．ｖ２２
数据库对
ｍｉＲＮＡ
成熟
体序列进行比对，并计算
ｍｉＲＮＡ
的表达量。
ｍｉＲＮＡ
差异分析采用
ＤＥＳｅｑ２
程序包对正常志愿者和精神
分裂症患者之间的差异表达水平进行统计学分析，
通过差异倍数（
｜ｌｏｇ
（和显著水平
ＦｏｌｄＣｈａｎｇｅ
）
｜＞１
）
（
两个水平筛选差异表达
ｍｉＲＮＡ
。
Ｐ＜０．０５
）
１．２．５ ｍｉＲＮＡ
靶基因的预测以及功能分析
本研
究采用
ｍｉＲＴａｒＢａｓｅ
、
ｍｉＲＤＢ
、
ｍｉＲＷａｌｋ
、
ＴａｒｇｅｔＳｃａｎ
四
个软件对差异表达的
ｍｉＲＮＡ
进行靶基因预测，同时
对四个软件的预测结果进行进一步筛选整理，并以
ｍｉＲＴａｒＢａｓｅ
预测结果或者同时为
ｍｉＲＤＢ
、
ｍｉＲＷａｌｋ
、
ＴａｒｇｅｔＳｃａｎ
三个软件的预测结果作为外泌体
ｍｉＲＮＡ
的候选靶基因。通过超几何分布方法等统计学分析
对靶基因进行
ＧＯ
分析，以
ＧＯ
注释富集程度的
Ｐ＜
２
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·
３７４
·
分析结果显示基因主要涉及细胞
０．０５
为显著阈值，
组成、分子功能以及生物过程三个方面。对
ｍｉＲＮＡ
的靶基因进行
ＫＥＧＧ
分析，通过
ＦｉｓｈｅｒＥｘａｃｔＴｅｓｔ
计
算
Ｐ
值以
ＫＥＧＧ
通路富集程度的
Ｐ＜０．０５
为显著
性阈值，得到分析结果。
２
结果
注释与分类
２．１
非编码
ＲＮＡ
（
ｎｃＲＮＡ
）
所有精神分裂症标本与正常志愿者标本测序得
到的
ｒｅａｄｓ
与各类权威
ＲＮＡ
数据库进行比对及注
释，具体使用的数据库如下：
ｍｉＲＮＡ
数据库来自
ｍｉＲＮＡＩＤ
ｈａｓｍｉＲＮＡ３６５ａ３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ３６５ｂ３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ６５１１ｂ５ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ２０６
ｈａｓｍｉＲＮＡ１２４３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ３７５３Ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ１２ｂ５ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ９２ａ３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ１０７
ｈａｓｍｉＲＮＡ４９９ａ５ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ１３９５ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ１８２５Ｐ
ＳＣＺ
２９．８０
２９．８０
１０２．９８
１２１．５７
１４．５１
６９３９．８５
１００３４．２０１
１５０３４８．７４
４８９６．５１
１３３．４４
１７６７．０８
８５２．５９
ｎ＝４８
）组（
ｎ＝４８
）对照组（
０
０
１．５６
６．１０
０．７８
５５８．４０
９６９．８６
２１５１６
１４８６．４０
４１．０７
５８０．８０
１８２．２７
ＪＣｌｉｎＰｓｙｃｈｉａｔｒｙ２０２３Ｖｏｌ３３Ｎｏ．５
，，，
；、、、数
ｐｉＲＮＡ
数据库来自
ｐｉｒｎａｂａｎｋ
，据库来自
Ｒｆａｍ１２．１
；
并对结果进行统计及制图。数据显示，精神分裂症
组的
ｍｉＲＮＡ
比例比正常对照组的高。其平均占比
达
４６．１２％
。
２．２
外泌体
ｍｉＲＮＡ
差异表达的筛选
本实验筛选出样品间的差异表达
ｍｉＲＮＡ
（
ｄｉｆ
共
３５３
个，其中
ｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄｍｉＲＮＡ
，
ＤＥＭ
）
１５７
个
ＤＥＭ
上调，
１９６
个
ＤＥＭ
下调。我们通过绘制
火山图，图中红色圆点表示有显著性上调
ＤＥＭ
，绿
色圆点表示显著下调
ＤＥＭ
。见表
１
，见表
２
，见图
１
。
ｍｉＲＢａｓｅｖｅｒｓｉｏｎ２２ｔＲＮＡｒＲＮＡｓｎＲＮＡｓｎｏＲＮＡ
珋
ｘ±ｓ
）
表
１
两组部分上调表达的外泌体
ｍｉＲＮＡ
分子比较（
基因表达差异倍数
７．２０７３８１
７．２０７３８１
５．７４３９６８
４．２３２４８１
３．９３９９３１
３．６３４０９１
３．３７０５５９
２．８０４７６
１．７１９１２
１．６７５５４７
１．６０３３９９
２．１９７６５
Ｐ
３．９０×１０
－７
３．９０×１０
－７
３．７９×１０
－１１
９．３６×１０
－１０
０．００３３
１．０８×１０
－１２
３．２９×１０
－１１
２．８３×１０
－８
９．９３×１０
－５
０．００８５９
０．０００９５
９．７１×１０
－７
值
Ｕｐ／Ｄｏｗｎ
Ｕｐ
Ｕｐ
Ｕｐ
Ｕｐ
Ｕｐ
Ｕｐ
Ｕｐ
Ｕｐ
Ｕｐ
Ｕｐ
Ｕｐ
Ｕｐ
ｍｉＲＮＡＩＤ
ｈａｓｍｉＲＮＡ１８１ｃ３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ１４２５Ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ４４３３ｂ３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ３８２３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ３２６
ｈａｓｍｉＲＮＡ１３３ｂ
ＳＣＺ
１２．８７
７７６４．５７
１２７．６８
１．１６
５７．０１
２．０４
ｎ＝４８
）组（
表
２
部分下调表达的外泌体
ｍｉＲＮＡ
分子
ｎ＝４８
）对照组（基因表达差异倍数
２００．９０
２３１２６．００
１２８４４．２８
７１．８５
１６２３．９８
２５．９２
－３．９９２３４
－１．５７４４５
－６．６５２０７
－６．００３４９
－４．８２４８８
－３．６２２９９
Ｐ
２．３６×１０
－１１
０．００４５４
１．０１×１０
－２６
１．３４×１０
－９
１．８３×１０
－２５
０．０００３１６
值
Ｕｐ／Ｄｏｗｎ
Ｄｏｗｎ
Ｄｏｗｎ
Ｄｏｗｎ
Ｄｏｗｎ
Ｄｏｗｎ
Ｄｏｗｎ
注：红色圆点为有显著上调
ｍｉＲＮＡ
，绿色圆点为显著下调
ｍｉＲＮＡ
图
１
外泌体
ｍｉＲＮＡ
基因表达差异倍数
ｌｏｇ
Ｆｏｌｄｃｈａｎｇｅ
）（火山图
２
差异表达外泌体
ｍｉＲＮＡ
的生物信息学分析
基因主要参与轴突生成、化学突触传递调节、跨
突出信号的调节等生物过程，涉及神经元细胞体、谷
氨酸能突触、神经元间突触、突触前和突触膜等细胞
主要参与多巴胺能突组成。
ＫＥＧＧ
通路分析显示，
触、
ＰＩ３ＫＡｋｔ
信号通路、
ＭＡＰＫ
信号通路、
Ｗｎｔ
信号
通路等与精神分裂症相关的信号通路。见表
３
。
３
讨论
本研究对比经药治疗精神分裂症患者和健康人
群血浆外泌体中差异表达的
ｍｉＲＮＡ
，经
Ｉｌｌｕｍｉｎａ
ＨｉｓｅｑＴＭ２５００
测序平台分析两组的血浆外泌体
ｍｉＲ
共筛选出
３５３
个显著差异表达
ｍｉＲＮＡ
，
ＮＡ
表达谱，
１９６
个表达下调。这一数据其中
１５７
个表达上调，
说明，经药治疗精神分裂症患者的血浆外泌体
ｍｉＲ
ＮＡ
表达谱较健康人群仍存在显著的变化。
２．３
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临床精神医学杂志
２０２３
年第
３３
卷第
５
期
ｍｉＲＮＡＩＤ
ｈａｓｍｉＲＮＡ３６５ａ３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ３６５ｂ３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ６５１１ｂ５ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ２０６
ｈａｓｍｉＲＮＡ１２４３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ３７５３Ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ１２ｂ５ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ９２ａ３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ１０７
ｈａｓｍｉＲＮＡ４９９ａ５ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ１３９５ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ１８１ｃ３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ１４２５Ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ４４３３ｂ３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ４４３３ａ３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ３８２３ｐ
ｈａｓｍｉＲＮＡ３２６
ｈａｓｍｉＲＮＡ３８２５ｐ
ＨａｓｍｉＲＮＡ１３３ｂ
·
３７５
·
Ｗｎｔ
信号通路
×
×
×
×
×
×
×
×
×
×
√
×
√
×
√
√
×
×
√
ＰＩ３ＫＡｋｔ
信号通路
×
×
×
√
×
×
×
√
×
×
√
×
×
×
√
×
×
√
√
ＴＮＦ
信号通路
×
×
×
×
×
×
×
×
×
×
√
×
√
×
√
√
×
×
√
ＦＯＸＯ
信号通路
×
×
×
×
×
×
×
√
×
×
×
√
√
×
×
×
×
×
√
Ｈｉｐｐｏ
信号通路
√
×
×
×
×
×
×
×
×
×
×
×
√
×
×
×
×
√
×
表
３
部分差异表达外泌体
ｍｉＲＮＡ
靶向相关的
ＫＥＧＧ
通路
ＭＡＰＫ
信号通路
√
√
×
√
×
×
×
√
×
√
√
×
√
√
×
√
√
×
×
多巴胺
信号通路
×
×
×
×
√
×
×
√
×
×
√
×
√
×
×
×
√
×
×
我们对差异表达的
ｍｉＲＮＡ
进行靶基因筛选，发
现部分差异表达的
ｍｉＲＮＡ
能靶向精神分裂症相关
基因，与精神分裂症病程发展有着紧密的联系。进
一步对靶基因进行
ＧＯ
分析，结果显示基因主要定
位神经元细胞体、谷氨酸能突触、神经元间突触、突
触前和突触膜，主要涉及轴突新生、化学突触传递调
节、跨突触信号调节等生物过程，这些证据提示，这
些差异表达的
ｍｉＲＮＡ
在突触功能及神经元活动的
调控中起重要作用。
Ａｄａｍｓ
等
［］
通过分析
１０７
例精
５７
名亲属和
１０８
名健康对照的脑电神分裂症患者、
图数据，发现精神分裂症异常的脑电图是由突触形
成减少造成的，这意味着精神分裂症相关症状很有
可能是因为突触功能的中断，或神经元之间的交流
方式异常，进而使兴奋性和抑制性传递之间的不平
衡导致的。本研究中，经药治疗精神分裂症组
ｍｉＲ
这些差异表达的
ＮＡ
表达量明显高于健康人群组，
进而影
ｍｉＲＮＡ
很有可能导致基因转录水平的紊乱，
响突触功能甚至是导致神经元之间的信号传递异
常，从而参与精神分裂症的病程发展。
本研究
ＫＥＧＧ
分析结果显示，富集显著的通路
主要为
ＭＡＰＫ
、
ＰＩ３ＫＡｋｔ
、
ＴＮＦ
、
Ｗｎｔ
、
ＦｏｘＯ
、
Ｈｉｐｐｏ
和
多巴胺能突触等在多种神经系统疾病的发病发展过
程中起关键作用的信号通路。其中，
ＭＡＰＫ
、
ＰＩ３Ｋ
Ａｋｔ
、
ＴＮＦ
、
Ｗｎｔ
、
Ｈｉｐｐｏ
等
５
条信号通路均被报道其通
过不同的生物过程激活
ｃａｓｐａｓｅ
蛋白，参与介导神经
元的损伤、凋亡。
ＦｏｘＯ
家族还受
ＰＩ３ＫＡｋｔ
信号通
路的调控，参与调控细胞周期、分化、代谢和凋亡等
重要生命过程，还可以调节下游靶基因的表达
［］
。
这与精神分裂症存在凋亡通路的异常，导致神经元
和神经胶质细胞的凋亡活动发生改变的观点一致。
６
７
本研究对差异表达的外泌体
ｍｉＲＮＡ
靶基因进
行预测发现，共同调
ｍｉＲＮＡ２０６
作为关键
ｍｉＲＮＡ
，
控靶基因参与
ＭＡＰＫ
、并对脑
ＰＩ３ＫＡｋｔ
等信号通路，
源性神经营养因子（
ｂｒａｉｎｄｅｒｉｖｅｄｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ
，
的表达存在靶向调控作用。
ＢＤＮＦ
是神经元
ＢＤＮＦ
）
生长必不可少的神经营养因子之一，与
ＴｒｋＢ
结合能
够促进神经元存活与发育，并能够抑制或缓解神经
元受损死亡
［］
。近年来国内外研究均发现
ＢＤＮＦ
与
精神分裂症的临床症状有一定的关联性，低于正常
人水平表达的
ＢＤＮＦ
可能会引起神经发育障碍进而
李志远教授团队证实了引发精神分裂症
［］
。近期，
ｍｉＲ２０６
靶向
ＢＤＮＦ
并负调控
ＢＤＮＦ
表达
［］
。
Ｄｕ
等
［］
的研究发现首发精神分裂症患者全血外泌体
其对应的血浆
ＢＤＮＦ
表
ｍｉＲ２０６
表达上调最显著，
达亦显著下降。本研究发现经药治疗后的精神分裂
症发病期患者血浆外泌体
ｍｉＲ２０６
表达亦显著上
调，这一发现说明，外泌体
ｍｉＲ２０６
很有可能与精神
分裂症的发病相关。综合上述数据，我们推测上调
的
ｍｉＲ２０６
很有可能通过干扰
ＢＤＮＦ
基因表达，导
加速神经可塑性受损、神经元致
ＢＤＮＦ
的功能失调，
细胞丢失甚至死亡，从而导致患者出现认知障碍等
相关临床症状，这一推测与目前精神分裂症的神经
营养素假说一致，
ｍｉＲ２０６ＢＤＮＦ
很有可能成为精神
分裂症的发病机制中的一个新的信号通路。
在经药治疗精神分裂症组，
ｍｉＲ１４２５ｐ
、
ｍｉＲ
１３９５ｐ
等关键
ｍｉＲＮＡ
调控关键靶基因参与
ＭＡＰＫ
、
多巴胺能突触等与神经系统疾病相关的
Ｗｎｔ
、
ＴＮＦ
、
ＮＲＧ１
）通路，并对神经调节素
１
（的表达存在靶向调
控作用。
ｍｉＲ１４２５ｐ
是多种细胞损伤的保护因子，
有研究
［］
发现癫痫大鼠神经细胞中的
ｍｉＲ１４２５ｐ
８
９
１０
１１
１２
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３７６
·
表达水平显著升高，干扰
ｍｉＲ１４２５ｐ
的表达后癫痫
大鼠神经细胞抗氧化系统酶类升高，氧化系统酶类
含量降低，这一数据提示高表达
ｍｉＲＮＡ１４２５ｐ
很
有可能通过促进神经细胞氧化应激反应而使神经元
损伤。
ｍｉＲ１３９５ｐ
是神经干细胞增殖和神经分化
的负调控因子。有研究团队
［］
将重度抑郁症患者
的血液外泌体注射到小鼠的尾静脉，发现小鼠产生
了明显的抑郁样行为，相反，将健康人群的血液外泌
体注射到有抑郁样行为的小鼠体内，发现小鼠的抑
郁样症状有所减轻，这一研究结果提示
ｍｉＲ１３９５ｐ
水平的上调可能介导应急诱导抑郁样行为的产生。
本研究发现精神分裂症患者血浆外泌体
ｍｉＲ１４２５ｐ
和
ｍｉＲ１３９５ｐ
表达显著上调，它们很可能同时对精
神分裂症相关基因
ＮＲＧ１
存在靶向调控作用。
丛启杰等
［］
通
ＮＲＧ１
是精神分裂症的易感基因
［］
，
过脑立体定位注射技术对小鼠大脑前额皮质进行
发现小鼠出现自发活动量增加、焦
ＮＲＧ１
基因敲除，
虑为特征的精神分裂症样行为。我们猜测
ｍｉＲ１４２
很有可能抑制患者
５ｐ
和
ｍｉＲ１３９５ｐ
水平上调，
从而导致抑制性和兴奋性神经
ＮＲＧ１
的表达水平，
递质转运蛋白平衡失调，结果尚需进一步验证。
本研究结果还显示，
ｍｉＲ１３３ｂ
在精神分裂症样
本中表达下调，根据靶基因预测，发现其可能对结蹄
组织生长因子（
ＣＴＧＦ
）的表达存在靶向作用。研究
发现，中脑多巴胺能神经元可特异性表达
ｍｉＲ
１３３ｂ
，反映其在中脑多巴胺能神经元的成熟、功能和
存活起着重要作用
［］
。研究人员
Ｐｅｉ
等
［］
利用大
ｍｉＲ１３３ｂ
的上调可负反馈鼠的动物实验结果发现，
ＣＴＧＦ
的表达水平，从而抑制抑郁大鼠海马神经元
凋亡，抑制炎症反应，保护抑郁大鼠海马神经元免于
凋亡和炎症的损伤。本研究发现经药治疗精神分裂
症发病期患者
ｍｉＲ１３３ｂ
水平下调，与
ＣＴＧＦ
之间很
有可能存在一个负反馈调控网络，导致神经元在细
胞凋亡机制和炎症机制的作用下受损甚至凋亡。
综上，本研究发现经药治疗精神分裂症患者和
正常人群血浆外泌体
ｍｉＲＮＡ
表达仍存在显著差异。
精神分裂症患者血浆外泌体表达的
ｍｉＲＮＡ２０６
、
ｍｉＲ１４２５ｐ
、
ｍｉＲ１３９５ｐ
、
ｍｉＲ１３３ｂ
等
ｍｉＲＮＡ
可能
是精神分裂症发生发展潜在的诊断生物标记物，这
对进一步认识
ｍｉＲＮＡ
在精神分裂症发病机制的作
用具有一定的参考意义。
１３
１４１５
１６１７
ＪＣｌｉｎＰｓｙｃｈｉａｔｒｙ２０２３Ｖｏｌ３３Ｎｏ．５
４９１４９６．
，（）：
２
］
ＭａｆｆｉｏｌｅｔｔｉＥ
，
ＣａｔｔａｎｅｏＡ
，
ＲｏｓｓｏＧ
，
ｅｔａｌ．Ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｗｈｏｌｅｂｌｏｏｄ
［
２０１２２３５２
Ｊ
］
．ＪＡｆｆｅｃｔＤｉｓｏｒｄ
，
２０１６
，
２００
：
２５０２５８．
［
３
］
ＷｅｉＨ
，
ＹｕａｎＹＢ
，
ＬｉｕＳ
，
ｅｔａｌ．ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇｍｉＲＮＡｌｅｖ
［
ｅｌｓｉｎｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ
［
Ｊ
］
．ＡｍＪＰｓｙｃｈｉａｔｒｙ
，
２０１５
，
１７２
（
１１
）
１１４１
：
ｍｉｃｒｏＲＮＡａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓｉｎｍａｊｏｒｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｂｉｐｏｌａｒｄｉｓｏｒｄｅｒ
，，，
［
４
］
ＺｈａｎｇＪ
，
ＬｉＳ
，
ＬｉＬ
，
ｅｔａｌ．ＥｘｏｓｏｍｅａｎｄｅｘｏｓｏｍａｌｍｉｃｒｏＲＮＡ
：
ｔｒａｆ
ｓｏｒｔｉｎｇ
，
ａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎ
［
Ｊ
］
．ＧｅｎｏｍｉｃｓＰｒｏｔｅｏｍｉｃｓＢｉｏｉｎｆｏｒｍａｆｉｃｋｉｎｇ
，
ｔｉｃｓ
，
２０１５
，
１３
（
１
）
１７２４．
：
５
］
ＷａｎｇＹ
，
ＡｍｄａｎｅｅＮ
，
ＺｈａｎｇＸ．Ｅｘｏｓｏｍｅｓｉｎｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ
：［
Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ
，
ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ
，
ａｎｄｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｔａｒ
６５
（
１
）
ｅ６１
：
１９．ｇｅｔｓ．ＥｕｒＰｓｙｃｈｉａｔｒｙ．２０２２
，，
６
］
ＡｄａｍｓＲＡ
，
ＰｉｎｏｔｓｉｓＤ
，
ＴｓｉｒｌｉｓＫ
，
ｅｔａｌ．Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌｍｏｄｅｌｉｎｇｏｆ
［
ｅｌｅｃｔｒｏｅｎｃｅｐｈａｌｏｇｒａｐｈｙａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｍａｇｎｅｔｉｃｒｅｓｏｎａｎｃｅｉｍａｇｉｎｇ
２０２２１５．
，，（）：
７
］
ＬｉｎｋＷ．ＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎｔｏＦＯＸＯｂｉｏｌｏｇｙ
［
Ｊ
］
．ＭｅｔｈｏｄｓＭｏｌＢｉｏｌ
，［
２０１９
，
１８９０
：
１９．
８
］
ＡｎｇｅｌｕｃｃｉＦ
，
ＢｒｅｎèＳ
，
ＭａｔｈéＡＡ．ＢＤＮＦｉｎｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ
，
ｄｅｐｒｅｓ
［
ｓｉｏｎａｎｄｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌｓ
［
Ｊ
］
．ＭｏｌＰｓｙｃｈｉａｔｒｙ
，
２００５
，
１０
（
４
）
３４５３５２．
：
９
］
ＴｉｇａｒｅｔＣＭ
，
ＬｉｎＴＣＥ
，
ＭｏｒｒｅｌｌＥＲ
，
ｅｔａｌ．Ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒａｃｔｉ
［
ｉｎｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａＪ．ＢｉｏｌＰｓｙｃｈｉａｔｒｙ２０２２９１２
ｖａｔｉｏｎｒｅｓｃｕｅｓｃｏｇｎｉｔｉｖｅａｎｄｓｙｎａｐｔｉｃａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓｃａｕｓｅｄｂｙｈｅｍ
ｉｚｙｇｏｓｉｔｙｏｆｔｈｅｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃｒｉｓｋｇｅｎｅＣａｃｎａ１ｃＪ．ＭｏｌＰｓｙｃｈｉａｔｒｙ
ｐａｒａｄｉｇｍｓｉｎｄｉｃａｔｅｓａｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔｌｏｓｓｏｆｐｙｒａｍｉｄａｌｃｅｌｌｓｙｎａｐｔｉｃｇａｉｎ
１１４７．
［］
１７４８１７６０．
，（）：
１０
］
ＺｈａｎｇＹＹ
，
ＤｅｎｇＷＹ
，
ＷａｎｇＷ
，
ｅｔａｌ．ＭｉｃｒｏＲＮＡ２０６ｄｏｗｎｒｅｇｕ
［
２０２１２６６
ｌａｔｅｄｈｕｍａｎｕｍｂｉｌｉｃａｌｃｏｒｄｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓａｌｌｅｖｉａｔｅｃｏｇ
３０４．
，，（）：
１１
］
ＤｕＹ
，
ＹｕＹ
，
ＨｕＹ
，
ｅｔａｌ．Ｇｅｎｏｍｅｗｉｄｅ
，
ｉｎｔｅｇｒａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓｉｍ
［
Ｄｉｓｃｏｖ２０２２８１
ｎｉａＪ．ＳｃｈｉｚｏｐｈｒＢｕｌｌ２０１９４５６
［］，
ｎｉｔｉｖｅｄｅｃｌｉｎｅｉｎＤｇａｌａｃｔｏｓｅｉｎｄｕｃｅｄａｇｉｎｇｍｉｃｅＪ．ＣｅｌｌＤｅａｔｈ
［］
１２５７１２６６．
［］，，（）：
１２
］赵利，［李海燕
．ｍｉＲ１４２５ｐ
对癫痫发作后神经元损伤的作用
Ｊ
］
．
分子诊断与治疗杂志，
２０２０
，
１２
（
７
）
９６８９７３．
机制［：
１３
］
ＷｅｉＺＸ
，
ＸｉｅＧＪ
，
ＭａｏＸ
，
ｅｔａｌ．Ｅｘｏｓｏｍｅｓｆｒｏｍｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｍａｊｏｒ
［
ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎｃａｕｓｅｄｅｐｒｅｓｓｉｖｅｌｉｋｅｂｅｈａｖｉｏｒｓｉｎｍｉｃｅｗｉｔｈｉｎｖｏｌｖｅ
１０５０１０５８．
，，（）：
１４
］陈彦霖，［陈诚，李泽平，等
．ＮＲＧ１／ＥｒｂＢ４
信号通路与精神疾病
．
中国现代医学杂志，
２０２０
，
３０
（
１５
）
４４
：关联的研究进展［
Ｊ
］
ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ２０２０４５６
１５
］丛启杰，［曾荣森，刘耘溪，等
．
大脑前额皮质
Ｎｒｇ１
基因敲低对
小鼠精神分裂症样行为形成的影响［
Ｊ
］
．
江苏大学学报（医学
２０２２
，
３２
（
３
）
２１３２１８．
版），：
１６
］
ＫｉｍＪ
，
ＩｎｏｕｅＫ
，
ＩｓｈｉｉＪ
，
ｅｔａｌ．ＡｍｉｃｒｏＲＮＡｆｅｅｄｂａｃｋｃｉｒｃｕｉｔｉｎ
［
ｍｉｄｂｒａｉｎｄｏｐａｍｉｎｅｎｅｕｒｏｎｓ
［
Ｊ
］
．Ｓｃｉｅｎｃｅ
，
２００７
，
３１７
（
５８４２
）：
１７
］
ＰｅｉＧＹ
，
ＸｕＬＧ
，
ＨｕａｎｇＷＨ
，
ｅｔａｌ．ＴｈｅｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｒｏｌｅｏｆｍｉｃｒｏＲ
［
ＮＡ１３３ｂｉｎｒｅｓｔｒｉｃｔｉｎｇｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌｎｅｕｒｏｎｓａｐｏｐｔｏｓｉｓａｎｄｉｎ
ｆｌａｍｍａｔｏｒｙｉｎｊｕｒｙｉｎｒａｔｓｗｉｔｈｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎｂｙｓｕｐｐｒｅｓｓｉｎｇＣＴＧＦ
Ｊ
］
．ＩｎｔＩｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ
，
２０２０
，
７８
：
１０６０７６．
［
２０２３０７２３
）（收稿日期：
２０２２１１０６
修回日期：
１２２０１２２４．
４９．
ｍｅｎｔｏｆｍｉＲ１３９５ｐｒｅｇｕｌａｔｅｄｎｅｕｒｏｇｅｎｅｓｉｓＪ．Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏ
ｐｌｉｃａｔｅｓｅｘｏｓｏｍｅｄｅｒｉｖｅｄｍｉｃｒｏＲＮＡｄｙｓｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｉｎｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅ
［］
参考文献：
１
］
ＧｅｅｋｉｙａｎａｇｅＨ
，
ＪｉｃｈａＧＡ
，
ＮｅｌｓｏｎＰＴ
，
ｅｔａｌ．ＢｌｏｏｄｓｅｒｕｍｍｉＲＮＡ
：［
ｎｏｎｉｎｖａｓｉｖｅｂｉｏｍａｒｋｅｒｓｆｏｒＡｌｚｈｅｉｍｅｒ＇ｓｄｉｓｅａｓｅ
［
Ｊ
］
．ＥｘｐＮｅｕｒｏｌ
，
Copyright©博看网. All Rights Reserved.