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延胡索提取物抗痛风作用
2024年5月15日发(作者：曲梦蕊)
张旭等延胡索提取物抗痛风作用第
7
期
•
1297
•
延胡索提取物抗痛风作用
张旭
-
张权铭
2
董睿陶
7
王托
0
（
、
长春医学高等专科学校临床医学部
，
吉林长春
182618
；
2
长春市十一高中
；
吉林大学
3
生命科学学
院;
4
药学院
）
〔
摘
要
〕
目的
探索延胡索提取物
（YHS
）
对高尿酸血症小鼠的保护作用
。
方法
采用氧嗪酸钾腹腔注射建立高尿酸
血症小鼠模型
，
采用比色法
、
酶联免疫吸附试验
、
病理切片染色
、
流式细胞术等方法测定
YHS
作用后高尿酸血症小鼠血清尿酸
5
UA
）
、
黄嘌吟氧化酶
（
XOD
）
、
氧化应激相关因子和炎症因子等的含量变化,肾脏组织结构变化和外周血中中性粒细胞比例变
化
。
结果
YHS
给药有效降低高尿酸血症小鼠中血清
UA
和
XOD
活性
，
降
低机体氧化应激水平
，
提高抗氧化酶活性
4
g/kg
YHS
降低了活性氧
（
ROS
）
升高了
SOD
水平
。
4
y/ky
和
8
y/ky
YHS
给药抑制了高尿酸血症小鼠肾小球病理变化
，
使小鼠外周
血中中性粒细胞数量减少
2.2%
以上。
8
y/ky
YHS
降低小鼠血清白细胞介素
（
（
C
-
N
p
和肿瘤坏死因子
（
TNF
）
k
。
结论
YHS
能通过降低
XOD
活性
，
提高机体抗氧化水平,实现降
UA
和防止机体氧化损伤的作用
。
且
YHS
对痛风发作相关的关键
炎症因子和炎症细胞具有抑制作用
。
延胡索具有成为痛风治疗药物的潜力
。
〔
关
键词
〕
延胡索;高尿酸血症;痛风;氧化应激
〔
中图分类号
〕
R559.0
〔
文献标识码
〕A
〔
文章编号
〕
1005-9202
（
2021
）
06-129794;doi
：
10.3969/j.
issn.
1005-9202.2021.06.
048
痛风是一种关节炎症疾病
，
伴随有严重的关节
红肿
、
发热和疼痛
〔
〕
。
临床上将血尿酸
（
UA
）
水平
型,拟分析延胡索提取物
（
YHS
）
降
UA
活性及其对
痛风发作过程可能的调节作用
。
持续高于
6-
3
my/di
定义为高尿酸血症
，
也被认为
是痛风发病的重要病理基础
〔
4
〕
。
基于痛风的病理
特征
，
痛风的治疗策略可分为解热镇痛和降低
UA
两类
〔
4
〕
。
解热镇痛作用药物主要应用于痛风性关
1
材料与方法
1.1
动物
SPF
级雄性
BALB/o
小鼠
2
周龄
，
体重
2
~20
/
购自辽宁长生生物制品有限公司
，
许可证
号
：
SCXK
（
辽
）
2214021
。
节炎急性发作期
，
仅能暂时缓解或抑制痛风的症
状
〔
〕
。
持续降低
UA
水平可有效防止痛风性关节炎
1.2
主要试剂延胡索块茎
（
河北省安国市瑞琪
中药材有限公司
）
，别嘌吟醇片
（
世茂天街药业有限
公司
）
，
红细胞裂解液和细胞染色缓冲液
（
赛默飞世
的发作
，
因此有研究者认为
，
降低
UA
才是痛风治疗
的根本
〔
〕
。
目前市场上的痛风药物
，
如秋水仙碱
、
别嘌吟醇等
,
均伴随有恶心
、
呕吐
、
腹泻等毒副作用
,
且作用效果单一
〔
2
、
5
〕
。
临床治疗中急需一种安全
性高,且既能发挥解热镇痛作用又能降低
UA
水平
尔公司
-
,
UA
测定试剂盒和
XOD
测定试剂盒
（
Sip-
mn-Nldpch
-
：
ROS,
丙二醛
（
MDA
）
,
超氧化物歧化酶
5
SOD
）
，
谷胱甘肽过氧化物酶
（
GSHK
o
）
,
过氧化氢
的痛风治疗手段
。
延胡索是植物延胡索的块茎
，
其
镇痛作用已受到广大医者的认同
〔
〕
。
目前从延胡
酶
（
CAT
）
,
白细胞介素
（
IL
）
K
p
,
肿瘤坏死因子
5
TNF
-
-a,IL-5
，
单核细胞趋化蛋白
（
MCP--1
等酶联
索中分离得到了多种活性生物碱成分
，
包括延胡索
免疫吸附试验
5
ELISA
-
试剂盒
（
江苏科特生物科技
乙素
、
去氢紫
堇
碱等
20
多种
，
展现了镇痛
、
抗菌
、
抗
肿瘤等多种生物活性⑼
。
机体中黄嘌吟氧化酶
有限公司
）
。
1.2
主要仪器
可调式微量移液器
（
12-120
^
1
,
I6
〜
、
006
|xl
,
EpnendoU
公司
）
；
电子天平
（
BP201S,
（
XOD
）
等催化嘌吟代谢产生
UA
的过程中,伴随有
大量活性氧
（
ROS
）
的产生
。
过量
ROS
不仅会引起
组织氧化损伤,而且促进了痛风发作过程中的炎症
因子产生释放过程
〔
2
7
-
〕
。
目前关于延胡索在痛风
德国赛多利斯
）
;
多功能酶标
（
Syn
e
ruy
T
M
6,BU/
e
P
公
司
）
；
超净工作台
（
VSK860V
,
苏州安泰空气技术有
限公司
-
；
恒温水浴锅
（
gsy
-
n
,
北京市医疗设备
厂
）
；
大容量冷冻离心机
（
5817R,
EppendoT
公司
-
；
疾病领域的应用研究几乎没有
，
其降低血液
UA
的
作用仍有待确定
。
本研究建立高尿酸血症小鼠模
通信作者:王托
（
10844
，
女
，
硕士
，
讲师
，
主要从事临床医学研究
。
真空冷冻冻干机
（
HLPHAKK,
Ch/st
公司
-
；
流式细
胞仪
5
CytoUev
-
贝克曼公司
-。
1.4
YHS
给药溶液制备取延胡索干燥品经初步
粉碎产物
IO
y
加入
1
L
去离子水混合均匀
S
OOC
第一作者:张旭
（
I6/4
，
女，
副教授
，
主要从事临床医学研究
。
•
1298
•
中国老年学杂志
262
、
年
3
月第
4
、
卷
加热
0
U,6
006
Tmid
离心取上清
，
上清液经冷冻干
燥后即为
YHS
o
Oy
S
y
和
3y
延胡索干燥品提取获
得的等量提取物分别溶于
I
mi
去离子水中即得
剂盒和
XOD
检测试剂盒测定
。
1.
12
小鼠氧化应激相关因子及炎症相关因子测定
使用
ELISA
测定小鼠血清和肝脏中
ROS
、
MDA
、
SOD
a
GSHKo
和
CAT
含量
，
小鼠血清中
IK
0
、TNF-
YHS
低剂量
（
L
）
、
中剂量
（
M
）
、
高剂量
（
H
）
给药
溶液
。
a
、
I4
、
MCPK
含量
。
1.
11
统计学方法
采用
SPSS17.
6
软件进行单因
1.
2
模型建立及给药
60
只雄性健康
BALB/o
小
鼠,经适应性喂养
1
w
后
，
随机分为空白对照组
、
模
型组
、
别嘌吟醇阳性组
（
AL
）
、
YHSK
组
a
YHS-M
组
素方差分析
（
ANOVA）
及
Dunn
多重比较检验
。
2
结果
2.
1
YHS
对高尿酸血症小鼠
UA
及
XOD
含量的影
和
YHS-H
组各I
只
，
AL
小鼠给药
20
my/ky
别嘌
吟醇
,YHSK
、
YHS-M
和
YHS-H
小鼠分别给药相应
给药溶液
（
等同于
0
y/ky
、
4
y/ky
和
5
y/ky
延胡
响
与对照组相比
，
模型组血清
UA
水平
,
血液和肝
索
）
。
对照组和模型组小鼠灌胃等体积去离子水
。
给药方式为灌胃给药
，
给药体积为
I
mPPy
,连续给
脏中
XOD
活性显著升高
（
P<6.
61
）
,
AL
组显著降低
（
P<2.25
-
。
与
AL
组比较
,
YHS
给药组
UA
水平和
药
17U
o
在最后
3
U
灌胃给药
1
h
前,除去对照组小
鼠
，
其余小鼠腹腔注射氧嗪酸钾生理盐水溶液
XOD
活性显著升高
（
P<6.
69
）
,
且
YHS
的作用效果
呈现剂量依赖性增强
。
见表
2
表
1
YHS
对高尿酸小鼠血
UA
及
XOD
的影响
（
亍
=
12
）
组别
（
306
my/ky
-
进行高尿酸血症建模
，
对照组小鼠注
射等体积生理盐水
。
1.2
小鼠外周血免疫细胞检测小鼠最后一次灌
血清
UA(
p
mU/L
)
血清
XOD(U/L
)
123.40±17.
66
6.45±6.65
8.65±6.6
、
0
9
肝脏
XOD(U/g
-
8.
2±1.96
胃给药
、
h
后
，
眼底静脉丛取血
，
分取
IO
小
血液,
加入红细胞裂解液
0
mi
混合均匀避光
9
mix
后
，
对照组
模型组
AL
组
170.63±I.54
5
、
32.46±7.98
5
、
14.
89±5.54i
3
5.89±6.94
9
、
7.65±6.69
4
、
6.69±6.68
4
、
4.6±6.68
9
、
9.77±4.45
8
、
8.54±1.95
4
、
1
206
TmV
离心
9
min,
弃上清
，
沉淀用
206
p!
细胞
YHS-E
组
YHS-M
组
129.77±10.34
6
、
108.84±26.64
9
3
&.54±24.84
9
、
染色缓冲液重悬
,
进行流式细胞术测定
。
1.2
小鼠血液及组织采集
小鼠最后一次灌胃给
YHSKH
组
6.45±6.24
9
、
6.74±1.77
9
、
药
2
h
后
，
眼底静脉丛取血
，
室温放置
32
mV
,
8
006
TmV
离心
17
mix
取上清即得小鼠血清
，
取血
后小鼠通过二氧化碳吸入法安乐死
。
收集小鼠肾脏
与对照组比较
：
1
）
P<9.6i2
）
P<9-661
;
与模型组比较
S
）
P<7.95
,
4
）
P<6.6
、
,
5
）
P<6.661
；
表
2
同
2.
2
YHS
对高尿酸血症小鼠氧化应激水平的影响
和肝脏
，
小鼠肾脏用
16%
甲醛固定
，
肝脏和血清
-80
C
保存备用
。
与对照组相比
，
模型组
ROS
水平显著升高
（
P<
6.01
）
,
SOD
和
GSH-Lc
水平显著降低
（
P<6.
05
）
。
1.2
小鼠肾脏病理学检测
小鼠肾脏固定
7
U
后,
与模型组比较
,YHS-H
组
ROS
水平显著降低
，
SOD
、
GSH-Lc,CAT
水平显著升高
（
P<6.
05,
P<6.
61
）
。
经过
59%
、
75%
、
80%、
99%
、
I6%
乙醇溶液
、
二甲
苯
、
二甲苯的顺序进行脱水透明后
，
进行石蜡包埋
。
将小鼠肾脏石蜡块切成
9
p
m
的组织切片后
，
经过
I6
%
、
9
9
%
、
80
%
、
75%
、
5
9
%
乙醇复水处理后
，
进行
AL
组
ROS
水平显著低于模型组
（
P<6.
69
）
,
见表
2
。
0.2
YHS
对高尿酸血症小鼠肾脏病理的影响
与
对照组相比
，
模型组小鼠肾脏肾小球间隙明显增大,
肾小球出现一定程度的不规则形变
。
YHS-M
a
YHS-
H
组小鼠肾小球病例变化得到缓解
，
肾小球间隙明
显缩小
。
见图
2
苏木素-伊红
（
HE）
染色
，
封片后在显微镜
206
倍放
大倍数下进行观察
。
1.2
小鼠血清
UA
及
XOD
测定
使用
UA
检测试
表1
YHS
对高尿酸小鼠氧化应激相关因子的影响
（
亍
=
1
）
组别
血清
ROS(U/mi)
14.
&
±6.
74
MDA
(
mol/ml)
7.
25
±6.
77
7.
7/±0.
27
7.
85±6.
70
7.
47±6.
99
7.
37±6.
6
7.
87±6.
04
SOD(U/mi)
GSH4o(U/mi)
CAT(U/mi)
5.
95±0.
47
对照组
模型组
AL
组
29.
55±1.05
43
03
±3
I
3
39.
34±4.
91
34.
73±4.
I
2
I.
09±3
31
5
9
15.
51±3
38
8
、
I.
95±1.97
4.
75±0.
39
3.
14±6.
3/
8
、
3.
11±6.
34
8
、
3.
I±6.
39
8
、
5.
51±6.
35
4
、
24.
37±1.95
45.
69±1.58
45
.
91±3
64
4
、
34.
94±5.
03
36.
14±5.
0
、
36.
35±5.
05
36.
93±4.
07
8
9
YHSKL
组
YHSKM
组
13082±2013
13
55±3
9/
4
、
YHSKH
组
24.
81±1.
07
4
、
张旭等延胡索提取物抗痛风作用第
2
期
-
199
-
续表
0
YHS
对高尿酸小鼠氧化应激相关因子的影响
(c
±
s,n
=
1
)
组别
肝脏
ROS(U/nia
)
2.
15±4.
1
2.
59±0.
22
0
)
2.
22
±4.
28
8
)
MDA(
mol/mg)
SOD(U/nig
)
GSHEp(U/nig
)
4.
32±4.
37
CAT(U/ng
)
4.
59±4.
43
4.
55
±4.
04
4.
61
±4.
04
8
-
对照组
模型组
AL
组
YHS-L
组
YHS-M
组
YHS-H
组
、
.
20±0.
23
2
•27
±4.
08
3.49±4.
23
2.
75±0.
2
1
-
2.
87
±4.
22
2.
36±4.
2
3.85±4.
20
1
-
2.33±4.
1
2.21±4.
2
3.
38±4.42
3.99±4.
45
2.
3
6±4.
3
9
2.20±4
.
33
4.0±4.
04
8
-
4.
61
±4.
04
8
-
4.
62±4.
43
6
-
2.29
±4.
07
2
•27
±4.
08
3.
04±4.
/
6
-
3.
23±4.
l
6
-
4.
1±4.
20
8
-
4.
20±0.
/
6
-
2.
92±4.
2
9
6
-
YHS-L
组
YHS-M
组YHS-H组
图
1
YHS对高尿酸小鼠肾脏病理学影响
(
HE,x2(2
)
0.4
YHS
对高尿酸血症小鼠炎症相关因子的影响
性粒细胞的作用效果呈现剂量依赖性增强
。
见图
0
o
表
3
各组炎症因子比较(x±^,pg/ml,n
=
10
)
组别
IBG
p
与对照组相比
，
模型组血清中
IBC
p
和
TNF
g
水
平显著升高
(PV
/./2
)
。
与模型组比较
，
YHS-H
组
IBG
p
显著降低,
AL
组
、
YHSE
、
M
、
H
组
TNF
g
水平
TNF
g
IBG
MCPA
显著降低(均
P
4
)
-
;
YHS-L
组
IBO
水平显著降
低
(PV4.
45)
，
见表
3
o
对照组
模型组
AL
组
18.
59±2.66
22.
91 ±2.
43
14.
21
±4.
38
36.
46±3.43
37.
88±2.
98
37.
46±3.
2
36.
46
±2.
43
37.
19±2.
75
22.
30±2.
69
1
-
27.
36±3.
59
1
-
2
2.32±4.
94
22.
57±2.32
22.
33±2.46
8
)
12.
35±4.
84
2.
46±4.
42
22.
35±3.
2
8
)
1.
79±2.22
2・
5
YHS
对高尿酸血症小鼠外周血细胞的影响
YHS-L
组
YHS-M
组
19.
93
±2.
86
23.25±2.84
8
)
1.
29±4.
88
6
-
36.
89±3.
2
与对照组相比
，
模型组小鼠外周血中性粒细胞比例
增加了
2.4%
以上
，
YHSE
［
、
YHS-H
组比例减少了
YHS-H
组
18.
07±3.
39
8
-
22.53±2.95
8
)
12.
33±4.
86
/•
4%
以上
。
YHS
降低高尿酸血症小鼠外周血中中
对照组
与对照组比较
：
2
-
P<4.
42
;
与模型组比较
8
-
P<4.
45,3)
P<4.
4
)
模型组
P2(41.18%)
P2Q6.78%)
图
0
YHS
对高尿酸小鼠外周血中中性粒细胞的影响
(
P0
中性粒细胞,
P3
单核细胞,
P4
淋巴细胞)
•
1300
•
中国老年学杂志
2621
年
3
月第
41
卷
of
novel
amibypeTpcemic
UeTpexCc
—
J
〕
.
Aphr
Res
Ther,
2000
；
8
3
讨论
天然产物以其生物相容性高
、
活性广泛
、
毒副作
用小等特点
,
成为新药开发的重要来源
,
受到越来越
多研究者的关注
。
延胡索是传统中医中药中经典的
(
Supyl
1
(
：
S43
5
Chen
J,Wn
M,
Yang
J
,
at
al.
The
immunoloaicai
basis
in
the
yatUo-
genesis
of
gu/J
〕
.
Iran
J
Immunol
gi
SOI
；
14(4)
：
964
6
Bunill
D
,
Taylor
WJ,TeTelmud
R
,
a
t
al.
Gout,
HypeTpcaemia
and
镇痛作用药物
，
现代药学研究从延胡索中分离获得
的延胡索甲素、
延胡索乙素等有效成分均显示了很
Cpstal-Associated
Disease
NetworU(
G-LAN
-
cocsensvs
s/tement
re-
garOing
dkels
and
definitions
of
disease
states
of
gou/J
〕
.
Ann
RUen-
好的镇痛作用⑼
。
高尿酸血症作为痛风发病的基
础,其本身并不会有明显的发病症状
。
高尿酸血症
mat
Dis,2617
；
9e(l1)
：
1394-S063
7
Fam
AG.
DiRicult
gout
and
new
appoacUes
for
control
of
hyperu/ce-
mia
in
the
aiocu/dol-aimrgic
yatiept
〔
J
〕
•
Curr
Rhexmatol
Rep
,
2001
；
5(
1-
：
20453
的危害主要在于其引起的痛风
、
心脑血管疾病
、
肾脏
损伤
、
糖尿病等并发症,在这一过程中氧化应激损伤
起到了很大作用
〔
、
〕
。
在痛风发作过程中
，
中性粒细
8
Fam
AG.
Treating
acute
gonty
arthritis
with
selective
COX
4
indViton
〔
J
〕
.
BMJSO
、
425
(757
、
)
：
9&K.
胞的募集及炎症因子
in
p
等的释放使患者患处疼
痛
、
发热及炎症反应的生理生化基础
〔
5
7
/
〕
,
氧化应
激可有效激活
NL3,
促进
IK
p
释放
〔
3
〕
。
通过抑制
9
尚坤
，李敬文
，
常美月
，
等•延胡索药理作用研究
〔
〕
〕
•
吉林中医
药
26I;59(1
)
：
1124
I
Singh
M
,
Kalia
AN
,
Shama
R
,
at
al.
Hyperuricemia
：
I
it
a
risk
factor
for
vascudr
eddothehai
Uysfunct/x
and
associated
caTUvascudr
中性粒细胞数量
，
降低氧化应激水平
，
抑制炎症因
UisoTers
〔
J
〕
?
Curr
HypePepsi
Rev
,2069
4(
、
)
：
、
4
子
，
可有效抑制痛风的发作
。
II
Billiet
L,
Doaty
S,KaW
JD,e
t
al.
Review
ot
UypeTpcemia
as
new
marUer
for
metaPo/c
syndome
〔
J
〕
.
IRN
Rhexmatol
:
2012
；
2012
:
8529543
本研究结果说明
YHS
不仅缓解了高尿酸血症
的症状
，
而且抑制了痛风发作过程中重要的生理生
化变化
。
本文证实了延胡索具有成为痛风治疗药物
1
BarOix
T,RUhet
W
P.
Impact
ot
comoTibities
ox
gout
and
hyperuri-
caemia
:
an
update
ox
pTvampce
and
treatment
optWns
〔
J
〕
•
BMC
,
2017
；
13
：
lO.
的潜力
，
为延胡索作为抗痛风药物的进一步开发提
供科学基础
。
4
参考文献
1
中华医学会风湿病学分会
.2010
中国痛风诊疗指南中华内
1
Rock
KL,
Hiroshi
K,
JiannKyP
L.
UPe
acid
as
a
danger
signal
in
gout
and
its
comoTiPCes
〔
J
〕
.
Nature
Rea
Rheuma/i
,2012
；
9
(1
-
:
2K3.
1
SaPina
EP
,
Rasool
M.
An
in
viva
and
in
vitro
po/pCai
ot
Indian
aynrvePie
UerOal
fomudtiox
Triphala
ox
expe/mental
gonty
aphriks
in
mUe
〔
J
〕
.
Vascul
PUamacoi,2008
；
28
(1
-
：
IKO.
科杂志
4010
；
33(11)
：
194-63
2
Lin
S
,
Perez-Ruiz
F
,
Miner
JN.
Patients
wiU
gout
UiRer
from
heal
thy
sudjects
in
renal
ospcuso
W
ckanges
in
serum
uric
acid
〔
J
〕
•
Joint
Bone
Spine
4017
；
84(4)
：
254.
1
Bai
H
,
Yang
B,Yn
W,
at
al.
CatPepsix
B
links
oxibativa
stress
/
the
activation
ot
NLRP5
Vtamma
—
me
〔
J
〕
.
Exper
Cel
l
Res,
2617
；
564
(1)
：
1864
9
TerOeltaud
RA.
CcOcUicine
update
：
2008
[
J.
.
Semin
ArU/tis
Rheum,
2069
；
38
(6)
：
2114
〔
2620K5K7
修回
〕
4
TerOe/aub
R
,
Buskinsky
DA
,
Becker
MA.
Recent
Ueveloxmepts
in
our
understanking
of
the
renal
basis
of
UypeTpcemia
and
the
Ueveloxmept
(编辑
滕欣航)
《
中国老年学杂志
》
被国内数家数据库
、
检索性期刊检索机构收录情况
《
中国老年学杂志
》
被评为第二届北方期刊优秀期刊
，
吉林省双十佳期刊
,
以国家重大课题和省部级课题研究成果为主要
报道内容的基础研究栏目被评为吉林省学术期刊名栏,被北大图书馆
•
北京高校图书馆期刊工作研究会列为中文核心期刊,
并被中国生物学文献数据库
、
中国期刊全文数据库
、
中国学术期刊综合评价数据库
、
中文科技期刊数据库
、
中国核心期刊(遴
选)数据库
、
解放军医学图书馆数据库及中国数字图书馆示范工程超星数字图书馆收录及列为统计源期刊
，
并被
《
中国医学文
摘
•
老年学分册
》
、
《
中国医学文摘•
皮肤科学分册》
、
《
中国生物学文摘
》
、
《
中文科技资料目录
》
(中草药)
、
《
中文科技资料目
录
》
(医药卫生)等检索性期刊摘录。
2024年5月15日发(作者：曲梦蕊)
张旭等延胡索提取物抗痛风作用第
7
期
•
1297
•
延胡索提取物抗痛风作用
张旭
-
张权铭
2
董睿陶
7
王托
0
（
、
长春医学高等专科学校临床医学部
，
吉林长春
182618
；
2
长春市十一高中
；
吉林大学
3
生命科学学
院;
4
药学院
）
〔
摘
要
〕
目的
探索延胡索提取物
（YHS
）
对高尿酸血症小鼠的保护作用
。
方法
采用氧嗪酸钾腹腔注射建立高尿酸
血症小鼠模型
，
采用比色法
、
酶联免疫吸附试验
、
病理切片染色
、
流式细胞术等方法测定
YHS
作用后高尿酸血症小鼠血清尿酸
5
UA
）
、
黄嘌吟氧化酶
（
XOD
）
、
氧化应激相关因子和炎症因子等的含量变化,肾脏组织结构变化和外周血中中性粒细胞比例变
化
。
结果
YHS
给药有效降低高尿酸血症小鼠中血清
UA
和
XOD
活性
，
降
低机体氧化应激水平
，
提高抗氧化酶活性
4
g/kg
YHS
降低了活性氧
（
ROS
）
升高了
SOD
水平
。
4
y/ky
和
8
y/ky
YHS
给药抑制了高尿酸血症小鼠肾小球病理变化
，
使小鼠外周
血中中性粒细胞数量减少
2.2%
以上。
8
y/ky
YHS
降低小鼠血清白细胞介素
（
（
C
-
N
p
和肿瘤坏死因子
（
TNF
）
k
。
结论
YHS
能通过降低
XOD
活性
，
提高机体抗氧化水平,实现降
UA
和防止机体氧化损伤的作用
。
且
YHS
对痛风发作相关的关键
炎症因子和炎症细胞具有抑制作用
。
延胡索具有成为痛风治疗药物的潜力
。
〔
关
键词
〕
延胡索;高尿酸血症;痛风;氧化应激
〔
中图分类号
〕
R559.0
〔
文献标识码
〕A
〔
文章编号
〕
1005-9202
（
2021
）
06-129794;doi
：
10.3969/j.
issn.
1005-9202.2021.06.
048
痛风是一种关节炎症疾病
，
伴随有严重的关节
红肿
、
发热和疼痛
〔
〕
。
临床上将血尿酸
（
UA
）
水平
型,拟分析延胡索提取物
（
YHS
）
降
UA
活性及其对
痛风发作过程可能的调节作用
。
持续高于
6-
3
my/di
定义为高尿酸血症
，
也被认为
是痛风发病的重要病理基础
〔
4
〕
。
基于痛风的病理
特征
，
痛风的治疗策略可分为解热镇痛和降低
UA
两类
〔
4
〕
。
解热镇痛作用药物主要应用于痛风性关
1
材料与方法
1.1
动物
SPF
级雄性
BALB/o
小鼠
2
周龄
，
体重
2
~20
/
购自辽宁长生生物制品有限公司
，
许可证
号
：
SCXK
（
辽
）
2214021
。
节炎急性发作期
，
仅能暂时缓解或抑制痛风的症
状
〔
〕
。
持续降低
UA
水平可有效防止痛风性关节炎
1.2
主要试剂延胡索块茎
（
河北省安国市瑞琪
中药材有限公司
）
，别嘌吟醇片
（
世茂天街药业有限
公司
）
，
红细胞裂解液和细胞染色缓冲液
（
赛默飞世
的发作
，
因此有研究者认为
，
降低
UA
才是痛风治疗
的根本
〔
〕
。
目前市场上的痛风药物
，
如秋水仙碱
、
别嘌吟醇等
,
均伴随有恶心
、
呕吐
、
腹泻等毒副作用
,
且作用效果单一
〔
2
、
5
〕
。
临床治疗中急需一种安全
性高,且既能发挥解热镇痛作用又能降低
UA
水平
尔公司
-
,
UA
测定试剂盒和
XOD
测定试剂盒
（
Sip-
mn-Nldpch
-
：
ROS,
丙二醛
（
MDA
）
,
超氧化物歧化酶
5
SOD
）
，
谷胱甘肽过氧化物酶
（
GSHK
o
）
,
过氧化氢
的痛风治疗手段
。
延胡索是植物延胡索的块茎
，
其
镇痛作用已受到广大医者的认同
〔
〕
。
目前从延胡
酶
（
CAT
）
,
白细胞介素
（
IL
）
K
p
,
肿瘤坏死因子
5
TNF
-
-a,IL-5
，
单核细胞趋化蛋白
（
MCP--1
等酶联
索中分离得到了多种活性生物碱成分
，
包括延胡索
免疫吸附试验
5
ELISA
-
试剂盒
（
江苏科特生物科技
乙素
、
去氢紫
堇
碱等
20
多种
，
展现了镇痛
、
抗菌
、
抗
肿瘤等多种生物活性⑼
。
机体中黄嘌吟氧化酶
有限公司
）
。
1.2
主要仪器
可调式微量移液器
（
12-120
^
1
,
I6
〜
、
006
|xl
,
EpnendoU
公司
）
；
电子天平
（
BP201S,
（
XOD
）
等催化嘌吟代谢产生
UA
的过程中,伴随有
大量活性氧
（
ROS
）
的产生
。
过量
ROS
不仅会引起
组织氧化损伤,而且促进了痛风发作过程中的炎症
因子产生释放过程
〔
2
7
-
〕
。
目前关于延胡索在痛风
德国赛多利斯
）
;
多功能酶标
（
Syn
e
ruy
T
M
6,BU/
e
P
公
司
）
；
超净工作台
（
VSK860V
,
苏州安泰空气技术有
限公司
-
；
恒温水浴锅
（
gsy
-
n
,
北京市医疗设备
厂
）
；
大容量冷冻离心机
（
5817R,
EppendoT
公司
-
；
疾病领域的应用研究几乎没有
，
其降低血液
UA
的
作用仍有待确定
。
本研究建立高尿酸血症小鼠模
通信作者:王托
（
10844
，
女
，
硕士
，
讲师
，
主要从事临床医学研究
。
真空冷冻冻干机
（
HLPHAKK,
Ch/st
公司
-
；
流式细
胞仪
5
CytoUev
-
贝克曼公司
-。
1.4
YHS
给药溶液制备取延胡索干燥品经初步
粉碎产物
IO
y
加入
1
L
去离子水混合均匀
S
OOC
第一作者:张旭
（
I6/4
，
女，
副教授
，
主要从事临床医学研究
。
•
1298
•
中国老年学杂志
262
、
年
3
月第
4
、
卷
加热
0
U,6
006
Tmid
离心取上清
，
上清液经冷冻干
燥后即为
YHS
o
Oy
S
y
和
3y
延胡索干燥品提取获
得的等量提取物分别溶于
I
mi
去离子水中即得
剂盒和
XOD
检测试剂盒测定
。
1.
12
小鼠氧化应激相关因子及炎症相关因子测定
使用
ELISA
测定小鼠血清和肝脏中
ROS
、
MDA
、
SOD
a
GSHKo
和
CAT
含量
，
小鼠血清中
IK
0
、TNF-
YHS
低剂量
（
L
）
、
中剂量
（
M
）
、
高剂量
（
H
）
给药
溶液
。
a
、
I4
、
MCPK
含量
。
1.
11
统计学方法
采用
SPSS17.
6
软件进行单因
1.
2
模型建立及给药
60
只雄性健康
BALB/o
小
鼠,经适应性喂养
1
w
后
，
随机分为空白对照组
、
模
型组
、
别嘌吟醇阳性组
（
AL
）
、
YHSK
组
a
YHS-M
组
素方差分析
（
ANOVA）
及
Dunn
多重比较检验
。
2
结果
2.
1
YHS
对高尿酸血症小鼠
UA
及
XOD
含量的影
和
YHS-H
组各I
只
，
AL
小鼠给药
20
my/ky
别嘌
吟醇
,YHSK
、
YHS-M
和
YHS-H
小鼠分别给药相应
给药溶液
（
等同于
0
y/ky
、
4
y/ky
和
5
y/ky
延胡
响
与对照组相比
，
模型组血清
UA
水平
,
血液和肝
索
）
。
对照组和模型组小鼠灌胃等体积去离子水
。
给药方式为灌胃给药
，
给药体积为
I
mPPy
,连续给
脏中
XOD
活性显著升高
（
P<6.
61
）
,
AL
组显著降低
（
P<2.25
-
。
与
AL
组比较
,
YHS
给药组
UA
水平和
药
17U
o
在最后
3
U
灌胃给药
1
h
前,除去对照组小
鼠
，
其余小鼠腹腔注射氧嗪酸钾生理盐水溶液
XOD
活性显著升高
（
P<6.
69
）
,
且
YHS
的作用效果
呈现剂量依赖性增强
。
见表
2
表
1
YHS
对高尿酸小鼠血
UA
及
XOD
的影响
（
亍
=
12
）
组别
（
306
my/ky
-
进行高尿酸血症建模
，
对照组小鼠注
射等体积生理盐水
。
1.2
小鼠外周血免疫细胞检测小鼠最后一次灌
血清
UA(
p
mU/L
)
血清
XOD(U/L
)
123.40±17.
66
6.45±6.65
8.65±6.6
、
0
9
肝脏
XOD(U/g
-
8.
2±1.96
胃给药
、
h
后
，
眼底静脉丛取血
，
分取
IO
小
血液,
加入红细胞裂解液
0
mi
混合均匀避光
9
mix
后
，
对照组
模型组
AL
组
170.63±I.54
5
、
32.46±7.98
5
、
14.
89±5.54i
3
5.89±6.94
9
、
7.65±6.69
4
、
6.69±6.68
4
、
4.6±6.68
9
、
9.77±4.45
8
、
8.54±1.95
4
、
1
206
TmV
离心
9
min,
弃上清
，
沉淀用
206
p!
细胞
YHS-E
组
YHS-M
组
129.77±10.34
6
、
108.84±26.64
9
3
&.54±24.84
9
、
染色缓冲液重悬
,
进行流式细胞术测定
。
1.2
小鼠血液及组织采集
小鼠最后一次灌胃给
YHSKH
组
6.45±6.24
9
、
6.74±1.77
9
、
药
2
h
后
，
眼底静脉丛取血
，
室温放置
32
mV
,
8
006
TmV
离心
17
mix
取上清即得小鼠血清
，
取血
后小鼠通过二氧化碳吸入法安乐死
。
收集小鼠肾脏
与对照组比较
：
1
）
P<9.6i2
）
P<9-661
;
与模型组比较
S
）
P<7.95
,
4
）
P<6.6
、
,
5
）
P<6.661
；
表
2
同
2.
2
YHS
对高尿酸血症小鼠氧化应激水平的影响
和肝脏
，
小鼠肾脏用
16%
甲醛固定
，
肝脏和血清
-80
C
保存备用
。
与对照组相比
，
模型组
ROS
水平显著升高
（
P<
6.01
）
,
SOD
和
GSH-Lc
水平显著降低
（
P<6.
05
）
。
1.2
小鼠肾脏病理学检测
小鼠肾脏固定
7
U
后,
与模型组比较
,YHS-H
组
ROS
水平显著降低
，
SOD
、
GSH-Lc,CAT
水平显著升高
（
P<6.
05,
P<6.
61
）
。
经过
59%
、
75%
、
80%、
99%
、
I6%
乙醇溶液
、
二甲
苯
、
二甲苯的顺序进行脱水透明后
，
进行石蜡包埋
。
将小鼠肾脏石蜡块切成
9
p
m
的组织切片后
，
经过
I6
%
、
9
9
%
、
80
%
、
75%
、
5
9
%
乙醇复水处理后
，
进行
AL
组
ROS
水平显著低于模型组
（
P<6.
69
）
,
见表
2
。
0.2
YHS
对高尿酸血症小鼠肾脏病理的影响
与
对照组相比
，
模型组小鼠肾脏肾小球间隙明显增大,
肾小球出现一定程度的不规则形变
。
YHS-M
a
YHS-
H
组小鼠肾小球病例变化得到缓解
，
肾小球间隙明
显缩小
。
见图
2
苏木素-伊红
（
HE）
染色
，
封片后在显微镜
206
倍放
大倍数下进行观察
。
1.2
小鼠血清
UA
及
XOD
测定
使用
UA
检测试
表1
YHS
对高尿酸小鼠氧化应激相关因子的影响
（
亍
=
1
）
组别
血清
ROS(U/mi)
14.
&
±6.
74
MDA
(
mol/ml)
7.
25
±6.
77
7.
7/±0.
27
7.
85±6.
70
7.
47±6.
99
7.
37±6.
6
7.
87±6.
04
SOD(U/mi)
GSH4o(U/mi)
CAT(U/mi)
5.
95±0.
47
对照组
模型组
AL
组
29.
55±1.05
43
03
±3
I
3
39.
34±4.
91
34.
73±4.
I
2
I.
09±3
31
5
9
15.
51±3
38
8
、
I.
95±1.97
4.
75±0.
39
3.
14±6.
3/
8
、
3.
11±6.
34
8
、
3.
I±6.
39
8
、
5.
51±6.
35
4
、
24.
37±1.95
45.
69±1.58
45
.
91±3
64
4
、
34.
94±5.
03
36.
14±5.
0
、
36.
35±5.
05
36.
93±4.
07
8
9
YHSKL
组
YHSKM
组
13082±2013
13
55±3
9/
4
、
YHSKH
组
24.
81±1.
07
4
、
张旭等延胡索提取物抗痛风作用第
2
期
-
199
-
续表
0
YHS
对高尿酸小鼠氧化应激相关因子的影响
(c
±
s,n
=
1
)
组别
肝脏
ROS(U/nia
)
2.
15±4.
1
2.
59±0.
22
0
)
2.
22
±4.
28
8
)
MDA(
mol/mg)
SOD(U/nig
)
GSHEp(U/nig
)
4.
32±4.
37
CAT(U/ng
)
4.
59±4.
43
4.
55
±4.
04
4.
61
±4.
04
8
-
对照组
模型组
AL
组
YHS-L
组
YHS-M
组
YHS-H
组
、
.
20±0.
23
2
•27
±4.
08
3.49±4.
23
2.
75±0.
2
1
-
2.
87
±4.
22
2.
36±4.
2
3.85±4.
20
1
-
2.33±4.
1
2.21±4.
2
3.
38±4.42
3.99±4.
45
2.
3
6±4.
3
9
2.20±4
.
33
4.0±4.
04
8
-
4.
61
±4.
04
8
-
4.
62±4.
43
6
-
2.29
±4.
07
2
•27
±4.
08
3.
04±4.
/
6
-
3.
23±4.
l
6
-
4.
1±4.
20
8
-
4.
20±0.
/
6
-
2.
92±4.
2
9
6
-
YHS-L
组
YHS-M
组YHS-H组
图
1
YHS对高尿酸小鼠肾脏病理学影响
(
HE,x2(2
)
0.4
YHS
对高尿酸血症小鼠炎症相关因子的影响
性粒细胞的作用效果呈现剂量依赖性增强
。
见图
0
o
表
3
各组炎症因子比较(x±^,pg/ml,n
=
10
)
组别
IBG
p
与对照组相比
，
模型组血清中
IBC
p
和
TNF
g
水
平显著升高
(PV
/./2
)
。
与模型组比较
，
YHS-H
组
IBG
p
显著降低,
AL
组
、
YHSE
、
M
、
H
组
TNF
g
水平
TNF
g
IBG
MCPA
显著降低(均
P
4
)
-
;
YHS-L
组
IBO
水平显著降
低
(PV4.
45)
，
见表
3
o
对照组
模型组
AL
组
18.
59±2.66
22.
91 ±2.
43
14.
21
±4.
38
36.
46±3.43
37.
88±2.
98
37.
46±3.
2
36.
46
±2.
43
37.
19±2.
75
22.
30±2.
69
1
-
27.
36±3.
59
1
-
2
2.32±4.
94
22.
57±2.32
22.
33±2.46
8
)
12.
35±4.
84
2.
46±4.
42
22.
35±3.
2
8
)
1.
79±2.22
2・
5
YHS
对高尿酸血症小鼠外周血细胞的影响
YHS-L
组
YHS-M
组
19.
93
±2.
86
23.25±2.84
8
)
1.
29±4.
88
6
-
36.
89±3.
2
与对照组相比
，
模型组小鼠外周血中性粒细胞比例
增加了
2.4%
以上
，
YHSE
［
、
YHS-H
组比例减少了
YHS-H
组
18.
07±3.
39
8
-
22.53±2.95
8
)
12.
33±4.
86
/•
4%
以上
。
YHS
降低高尿酸血症小鼠外周血中中
对照组
与对照组比较
：
2
-
P<4.
42
;
与模型组比较
8
-
P<4.
45,3)
P<4.
4
)
模型组
P2(41.18%)
P2Q6.78%)
图
0
YHS
对高尿酸小鼠外周血中中性粒细胞的影响
(
P0
中性粒细胞,
P3
单核细胞,
P4
淋巴细胞)
•
1300
•
中国老年学杂志
2621
年
3
月第
41
卷
of
novel
amibypeTpcemic
UeTpexCc
—
J
〕
.
Aphr
Res
Ther,
2000
；
8
3
讨论
天然产物以其生物相容性高
、
活性广泛
、
毒副作
用小等特点
,
成为新药开发的重要来源
,
受到越来越
多研究者的关注
。
延胡索是传统中医中药中经典的
(
Supyl
1
(
：
S43
5
Chen
J,Wn
M,
Yang
J
,
at
al.
The
immunoloaicai
basis
in
the
yatUo-
genesis
of
gu/J
〕
.
Iran
J
Immunol
gi
SOI
；
14(4)
：
964
6
Bunill
D
,
Taylor
WJ,TeTelmud
R
,
a
t
al.
Gout,
HypeTpcaemia
and
镇痛作用药物
，
现代药学研究从延胡索中分离获得
的延胡索甲素、
延胡索乙素等有效成分均显示了很
Cpstal-Associated
Disease
NetworU(
G-LAN
-
cocsensvs
s/tement
re-
garOing
dkels
and
definitions
of
disease
states
of
gou/J
〕
.
Ann
RUen-
好的镇痛作用⑼
。
高尿酸血症作为痛风发病的基
础,其本身并不会有明显的发病症状
。
高尿酸血症
mat
Dis,2617
；
9e(l1)
：
1394-S063
7
Fam
AG.
DiRicult
gout
and
new
appoacUes
for
control
of
hyperu/ce-
mia
in
the
aiocu/dol-aimrgic
yatiept
〔
J
〕
•
Curr
Rhexmatol
Rep
,
2001
；
5(
1-
：
20453
的危害主要在于其引起的痛风
、
心脑血管疾病
、
肾脏
损伤
、
糖尿病等并发症,在这一过程中氧化应激损伤
起到了很大作用
〔
、
〕
。
在痛风发作过程中
，
中性粒细
8
Fam
AG.
Treating
acute
gonty
arthritis
with
selective
COX
4
indViton
〔
J
〕
.
BMJSO
、
425
(757
、
)
：
9&K.
胞的募集及炎症因子
in
p
等的释放使患者患处疼
痛
、
发热及炎症反应的生理生化基础
〔
5
7
/
〕
,
氧化应
激可有效激活
NL3,
促进
IK
p
释放
〔
3
〕
。
通过抑制
9
尚坤
，李敬文
，
常美月
，
等•延胡索药理作用研究
〔
〕
〕
•
吉林中医
药
26I;59(1
)
：
1124
I
Singh
M
,
Kalia
AN
,
Shama
R
,
at
al.
Hyperuricemia
：
I
it
a
risk
factor
for
vascudr
eddothehai
Uysfunct/x
and
associated
caTUvascudr
中性粒细胞数量
，
降低氧化应激水平
，
抑制炎症因
UisoTers
〔
J
〕
?
Curr
HypePepsi
Rev
,2069
4(
、
)
：
、
4
子
，
可有效抑制痛风的发作
。
II
Billiet
L,
Doaty
S,KaW
JD,e
t
al.
Review
ot
UypeTpcemia
as
new
marUer
for
metaPo/c
syndome
〔
J
〕
.
IRN
Rhexmatol
:
2012
；
2012
:
8529543
本研究结果说明
YHS
不仅缓解了高尿酸血症
的症状
，
而且抑制了痛风发作过程中重要的生理生
化变化
。
本文证实了延胡索具有成为痛风治疗药物
1
BarOix
T,RUhet
W
P.
Impact
ot
comoTibities
ox
gout
and
hyperuri-
caemia
:
an
update
ox
pTvampce
and
treatment
optWns
〔
J
〕
•
BMC
,
2017
；
13
：
lO.
的潜力
，
为延胡索作为抗痛风药物的进一步开发提
供科学基础
。
4
参考文献
1
中华医学会风湿病学分会
.2010
中国痛风诊疗指南中华内
1
Rock
KL,
Hiroshi
K,
JiannKyP
L.
UPe
acid
as
a
danger
signal
in
gout
and
its
comoTiPCes
〔
J
〕
.
Nature
Rea
Rheuma/i
,2012
；
9
(1
-
:
2K3.
1
SaPina
EP
,
Rasool
M.
An
in
viva
and
in
vitro
po/pCai
ot
Indian
aynrvePie
UerOal
fomudtiox
Triphala
ox
expe/mental
gonty
aphriks
in
mUe
〔
J
〕
.
Vascul
PUamacoi,2008
；
28
(1
-
：
IKO.
科杂志
4010
；
33(11)
：
194-63
2
Lin
S
,
Perez-Ruiz
F
,
Miner
JN.
Patients
wiU
gout
UiRer
from
heal
thy
sudjects
in
renal
ospcuso
W
ckanges
in
serum
uric
acid
〔
J
〕
•
Joint
Bone
Spine
4017
；
84(4)
：
254.
1
Bai
H
,
Yang
B,Yn
W,
at
al.
CatPepsix
B
links
oxibativa
stress
/
the
activation
ot
NLRP5
Vtamma
—
me
〔
J
〕
.
Exper
Cel
l
Res,
2617
；
564
(1)
：
1864
9
TerOeltaud
RA.
CcOcUicine
update
：
2008
[
J.
.
Semin
ArU/tis
Rheum,
2069
；
38
(6)
：
2114
〔
2620K5K7
修回
〕
4
TerOe/aub
R
,
Buskinsky
DA
,
Becker
MA.
Recent
Ueveloxmepts
in
our
understanking
of
the
renal
basis
of
UypeTpcemia
and
the
Ueveloxmept
(编辑
滕欣航)
《
中国老年学杂志
》
被国内数家数据库
、
检索性期刊检索机构收录情况
《
中国老年学杂志
》
被评为第二届北方期刊优秀期刊
，
吉林省双十佳期刊
,
以国家重大课题和省部级课题研究成果为主要
报道内容的基础研究栏目被评为吉林省学术期刊名栏,被北大图书馆
•
北京高校图书馆期刊工作研究会列为中文核心期刊,
并被中国生物学文献数据库
、
中国期刊全文数据库
、
中国学术期刊综合评价数据库
、
中文科技期刊数据库
、
中国核心期刊(遴
选)数据库
、
解放军医学图书馆数据库及中国数字图书馆示范工程超星数字图书馆收录及列为统计源期刊
，
并被
《
中国医学文
摘
•
老年学分册
》
、
《
中国医学文摘•
皮肤科学分册》
、
《
中国生物学文摘
》
、
《
中文科技资料目录
》
(中草药)
、
《
中文科技资料目
录
》
(医药卫生)等检索性期刊摘录。