2024年4月11日发(作者：武盼晴)
・
４２・ 《上海畜牧兽医通讯》２０１５年第２期
ＩＳＡ ２ ０ ６佐剂配制的猪细小病毒病油乳剂
疫苗的检测
朱永军 邹 勇 倪建平 张春玲
（上海市农业科学院畜牧兽医研究所
何锡忠 张婉华
２０１１０６） 上海佳牧生物制品有限公司 上海
【摘要】为验证Ｓｅｐｐｉｃ公司的ＭＯＮＴＡＮ１ＤＥｍ ＩＳＡ ２０６ ＶＧ佐剂对猪细小病毒病灭活疫苗的
效果，本实验用Ｓｅｐｐｉｃ ＩＳＡ ２０６ ＶＧ佐剂替代白油佐剂，配制２批猪细小病毒病灭活疫苗，检测结
果：疫苗的物理性状良好，接种乳鼠全部健活，接种豚鼠后２８ ｄ全部产生抗体反应。证实Ｓｅｐｐｉｃ公
司的ＭｏＮＴＡＮＩＤＥ ＩＳＡ ２０６ ＶＧ佐剂配制的猪细小病毒病灭活疫苗具有良好的安全性和免疫
效力。
关键词：ＩＳＡ ２０６ ＶＧ佐剂；ＰＰＶ疫苗；检测
猪细小病毒（Ｐｏｒｃｉｎｅ ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ，ＰＰＶ）是引起 疫苗的影响。
猪繁殖障碍的主要病因之一，可引起母猪尤其是初
产母猪的繁殖障碍，表现为母猪受胎率降低，产活
仔数减少和（或）出现死胎、木乃伊胎等。ＰＰＶ是由
Ｍａｙｒ和Ｍａｈｎｅｌ于１９６６年进行猪瘟病毒组织培养
时发现的，并认为是细胞内潜伏感染的病毒。１９６７
年Ｃａｒｔｗｒｉｇｈｔ等在对猪的不孕症、流产和死产的病
原学研究中，从病料中分离出ＰＰＶ，首次证明了该
病毒的致病作用。近年来，ＰＰＶ感染呈扩大趋势，
给全球养猪业造成巨大的经济损失。国内１９８３年
首次在上海分离到该病毒，此后全国各地均有本病
发生的报道，血清学调查的阳性率为８０ ｎ 。
猪细小病毒血清型单一并具有高免疫原性，使得
疫苗接种成为控制ＰＰＶ感染的有效措施。本所研制
的猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗具有良好的安全性
１材料与方法
１．１ 材料
１．１．１ ＰＰＶ灭活病毒：ＨＡ：４０９６，由本实验室
提供。
１．１．２ 佐齐０：ＭｏＮＴＡＮＩＤＥ。Ｍ ＩＳＡ ２０６ ＶＧ佐齐４，
由Ｓｅｐｐｉｃ赛彼科（上海）特殊化学品有限公司提供。
１．１．３ 试验动物：２～４日龄乳鼠（一窝不少于５
只）、ＰＰＶ ＨＩ抗体阴性（ＨＩ抗体效价≤１：８）体重
４００ ｇ左右健康豚鼠，均购自中国科学院上海实验
动物中心。
１．２ 方法
１．２。１ ＨＩ试验：按文献［２］操作。ＨＩ≥１６判为
阳性。
和免疫原性，于１９９４年在国内首先获得农业部颁发
的新兽药证书，填补了国内这一领域的空白。该疫苗
是将灭活的猪细小病毒加入白油佐剂经二步乳化，配
制成水包油包水（ｗ／ｏ／ｗ）的双相油乳剂疫苗，疫苗
配制所需的白油佐剂是实验室熬制的，随着乳化技术
１．２．２疫苗配制：ＰＰＶ灭活病毒和ＩＳＡ ２０６ ＶＧ佐
剂预热至３Ｏ℃，按重量比１：１配制，在低速搅拌的
状况下，将预热至３０℃的病毒液缓慢加入到同样预
热至３Ｏ℃的ＩＳＡ ２０６ ＶＧ佐剂中，再调高转速至
２ ０００ ｒ／ｍｉｎ，１０ ｍｉｎ，分装，４℃保存。标记为苗１、
苗２。
的进步，油佐剂中所应用的油成分逐渐降低，如法国
赛比克公司的ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ ＩＳＡ ２０６佐剂。本实
验用ＩＳＡ ２０６ ＶＧ油佐剂代替白油佐剂进行猪细小病
１．２．３疫苗检测：（１）物理性状检测：（ａ）外观：本
品应为乳白色乳状液，静置后下层略带粉红色。
毒病油乳剂疫苗的配制，通过疫苗的物理性状检测、
安全性检验和效力检验，观察ＩＳＡ ２０６ ＶＧ油佐剂对
（ｂ）剂型：本品应为ｗ／ｏ／ｗ双相疫苗，取１吸管吸
取少量疫苗滴于冷水中，第１滴呈云雾状扩散，第２
滴不扩散。（ｃ）粘度：用出口内径１．２ ｍｍ的１ ｍＬ
＊为通讯作者
吸管，吸取疫苗１ ｍＬ，使其垂直自然流出，流出
《上海畜牧兽医通讯》２０１５年第２期 ・ ４３ ・
０．４ ｍＬ所需时间应在２ Ｓ以内。（ｄ）稳定性：将疫
苗置离心管内，３ ０００ ｒ／ｍｉｎ，离心１５ ｒａｉｎ，有少量分
层，但不破乳；在４℃保存逐渐分为２层，但不破乳。
（２）安全检验：２批疫苗分别皮下注射乳鼠１窝，观
察１周，应无不良临床反应，乳鼠应全部健活。（３）
效力检验：豚鼠１３只，随机分为３组，第１、第２组
为每组５只，分别肌肉接种苗１、苗２疫苗，０．５ ｍＬ／只；
第３组３只为对照组。接种后２８ ｄ，接种组和对照
组同时采血检测ＰＰＶ ＨＩ抗体，对照组应为阴性；接
种组应有４只出现抗体反应，ＨＩ≥６４。
２ 结果
２．１ 疫苗配制
按配制要求，配制疫苗２批。
２．２ 疫苗物理性状检测
２．２．１ 外观：２批疫苗均为乳白色乳状液，静置
２４ ｈ后略有分层，下层略带粉红色。
２．２．２剂型：２批疫苗分别用吸管吸取少量疫苗滴
于冷水中，第１滴呈云雾状扩散，第２滴不扩散，呈
ｗ／ｏ／ｗ的双相疫苗。
２．２．３ 粘度：２批疫苗均用１ ｍＬ吸管吸取疫苗
１ ｍＬ，垂直自然流出０．４ ｍＬ所需时间均在２ ｓ
以内。
２．２．４ 稳定性：２批疫苗分别置离心管内，
３ ０００ ｒ／ｍｉｎ，离心１５ ｍｉｎ，有少量分层，但不破乳；
在４℃保存逐渐分为２层，但不破乳。
２．３ 安全检验
２批疫苗分别接种乳鼠１窝，无不良反应，观察
１周乳鼠全部健活。见表１。
２．４ 效力检验
疫苗接种后２８ ｄ，ＰＰＶ ＨＩ抗体检测对照组保
持阴性；接种组ＰＰＶ ＨＩ抗体全部转为阳性。见
表１。
表１疫苗的安全检验和效力检验
“
一
”表示ＰＰＶ ＨＩ抗体阴性
３结论与讨论
３．１ 本实验用法国赛彼科公司的ＭＯＮ—
ＴＡＮＩＤＥＭ ＩＳＡ ２０６ＶＧ佐剂，与灭活的ＰＰＶ按１。
１配制成双相疫苗，经实验室检测，其物理性状、安
全检验和效力检验均符合ＰＰＶ灭活疫苗的要求，取
得了理想的结果。
３．２ 疫苗制备中所应用的佐剂，可改变和提高机
体对抗原的特异性免疫应答，发挥辅助作用的一类
物质。传统兽用疫苗的佐剂多为弗氏佐剂，随着乳
化技术的进步，油佐剂中所应用的油成分逐渐降低
（不高于５ ），降低了佐剂的毒副作用０ ，如ＭＯＮ—
ＴＡＮＩＤＥＭ ＩＳＡ ２０６ ＶＧ佐剂，是一种基于矿物油设
计的油佐剂，用于制备可注射的水包油包水型乳化
疫苗，该佐剂可一步乳化制备成ｗ／ｏ／ｗ的双相疫
苗。本实验用２０６ ＶＧ佐剂一步乳化配制成ＰＰＶ
疫苗，经实验室检测，疫苗为ｗ／ｏ／ｗ剂型，与张超
范报道的一致“ 。本所研制的ＰＰＶ灭活疫苗于
１９９４年获得农业部颁发的新兽药证书，具有很好的
安全性和免疫效力，该疫苗的佐剂是白油加硬脂酸
铝和Ｓｐａｎ８０熬制而成的，疫苗的配制需二步乳化；
而２０６佐剂无需熬制，即开即用，且只需一步乳化即
能达到双相疫苗，但同时也存在预热的麻烦，在疫
苗配制前，抗原和佐剂都需预热至３０℃，因此工厂
化生产需根据自身情况而定。
参考文献
［１］殷震，刘景华．动物病毒学（第２版）［Ｍ３．北京：科学出版
社，１９９７．
（２３张婉华，邹勇，朱永军，等．猪细小病毒ＨＡ、ＨＩ微量法试
验的优化（Ｊ３．中国兽药杂志，２０１３，４７（２）：２１～２３．
（３３李娜，周伟芳，刘慧敏，等．疫苗佐剂的研究现状和发展趋
势［Ｊ３．中国预防兽医学报，２０１３，３５（１）：８１～８６．
（４３张超范，崔尚金，苗岚飞，等．猪细小病毒灭活疫苗安全性
试验及佐剂的筛选［Ｊ３．中国预防兽医学报，２００９，３１（６）：
４６２～４６５．
2024年4月11日发(作者：武盼晴)
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４２・ 《上海畜牧兽医通讯》２０１５年第２期
ＩＳＡ ２ ０ ６佐剂配制的猪细小病毒病油乳剂
疫苗的检测
朱永军 邹 勇 倪建平 张春玲
（上海市农业科学院畜牧兽医研究所
何锡忠 张婉华
２０１１０６） 上海佳牧生物制品有限公司 上海
【摘要】为验证Ｓｅｐｐｉｃ公司的ＭＯＮＴＡＮ１ＤＥｍ ＩＳＡ ２０６ ＶＧ佐剂对猪细小病毒病灭活疫苗的
效果，本实验用Ｓｅｐｐｉｃ ＩＳＡ ２０６ ＶＧ佐剂替代白油佐剂，配制２批猪细小病毒病灭活疫苗，检测结
果：疫苗的物理性状良好，接种乳鼠全部健活，接种豚鼠后２８ ｄ全部产生抗体反应。证实Ｓｅｐｐｉｃ公
司的ＭｏＮＴＡＮＩＤＥ ＩＳＡ ２０６ ＶＧ佐剂配制的猪细小病毒病灭活疫苗具有良好的安全性和免疫
效力。
关键词：ＩＳＡ ２０６ ＶＧ佐剂；ＰＰＶ疫苗；检测
猪细小病毒（Ｐｏｒｃｉｎｅ ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ，ＰＰＶ）是引起 疫苗的影响。
猪繁殖障碍的主要病因之一，可引起母猪尤其是初
产母猪的繁殖障碍，表现为母猪受胎率降低，产活
仔数减少和（或）出现死胎、木乃伊胎等。ＰＰＶ是由
Ｍａｙｒ和Ｍａｈｎｅｌ于１９６６年进行猪瘟病毒组织培养
时发现的，并认为是细胞内潜伏感染的病毒。１９６７
年Ｃａｒｔｗｒｉｇｈｔ等在对猪的不孕症、流产和死产的病
原学研究中，从病料中分离出ＰＰＶ，首次证明了该
病毒的致病作用。近年来，ＰＰＶ感染呈扩大趋势，
给全球养猪业造成巨大的经济损失。国内１９８３年
首次在上海分离到该病毒，此后全国各地均有本病
发生的报道，血清学调查的阳性率为８０ ｎ 。
猪细小病毒血清型单一并具有高免疫原性，使得
疫苗接种成为控制ＰＰＶ感染的有效措施。本所研制
的猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗具有良好的安全性
１材料与方法
１．１ 材料
１．１．１ ＰＰＶ灭活病毒：ＨＡ：４０９６，由本实验室
提供。
１．１．２ 佐齐０：ＭｏＮＴＡＮＩＤＥ。Ｍ ＩＳＡ ２０６ ＶＧ佐齐４，
由Ｓｅｐｐｉｃ赛彼科（上海）特殊化学品有限公司提供。
１．１．３ 试验动物：２～４日龄乳鼠（一窝不少于５
只）、ＰＰＶ ＨＩ抗体阴性（ＨＩ抗体效价≤１：８）体重
４００ ｇ左右健康豚鼠，均购自中国科学院上海实验
动物中心。
１．２ 方法
１．２。１ ＨＩ试验：按文献［２］操作。ＨＩ≥１６判为
阳性。
和免疫原性，于１９９４年在国内首先获得农业部颁发
的新兽药证书，填补了国内这一领域的空白。该疫苗
是将灭活的猪细小病毒加入白油佐剂经二步乳化，配
制成水包油包水（ｗ／ｏ／ｗ）的双相油乳剂疫苗，疫苗
配制所需的白油佐剂是实验室熬制的，随着乳化技术
１．２．２疫苗配制：ＰＰＶ灭活病毒和ＩＳＡ ２０６ ＶＧ佐
剂预热至３Ｏ℃，按重量比１：１配制，在低速搅拌的
状况下，将预热至３０℃的病毒液缓慢加入到同样预
热至３Ｏ℃的ＩＳＡ ２０６ ＶＧ佐剂中，再调高转速至
２ ０００ ｒ／ｍｉｎ，１０ ｍｉｎ，分装，４℃保存。标记为苗１、
苗２。
的进步，油佐剂中所应用的油成分逐渐降低，如法国
赛比克公司的ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ ＩＳＡ ２０６佐剂。本实
验用ＩＳＡ ２０６ ＶＧ油佐剂代替白油佐剂进行猪细小病
１．２．３疫苗检测：（１）物理性状检测：（ａ）外观：本
品应为乳白色乳状液，静置后下层略带粉红色。
毒病油乳剂疫苗的配制，通过疫苗的物理性状检测、
安全性检验和效力检验，观察ＩＳＡ ２０６ ＶＧ油佐剂对
（ｂ）剂型：本品应为ｗ／ｏ／ｗ双相疫苗，取１吸管吸
取少量疫苗滴于冷水中，第１滴呈云雾状扩散，第２
滴不扩散。（ｃ）粘度：用出口内径１．２ ｍｍ的１ ｍＬ
＊为通讯作者
吸管，吸取疫苗１ ｍＬ，使其垂直自然流出，流出
《上海畜牧兽医通讯》２０１５年第２期 ・ ４３ ・
０．４ ｍＬ所需时间应在２ Ｓ以内。（ｄ）稳定性：将疫
苗置离心管内，３ ０００ ｒ／ｍｉｎ，离心１５ ｒａｉｎ，有少量分
层，但不破乳；在４℃保存逐渐分为２层，但不破乳。
（２）安全检验：２批疫苗分别皮下注射乳鼠１窝，观
察１周，应无不良临床反应，乳鼠应全部健活。（３）
效力检验：豚鼠１３只，随机分为３组，第１、第２组
为每组５只，分别肌肉接种苗１、苗２疫苗，０．５ ｍＬ／只；
第３组３只为对照组。接种后２８ ｄ，接种组和对照
组同时采血检测ＰＰＶ ＨＩ抗体，对照组应为阴性；接
种组应有４只出现抗体反应，ＨＩ≥６４。
２ 结果
２．１ 疫苗配制
按配制要求，配制疫苗２批。
２．２ 疫苗物理性状检测
２．２．１ 外观：２批疫苗均为乳白色乳状液，静置
２４ ｈ后略有分层，下层略带粉红色。
２．２．２剂型：２批疫苗分别用吸管吸取少量疫苗滴
于冷水中，第１滴呈云雾状扩散，第２滴不扩散，呈
ｗ／ｏ／ｗ的双相疫苗。
２．２．３ 粘度：２批疫苗均用１ ｍＬ吸管吸取疫苗
１ ｍＬ，垂直自然流出０．４ ｍＬ所需时间均在２ ｓ
以内。
２．２．４ 稳定性：２批疫苗分别置离心管内，
３ ０００ ｒ／ｍｉｎ，离心１５ ｍｉｎ，有少量分层，但不破乳；
在４℃保存逐渐分为２层，但不破乳。
２．３ 安全检验
２批疫苗分别接种乳鼠１窝，无不良反应，观察
１周乳鼠全部健活。见表１。
２．４ 效力检验
疫苗接种后２８ ｄ，ＰＰＶ ＨＩ抗体检测对照组保
持阴性；接种组ＰＰＶ ＨＩ抗体全部转为阳性。见
表１。
表１疫苗的安全检验和效力检验
“
一
”表示ＰＰＶ ＨＩ抗体阴性
３结论与讨论
３．１ 本实验用法国赛彼科公司的ＭＯＮ—
ＴＡＮＩＤＥＭ ＩＳＡ ２０６ＶＧ佐剂，与灭活的ＰＰＶ按１。
１配制成双相疫苗，经实验室检测，其物理性状、安
全检验和效力检验均符合ＰＰＶ灭活疫苗的要求，取
得了理想的结果。
３．２ 疫苗制备中所应用的佐剂，可改变和提高机
体对抗原的特异性免疫应答，发挥辅助作用的一类
物质。传统兽用疫苗的佐剂多为弗氏佐剂，随着乳
化技术的进步，油佐剂中所应用的油成分逐渐降低
（不高于５ ），降低了佐剂的毒副作用０ ，如ＭＯＮ—
ＴＡＮＩＤＥＭ ＩＳＡ ２０６ ＶＧ佐剂，是一种基于矿物油设
计的油佐剂，用于制备可注射的水包油包水型乳化
疫苗，该佐剂可一步乳化制备成ｗ／ｏ／ｗ的双相疫
苗。本实验用２０６ ＶＧ佐剂一步乳化配制成ＰＰＶ
疫苗，经实验室检测，疫苗为ｗ／ｏ／ｗ剂型，与张超
范报道的一致“ 。本所研制的ＰＰＶ灭活疫苗于
１９９４年获得农业部颁发的新兽药证书，具有很好的
安全性和免疫效力，该疫苗的佐剂是白油加硬脂酸
铝和Ｓｐａｎ８０熬制而成的，疫苗的配制需二步乳化；
而２０６佐剂无需熬制，即开即用，且只需一步乳化即
能达到双相疫苗，但同时也存在预热的麻烦，在疫
苗配制前，抗原和佐剂都需预热至３０℃，因此工厂
化生产需根据自身情况而定。
参考文献
［１］殷震，刘景华．动物病毒学（第２版）［Ｍ３．北京：科学出版
社，１９９７．
（２３张婉华，邹勇，朱永军，等．猪细小病毒ＨＡ、ＨＩ微量法试
验的优化（Ｊ３．中国兽药杂志，２０１３，４７（２）：２１～２３．
（３３李娜，周伟芳，刘慧敏，等．疫苗佐剂的研究现状和发展趋
势［Ｊ３．中国预防兽医学报，２０１３，３５（１）：８１～８６．
（４３张超范，崔尚金，苗岚飞，等．猪细小病毒灭活疫苗安全性
试验及佐剂的筛选［Ｊ３．中国预防兽医学报，２００９，３１（６）：
４６２～４６５．