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盐胁迫下甜高粱WRKY50基因的功能分析

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2024年4月7日发(作者:代晴丽)

山东师范大学硕士学位论文

目录

摘要 ............................................................................................................................................ I

Abstract .................................................................................................................................. III

第一章 文献综述 ..................................................................................................................... 1

1.

盐胁迫对植物生长发育的影响 ................................................................................ 1

2. 植物响应盐胁迫的生理生化机制 .............................................................................. 2

3. WRKY转录因子参与植物耐盐的分子机制与研究进展 ......................................... 3

4. 甜高粱简述 .................................................................................................................. 4

5. 本论文的目的与意义 .................................................................................................. 5

第二章 甜高粱WRKY50基因的生物信息学分析 ................................................................ 6

1. 试验材料与方法 .......................................................................................................... 6

2. 试验结果与分析 .......................................................................................................... 6

2.1 SbWRKY50的氨基酸序列以及结构域的分析................................................. 6

2.2 SbWRKY50蛋白序列的亲疏水性分析............................................................. 7

2.3 SbWRKY50信号肽及跨膜结构预测及分析..................................................... 7

2.4 SbWRKY50蛋白与其他同源蛋白的关系......................................................... 8

3. 讨论 .............................................................................................................................. 9

第三章 甜高粱WRKY50的表达模式分析 .......................................................................... 10

1. 试验材料与方法 ........................................................................................................ 10

2. 试验方法 .................................................................................................................... 10

2.1 RNA的提取与cDNA的合成 ......................................................................... 10

2.2 甜高粱WRKY50基因的表达模式分析 ......................................................... 10

3. 试验结果与分析 ........................................................................................................ 11

3.1甜高粱WRKY50基因的组织和诱导表达模式 .............................................. 11

山东师范大学硕士学位论文

4. 讨论 ............................................................................................................................ 12

第四章 甜高粱WRKY50基因的克隆、亚细胞定位以及转录活性分析 .......................... 13

1. 试验材料 .................................................................................................................... 13

2. 试验方法 .................................................................................................................... 13

2.1 克隆甜高粱WRKY50基因 ............................................................................. 13

2.2 表达载体的构建 .............................................................................................. 15

2.3 表达载体转化农杆菌GV3101 ....................................................................... 16

2.4 酵母细胞AH109的转化 ................................................................................ 16

2.5 SbWRKY50的亚细胞定位分析....................................................................... 16

3. 试验结果与分析 ........................................................................................................ 17

3.1甜高粱WRKY50基因的克隆及载体构建 ...................................................... 17

3.2 SbWRKY50的亚细胞定位分析....................................................................... 18

3.3 SbWRKY50的转录活性分析........................................................................... 19

4. 讨论 ............................................................................................................................ 19

第五章 盐胁迫下甜高粱WRKY50基因的功能研究 .......................................................... 21

1. 试验材料 .................................................................................................................... 21

2. 试验方法 .................................................................................................................... 21

2.1 拟南芥SbWRKY50过表达株系的筛选与鉴定............................................. 21

2.2过表达株系的萌发期试验 ............................................................................... 22

2.3过表达株系的幼苗期试验 ............................................................................... 22

3. 试验结果与分析 ........................................................................................................ 25

3.1 拟南芥SbWRKY50过表达株系的获得......................................................... 25

3.2 过表达株系的萌发期实验 .............................................................................. 27

3.3过表达株系的幼苗期实验 ............................................................................... 29

2024年4月7日发(作者:代晴丽)

山东师范大学硕士学位论文

目录

摘要 ............................................................................................................................................ I

Abstract .................................................................................................................................. III

第一章 文献综述 ..................................................................................................................... 1

1.

盐胁迫对植物生长发育的影响 ................................................................................ 1

2. 植物响应盐胁迫的生理生化机制 .............................................................................. 2

3. WRKY转录因子参与植物耐盐的分子机制与研究进展 ......................................... 3

4. 甜高粱简述 .................................................................................................................. 4

5. 本论文的目的与意义 .................................................................................................. 5

第二章 甜高粱WRKY50基因的生物信息学分析 ................................................................ 6

1. 试验材料与方法 .......................................................................................................... 6

2. 试验结果与分析 .......................................................................................................... 6

2.1 SbWRKY50的氨基酸序列以及结构域的分析................................................. 6

2.2 SbWRKY50蛋白序列的亲疏水性分析............................................................. 7

2.3 SbWRKY50信号肽及跨膜结构预测及分析..................................................... 7

2.4 SbWRKY50蛋白与其他同源蛋白的关系......................................................... 8

3. 讨论 .............................................................................................................................. 9

第三章 甜高粱WRKY50的表达模式分析 .......................................................................... 10

1. 试验材料与方法 ........................................................................................................ 10

2. 试验方法 .................................................................................................................... 10

2.1 RNA的提取与cDNA的合成 ......................................................................... 10

2.2 甜高粱WRKY50基因的表达模式分析 ......................................................... 10

3. 试验结果与分析 ........................................................................................................ 11

3.1甜高粱WRKY50基因的组织和诱导表达模式 .............................................. 11

山东师范大学硕士学位论文

4. 讨论 ............................................................................................................................ 12

第四章 甜高粱WRKY50基因的克隆、亚细胞定位以及转录活性分析 .......................... 13

1. 试验材料 .................................................................................................................... 13

2. 试验方法 .................................................................................................................... 13

2.1 克隆甜高粱WRKY50基因 ............................................................................. 13

2.2 表达载体的构建 .............................................................................................. 15

2.3 表达载体转化农杆菌GV3101 ....................................................................... 16

2.4 酵母细胞AH109的转化 ................................................................................ 16

2.5 SbWRKY50的亚细胞定位分析....................................................................... 16

3. 试验结果与分析 ........................................................................................................ 17

3.1甜高粱WRKY50基因的克隆及载体构建 ...................................................... 17

3.2 SbWRKY50的亚细胞定位分析....................................................................... 18

3.3 SbWRKY50的转录活性分析........................................................................... 19

4. 讨论 ............................................................................................................................ 19

第五章 盐胁迫下甜高粱WRKY50基因的功能研究 .......................................................... 21

1. 试验材料 .................................................................................................................... 21

2. 试验方法 .................................................................................................................... 21

2.1 拟南芥SbWRKY50过表达株系的筛选与鉴定............................................. 21

2.2过表达株系的萌发期试验 ............................................................................... 22

2.3过表达株系的幼苗期试验 ............................................................................... 22

3. 试验结果与分析 ........................................................................................................ 25

3.1 拟南芥SbWRKY50过表达株系的获得......................................................... 25

3.2 过表达株系的萌发期实验 .............................................................................. 27

3.3过表达株系的幼苗期实验 ............................................................................... 29

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