2024年5月9日发(作者：么访冬)
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１Ｏ２２ ・
国际检验医学杂志２０１１年７月第３２卷第１Ｏ期１ｎｔ Ｊ Ｉ＾ｂ Ｍｅｄ，Ｊｕｌｙ ２０１１，Ｖｏ１．３２，Ｎｏ．１０
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论 著・
酶免疫组化技术检测ＭＡＧＥ—Ａ３抗原在肺癌组织中的表达
向 波 ，陆倩雯 ，韩秀晶 ，林云恩 ，杨 羚 ，范婷婷 ，廖伟娇
（广州医学院第一附属医院：１．检验科；２．病理科５１０１２０）
摘要：目的检测黑色素瘤抗原Ａ３（ＭＡＧＥ—Ａ３）在原发性肺癌组织中的表达情况，并探讨其临床意义。方法应用间接酶
免疫组化技术检测ＭＡＧＥ－Ａ３抗原在４８例肺癌组织中的表达情况，并分析其与肺癌分型和淋巴结转移的关系。结果 ４８例肺
癌患者中有２９例（６０．４ ）为ＭＡＧＥ—Ａ３抗原表达阳性，ｌ９例（３９．６％）为ＭＡＧＥ－Ａ３抗原表达阴性；肺腺癌、肺鳞癌、肺腺鳞癌和
小细胞肺癌的阳性率分别为８０．０％、３１．３％、７５．０ 和３３．３ ；肺腺癌组的阳性率显著高于肺鳞癌组（ 一９．７４４，Ｐ（０．０５），淋巴
结转移组和非淋巴结转移组的阳性率差异无统计学意义（．）ｆ。一０．００１，Ｐ＞Ｏ．０５）。结论ＭＡＧＥ－Ａ３抗原在肺癌组织中有较高的
表达率，肺腺癌组ＭＡＧＥ—Ａ３的表达阳性率显著高于肺鳞癌组，肺癌淋巴结转移组和非淋巴结转移组的阳性率差异无统计学
意义。
关键词：黑色素瘤； 肺肿瘤； 免疫组织化学
Ｄ０Ｉ：１Ｏ．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３—４１３０．２Ｏ１１．１０．００２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７３—４１３０（２Ｏｌ１）１０—１０２２—０２
Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＭＡＧＥ－Ａ３ ｉｎ ｌｕｎｇ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｔｉｓｓｕｅｓ ｂｙ ｅｎｚｙｍｅ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄｓ
Ｘｉａｎｇ Ｂｏ ，Ｌ“Ｑｉａｎｗｅｎ ，Ｈａｎ Ｘｉｕｊｉｎｇ ，Ｌｉｎ Ｙｕｎ ｅｎ。，Ｙａｎｇ Ｌｉｎｇ ，Ｆａｎ Ｔｉｎｇｔｉｎｇ ，Ｌｉａｏ Ｗｅｉｊｉａｏ
（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，ｔｈｅ Ｆｉｒｓｔ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ
Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，５１０１２０，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＭＡＧＥ—Ａ３ ｉｎ ｐｒｉｍａｒｙ ｌｕｎｇ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｔｉｓｓｕｅｓ ａｎｄ ｅｘｐｌｏｒｅ ｉｔｓ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉ—
ｃａｎｃｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｉｎｄｉｒｅｃｔ ｅｎｚｙｍｅ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＭＡＧＥ—Ａ３ ｉｎ ４８ ｃａｓｅｓ ｏｆ
ｐｒｉｍａｒｙ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ｔｉｓｓｕｅｓ．Ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ＭＡＧＥ Ａ３ ａｎｄ ｔｈｅ ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌ ｔｙｐｅｓ ｏｆ ｐｒｉｍａｒｙ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅ
ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ａｍｏｎｇ ｔｈｅ ４８ ｃａｓｅｓ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ，２９（６０．４ ）ｃａｓｅｓ ｗｅｒｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｗｉｔｈ ＭＡＧＥ Ａ３ ａｎｄ １ ９
（３９．６ ）ｗｅｒｅ ｎｅｇａｔｉｖｅ．Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅｓ ｏｆ ＭＡＧＥ Ａ３ ｉｎ ｌｕｎｇ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ（ＬＡ），ｌｕｎｇ ｓｑｕａｍｏｕｓ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ（ＬＳｑＣａ），
ｌｕｎｇ ａｄｅｎｏｓｑｕａｍｏｕｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ（ＬＡＳＣａ）ａｎｄ ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ（ＳＣＩ Ｃ）ｗｅｒｅ ８０．０ ，３１．３ ，７５．０ ａｎｄ ３３．３ ．Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ
ｒａｔｅ ｏｆ ＭＡＧＥ—Ａ３ ｉｎ ＬＡ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ＬＳｑＣａ ｇｒｏｕｐ（Ｘ 一９．７４４，Ｐ＜Ｏ．０５），ｂｕｔ ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｏ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ
ｏｆ ｉｔ ｂｅｔｗｅｅｎ ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｎｏｎ－ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｇｒｏｕｐ（ 一０．００１，Ｐ＞０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓ
ｓｉｏｎ ｏｆ ＭＡＧＥ—Ａ３ ｗａｓ ｍｏｒｅ ｆｒｅｑｕｅｎｔ ｉｎ ｌｕｎｇ ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ，ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙ ｉｎ ＬＡ，ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｏｆ ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ＬＳｑＣａ，ｗｈｉｌｅ
ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＭＡＧＥ—Ａ３ ｗａｓ ｎｏｔ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｍｅｌａｎｏｍａ； １ｕｎｇ ｎｅｐｌａｓｍｓ； ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
肺癌是目前世界恶性肿瘤死亡率之首，其发病率和死亡率
呈上升趋势 ］。专家预计其上升趋势至少还要延续２Ｏ～３Ｏ
年，到２０２５年，中国每年死于肺癌的患者将接近１００万＿２ 。目
前肺癌的治疗手段以手术、化疗、放疗为主，这些方法的治疗效
一
步研究提供有价值的数据，现将相关情况报道如下。
４８例肺癌患者手术切除癌组织标本由本院
ｌ资料与方法
１．１一般资料
肺癌３例。
病理科提供，其中腺癌２５例，鳞癌１６例，腺鳞癌４例，小细胞
果并不能令人满意，特别是对于较晚期和已发生转移的病例。
随着现代肿瘤学、肿瘤免疫学理论的飞速发展，以肿瘤免疫治
疗为基础的生物治疗正日益受到大家的重视，以适宜的肿瘤特
异性抗原为靶点，对肿瘤患者进行免疫治疗的方法有着巨大的
潜力，值得深入研究、开发和利用。
１．２试剂 人ＭＡＧＥ—Ａ３的小鼠单克隆抗体（Ｍ０１，ｃｌｏｎｅ
６Ｄ１０）购自Ａｂｎｏｖａ亚诺法生技股份有限公司，Ｅｎｖｉｓｉｏｎ 两步
法免疫组化试剂盒为Ｄａｋｏ公司产品。
１．３方法
黑色素瘤抗原Ａ３（ＭＡＧＥ—Ａ３）为黑色素瘤抗原家族的一
员，它不仅表达于大部分的黑色素瘤，而且还以较大比例表达
１．３．１操作步骤 肺癌标本常规石蜡包埋，切片厚３／ａｍ，
６５℃烤片２ ｈ，常规脱蜡至水；抗原修复采用ＥＤＴＡ（ｐＨ８．０）
于多种组织类型的各种肿瘤，如原发性肝癌、结肠癌、肺癌等，
但在正常组织细胞（除睾丸和胎盘外）却不表达，为肿瘤特异性
的共同抗原，因而被认为是肿瘤特异性免疫治疗的理想免疫
微波修复；自然冷却后过蒸馏水，滴加３ 过氧化氢阻断内源
性过氧化物酶，室温孵育１０ ｍｉｎ，磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）冲洗，２
ｍｉｎｘ ３次；加入１：１００稀释的ＭＡＧＥ—Ａ３单克隆抗体至覆盖
标本，３７℃孵育１ ｈ，ＰＢＳ冲洗，５ ｍｉｎ×３次；加人ＨＲＰ标志的
二抗至覆盖标本，３７℃孵育２０ ｍｉｎ，ＰＢＳ冲洗，５ ｍｉｎ×３次；加
入ＤＡＢ在显微镜下控制显色，自来水充分冲洗，苏木素复染，
原［３－５］。本文旨在研究肺癌组织中ＭＡＧＥ—Ａ３抗原的表达情
况，为以ＭＡＧＥ—Ａ３抗原为靶点对肺癌患者进行特异性免疫
治疗提供理论依据，同时为肺癌的发生、发展、转移、预后等进
＊ 基金项目：广州医学院第一附属医院科研基金（ｙ２００９１０ｇｙｆｙ）；广州医学院青年基金资助项目（２０１０Ａ０８）。
通讯作者，Ｅ—ｍａｉｌ：ｌｉａｏｗｅｉｊｉａｏ＠１６３．ｃｏｍ。
国际检验医学杂志２０１１年７月第３２卷第１ｏ期Ｉｎｔ Ｊ ＬａｂＭｅｄ，Ｊｕｌｙ ２０１１，Ｖｏ１．３２，Ｎｏ．１０
脱水透明，封片后在显微镜下观察。
递呈到细胞表面，成为所谓“肿瘤排斥抗原”，并为ＣＴＬ识别，
１．３．２实验对照 恶性黑色素瘤标本如上操作为阳性对照。 诱导ＣＴＬ对肿瘤细胞特异性杀伤。因此，ＭＡＧＥ—Ａ３基因在
恶性黑色素瘤标本和正常肺组织标本，以ＰＢＳ代替一抗如上
肿瘤细胞的表达情况是影响肿瘤免疫治疗的重要因素¨６］。探
操作为空白对照。正常肺组织标本如上操作为阴性对照。另
讨中国肺癌人群ＭＡＧＥ—Ａ３表达情况具有更为重要意义，因
外，每张切片设ＨＥ常规染色。
为中国人群ＨＬＡ—Ｉ类分子中ＨＬＡ—Ａ２表达较高（５４ ），而
１．４结果判断根据阳性细胞在全部组织细胞中所占比例以
ＭＡＧＥ—Ａ３基因产物ＭＺ２一Ｄ上具有可被ＨＬＡ＿Ａ２分子识别
及阳性细胞染色强度判定实验结果。Ａ：按显色细胞数记分，
呈递的肽段ＦＬＷＧＰＲＡＬＶ，因此对于以ＭＡＧＥ－Ａ３抗原为靶
阳性细胞数小于或等于１／３为１分，阳性细胞数１／３～２／３为２
点对中国肺癌患者进行特异性免疫治疗的研究，具有更高的实
分，阳性细胞数大于或等于２／３为３分。Ｂ：按细胞显色深浅记
用价值和更为广阔的应用前景。
分，无阳性反应细胞为。分，浅黄色为１分，棕黄色为２分，棕
目前，有关ＭＡＧＥ－Ａ３抗原在肺癌组织中表达情况的研
褐色为３分。积分数为：Ａ×Ｂ，Ａ×Ｂ一０判断为（一），Ａ×Ｂ≥
究国内外均有报道，但多集中在ｍＲＮＡ水平，有关蛋白水平的
１判断为（＋），或者Ａ×Ｂ一１～２判断为（＋），Ａ×Ｂ一３～４判
表达报道相对较少且结果不大一致＿７］。而ｍＲＮＡ水平的基因
断为（＋＋），Ａ×Ｂ一６～９判断为（＋＋＋）。
阳性表达并不等于抗原蛋白的表达，只有抗原蛋白的表达才可
１．５统计学处理所获数据采用统计分析系统ＳＰＳＳ １７．ｏ软
诱导ＣＴＬ对该肿瘤细胞的特异性识别与杀伤，因此抗原蛋白
件进行处理，统计学分析采用 检验。
的表达与机体免疫应答的关系更直接、更密切。本次实验研究
２结 果
采用免疫组化（ＩＨＣ）技术，是１种更形象、直观的技术，能将抗
２．１ ＭＡＧＥ—Ａ３抗原在肺癌组织中的总阳性率恶性黑色素
原的定位等体现出来，准确地反映抗原本质；而且ＩＨＣ技术在
瘤阳性对照细胞质可见明显染色，结果（＋＋）～（＋＋＋），空
实验影响因素、实验条件的控制、操作的简易程度方面具有优
白对照和阴性对照无明显染色，结果（一）；４８例肺癌组织标本
越性，是研究本抗原表达及应用较合适的方法。
中有２９例可见细胞质染色（＋）～（＋＋），总阳性率６Ｏ．４
本次实验的结果显示，肺癌ＭＡＧＥ—Ａ３抗原的阳性表达
（２９／４８）。
率为６Ｏ．４ （２９／４８），提示将ＭＡＧＥ—Ａ３作为肺癌免疫靶向治
２．２ ＭＡＧＥ—Ａ３抗原在各型肺癌组织中表达情况 见表１。
疗靶抗原具有可行性。对于ＭＡＧＥ—Ａ３抗原阳性的肺癌患
采用ＳＰＳＳ １７．０统计软件对肺腺癌和肺鳞癌的表达阳性率进
者，可直接进行ＭＡＧＢＡ３的特异性免疫治疗。而对于
行统计分析显示，肺腺癌组的ＭＡＧＥ Ａ３的表达阳性率高于
ＭＡＧＥ—Ａ３阴性的患者，是否可通过诱导表达或接种等途径而
肺鳞癌组（Ｙ 一９．７４４，Ｐ＜Ｏ．０５）。
促使其表达，从而作为免疫治疗靶点，有待进一步的研究。目
２．３肺癌ＭＡＧＥ—Ａ３抗原表达与淋巴结转移的关系 ４８例
前，将ＭＡＧＥ抗原肽直接接种到肿瘤患者体内的研究在国外
肺癌病例中２３例为淋巴结转移，其余２５例仅浸润胸膜或未见
已经展开，并且在黑色素瘤、非小细胞肺癌、头颈部鳞癌等肿瘤
转移（设为非淋巴结转移组），肺癌的淋巴结转移与ＭＡＧＥ－Ａ３
患者中已进行了临床实验，为ＭＡＧＥ抗原肽更为广泛而有效
表达之间的关系见表２。采用ＳＰＳＳ １７．０统计软件进行统计
地运用于肿瘤的治疗提供了依据＿８］。而联合ＭＡＧＥ－Ａ３瘤苗
分析：肺癌淋巴结转移组和非淋巴结转移组的阳性率差异无统
治疗和手术切除的Ｉ ｂ和Ⅱ期ＮＳＣＬＣ患者的多国联合实验已
计学意义（ｘ。一Ｏ．００１，Ｐ＞０．０５）。
经开始进行 。
表１ 各型肺癌组织中ＭＡＧＥ—Ａ３的表达情况
本次实验中，肺癌ＭＡＧＥ—Ａ３抗原表达的阳性率高于刘
庆伦等 的报道结果，而且本次实验中肺鳞癌组的阳性表达
率低于腺癌组，与李秋泽等＿］１］采用ＲＴ—ＰＣＲ方法测得的
ＭＡＧＥ—Ａ３在肺鳞癌中表达较高的结果不一致，原因可能有以
下几点：（１）影响抗原表达的因素有很多，所测定的标本处于不
同的癌症进展阶段，从而使ＭＡＧＥ—Ａ３的表达有差异。国外
有研究表明，不同阶段的非小细胞肺癌患者ＭＡＧＥ—Ａ３表达
水平有明显不同，揭示肿瘤的进展与ＭＡＧＥ—Ａ３抗原的表达
有关［１ ２＿；另外，不同人种表达不同的ＨＬＡ分子类型也会导致
ＭＡＧＥ Ａ３表达的不同。（２）本次实验采用的研究方法是间接
表２ 肺癌的淋巴结转移情况与ＭＡＧＥ—Ａ３表达的关系
酶免疫组化法，实验的影响因素也可能导致一定的假阳性或假
阴性，如切片的显色不好会影响到结果判断。（３）样本的抽样
误差引起。
多项研究发现，在ＭＡＧＥ—Ａ３抗原阳性的肺癌患者中，术
后长期存活率明显高于ＭＡＧＥ Ａ３抗原阴性患者，而肿瘤转
移率则明显低于阴性患者。本实验对４８例肺癌的转移情况也
进行了统计分析，结果发现肺癌淋巴结转移组和非淋巴结转移
３讨 论
组的阳性率差异无统计学意义。探讨ＭＡＧＥ—Ａ３表达与肺癌
肿瘤免疫学指出，肿瘤抗原的天然蛋白及其细胞毒性Ｔ
转移的相关性，有待于进一步大样本量的研究。
淋巴细胞（ＣＴＬ）表位能诱导特异性ＣＴＬ的产生，从而使部分
患者的肿瘤缩小或完全消退。ＭＡＧＥ—Ａ３基因编码的九肽：苯
参考文献
丙氨酸一亮氨酸一色氨酸一甘氨酸一脯氨酸一精氨酸一丙氨酸一亮氨
Ｅ１３程梅莲，刘峰，李小琴．血清内皮抑素水平在肺癌早期诊断中应用
酸一缬氨酸（ＦＬＷＧＰＲＡＬＶ），可与ＨＬＡ＿Ｉ类分子形成复合物，
研究［Ｊ］．国际检验医学杂志，２００９，３０（１）：３９—４０．（下转第１０２６页）
国际检验医学杂志２０１１年７月第３２卷第１ｏ期Ｉｎｔ Ｊ Ｌａｂ Ｍｅｄ，Ｊｕｌｙ ２０１１，Ｖｏ１．３２，Ｎｏ．１０
组（ＣＩＮ １Ｉ～ｃＩＮ １１Ｉ）以高危型ＨＰＶ１６、５２、５８、１８、５６和６８最
为常见；５５例官颈癌检出１Ｏ种高危亚型ＨＰＶ，他们分别是
ＨＰＶ１６、３３、１８、５８、５６、５２、５９、３５、５３和６６。虽然不同病变级别
ｒｉｓｋ ｔｙｐｅｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｒｉｓｋ ｆａｃｔｏｒｓ ｆｏｒ ＨＰＶ
ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｉｎ Ｇｅｒｍａｎｙ ｗｉｔｈｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ａｇｅ ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ ｗｏｍｅｎ ｕｐ ｔｏ
３０ ｙｅａｒｓ ｏｆ ａｇｅ：ａｎ ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｉｅａｌ ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎａｌ ｓｔｕｄｙ￣Ｊｊ．Ｊ Ｍｅｄ
Ｖｉｒｏｌ，２０１０，８２（１１）：１９２８—１９３９．
间感染型别存在差异，但高危型ＨＰＶ１６、５８、１８、５２、３３在不同
病变级别组均占有一定优势，提示上述型别具有较高致病性，
尤其是感染率最高的ＨＰＶ１６亚型，随宫颈病变级别的增高其
感染率明显上升，在宫颈炎和低度病变组分别为３．８２ 和
４．６Ｏ ，而在高度病变组和宫颈癌组的感染率高达２８．２１ 和
５６．３６ ，组问差异有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０１），说明ＨＰＶ１６致
癌性更强。由此可见，ＨＰＶ基因型与宫颈癌病变程度明显相
关，特别是高危型ＨＰＶ１６、５８、１８、５２、３３的持续性感染是导致
宫颈癌发生的最主要原因之一ｌ９］。
［２］虞善之，马刚．宫颈上皮内瘤变的临床研究进展［Ｊ］．右江医学，
２００９，３８（４）：４８９—４９１．
［３］黄庆，府伟灵，周玉，等．基因芯片对人乳头瘤病毒的快速检测和
分型［Ｊ］．中华医院感染学杂志，２００５，１５（４）：４７６—４７８．
［４］陈贤琼，宋一一，孙蓬明，等．全酿酒酵母ＨＰＶ１ ６一Ｅ７疫苗的构建
及免疫原性研究［Ｊ］．中国妇产科临床杂志，２００９，１０（２）：１２３ １ ２６．
Ｅｓ］姜晓曼，黄民主，张志魁，等．ＨＰＶ Ｌ１壳蛋白在宫颈病变中的表
达及与ＨＲ—ＨＰＶ ＤＮＡ的关系［Ｊ］．国际检验医学杂志，２０１ｏ，３ｌ
（６）：５５４ ５５６．
目前，ＨＰＶ多重感染与宫颈病变关系的研究较少。据报
Ｅ６］Ｔｏｒｒｅｓ ＬＡ，Ｒｏｊｏ ＨＧ，Ｔｏｒｒｅｓ ＲＡ，ｅｔ ａ１．Ｃｅｒｖｉｃａｌ ｃａｎｃｅｒ：ｃｕｒｒｅｎｔ
ｖｉｅｗ ｏｆ ｉｔｓ ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｒｉｓｋ ｆａｃｔｏｒｓ［Ｊ］．Ｇｉｎｅｃｏｌ Ｏｂｓｔｅｔ Ｍｅｘ，
２００４，７２：４６６－４７４．
道，ＨＰＶ在宫颈鳞癌组织中的检出率为９９ ，在宫颈鳞状上
皮中为９４ 。ＨＰＶ多重感染与宫颈病变呈正相关，随着宫颈
病变级别增加，多重感染呈上升趋势，但宫颈癌除外Ｉ１ 。多重
感染表明，机体免疫清除机制清除病毒不利，预示病情进展。
亦有研究显示，随宫颈病变级别增加，多重感染率趋于下降，且
宫颈鳞癌ＨＰＶ感染趋于单一高危型 １ 。ＨＰＶ感染有四重、
五重，甚至七重感染报道，在相关的研究中，从正常组织到ＣＩＮ
Ⅱ的不同病变中，多型别感染比例随病变级别上升逐渐增加，
由宫颈炎的７．３ 升高到ＣＩＮ １１Ｉ的１４．３ ，在ＣＩＮ １Ｉ及宫颈
［７］Ｈｏ ＧＹ，Ｂｉｅｒｍａｎ Ｒ，Ｂｅａｒｄｓｌｅｙ Ｉ ，ｅｔ ａ１．Ｎａｔｕｒａｌ ｈｉｓｔｏｒｙ ｏｆ ｃｅｒｖｉｃｏ
ｖａｇｉｎａｌ ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ｙｏｎｇ ｗｏｍｅｎ［Ｊ］．Ｎ Ｅｎｇ Ｊ Ｍｅｄ，
１９９８，３３８（７）：４２３－４２８．
［８］黄进波，叶珊．基因芯片检测人乳头瘤病毒２３种亚型的应用评价
［Ｊ］．中国皮肤性病学杂志，２００７，２１（２）：７８—８１．
［９］孙蓬明，陈贤璩，林超琴，等．应用导流杂交基因芯片技术检测人
乳头状瘤病毒亚型的临床意义口］．海峡预防医学杂志，２０１０，１６
（１）：４—７．
癌中比例有所下降，而仍高于宫颈炎组的比例。虽差异无统计
学意义，但在一定程度上说明多型别感染对宫颈病变以及宫颈
癌的发展起促进作用，有待进一步研究。本研究同时发现，
［１０］陶萍萍，卞美璐，李敏，等．ＨＰＶ多重感染与宫颈病变关系探讨
［Ｊ］．妇产科ｌ临床杂志，２００６，７（２）：９４—９６．
［１１］Ｃｈａｎｇ ＤＹ，Ｃｈｅｎ ＲＪ，Ｌｅｅ ＳＣ，ｅｔ ａ１．Ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ ｏｆ ｓｉｎｇｌｅ ａｎｄ ｎｍｈｉ—
ｐｌｅ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｈｕｍａｎ ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓｅｓ ｉｎ ｖａｒｉｏｕｓ ｇｒａｄｅｓ ｏｆ
ＨＰＶ多重感染有年龄集中趋势，小于４Ｏ岁者ＨＰＶ多重感染
率较高（Ｐ＜Ｏ．０５），可能与性生活频率、性伴侣数量多有关。
ｃｅｒｖｉｃａｌ ｎｅｏｐｌａｓｉａ［Ｊ］．Ｊ Ｍｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，１９９７，４６（１）：５４—６０．
［１２］庞伟鸿，刘红杏，宁学玲，等．基因芯片检测技术在女性生殖道
ＨＰＶ分型感染中的应用［Ｊ］．国际检验医学杂志，２００９，３０（７）：
６３０—６３１。６３４．
本研究利用ＤＮＡ杂交技术这一高通量基因检测技术，仅
需１次扩增，即可同时检测２３种高、低危型ＨＰＶ ＤＮＡ。该方
法具有高通量、高灵敏度、特异性好、可监测多重感染等优点，
可用于宫颈癌等疾病的早期预警和诊断，适用于大规模临床筛
查及推广应用＿１ 。
参考文献
［１］Ｉｆｔｎｅｒ Ｔ，Ｅｂｅｒｌｅ Ｓ，Ｉｆｔｎｅｒ Ａ，ｅｔ ａ１．Ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ ｏｆ ｌｏｗ—ｒｉｓｋ ａｎｄ ｈｉｇｈ—
（收稿日期：２Ｏｌ１－０１—２０）
（上接第１０２３页）
［２］潘虹，黄庆，府伟灵．ＥＧＦＲ信号通路基因突变与非小细胞肺癌的
靶向性治疗［Ｊ］．国际检验医学杂志，２００９，３０（９）：８６９—８７１．
［３］Ｌｕｏ Ｇ，Ｈｕａｎｇ Ｓ，Ｘｉｅ Ｘ，ｅｔ ａ１．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ－ｔｅｓｔｉｓ ｇｅｎｅｓ ｉｎ
ｓｐｏｎｓｅｓ ｉｎ ｍｅｌａｎｏｍａ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ［Ｊ］．Ｃｒｉｔ
Ｒｅｖ Ｏｎｃｏｌ Ｈｅｍａｔｏｌ，２００２，４３（１）：１－ｌ１．
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ｈｕｍａｎ ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎ，２００２，２：１ １．
［４］Ｌｉ Ｍ，Ｙｕａｎ ＹＨ，Ｈａｎ Ｙ，ｅｔ ａ１．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐｒｏｆｉｌｅ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ—ｔｅｓｔｉｓ
ｇｅｎｅｓ ｉｎ １２１ ｈｕｍａｎ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ ｔｉｓｓｕｅ ａｎｄ ａｄｊａｃｅｎｔ ｎｏｒｍａｌ
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ｇｅｎ（ＭＡＣＥ）一Ａ３ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｓｔａｇｅｓ Ｔ ａｎｄ ＩＩ ｎｏｎ—ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ
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Ｓｕｒｇ，２００４，２５（１）：１３１—１３４．
（收稿日期：２ｏ１１—０３—０５）
2024年5月9日发(作者：么访冬)
・
１Ｏ２２ ・
国际检验医学杂志２０１１年７月第３２卷第１Ｏ期１ｎｔ Ｊ Ｉ＾ｂ Ｍｅｄ，Ｊｕｌｙ ２０１１，Ｖｏ１．３２，Ｎｏ．１０
・
论 著・
酶免疫组化技术检测ＭＡＧＥ—Ａ３抗原在肺癌组织中的表达
向 波 ，陆倩雯 ，韩秀晶 ，林云恩 ，杨 羚 ，范婷婷 ，廖伟娇
（广州医学院第一附属医院：１．检验科；２．病理科５１０１２０）
摘要：目的检测黑色素瘤抗原Ａ３（ＭＡＧＥ—Ａ３）在原发性肺癌组织中的表达情况，并探讨其临床意义。方法应用间接酶
免疫组化技术检测ＭＡＧＥ－Ａ３抗原在４８例肺癌组织中的表达情况，并分析其与肺癌分型和淋巴结转移的关系。结果 ４８例肺
癌患者中有２９例（６０．４ ）为ＭＡＧＥ—Ａ３抗原表达阳性，ｌ９例（３９．６％）为ＭＡＧＥ－Ａ３抗原表达阴性；肺腺癌、肺鳞癌、肺腺鳞癌和
小细胞肺癌的阳性率分别为８０．０％、３１．３％、７５．０ 和３３．３ ；肺腺癌组的阳性率显著高于肺鳞癌组（ 一９．７４４，Ｐ（０．０５），淋巴
结转移组和非淋巴结转移组的阳性率差异无统计学意义（．）ｆ。一０．００１，Ｐ＞Ｏ．０５）。结论ＭＡＧＥ－Ａ３抗原在肺癌组织中有较高的
表达率，肺腺癌组ＭＡＧＥ—Ａ３的表达阳性率显著高于肺鳞癌组，肺癌淋巴结转移组和非淋巴结转移组的阳性率差异无统计学
意义。
关键词：黑色素瘤； 肺肿瘤； 免疫组织化学
Ｄ０Ｉ：１Ｏ．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３—４１３０．２Ｏ１１．１０．００２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７３—４１３０（２Ｏｌ１）１０—１０２２—０２
Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＭＡＧＥ－Ａ３ ｉｎ ｌｕｎｇ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｔｉｓｓｕｅｓ ｂｙ ｅｎｚｙｍｅ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄｓ
Ｘｉａｎｇ Ｂｏ ，Ｌ“Ｑｉａｎｗｅｎ ，Ｈａｎ Ｘｉｕｊｉｎｇ ，Ｌｉｎ Ｙｕｎ ｅｎ。，Ｙａｎｇ Ｌｉｎｇ ，Ｆａｎ Ｔｉｎｇｔｉｎｇ ，Ｌｉａｏ Ｗｅｉｊｉａｏ
（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，ｔｈｅ Ｆｉｒｓｔ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ
Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，５１０１２０，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＭＡＧＥ—Ａ３ ｉｎ ｐｒｉｍａｒｙ ｌｕｎｇ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｔｉｓｓｕｅｓ ａｎｄ ｅｘｐｌｏｒｅ ｉｔｓ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉ—
ｃａｎｃｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｉｎｄｉｒｅｃｔ ｅｎｚｙｍｅ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＭＡＧＥ—Ａ３ ｉｎ ４８ ｃａｓｅｓ ｏｆ
ｐｒｉｍａｒｙ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ｔｉｓｓｕｅｓ．Ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ＭＡＧＥ Ａ３ ａｎｄ ｔｈｅ ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌ ｔｙｐｅｓ ｏｆ ｐｒｉｍａｒｙ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅ
ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ａｍｏｎｇ ｔｈｅ ４８ ｃａｓｅｓ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ，２９（６０．４ ）ｃａｓｅｓ ｗｅｒｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｗｉｔｈ ＭＡＧＥ Ａ３ ａｎｄ １ ９
（３９．６ ）ｗｅｒｅ ｎｅｇａｔｉｖｅ．Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅｓ ｏｆ ＭＡＧＥ Ａ３ ｉｎ ｌｕｎｇ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ（ＬＡ），ｌｕｎｇ ｓｑｕａｍｏｕｓ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ（ＬＳｑＣａ），
ｌｕｎｇ ａｄｅｎｏｓｑｕａｍｏｕｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ（ＬＡＳＣａ）ａｎｄ ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ（ＳＣＩ Ｃ）ｗｅｒｅ ８０．０ ，３１．３ ，７５．０ ａｎｄ ３３．３ ．Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ
ｒａｔｅ ｏｆ ＭＡＧＥ—Ａ３ ｉｎ ＬＡ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ＬＳｑＣａ ｇｒｏｕｐ（Ｘ 一９．７４４，Ｐ＜Ｏ．０５），ｂｕｔ ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｏ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ
ｏｆ ｉｔ ｂｅｔｗｅｅｎ ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｎｏｎ－ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｇｒｏｕｐ（ 一０．００１，Ｐ＞０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓ
ｓｉｏｎ ｏｆ ＭＡＧＥ—Ａ３ ｗａｓ ｍｏｒｅ ｆｒｅｑｕｅｎｔ ｉｎ ｌｕｎｇ ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ，ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙ ｉｎ ＬＡ，ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｏｆ ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ＬＳｑＣａ，ｗｈｉｌｅ
ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＭＡＧＥ—Ａ３ ｗａｓ ｎｏｔ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｍｅｌａｎｏｍａ； １ｕｎｇ ｎｅｐｌａｓｍｓ； ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
肺癌是目前世界恶性肿瘤死亡率之首，其发病率和死亡率
呈上升趋势 ］。专家预计其上升趋势至少还要延续２Ｏ～３Ｏ
年，到２０２５年，中国每年死于肺癌的患者将接近１００万＿２ 。目
前肺癌的治疗手段以手术、化疗、放疗为主，这些方法的治疗效
一
步研究提供有价值的数据，现将相关情况报道如下。
４８例肺癌患者手术切除癌组织标本由本院
ｌ资料与方法
１．１一般资料
肺癌３例。
病理科提供，其中腺癌２５例，鳞癌１６例，腺鳞癌４例，小细胞
果并不能令人满意，特别是对于较晚期和已发生转移的病例。
随着现代肿瘤学、肿瘤免疫学理论的飞速发展，以肿瘤免疫治
疗为基础的生物治疗正日益受到大家的重视，以适宜的肿瘤特
异性抗原为靶点，对肿瘤患者进行免疫治疗的方法有着巨大的
潜力，值得深入研究、开发和利用。
１．２试剂 人ＭＡＧＥ—Ａ３的小鼠单克隆抗体（Ｍ０１，ｃｌｏｎｅ
６Ｄ１０）购自Ａｂｎｏｖａ亚诺法生技股份有限公司，Ｅｎｖｉｓｉｏｎ 两步
法免疫组化试剂盒为Ｄａｋｏ公司产品。
１．３方法
黑色素瘤抗原Ａ３（ＭＡＧＥ—Ａ３）为黑色素瘤抗原家族的一
员，它不仅表达于大部分的黑色素瘤，而且还以较大比例表达
１．３．１操作步骤 肺癌标本常规石蜡包埋，切片厚３／ａｍ，
６５℃烤片２ ｈ，常规脱蜡至水；抗原修复采用ＥＤＴＡ（ｐＨ８．０）
于多种组织类型的各种肿瘤，如原发性肝癌、结肠癌、肺癌等，
但在正常组织细胞（除睾丸和胎盘外）却不表达，为肿瘤特异性
的共同抗原，因而被认为是肿瘤特异性免疫治疗的理想免疫
微波修复；自然冷却后过蒸馏水，滴加３ 过氧化氢阻断内源
性过氧化物酶，室温孵育１０ ｍｉｎ，磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）冲洗，２
ｍｉｎｘ ３次；加入１：１００稀释的ＭＡＧＥ—Ａ３单克隆抗体至覆盖
标本，３７℃孵育１ ｈ，ＰＢＳ冲洗，５ ｍｉｎ×３次；加人ＨＲＰ标志的
二抗至覆盖标本，３７℃孵育２０ ｍｉｎ，ＰＢＳ冲洗，５ ｍｉｎ×３次；加
入ＤＡＢ在显微镜下控制显色，自来水充分冲洗，苏木素复染，
原［３－５］。本文旨在研究肺癌组织中ＭＡＧＥ—Ａ３抗原的表达情
况，为以ＭＡＧＥ—Ａ３抗原为靶点对肺癌患者进行特异性免疫
治疗提供理论依据，同时为肺癌的发生、发展、转移、预后等进
＊ 基金项目：广州医学院第一附属医院科研基金（ｙ２００９１０ｇｙｆｙ）；广州医学院青年基金资助项目（２０１０Ａ０８）。
通讯作者，Ｅ—ｍａｉｌ：ｌｉａｏｗｅｉｊｉａｏ＠１６３．ｃｏｍ。
国际检验医学杂志２０１１年７月第３２卷第１ｏ期Ｉｎｔ Ｊ ＬａｂＭｅｄ，Ｊｕｌｙ ２０１１，Ｖｏ１．３２，Ｎｏ．１０
脱水透明，封片后在显微镜下观察。
递呈到细胞表面，成为所谓“肿瘤排斥抗原”，并为ＣＴＬ识别，
１．３．２实验对照 恶性黑色素瘤标本如上操作为阳性对照。 诱导ＣＴＬ对肿瘤细胞特异性杀伤。因此，ＭＡＧＥ—Ａ３基因在
恶性黑色素瘤标本和正常肺组织标本，以ＰＢＳ代替一抗如上
肿瘤细胞的表达情况是影响肿瘤免疫治疗的重要因素¨６］。探
操作为空白对照。正常肺组织标本如上操作为阴性对照。另
讨中国肺癌人群ＭＡＧＥ—Ａ３表达情况具有更为重要意义，因
外，每张切片设ＨＥ常规染色。
为中国人群ＨＬＡ—Ｉ类分子中ＨＬＡ—Ａ２表达较高（５４ ），而
１．４结果判断根据阳性细胞在全部组织细胞中所占比例以
ＭＡＧＥ—Ａ３基因产物ＭＺ２一Ｄ上具有可被ＨＬＡ＿Ａ２分子识别
及阳性细胞染色强度判定实验结果。Ａ：按显色细胞数记分，
呈递的肽段ＦＬＷＧＰＲＡＬＶ，因此对于以ＭＡＧＥ－Ａ３抗原为靶
阳性细胞数小于或等于１／３为１分，阳性细胞数１／３～２／３为２
点对中国肺癌患者进行特异性免疫治疗的研究，具有更高的实
分，阳性细胞数大于或等于２／３为３分。Ｂ：按细胞显色深浅记
用价值和更为广阔的应用前景。
分，无阳性反应细胞为。分，浅黄色为１分，棕黄色为２分，棕
目前，有关ＭＡＧＥ－Ａ３抗原在肺癌组织中表达情况的研
褐色为３分。积分数为：Ａ×Ｂ，Ａ×Ｂ一０判断为（一），Ａ×Ｂ≥
究国内外均有报道，但多集中在ｍＲＮＡ水平，有关蛋白水平的
１判断为（＋），或者Ａ×Ｂ一１～２判断为（＋），Ａ×Ｂ一３～４判
表达报道相对较少且结果不大一致＿７］。而ｍＲＮＡ水平的基因
断为（＋＋），Ａ×Ｂ一６～９判断为（＋＋＋）。
阳性表达并不等于抗原蛋白的表达，只有抗原蛋白的表达才可
１．５统计学处理所获数据采用统计分析系统ＳＰＳＳ １７．ｏ软
诱导ＣＴＬ对该肿瘤细胞的特异性识别与杀伤，因此抗原蛋白
件进行处理，统计学分析采用 检验。
的表达与机体免疫应答的关系更直接、更密切。本次实验研究
２结 果
采用免疫组化（ＩＨＣ）技术，是１种更形象、直观的技术，能将抗
２．１ ＭＡＧＥ—Ａ３抗原在肺癌组织中的总阳性率恶性黑色素
原的定位等体现出来，准确地反映抗原本质；而且ＩＨＣ技术在
瘤阳性对照细胞质可见明显染色，结果（＋＋）～（＋＋＋），空
实验影响因素、实验条件的控制、操作的简易程度方面具有优
白对照和阴性对照无明显染色，结果（一）；４８例肺癌组织标本
越性，是研究本抗原表达及应用较合适的方法。
中有２９例可见细胞质染色（＋）～（＋＋），总阳性率６Ｏ．４
本次实验的结果显示，肺癌ＭＡＧＥ—Ａ３抗原的阳性表达
（２９／４８）。
率为６Ｏ．４ （２９／４８），提示将ＭＡＧＥ—Ａ３作为肺癌免疫靶向治
２．２ ＭＡＧＥ—Ａ３抗原在各型肺癌组织中表达情况 见表１。
疗靶抗原具有可行性。对于ＭＡＧＥ—Ａ３抗原阳性的肺癌患
采用ＳＰＳＳ １７．０统计软件对肺腺癌和肺鳞癌的表达阳性率进
者，可直接进行ＭＡＧＢＡ３的特异性免疫治疗。而对于
行统计分析显示，肺腺癌组的ＭＡＧＥ Ａ３的表达阳性率高于
ＭＡＧＥ—Ａ３阴性的患者，是否可通过诱导表达或接种等途径而
肺鳞癌组（Ｙ 一９．７４４，Ｐ＜Ｏ．０５）。
促使其表达，从而作为免疫治疗靶点，有待进一步的研究。目
２．３肺癌ＭＡＧＥ—Ａ３抗原表达与淋巴结转移的关系 ４８例
前，将ＭＡＧＥ抗原肽直接接种到肿瘤患者体内的研究在国外
肺癌病例中２３例为淋巴结转移，其余２５例仅浸润胸膜或未见
已经展开，并且在黑色素瘤、非小细胞肺癌、头颈部鳞癌等肿瘤
转移（设为非淋巴结转移组），肺癌的淋巴结转移与ＭＡＧＥ－Ａ３
患者中已进行了临床实验，为ＭＡＧＥ抗原肽更为广泛而有效
表达之间的关系见表２。采用ＳＰＳＳ １７．０统计软件进行统计
地运用于肿瘤的治疗提供了依据＿８］。而联合ＭＡＧＥ－Ａ３瘤苗
分析：肺癌淋巴结转移组和非淋巴结转移组的阳性率差异无统
治疗和手术切除的Ｉ ｂ和Ⅱ期ＮＳＣＬＣ患者的多国联合实验已
计学意义（ｘ。一Ｏ．００１，Ｐ＞０．０５）。
经开始进行 。
表１ 各型肺癌组织中ＭＡＧＥ—Ａ３的表达情况
本次实验中，肺癌ＭＡＧＥ—Ａ３抗原表达的阳性率高于刘
庆伦等 的报道结果，而且本次实验中肺鳞癌组的阳性表达
率低于腺癌组，与李秋泽等＿］１］采用ＲＴ—ＰＣＲ方法测得的
ＭＡＧＥ—Ａ３在肺鳞癌中表达较高的结果不一致，原因可能有以
下几点：（１）影响抗原表达的因素有很多，所测定的标本处于不
同的癌症进展阶段，从而使ＭＡＧＥ—Ａ３的表达有差异。国外
有研究表明，不同阶段的非小细胞肺癌患者ＭＡＧＥ—Ａ３表达
水平有明显不同，揭示肿瘤的进展与ＭＡＧＥ—Ａ３抗原的表达
有关［１ ２＿；另外，不同人种表达不同的ＨＬＡ分子类型也会导致
ＭＡＧＥ Ａ３表达的不同。（２）本次实验采用的研究方法是间接
表２ 肺癌的淋巴结转移情况与ＭＡＧＥ—Ａ３表达的关系
酶免疫组化法，实验的影响因素也可能导致一定的假阳性或假
阴性，如切片的显色不好会影响到结果判断。（３）样本的抽样
误差引起。
多项研究发现，在ＭＡＧＥ—Ａ３抗原阳性的肺癌患者中，术
后长期存活率明显高于ＭＡＧＥ Ａ３抗原阴性患者，而肿瘤转
移率则明显低于阴性患者。本实验对４８例肺癌的转移情况也
进行了统计分析，结果发现肺癌淋巴结转移组和非淋巴结转移
３讨 论
组的阳性率差异无统计学意义。探讨ＭＡＧＥ—Ａ３表达与肺癌
肿瘤免疫学指出，肿瘤抗原的天然蛋白及其细胞毒性Ｔ
转移的相关性，有待于进一步大样本量的研究。
淋巴细胞（ＣＴＬ）表位能诱导特异性ＣＴＬ的产生，从而使部分
患者的肿瘤缩小或完全消退。ＭＡＧＥ—Ａ３基因编码的九肽：苯
参考文献
丙氨酸一亮氨酸一色氨酸一甘氨酸一脯氨酸一精氨酸一丙氨酸一亮氨
Ｅ１３程梅莲，刘峰，李小琴．血清内皮抑素水平在肺癌早期诊断中应用
酸一缬氨酸（ＦＬＷＧＰＲＡＬＶ），可与ＨＬＡ＿Ｉ类分子形成复合物，
研究［Ｊ］．国际检验医学杂志，２００９，３０（１）：３９—４０．（下转第１０２６页）
国际检验医学杂志２０１１年７月第３２卷第１ｏ期Ｉｎｔ Ｊ Ｌａｂ Ｍｅｄ，Ｊｕｌｙ ２０１１，Ｖｏ１．３２，Ｎｏ．１０
组（ＣＩＮ １Ｉ～ｃＩＮ １１Ｉ）以高危型ＨＰＶ１６、５２、５８、１８、５６和６８最
为常见；５５例官颈癌检出１Ｏ种高危亚型ＨＰＶ，他们分别是
ＨＰＶ１６、３３、１８、５８、５６、５２、５９、３５、５３和６６。虽然不同病变级别
ｒｉｓｋ ｔｙｐｅｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｒｉｓｋ ｆａｃｔｏｒｓ ｆｏｒ ＨＰＶ
ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｉｎ Ｇｅｒｍａｎｙ ｗｉｔｈｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ａｇｅ ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ ｗｏｍｅｎ ｕｐ ｔｏ
３０ ｙｅａｒｓ ｏｆ ａｇｅ：ａｎ ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｉｅａｌ ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎａｌ ｓｔｕｄｙ￣Ｊｊ．Ｊ Ｍｅｄ
Ｖｉｒｏｌ，２０１０，８２（１１）：１９２８—１９３９．
间感染型别存在差异，但高危型ＨＰＶ１６、５８、１８、５２、３３在不同
病变级别组均占有一定优势，提示上述型别具有较高致病性，
尤其是感染率最高的ＨＰＶ１６亚型，随宫颈病变级别的增高其
感染率明显上升，在宫颈炎和低度病变组分别为３．８２ 和
４．６Ｏ ，而在高度病变组和宫颈癌组的感染率高达２８．２１ 和
５６．３６ ，组问差异有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０１），说明ＨＰＶ１６致
癌性更强。由此可见，ＨＰＶ基因型与宫颈癌病变程度明显相
关，特别是高危型ＨＰＶ１６、５８、１８、５２、３３的持续性感染是导致
宫颈癌发生的最主要原因之一ｌ９］。
［２］虞善之，马刚．宫颈上皮内瘤变的临床研究进展［Ｊ］．右江医学，
２００９，３８（４）：４８９—４９１．
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分型［Ｊ］．中华医院感染学杂志，２００５，１５（４）：４７６—４７８．
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目前，ＨＰＶ多重感染与宫颈病变关系的研究较少。据报
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ｖｉｅｗ ｏｆ ｉｔｓ ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｒｉｓｋ ｆａｃｔｏｒｓ［Ｊ］．Ｇｉｎｅｃｏｌ Ｏｂｓｔｅｔ Ｍｅｘ，
２００４，７２：４６６－４７４．
道，ＨＰＶ在宫颈鳞癌组织中的检出率为９９ ，在宫颈鳞状上
皮中为９４ 。ＨＰＶ多重感染与宫颈病变呈正相关，随着宫颈
病变级别增加，多重感染呈上升趋势，但宫颈癌除外Ｉ１ 。多重
感染表明，机体免疫清除机制清除病毒不利，预示病情进展。
亦有研究显示，随宫颈病变级别增加，多重感染率趋于下降，且
宫颈鳞癌ＨＰＶ感染趋于单一高危型 １ 。ＨＰＶ感染有四重、
五重，甚至七重感染报道，在相关的研究中，从正常组织到ＣＩＮ
Ⅱ的不同病变中，多型别感染比例随病变级别上升逐渐增加，
由宫颈炎的７．３ 升高到ＣＩＮ １１Ｉ的１４．３ ，在ＣＩＮ １Ｉ及宫颈
［７］Ｈｏ ＧＹ，Ｂｉｅｒｍａｎ Ｒ，Ｂｅａｒｄｓｌｅｙ Ｉ ，ｅｔ ａ１．Ｎａｔｕｒａｌ ｈｉｓｔｏｒｙ ｏｆ ｃｅｒｖｉｃｏ
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乳头状瘤病毒亚型的临床意义口］．海峡预防医学杂志，２０１０，１６
（１）：４—７．
癌中比例有所下降，而仍高于宫颈炎组的比例。虽差异无统计
学意义，但在一定程度上说明多型别感染对宫颈病变以及宫颈
癌的发展起促进作用，有待进一步研究。本研究同时发现，
［１０］陶萍萍，卞美璐，李敏，等．ＨＰＶ多重感染与宫颈病变关系探讨
［Ｊ］．妇产科ｌ临床杂志，２００６，７（２）：９４—９６．
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ｐｌｅ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｈｕｍａｎ ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓｅｓ ｉｎ ｖａｒｉｏｕｓ ｇｒａｄｅｓ ｏｆ
ＨＰＶ多重感染有年龄集中趋势，小于４Ｏ岁者ＨＰＶ多重感染
率较高（Ｐ＜Ｏ．０５），可能与性生活频率、性伴侣数量多有关。
ｃｅｒｖｉｃａｌ ｎｅｏｐｌａｓｉａ［Ｊ］．Ｊ Ｍｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，１９９７，４６（１）：５４—６０．
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ＨＰＶ分型感染中的应用［Ｊ］．国际检验医学杂志，２００９，３０（７）：
６３０—６３１。６３４．
本研究利用ＤＮＡ杂交技术这一高通量基因检测技术，仅
需１次扩增，即可同时检测２３种高、低危型ＨＰＶ ＤＮＡ。该方
法具有高通量、高灵敏度、特异性好、可监测多重感染等优点，
可用于宫颈癌等疾病的早期预警和诊断，适用于大规模临床筛
查及推广应用＿１ 。
参考文献
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（收稿日期：２Ｏｌ１－０１—２０）
（上接第１０２３页）
［２］潘虹，黄庆，府伟灵．ＥＧＦＲ信号通路基因突变与非小细胞肺癌的
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（收稿日期：２ｏ１１—０３—０５）