2024年4月11日发(作者：犹宏放)
植物组织中丙二醛的测定
实验原理：
植物器官衰老或在逆境下遭受伤害，往往发生膜脂过氧化作用，丙二醛(MDA)是膜脂
过氧化作用的最终分解产物，其含量可以反映植物遭受逆境伤害的程度。丙二醛在酸性和
高温条件，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3,5,5—三甲基恶唑2,4-二
酮)，在532nm处有最大光吸收，在600nm处有最小光吸收，该复合物的吸光系数为
155[mmol/( )] ，可按公式：A532－A600=155000×C×L算出MDA浓度
C(μmol/L)，进一步算出单位重量鲜组织中 MDA 含量(μmol/g)。式中，A532和A600
分别表示532nm和600nm处的吸光度值。L为比色杯厚度(cm )。
需要指出的是，植物组织中糖类物质对MDA-TBA反应有干扰作用。为消除这种干扰，
经试验，可用下列公式消除由蔗糖引起的误差。
C(μmol/L)=6.45(A532－A600)-0.56A450
式中： A450、A532和A600分别表示450nm、532nm 和600nm处的吸光度值。
算出植物样品提取液中MDA的浓度后，可进一步算出其在植物组织中的含量。
实验材料、试剂与仪器设备
（一）实验材料
植物的根或叶片。
（二）试剂
1、5%三氯乙酸(TCA)。
2、0.6 %硫代巴比妥酸(TBA)溶液：称取硫代巴比妥酸0.6g溶于5％TCA溶解并用其
定容至l00mL 。
（三）仪器设备
研钵，恒温水浴锅，分光光度计，离心机，天平，刻度试管，移液管
实验步骤
的提取 称取植物材料1g，剪碎，加入2mL5%TCA和少量石英砂，研磨至匀
浆，再加8mLTCA进一步研磨，匀浆在4000r/min离心10min，上清液为样品提取液。
2. 显色反应和测定 吸取离心的上清液2mL(对照加2mL蒸馏水)，加入2 mL0.6%TBA
溶液，摇匀。将试管放入沸水浴中煮沸10min(自试管内溶液中出现小气泡开始计时)，取
出试管并冷却，3000r/min离心15 min，取上清液并量其体积。以0.6％TBA 溶液为空
白测定532nm、600nm和450nm处的吸光度值。
结果计算
MDA 含量 ( μmol/g)=
2024年4月11日发(作者：犹宏放)
植物组织中丙二醛的测定
实验原理：
植物器官衰老或在逆境下遭受伤害，往往发生膜脂过氧化作用，丙二醛(MDA)是膜脂
过氧化作用的最终分解产物，其含量可以反映植物遭受逆境伤害的程度。丙二醛在酸性和
高温条件，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3,5,5—三甲基恶唑2,4-二
酮)，在532nm处有最大光吸收，在600nm处有最小光吸收，该复合物的吸光系数为
155[mmol/( )] ，可按公式：A532－A600=155000×C×L算出MDA浓度
C(μmol/L)，进一步算出单位重量鲜组织中 MDA 含量(μmol/g)。式中，A532和A600
分别表示532nm和600nm处的吸光度值。L为比色杯厚度(cm )。
需要指出的是，植物组织中糖类物质对MDA-TBA反应有干扰作用。为消除这种干扰，
经试验，可用下列公式消除由蔗糖引起的误差。
C(μmol/L)=6.45(A532－A600)-0.56A450
式中： A450、A532和A600分别表示450nm、532nm 和600nm处的吸光度值。
算出植物样品提取液中MDA的浓度后，可进一步算出其在植物组织中的含量。
实验材料、试剂与仪器设备
（一）实验材料
植物的根或叶片。
（二）试剂
1、5%三氯乙酸(TCA)。
2、0.6 %硫代巴比妥酸(TBA)溶液：称取硫代巴比妥酸0.6g溶于5％TCA溶解并用其
定容至l00mL 。
（三）仪器设备
研钵，恒温水浴锅，分光光度计，离心机，天平，刻度试管，移液管
实验步骤
的提取 称取植物材料1g，剪碎，加入2mL5%TCA和少量石英砂，研磨至匀
浆，再加8mLTCA进一步研磨，匀浆在4000r/min离心10min，上清液为样品提取液。
2. 显色反应和测定 吸取离心的上清液2mL(对照加2mL蒸馏水)，加入2 mL0.6%TBA
溶液，摇匀。将试管放入沸水浴中煮沸10min(自试管内溶液中出现小气泡开始计时)，取
出试管并冷却，3000r/min离心15 min，取上清液并量其体积。以0.6％TBA 溶液为空
白测定532nm、600nm和450nm处的吸光度值。
结果计算
MDA 含量 ( μmol/g)=