2024年6月14日发(作者:边寒雁)
血清天门冬氨酸氨基转移酶测定
1. 实验原理:国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外
连续监测法,酶偶联反应式为:
L-天门冬氨酸+ -酮戊二酸
AST
草酰乙酸
+L-谷氨酸
草酰乙酸+ NADH +H
+NAD+H
2
O
+
+ MDH苹果酸脱氢酶
L-苹果酸
在340nm波长下,监测NADH的氧化速率,即吸光度的
下降速率与AST活性呈正比。
2. 标本:
2.1 病人准备:12小时禁食。
2.2 类型:血清,肝素或EDTA血浆。
3. 标本存放:3天内的活性损失:2~8℃保存:<8%;
15~25℃保存:<10%;标本稳定性:-20℃保存至少可
稳定3个月。
4. 标本运输:常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准:标本溶血、细菌污染的标本。
6. 实验材料
6.1 试剂:欧泰克 AST测定试剂盒
6.1.1 试剂组成
Tris缓冲液 pH7.8 80mmol/L
L-天门冬氨酸 240mmol/L
MDH(苹果酸脱氢酶) ≥600U/L
LDH(乳酸脱氢酶) ≥1200U/L
a-酮戊二酸 12mmol/L
NADH 0.18mmol/L
6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存
试剂保存于2~8℃,若无污染,可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有
浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,
不能继续使用。
6.1.5 注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95g/L)为防腐
剂。不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的
预防措施使用试剂。
6.2 校准品:使用罗氏公司提供的复合校准品对自动
分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和质控
品.SOP文件。
6.3 质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP
文件。
7. 仪器:日立7060生化分析仪
8. 操作步骤
8.1 项目基本参数:参见生化检验日立7060生化分析
仪项目测定参数.SOP文件
8.2 仪器操作步骤:参见生化检验日立7060生化分析
仪操作规程.SOP文件
9. 检验结果的判断与分析
10. 质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水
平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控
警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。
质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。
11. 计算方法:以罗氏复合校准品AST校准值校准仪
器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠
的检测结果。
12. 参考值范围
[4]
女性 <31U/L
男性 <37U/L
13. 临床意义
丙氨酸氨基转移酶(ALT)旧称谷丙转氨酶(GPT),
天门冬氨酸氨基转移酶(AST)旧称谷草转氨酶(GOT)。
它们是氨基转移酶类的典型代表。氨基转移酶催化氨
基从氨基酸转移给-酮酸的反应。
ALT是肝脏的特异性酶,仅在肝胆疾病时显著升
高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌损伤,以及肝
组织损害等都有关。因此同时进行ALT和AST的检测
用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤。AST/ALT比率
可用于肝病的鉴别诊断。比率<1预示中度的肝损伤;
比率>1和严重肝病有关,常见慢性肝病。
14. 线性范围2-800U/L。
15. 超出范围结果处理:本法对AST活力检测的最大
ΔA/min在340、334nm为0.16,在365nm为0.08。
当样品测定值超过上限时,应将样品用9g/L氯化钠溶
液作1+9稀释,重新测定,结果乘以10。
16. 病危报警值的处理:复查后电话通知临床。
2024年6月14日发(作者:边寒雁)
血清天门冬氨酸氨基转移酶测定
1. 实验原理:国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外
连续监测法,酶偶联反应式为:
L-天门冬氨酸+ -酮戊二酸
AST
草酰乙酸
+L-谷氨酸
草酰乙酸+ NADH +H
+NAD+H
2
O
+
+ MDH苹果酸脱氢酶
L-苹果酸
在340nm波长下,监测NADH的氧化速率,即吸光度的
下降速率与AST活性呈正比。
2. 标本:
2.1 病人准备:12小时禁食。
2.2 类型:血清,肝素或EDTA血浆。
3. 标本存放:3天内的活性损失:2~8℃保存:<8%;
15~25℃保存:<10%;标本稳定性:-20℃保存至少可
稳定3个月。
4. 标本运输:常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准:标本溶血、细菌污染的标本。
6. 实验材料
6.1 试剂:欧泰克 AST测定试剂盒
6.1.1 试剂组成
Tris缓冲液 pH7.8 80mmol/L
L-天门冬氨酸 240mmol/L
MDH(苹果酸脱氢酶) ≥600U/L
LDH(乳酸脱氢酶) ≥1200U/L
a-酮戊二酸 12mmol/L
NADH 0.18mmol/L
6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存
试剂保存于2~8℃,若无污染,可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有
浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,
不能继续使用。
6.1.5 注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95g/L)为防腐
剂。不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的
预防措施使用试剂。
6.2 校准品:使用罗氏公司提供的复合校准品对自动
分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和质控
品.SOP文件。
6.3 质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP
文件。
7. 仪器:日立7060生化分析仪
8. 操作步骤
8.1 项目基本参数:参见生化检验日立7060生化分析
仪项目测定参数.SOP文件
8.2 仪器操作步骤:参见生化检验日立7060生化分析
仪操作规程.SOP文件
9. 检验结果的判断与分析
10. 质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水
平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控
警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。
质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。
11. 计算方法:以罗氏复合校准品AST校准值校准仪
器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠
的检测结果。
12. 参考值范围
[4]
女性 <31U/L
男性 <37U/L
13. 临床意义
丙氨酸氨基转移酶(ALT)旧称谷丙转氨酶(GPT),
天门冬氨酸氨基转移酶(AST)旧称谷草转氨酶(GOT)。
它们是氨基转移酶类的典型代表。氨基转移酶催化氨
基从氨基酸转移给-酮酸的反应。
ALT是肝脏的特异性酶,仅在肝胆疾病时显著升
高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌损伤,以及肝
组织损害等都有关。因此同时进行ALT和AST的检测
用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤。AST/ALT比率
可用于肝病的鉴别诊断。比率<1预示中度的肝损伤;
比率>1和严重肝病有关,常见慢性肝病。
14. 线性范围2-800U/L。
15. 超出范围结果处理:本法对AST活力检测的最大
ΔA/min在340、334nm为0.16,在365nm为0.08。
当样品测定值超过上限时,应将样品用9g/L氯化钠溶
液作1+9稀释,重新测定,结果乘以10。
16. 病危报警值的处理:复查后电话通知临床。