2024年3月28日发(作者：台依然)
牛支原体武威株脂蛋白P48基因的克隆、原核表达及亚细胞
定位
胡国明;邢小勇;李娜;苏炜德;温峰琴;项海涛;胡永浩;包世俊
【期刊名称】《甘肃农业大学学报》
【年(卷),期】2016(051)002
【摘 要】[目的]验证牛支原体P48蛋白在细胞中的位置,并为后续功能的研究奠定
基础.[方法]运用OverlapPCR扩增获得点突变后的牛支原体武威分离株P48基因,
并将其克隆至pGEM-T Easy,将测序正确的质粒克隆至表达载体pET-28a中,构建
原核表达质粒pET-P48,表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),并在IPTG诱导下成功
获得融合蛋白表达产物rMbP48,大小约为51 ku.重组蛋白纯化后免疫新西兰大白
兔制备多克隆抗体.在分离牛支原体膜蛋白的基础上应用Western-blot及间接
ELISA对P48蛋白在细胞中的分布进行分析.[结果]P48蛋白主要存在于牛支原体
的膜分离相.全菌免疫荧光试验进一步证实脂蛋白P48位于牛支原体的膜表面.[结
论]牛支原体P48蛋白是存在于牛支原体表面的一种具有免疫原性的脂蛋白.本研究
为进一步研究P48蛋白的生物学特性及建立高效的牛支原体诊断方法奠定了基础.
【总页数】7页(P1-7)
【作 者】胡国明;邢小勇;李娜;苏炜德;温峰琴;项海涛;胡永浩;包世俊
【作者单位】甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州 730070;甘肃农业大学动物医学
院,甘肃兰州 730070;甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州 730070;甘肃农业大学动
物医学院,甘肃兰州 730070;甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州 730070;甘肃农业
大学动物医学院,甘肃兰州 730070;甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州 730070;甘
肃农业大学动物医学院,甘肃兰州 730070
【正文语种】中 文
【中图分类】Q7
【相关文献】
1.牛支原体新疆分离株P48基因的克隆、原核表达及重组蛋白免疫原性研究 [J],
张锐;杨铭伟;任静静;朱玲;柳旭伟;剡根强
2.牛支原体pdhc基因的克隆、表达及其亚细胞定位 [J], 张懿;邢小勇;温峰琴;包世
俊
3.牛支原体武威分离株丙酮酸激酶基因的原核表达及其表达产物的功能检测 [J],
包世俊; 冯娜; 邢小勇; 温峰琴; 武小椿
4.牛支原体新疆分离株P48基因克隆及分子特征分析 [J], 凌晨;郝成武;张飞;候凤;
贺笋
5.牛支原体广西分离株P48的原核表达及蛋白纯化研究 [J], 黄清萍;陈芷珊;陀燕
婷;杨松鑫;何斌;潘艳;彭小玉;陈海兰
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2024年3月28日发(作者：台依然)
牛支原体武威株脂蛋白P48基因的克隆、原核表达及亚细胞
定位
胡国明;邢小勇;李娜;苏炜德;温峰琴;项海涛;胡永浩;包世俊
【期刊名称】《甘肃农业大学学报》
【年(卷),期】2016(051)002
【摘 要】[目的]验证牛支原体P48蛋白在细胞中的位置,并为后续功能的研究奠定
基础.[方法]运用OverlapPCR扩增获得点突变后的牛支原体武威分离株P48基因,
并将其克隆至pGEM-T Easy,将测序正确的质粒克隆至表达载体pET-28a中,构建
原核表达质粒pET-P48,表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),并在IPTG诱导下成功
获得融合蛋白表达产物rMbP48,大小约为51 ku.重组蛋白纯化后免疫新西兰大白
兔制备多克隆抗体.在分离牛支原体膜蛋白的基础上应用Western-blot及间接
ELISA对P48蛋白在细胞中的分布进行分析.[结果]P48蛋白主要存在于牛支原体
的膜分离相.全菌免疫荧光试验进一步证实脂蛋白P48位于牛支原体的膜表面.[结
论]牛支原体P48蛋白是存在于牛支原体表面的一种具有免疫原性的脂蛋白.本研究
为进一步研究P48蛋白的生物学特性及建立高效的牛支原体诊断方法奠定了基础.
【总页数】7页(P1-7)
【作 者】胡国明;邢小勇;李娜;苏炜德;温峰琴;项海涛;胡永浩;包世俊
【作者单位】甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州 730070;甘肃农业大学动物医学
院,甘肃兰州 730070;甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州 730070;甘肃农业大学动
物医学院,甘肃兰州 730070;甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州 730070;甘肃农业
大学动物医学院,甘肃兰州 730070;甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州 730070;甘
肃农业大学动物医学院,甘肃兰州 730070
【正文语种】中 文
【中图分类】Q7
【相关文献】
1.牛支原体新疆分离株P48基因的克隆、原核表达及重组蛋白免疫原性研究 [J],
张锐;杨铭伟;任静静;朱玲;柳旭伟;剡根强
2.牛支原体pdhc基因的克隆、表达及其亚细胞定位 [J], 张懿;邢小勇;温峰琴;包世
俊
3.牛支原体武威分离株丙酮酸激酶基因的原核表达及其表达产物的功能检测 [J],
包世俊; 冯娜; 邢小勇; 温峰琴; 武小椿
4.牛支原体新疆分离株P48基因克隆及分子特征分析 [J], 凌晨;郝成武;张飞;候凤;
贺笋
5.牛支原体广西分离株P48的原核表达及蛋白纯化研究 [J], 黄清萍;陈芷珊;陀燕
婷;杨松鑫;何斌;潘艳;彭小玉;陈海兰
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