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血清天门冬氨酸氨基转移酶测定

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2024年6月14日发(作者:边寒雁)

血清天门冬氨酸氨基转移酶测定

1. 实验原理:国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外

连续监测法,酶偶联反应式为:

L-天门冬氨酸+ -酮戊二酸

AST

草酰乙酸

+L-谷氨酸

草酰乙酸+ NADH +H

+NAD+H

2

O

+

+ MDH苹果酸脱氢酶

L-苹果酸

在340nm波长下,监测NADH的氧化速率,即吸光度的

下降速率与AST活性呈正比。

2. 标本:

2.1 病人准备:12小时禁食。

2.2 类型:血清,肝素或EDTA血浆。

3. 标本存放:3天内的活性损失:2~8℃保存:<8%;

15~25℃保存:<10%;标本稳定性:-20℃保存至少可

稳定3个月。

4. 标本运输:常温条件下保存运输。

5. 标本拒收标准:标本溶血、细菌污染的标本。

6. 实验材料

6.1 试剂:欧泰克 AST测定试剂盒

6.1.1 试剂组成

Tris缓冲液 pH7.8 80mmol/L

L-天门冬氨酸 240mmol/L

MDH(苹果酸脱氢酶) ≥600U/L

LDH(乳酸脱氢酶) ≥1200U/L

a-酮戊二酸 12mmol/L

NADH 0.18mmol/L

6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。

6.1.3 试剂稳定性与贮存

试剂保存于2~8℃,若无污染,可稳定至失效期。

试剂不可冰冻。

6.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有

浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,

不能继续使用。

6.1.5 注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95g/L)为防腐

剂。不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的

预防措施使用试剂。

6.2 校准品:使用罗氏公司提供的复合校准品对自动

分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和质控

品.SOP文件。

6.3 质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP

文件。

7. 仪器:日立7060生化分析仪

8. 操作步骤

8.1 项目基本参数:参见生化检验日立7060生化分析

仪项目测定参数.SOP文件

8.2 仪器操作步骤:参见生化检验日立7060生化分析

仪操作规程.SOP文件

9. 检验结果的判断与分析

10. 质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水

平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控

警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。

质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。

11. 计算方法:以罗氏复合校准品AST校准值校准仪

器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠

的检测结果。

12. 参考值范围

[4]

女性 <31U/L

男性 <37U/L

13. 临床意义

丙氨酸氨基转移酶(ALT)旧称谷丙转氨酶(GPT),

天门冬氨酸氨基转移酶(AST)旧称谷草转氨酶(GOT)。

它们是氨基转移酶类的典型代表。氨基转移酶催化氨

基从氨基酸转移给-酮酸的反应。

ALT是肝脏的特异性酶,仅在肝胆疾病时显著升

高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌损伤,以及肝

组织损害等都有关。因此同时进行ALT和AST的检测

用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤。AST/ALT比率

可用于肝病的鉴别诊断。比率<1预示中度的肝损伤;

比率>1和严重肝病有关,常见慢性肝病。

14. 线性范围2-800U/L。

15. 超出范围结果处理:本法对AST活力检测的最大

ΔA/min在340、334nm为0.16,在365nm为0.08。

当样品测定值超过上限时,应将样品用9g/L氯化钠溶

液作1+9稀释,重新测定,结果乘以10。

16. 病危报警值的处理:复查后电话通知临床。

2024年6月14日发(作者:边寒雁)

血清天门冬氨酸氨基转移酶测定

1. 实验原理:国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外

连续监测法,酶偶联反应式为:

L-天门冬氨酸+ -酮戊二酸

AST

草酰乙酸

+L-谷氨酸

草酰乙酸+ NADH +H

+NAD+H

2

O

+

+ MDH苹果酸脱氢酶

L-苹果酸

在340nm波长下,监测NADH的氧化速率,即吸光度的

下降速率与AST活性呈正比。

2. 标本:

2.1 病人准备:12小时禁食。

2.2 类型:血清,肝素或EDTA血浆。

3. 标本存放:3天内的活性损失:2~8℃保存:<8%;

15~25℃保存:<10%;标本稳定性:-20℃保存至少可

稳定3个月。

4. 标本运输:常温条件下保存运输。

5. 标本拒收标准:标本溶血、细菌污染的标本。

6. 实验材料

6.1 试剂:欧泰克 AST测定试剂盒

6.1.1 试剂组成

Tris缓冲液 pH7.8 80mmol/L

L-天门冬氨酸 240mmol/L

MDH(苹果酸脱氢酶) ≥600U/L

LDH(乳酸脱氢酶) ≥1200U/L

a-酮戊二酸 12mmol/L

NADH 0.18mmol/L

6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。

6.1.3 试剂稳定性与贮存

试剂保存于2~8℃,若无污染,可稳定至失效期。

试剂不可冰冻。

6.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有

浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,

不能继续使用。

6.1.5 注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95g/L)为防腐

剂。不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的

预防措施使用试剂。

6.2 校准品:使用罗氏公司提供的复合校准品对自动

分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和质控

品.SOP文件。

6.3 质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP

文件。

7. 仪器:日立7060生化分析仪

8. 操作步骤

8.1 项目基本参数:参见生化检验日立7060生化分析

仪项目测定参数.SOP文件

8.2 仪器操作步骤:参见生化检验日立7060生化分析

仪操作规程.SOP文件

9. 检验结果的判断与分析

10. 质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水

平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控

警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。

质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。

11. 计算方法:以罗氏复合校准品AST校准值校准仪

器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠

的检测结果。

12. 参考值范围

[4]

女性 <31U/L

男性 <37U/L

13. 临床意义

丙氨酸氨基转移酶(ALT)旧称谷丙转氨酶(GPT),

天门冬氨酸氨基转移酶(AST)旧称谷草转氨酶(GOT)。

它们是氨基转移酶类的典型代表。氨基转移酶催化氨

基从氨基酸转移给-酮酸的反应。

ALT是肝脏的特异性酶,仅在肝胆疾病时显著升

高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌损伤,以及肝

组织损害等都有关。因此同时进行ALT和AST的检测

用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤。AST/ALT比率

可用于肝病的鉴别诊断。比率<1预示中度的肝损伤;

比率>1和严重肝病有关,常见慢性肝病。

14. 线性范围2-800U/L。

15. 超出范围结果处理:本法对AST活力检测的最大

ΔA/min在340、334nm为0.16,在365nm为0.08。

当样品测定值超过上限时,应将样品用9g/L氯化钠溶

液作1+9稀释,重新测定,结果乘以10。

16. 病危报警值的处理:复查后电话通知临床。

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