2024年4月10日发(作者：刘慕)
化妆品中维生素E的检验方法
维生素E 乂称生育酚，多存在于植物组织中，在化学结构上客观存在是6-疑基苯骈二氢毗喃 的衍生物，环上C2都有屮基和坯
链。由于环上的中基位置和数H不同，有—B、丫、§生育酚等。 天然的生育酚都有是D型，而人工合成的为DL型。维生素E油
状物，在无氧条件下对热稳定。游 离的维生素E和它的酯都极易溶于油脂和大多数有机溶剂，不溶于水，有抗氧化剂的作用。
« -生育酚和« -生育酚乙酸酯是维生素E的衍生物。I」前已广泛地用于化妆品中作用抗氧化剂。
（-）薄层色谱定性法
1应用范围
本方法适用于油性沐浴液、护肤霜、香波中a-生育酚和a-生育酚乙酸酯的定性测定。
2原理
样品中a -生育酚和a -生育酚乙酸酯在GF-254薄层板上经展开剂展开分离后，在紫外光下观察， 根据Rf值进行定性。
3试剂
。-生育酚标准溶液：准确称取。-生育酚于10ml棕色容量瓶中，用己烷定容到刻度，储于氮气 下以避免被空气氧化，避光保
存。此溶液lml含 「生育酚。每周配制一次。
。-生育酚乙酸酯标准溶液：准确称取 旷生育酚于10ml棕色容量瓶中，用己烷定容，作为储备 液。每周配制一次。储于氮气
下以避免被空气氧化，避光保存。此溶液每毫升含&-生育酚乙酸酯。
展开剂：环已烷+乙醍（8+2）
4 仪器
硅胶薄层板：含254nm下产生荧光指示剂。
玻璃层析缸： 275X275X75mm （HXWXD）
。
5测定
样品处理
称取定量样品，用数毫升已烷溶解或萃取，离心，取上清液在氮气流下吹气浓缩。此浓缩液作为待 测样品。
薄层定性分析
取5〜10 U1待测样品和标准液（和）分别点样于硅胶薄层板（）上，样点离底端3cm,二样点间 相距1. 5cmo将薄层板置于
内装有环己烷+乙醛（8+2）溶液的玻璃层析缸内。待展开液前沿移动10cm 以后，取出薄层板，自然风干。将薄层板置紫外光（254nm）
下观察。在绿色荧光背景上出现黑色 色斑。比较待测溶液与标准的色斑位置以定性判别（1）。
注解：
（1） a -生育酚的Rf值约为；a -生育酚乙酸酯的Rf值为。
（二）气相色谱法
1应用范围
本法适用于油性沐溶液、护肤霜、香波中a-生育酚和a-生育酚乙酸酯的测定。
2原理
维生素E和它的酯都极易溶于油脂及有机溶剂中，因此，将样品经有机溶剂萃取，或再经过吸附柱 净化后，气相色谱分离定量。
3试剂
a -生育酚：同（一）。
。-生育酚乙酸酯：同（一）o
三十二烷（内标）标准溶液：准确称取三十二烷置于10ml棕色容量瓶中，用已烷定容。此溶液 lml含三十二烷。需每周配制
一次。
己烷；分析纯。
乙瞇：分析纯。
屮醇：分析纯。
4仪器
气相色谱仪：具有氢火焰离子检测器。
氧化铝层析柱：氧化铝层析柱制备方法如下：称取8g 80〜100 口已被检定过的中性氧化铝 （Brockman,活性为1〜3级）与
lml水充分混合，放在密闭容器内平衡过夜。用己烷将此氧化铝 调成浆状，倒入一端填有玻璃棉、并盛有25〜30ml己烷的X30 （cm）
的玻璃柱中，排出己烷，使 液面近于吸附剂水平面，但注意管内液体水平面不可低于氧化铝的顶部，备用。
5分析步骤
样品预处理
5.1.1样品萃取液的制备
护肤霜：准确称取适量样品，使其含VE不少于lmgo用加有2〜3滴盐酸的50ml热水将样品移 入分液漏斗中。用己烷萃取3
次。每次用20ml,合并萃取液。在微氮气流中用蒸汽浴蒸发浓缩。 吸取2〜3 u 1浓缩液注入气相色谱柱以校正稀释度和干扰峰。
萃取液中若含有大量化妆品其他组分 妨碍萃取液充分浓缩而影响维生素E的测定，或有干扰物存在时应将萃取液进一步净化处理（）。
香波：准确称取适量样品，使其含待测化合物的量不少于lmg,用25ml屮醇+水（1+1）将样品 移入分液漏斗中。用乙烷+乙
醯（1+1）萃取5次，每次20mlo合并萃取液，在微弱氮气流中蒸发 至于，用2〜3ml己烷溶解残渣，吸取2〜3 注入气相色谱中，
以校正稀释度和干扰峰。若有干 扰先按对萃取物进行色谱分离；若无干扰，加内标物，使内标物峰高与待测物峰高近于相等（土 10%）,
经预注射试验估算应加入内标物的量。
油性沐浴液：准确称取适量样品，使其含待测化合物的量不少于lmg,用2〜3ml己烷溶解，吸 取2〜3 注入气相色谱柱，以校
验稀释度和干扰峰。若无干扰，加入一份三十二烷内标物，使内 标物峰高与待测物峰高近于相等（±10%）,以预注射试验估算应加
入内标物（或标准物）的量。
萃取液的净化：将萃取液溶于15ml己烷中，定量地移入氧化铝吸附柱，用少量己烷分2〜3次淋 洗，溶剂的表面不能低于氧
化铝顶部，收集30ml己烷洗脱液。如样液中有生育酚，继续用乙醯 洗脱，并收集25ml乙醯洗脱液。Q-生育酚乙酸酯应在己烷洗
出液中，而生育酚则在乙醴洗出 液中。在微弱氮气流下蒸气浴蒸发乙瞇洗岀液至干，然后用2〜3n）l己烷重新溶解，作为待测溶
液。
色谱条件
色谱柱：担体为80~100 U Gas Chrom
Q,
用漏斗涂布法（funnel coating method）涂布 约5%的SE-30,将涂了固定液的担
体装入长3. 048m内径的玻璃柱中，先不通载气283°C下老化一 夜，再通入载气，以10〜20ml / min的流速于285°C老化二天，
提高流速至66ml / min。降低炉温 到200°C,将501H甲硅烷基-8 （Sily-8）注入柱中。
氢火焰离子检测器：检测器温度348°Co进样口温267°C、炉温285°C.氮气流速66ml / min。或 调节衰减使8〜10 Hi a -生
育酚乙酸酯的响应值等于或大于50%满标。
测定
在己烷中加入已知量的待测化合物和内标物，所加入的量要使两种化合物的峰高近于相等（土 10%） o该标准溶液当天用当
天配。将标准溶液和样品溶液交替地注入色谱柱中，每种溶液重复注 射不得少于2次。调整注射体积，使样品和标准物的峰高为满
标的50〜100%,并使两者的峰高在 适当的量程及衰减设置下近于相等。按公式计算样品中维生素E的含量。
6计算
维生素 E 含量（mg）二（Ru/Rs） XKsX （Iu/Is）
式中：Ru——样品中未知物峰高与内标物峰高的比值；
Rs——标准溶液中标准物峰高与内标物峰高比值；
Ks——标准溶液中标准物的毫克数；
Iu——样品中内标物的毫克数；
Is——加到标准液中的内标物的毫克数。
注解：
一些脂性（即油包水型）护肤育商品，含有与维生素E衍生物相同的保留时间的组分，这些组分不 能被吸附色谱除去，可能被
误认为维生素E,因此需要通过其他方法如TLC进一步确证。
2024年4月10日发(作者：刘慕)
化妆品中维生素E的检验方法
维生素E 乂称生育酚，多存在于植物组织中，在化学结构上客观存在是6-疑基苯骈二氢毗喃 的衍生物，环上C2都有屮基和坯
链。由于环上的中基位置和数H不同，有—B、丫、§生育酚等。 天然的生育酚都有是D型，而人工合成的为DL型。维生素E油
状物，在无氧条件下对热稳定。游 离的维生素E和它的酯都极易溶于油脂和大多数有机溶剂，不溶于水，有抗氧化剂的作用。
« -生育酚和« -生育酚乙酸酯是维生素E的衍生物。I」前已广泛地用于化妆品中作用抗氧化剂。
（-）薄层色谱定性法
1应用范围
本方法适用于油性沐浴液、护肤霜、香波中a-生育酚和a-生育酚乙酸酯的定性测定。
2原理
样品中a -生育酚和a -生育酚乙酸酯在GF-254薄层板上经展开剂展开分离后，在紫外光下观察， 根据Rf值进行定性。
3试剂
。-生育酚标准溶液：准确称取。-生育酚于10ml棕色容量瓶中，用己烷定容到刻度，储于氮气 下以避免被空气氧化，避光保
存。此溶液lml含 「生育酚。每周配制一次。
。-生育酚乙酸酯标准溶液：准确称取 旷生育酚于10ml棕色容量瓶中，用己烷定容，作为储备 液。每周配制一次。储于氮气
下以避免被空气氧化，避光保存。此溶液每毫升含&-生育酚乙酸酯。
展开剂：环已烷+乙醍（8+2）
4 仪器
硅胶薄层板：含254nm下产生荧光指示剂。
玻璃层析缸： 275X275X75mm （HXWXD）
。
5测定
样品处理
称取定量样品，用数毫升已烷溶解或萃取，离心，取上清液在氮气流下吹气浓缩。此浓缩液作为待 测样品。
薄层定性分析
取5〜10 U1待测样品和标准液（和）分别点样于硅胶薄层板（）上，样点离底端3cm,二样点间 相距1. 5cmo将薄层板置于
内装有环己烷+乙醛（8+2）溶液的玻璃层析缸内。待展开液前沿移动10cm 以后，取出薄层板，自然风干。将薄层板置紫外光（254nm）
下观察。在绿色荧光背景上出现黑色 色斑。比较待测溶液与标准的色斑位置以定性判别（1）。
注解：
（1） a -生育酚的Rf值约为；a -生育酚乙酸酯的Rf值为。
（二）气相色谱法
1应用范围
本法适用于油性沐溶液、护肤霜、香波中a-生育酚和a-生育酚乙酸酯的测定。
2原理
维生素E和它的酯都极易溶于油脂及有机溶剂中，因此，将样品经有机溶剂萃取，或再经过吸附柱 净化后，气相色谱分离定量。
3试剂
a -生育酚：同（一）。
。-生育酚乙酸酯：同（一）o
三十二烷（内标）标准溶液：准确称取三十二烷置于10ml棕色容量瓶中，用已烷定容。此溶液 lml含三十二烷。需每周配制
一次。
己烷；分析纯。
乙瞇：分析纯。
屮醇：分析纯。
4仪器
气相色谱仪：具有氢火焰离子检测器。
氧化铝层析柱：氧化铝层析柱制备方法如下：称取8g 80〜100 口已被检定过的中性氧化铝 （Brockman,活性为1〜3级）与
lml水充分混合，放在密闭容器内平衡过夜。用己烷将此氧化铝 调成浆状，倒入一端填有玻璃棉、并盛有25〜30ml己烷的X30 （cm）
的玻璃柱中，排出己烷，使 液面近于吸附剂水平面，但注意管内液体水平面不可低于氧化铝的顶部，备用。
5分析步骤
样品预处理
5.1.1样品萃取液的制备
护肤霜：准确称取适量样品，使其含VE不少于lmgo用加有2〜3滴盐酸的50ml热水将样品移 入分液漏斗中。用己烷萃取3
次。每次用20ml,合并萃取液。在微氮气流中用蒸汽浴蒸发浓缩。 吸取2〜3 u 1浓缩液注入气相色谱柱以校正稀释度和干扰峰。
萃取液中若含有大量化妆品其他组分 妨碍萃取液充分浓缩而影响维生素E的测定，或有干扰物存在时应将萃取液进一步净化处理（）。
香波：准确称取适量样品，使其含待测化合物的量不少于lmg,用25ml屮醇+水（1+1）将样品 移入分液漏斗中。用乙烷+乙
醯（1+1）萃取5次，每次20mlo合并萃取液，在微弱氮气流中蒸发 至于，用2〜3ml己烷溶解残渣，吸取2〜3 注入气相色谱中，
以校正稀释度和干扰峰。若有干 扰先按对萃取物进行色谱分离；若无干扰，加内标物，使内标物峰高与待测物峰高近于相等（土 10%）,
经预注射试验估算应加入内标物的量。
油性沐浴液：准确称取适量样品，使其含待测化合物的量不少于lmg,用2〜3ml己烷溶解，吸 取2〜3 注入气相色谱柱，以校
验稀释度和干扰峰。若无干扰，加入一份三十二烷内标物，使内 标物峰高与待测物峰高近于相等（±10%）,以预注射试验估算应加
入内标物（或标准物）的量。
萃取液的净化：将萃取液溶于15ml己烷中，定量地移入氧化铝吸附柱，用少量己烷分2〜3次淋 洗，溶剂的表面不能低于氧
化铝顶部，收集30ml己烷洗脱液。如样液中有生育酚，继续用乙醯 洗脱，并收集25ml乙醯洗脱液。Q-生育酚乙酸酯应在己烷洗
出液中，而生育酚则在乙醴洗出 液中。在微弱氮气流下蒸气浴蒸发乙瞇洗岀液至干，然后用2〜3n）l己烷重新溶解，作为待测溶
液。
色谱条件
色谱柱：担体为80~100 U Gas Chrom
Q,
用漏斗涂布法（funnel coating method）涂布 约5%的SE-30,将涂了固定液的担
体装入长3. 048m内径的玻璃柱中，先不通载气283°C下老化一 夜，再通入载气，以10〜20ml / min的流速于285°C老化二天，
提高流速至66ml / min。降低炉温 到200°C,将501H甲硅烷基-8 （Sily-8）注入柱中。
氢火焰离子检测器：检测器温度348°Co进样口温267°C、炉温285°C.氮气流速66ml / min。或 调节衰减使8〜10 Hi a -生
育酚乙酸酯的响应值等于或大于50%满标。
测定
在己烷中加入已知量的待测化合物和内标物，所加入的量要使两种化合物的峰高近于相等（土 10%） o该标准溶液当天用当
天配。将标准溶液和样品溶液交替地注入色谱柱中，每种溶液重复注 射不得少于2次。调整注射体积，使样品和标准物的峰高为满
标的50〜100%,并使两者的峰高在 适当的量程及衰减设置下近于相等。按公式计算样品中维生素E的含量。
6计算
维生素 E 含量（mg）二（Ru/Rs） XKsX （Iu/Is）
式中：Ru——样品中未知物峰高与内标物峰高的比值；
Rs——标准溶液中标准物峰高与内标物峰高比值；
Ks——标准溶液中标准物的毫克数；
Iu——样品中内标物的毫克数；
Is——加到标准液中的内标物的毫克数。
注解：
一些脂性（即油包水型）护肤育商品，含有与维生素E衍生物相同的保留时间的组分，这些组分不 能被吸附色谱除去，可能被
误认为维生素E,因此需要通过其他方法如TLC进一步确证。