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干旱胁迫对小麦的生理生化化指标的影响1
2024年4月11日发(作者:郎萧曼)
干旱胁迫对小麦的生理生化化指标的影响
摘 要:研究干旱胁迫对小麦生理生化指标脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)、过氧化
氢(H2O2)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、谷胱甘肽(GSH)、可溶性糖(WSS)
的含量的影响。结果表明干旱对这些生理生化指标的含量都有影响,经干旱胁迫
后Pro、MDA、H2O2、PPO、GSH、WSS的含量显著升高,且Pro和PPO的含
量升高的幅度极显著。只有POD的含量经干旱胁迫后呈下降趋势。从总体上看,
经胁迫后的小麦抗逆性强于正常生长的小麦。
关键词: 小麦、干旱、Pro、MDA、H2O2、PPO、GSH、WSS、POD
植物体生存在自然环境中,由于自然环境是个变数,其水热条件随时都变化,
对植物多少会产生一些影响。凡是对植物产生伤害的环境都被称为逆境,也称胁
迫。干旱也属于逆境,水分在植物的生命活动中占主导地位,大多数植物遭受干
旱逆境后各个生理过程都会受到不同程度的影响。植物的生长主要是叶的生长,
但Hsico等(1987年)指出,叶的扩展生长对缺水最为敏感,轻微的胁迫就会使其受
到明显限制。扩展生长不论是细胞分裂分化或体积扩大,都同时依赖于水的吸收、
溶质的积累和胞壁的松驰。任何能直接或间接影响三者之一的因素均能影响生
长。当植物受到逆境胁迫时,会采取一定的措施来抵抗不良环境,比如生理生化
指标Pro、MDA、H2O2、PPO、GSH、WSS、POD等发生变化。
小麦是世界上仅次于玉米的第二大粮食作物,也是我国北方主要的粮食作物
之一。世界上约有70%的小麦播种面积分布在干 旱、半干旱农业区。其在生长
过程中,经常会受到干旱的影响,在世界范围内,由于水分所造成的减产,可能
要超过其他因素所导致的产量损失 总和。,干旱胁迫下小麦的生理生化特性差异
被认为是小麦抗旱性差异的内在原因。本次实验是研究吸胀12小时萌发一周后,
干旱处理5天的小麦其生理生化指标含量的变化,这可以为抗旱研究作出一点贡
献。
1 材料和方法
1.1 供应材料。
小麦种子;主要试剂:0.1% HgCl
2
,TTC,3%磺基水杨酸(SSA),冰乙酸,
茚三酮,PBS(pH=7.8) ,0.6%TBA(用0.6% TCA配制), PBS (pH=6.8,内含1mMHA),
0.1%Ti(SO
4
)
2
[用20%(v/v) H
2
SO
4
配制] ,PBS, (pH=5.8,内含0.1mmol/ LEDTA,
1%PVP), POD反应混合液(10 mmol/L愈创木酚,5 mmol/L H
2
O
2
,用PBS溶解),
PPO反应混合液( 20 mmol/L邻苯二酚,用PBS溶解)5%三氯乙酸,PBS (pH=7.7) ,
4 mM DTNB (用0.1M pH=6.8PBS现配)。主要仪器:分光光度仪,离心机,试管,
微量加样器,研钵等。
1.2材料处理。
经发芽率测定,小麦的发芽率是100%。
小麦→ 用0.1% HgCl2消毒10 min后 → 用蒸馏水漂洗干净 → 用蒸馏水于
26℃下吸涨12 h → 播于垫有6层湿润滤纸的带盖白磁盘(24cm×16cm)中 →
于26℃下暗萌发60 h →计算发芽率 → 选取长势一致的玉米幼苗做干旱、高温、
盐渍或低温下处理(去除较矮或较高的玉米幼苗)。
1.3 实验方法。
1.31 Pro的提取步骤和结果。分别取0.1 g实验组(为干旱处理5天)和对
照组(不做干旱处理)的胚芽鞘置于研钵中,加入3 mL 3%磺基水杨酸(SSA)
和少许石英砂充分研磨,再用2 mL 3% SSA洗研钵,置于离心机中,在5000 rpm
下离心10 min ,取上清液,定容至5 mL。测定:取上清液各2 mL ,分别加入
2 mL冰乙酸和2 mL茚三酮试剂再煮沸15 min,冷却后,5000 rpm离心10 min ,
分别测定A
520
。
520总
(mmol.g-1FW)
Pro content =
显
用
表一 Pro正常组和实验组A
520
的
Pro content
AV
V
LWV
Pro content
正常(对照组)
9.95
(
干旱胁迫(实验组)
97.69
(mol.g
-1
FW)
mol.g
-1
FW)
由图表可知,正常组
mol.g
-1
FW)
,而干旱胁迫组的Pro含量为97.69
(mol.g
-1
FW),后
者是前者的9.8倍。由此可见
正常情况下脯氨酸的含量较小,一旦受到干旱胁迫,其含
的Pro汉两为9.95
(
量就会大幅度增加。
1.32 丙二醛(
MDA)提取。分别取0.1 g实验组和对照组(与1.32做相同处理)
置于研钵中,加入3 mL 50mM PBS (pH=7.8)和少许石英砂充分研磨,再用2 mL PBS
洗研钵,置与离心机中,在5000 rpm下离心10 min ,取上清液,定容至5 mL。
测定:分别取上清液各2 mL ,加入0.6%TBA(用0.6% TCA配制) 2 mL,煮沸
12 min,冷却后,5000 rpm离心10 min ,分别测定OD
450
和OD
532
。
表二 正常组和实验组A
450
、A
532
下的WSS、MDA浓度
正常(对照组)
干旱胁迫(实验组)
可溶性糖(WSS) 3.36 mmol/L 16.80 mmol/L
丙二醛(MDA) 0.23823umol/L
1.04755
umol/L
由图表可知,可溶性糖和丙二醛的浓度都是实验组大于对照组,实验组,即受干
2024年4月11日发(作者:郎萧曼)
干旱胁迫对小麦的生理生化化指标的影响
摘 要:研究干旱胁迫对小麦生理生化指标脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)、过氧化
氢(H2O2)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、谷胱甘肽(GSH)、可溶性糖(WSS)
的含量的影响。结果表明干旱对这些生理生化指标的含量都有影响,经干旱胁迫
后Pro、MDA、H2O2、PPO、GSH、WSS的含量显著升高,且Pro和PPO的含
量升高的幅度极显著。只有POD的含量经干旱胁迫后呈下降趋势。从总体上看,
经胁迫后的小麦抗逆性强于正常生长的小麦。
关键词: 小麦、干旱、Pro、MDA、H2O2、PPO、GSH、WSS、POD
植物体生存在自然环境中,由于自然环境是个变数,其水热条件随时都变化,
对植物多少会产生一些影响。凡是对植物产生伤害的环境都被称为逆境,也称胁
迫。干旱也属于逆境,水分在植物的生命活动中占主导地位,大多数植物遭受干
旱逆境后各个生理过程都会受到不同程度的影响。植物的生长主要是叶的生长,
但Hsico等(1987年)指出,叶的扩展生长对缺水最为敏感,轻微的胁迫就会使其受
到明显限制。扩展生长不论是细胞分裂分化或体积扩大,都同时依赖于水的吸收、
溶质的积累和胞壁的松驰。任何能直接或间接影响三者之一的因素均能影响生
长。当植物受到逆境胁迫时,会采取一定的措施来抵抗不良环境,比如生理生化
指标Pro、MDA、H2O2、PPO、GSH、WSS、POD等发生变化。
小麦是世界上仅次于玉米的第二大粮食作物,也是我国北方主要的粮食作物
之一。世界上约有70%的小麦播种面积分布在干 旱、半干旱农业区。其在生长
过程中,经常会受到干旱的影响,在世界范围内,由于水分所造成的减产,可能
要超过其他因素所导致的产量损失 总和。,干旱胁迫下小麦的生理生化特性差异
被认为是小麦抗旱性差异的内在原因。本次实验是研究吸胀12小时萌发一周后,
干旱处理5天的小麦其生理生化指标含量的变化,这可以为抗旱研究作出一点贡
献。
1 材料和方法
1.1 供应材料。
小麦种子;主要试剂:0.1% HgCl
2
,TTC,3%磺基水杨酸(SSA),冰乙酸,
茚三酮,PBS(pH=7.8) ,0.6%TBA(用0.6% TCA配制), PBS (pH=6.8,内含1mMHA),
0.1%Ti(SO
4
)
2
[用20%(v/v) H
2
SO
4
配制] ,PBS, (pH=5.8,内含0.1mmol/ LEDTA,
1%PVP), POD反应混合液(10 mmol/L愈创木酚,5 mmol/L H
2
O
2
,用PBS溶解),
PPO反应混合液( 20 mmol/L邻苯二酚,用PBS溶解)5%三氯乙酸,PBS (pH=7.7) ,
4 mM DTNB (用0.1M pH=6.8PBS现配)。主要仪器:分光光度仪,离心机,试管,
微量加样器,研钵等。
1.2材料处理。
经发芽率测定,小麦的发芽率是100%。
小麦→ 用0.1% HgCl2消毒10 min后 → 用蒸馏水漂洗干净 → 用蒸馏水于
26℃下吸涨12 h → 播于垫有6层湿润滤纸的带盖白磁盘(24cm×16cm)中 →
于26℃下暗萌发60 h →计算发芽率 → 选取长势一致的玉米幼苗做干旱、高温、
盐渍或低温下处理(去除较矮或较高的玉米幼苗)。
1.3 实验方法。
1.31 Pro的提取步骤和结果。分别取0.1 g实验组(为干旱处理5天)和对
照组(不做干旱处理)的胚芽鞘置于研钵中,加入3 mL 3%磺基水杨酸(SSA)
和少许石英砂充分研磨,再用2 mL 3% SSA洗研钵,置于离心机中,在5000 rpm
下离心10 min ,取上清液,定容至5 mL。测定:取上清液各2 mL ,分别加入
2 mL冰乙酸和2 mL茚三酮试剂再煮沸15 min,冷却后,5000 rpm离心10 min ,
分别测定A
520
。
520总
(mmol.g-1FW)
Pro content =
显
用
表一 Pro正常组和实验组A
520
的
Pro content
AV
V
LWV
Pro content
正常(对照组)
9.95
(
干旱胁迫(实验组)
97.69
(mol.g
-1
FW)
mol.g
-1
FW)
由图表可知,正常组
mol.g
-1
FW)
,而干旱胁迫组的Pro含量为97.69
(mol.g
-1
FW),后
者是前者的9.8倍。由此可见
正常情况下脯氨酸的含量较小,一旦受到干旱胁迫,其含
的Pro汉两为9.95
(
量就会大幅度增加。
1.32 丙二醛(
MDA)提取。分别取0.1 g实验组和对照组(与1.32做相同处理)
置于研钵中,加入3 mL 50mM PBS (pH=7.8)和少许石英砂充分研磨,再用2 mL PBS
洗研钵,置与离心机中,在5000 rpm下离心10 min ,取上清液,定容至5 mL。
测定:分别取上清液各2 mL ,加入0.6%TBA(用0.6% TCA配制) 2 mL,煮沸
12 min,冷却后,5000 rpm离心10 min ,分别测定OD
450
和OD
532
。
表二 正常组和实验组A
450
、A
532
下的WSS、MDA浓度
正常(对照组)
干旱胁迫(实验组)
可溶性糖(WSS) 3.36 mmol/L 16.80 mmol/L
丙二醛(MDA) 0.23823umol/L
1.04755
umol/L
由图表可知,可溶性糖和丙二醛的浓度都是实验组大于对照组,实验组,即受干