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SOP标准操作程序-LDH

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2024年4月21日发(作者:宝痴柏)

SOP标准操作程序

LDH 乳酸脱氢酶(货号:OSR6127,OSR6227)

实验原理:

在心肌损伤、肝脏疾病、巨细胞贫血、肺栓塞、恶性脓包、皮肤炭疽、肌营养不良等疾

病中测定LDH(EC 1.1.1.27)。测定LDH并结合测定CK肌酸激酶及同功酶能确诊急性心肌

梗塞。

方法学:

Olympus公司LDH的测定方法采用的是改良Wacker法,反应方向中乳酸转化为丙酮

酸。乳酸与N AD在LDH作用下转化为丙酮酸与NADH。NADH在340nm下有强吸收,但

NAD没有吸收。在340/380nm下测定吸光度的变化可以测定标本中LDH的活性。

LDH

乳酸+NAD-------------﹥丙酮酸+NADH+H

标本:

病人准备:无特殊要求。

类型:无溶血的血清或肝素化的血浆。凝固后尽快分离血清,尽量避免溶血。

标本准备:

各种不同的研究表明,LDH在不同温度下稳定性各不相同。尽管结论各不一致,但比较一

致认为心脏同功酶比肝脏同功酶更加稳定。在任何性情况下,标本收集贮存要有合适的操作

程序使结果一致。最好不要放在冰箱或冰冻,在室温应尽快测定。

仪器与材料:

仪器:奥林巴斯AU640生化分析仪

材料:奥林巴斯AU640乳酸脱氢酶(LDH)

参与反应成份的最终浓度:

AMP缓冲液(PH 8.9) 230 mmol/L

L-乳酸 70 mmol/L

NAD 10 mmol/L

其中含有稳定剂与保护剂。

注意:1.此试剂为体外诊断用。

2.不要入口,吞下有害。保护剂为叠氮钠,与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物,

如果排向下水道请用大量的水冲洗。

试验用试管的直径在12~16mm。

试剂准备:奥林巴斯AU640的LDH试剂是即开即用的。无需特殊准备。

执行参数(性能参数):以下数据是根据奥林巴斯AU640 LDH试剂已经建立的程序。

重复性:重复性的评估是根据NCCLS推荐的典型方法,AU640批内重复性小于3%,总不

精密度小于5%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。

N=100

平均值(U/L)

101

174

417

批 内

SD

0.7

1.3

2.4

精 密 度

CV%

0.7

0.8

0.6

总 精

SD

2.2

3.6

7.5

密 度

CV%

2.2

2.1

1.8

方法学比较:奥林巴斯AU640 LDH(方法1)与其它奥林巴斯分析仪器(方法2),共同做

182个病人标本。相关系数达到0.998,回归方程如下:

LDH方法1=(LDH方法2×1.04)-0.8

病人结果数值分布:48~821U/L

敏感度:在奥林巴斯AU640生化分析仪上每分钟变化0.09毫吸光度为1U/L。

试剂的贮存:1.当保存于2~8℃,不开盖情况下至标签的失效期。

2.开盖后放于仪器中可以稳定30天。

变质指示:当试剂有浊度时,不能继续使用。

校准:

标准液的准备:这个实验不需要标准液。

校准程序:LDH的校准中基于NADH的摩尔消光系数,在340nm为6300。

质控:在每一批标本中都应把奥林巴斯水平I与II质控(DR0061&62)做为未知标本进行

分析。

操作程序(逐步地):

AU640开机

1.认两瓶清洗剂有足够的量。

2.打开蒸馏水供应系统的阀门。

3.如果没有设定自动开机,请按分析仪器上的[POWER ON]键。

4.确认打印机为开机并处于联机状态。

5.在[Start Condition]屏幕,输入所需信息,并按F2退出。

6.如果有需要请进入password。

7.确认仪器上的在线试剂的位置是否正确、数量(体积)是否充足,不足请添加并在系统状

态中的试剂状态检查试剂。

8.在急诊台Wash1的位置的试管中加满一支1N HCL的样品针清洗液。

开始分析:

1.把定标、质控、和标本架放在仪器的Rack Feed上。

2.用鼠标点击在屏幕最上方[开始分析]图标。

3.点击F2退出键退到主屏幕。

分析参数

样品体积 3微升 吐水量 0微升

试剂I体积 80微升 吐水量 0微升

试剂II体积 40微升 吐水量 40微升

波长 340/380 方法 Rate

读点 14/21 温度 37℃

完整的实验参数与操作程序可以在AU640用户手册中查到。

计算:

无需手工计算,结果为在37℃自动以U/L打印。

报告结果:

参考范围: 140~271U/L

2024年4月21日发(作者:宝痴柏)

SOP标准操作程序

LDH 乳酸脱氢酶(货号:OSR6127,OSR6227)

实验原理:

在心肌损伤、肝脏疾病、巨细胞贫血、肺栓塞、恶性脓包、皮肤炭疽、肌营养不良等疾

病中测定LDH(EC 1.1.1.27)。测定LDH并结合测定CK肌酸激酶及同功酶能确诊急性心肌

梗塞。

方法学:

Olympus公司LDH的测定方法采用的是改良Wacker法,反应方向中乳酸转化为丙酮

酸。乳酸与N AD在LDH作用下转化为丙酮酸与NADH。NADH在340nm下有强吸收,但

NAD没有吸收。在340/380nm下测定吸光度的变化可以测定标本中LDH的活性。

LDH

乳酸+NAD-------------﹥丙酮酸+NADH+H

标本:

病人准备:无特殊要求。

类型:无溶血的血清或肝素化的血浆。凝固后尽快分离血清,尽量避免溶血。

标本准备:

各种不同的研究表明,LDH在不同温度下稳定性各不相同。尽管结论各不一致,但比较一

致认为心脏同功酶比肝脏同功酶更加稳定。在任何性情况下,标本收集贮存要有合适的操作

程序使结果一致。最好不要放在冰箱或冰冻,在室温应尽快测定。

仪器与材料:

仪器:奥林巴斯AU640生化分析仪

材料:奥林巴斯AU640乳酸脱氢酶(LDH)

参与反应成份的最终浓度:

AMP缓冲液(PH 8.9) 230 mmol/L

L-乳酸 70 mmol/L

NAD 10 mmol/L

其中含有稳定剂与保护剂。

注意:1.此试剂为体外诊断用。

2.不要入口,吞下有害。保护剂为叠氮钠,与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物,

如果排向下水道请用大量的水冲洗。

试验用试管的直径在12~16mm。

试剂准备:奥林巴斯AU640的LDH试剂是即开即用的。无需特殊准备。

执行参数(性能参数):以下数据是根据奥林巴斯AU640 LDH试剂已经建立的程序。

重复性:重复性的评估是根据NCCLS推荐的典型方法,AU640批内重复性小于3%,总不

精密度小于5%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。

N=100

平均值(U/L)

101

174

417

批 内

SD

0.7

1.3

2.4

精 密 度

CV%

0.7

0.8

0.6

总 精

SD

2.2

3.6

7.5

密 度

CV%

2.2

2.1

1.8

方法学比较:奥林巴斯AU640 LDH(方法1)与其它奥林巴斯分析仪器(方法2),共同做

182个病人标本。相关系数达到0.998,回归方程如下:

LDH方法1=(LDH方法2×1.04)-0.8

病人结果数值分布:48~821U/L

敏感度:在奥林巴斯AU640生化分析仪上每分钟变化0.09毫吸光度为1U/L。

试剂的贮存:1.当保存于2~8℃,不开盖情况下至标签的失效期。

2.开盖后放于仪器中可以稳定30天。

变质指示:当试剂有浊度时,不能继续使用。

校准:

标准液的准备:这个实验不需要标准液。

校准程序:LDH的校准中基于NADH的摩尔消光系数,在340nm为6300。

质控:在每一批标本中都应把奥林巴斯水平I与II质控(DR0061&62)做为未知标本进行

分析。

操作程序(逐步地):

AU640开机

1.认两瓶清洗剂有足够的量。

2.打开蒸馏水供应系统的阀门。

3.如果没有设定自动开机,请按分析仪器上的[POWER ON]键。

4.确认打印机为开机并处于联机状态。

5.在[Start Condition]屏幕,输入所需信息,并按F2退出。

6.如果有需要请进入password。

7.确认仪器上的在线试剂的位置是否正确、数量(体积)是否充足,不足请添加并在系统状

态中的试剂状态检查试剂。

8.在急诊台Wash1的位置的试管中加满一支1N HCL的样品针清洗液。

开始分析:

1.把定标、质控、和标本架放在仪器的Rack Feed上。

2.用鼠标点击在屏幕最上方[开始分析]图标。

3.点击F2退出键退到主屏幕。

分析参数

样品体积 3微升 吐水量 0微升

试剂I体积 80微升 吐水量 0微升

试剂II体积 40微升 吐水量 40微升

波长 340/380 方法 Rate

读点 14/21 温度 37℃

完整的实验参数与操作程序可以在AU640用户手册中查到。

计算:

无需手工计算,结果为在37℃自动以U/L打印。

报告结果:

参考范围: 140~271U/L

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