2024年10月8日发(作者:吾魄)
ButylLargeScaleHP层析介质说明书
1.
产品介绍
ButylLargeScaleHP层析介质是蓝晓科技自主研发的一种新型疏水层析介质,是将苯基偶
联到高流速琼脂糖凝胶过滤层析介质上形成的强疏水性层析介质,它利用生物分子表面的疏水
基团与层析介质上的疏水基团相互作用强弱不同进行分离,疏水性强、载量高、流速快,广泛
应用于生物大分子的纯化分离。
2.
性能介绍
产品牌号
外观
种类
基质
配基
粒径d
50v
(μm)
pH稳定性
动态载量Q
B10
(mg/ml)
工作温度
耐压流速
化学稳定性
ButylLargeScaleHP
白色球状凝胶,无臭无味
强疏水填料
LargeScaleHP微球
丁基
~40
3~13(长期),2~14(短期,在位清洗[CIP])
~37(HSA)
4~30℃
Deltacp0.3MPa条件下,>220cm/h,柱床高20cm
1mol/L氢氧化钠;70%乙醇;30%异丙醇;0.5%SDS;10%乙二
醇;6mol/L盐酸胍;8mol/L尿素;3mol/L(NH
4
)
2
SO
4
二醇;6mol/L盐酸胍;8mol/L尿素;3mol/L(NH
4
)
2
SO
4
应用用于生物制药和生物工程下游生物大分子的分离纯化
3.使用方法
3.1装柱
装柱按照标准操作规程操作。必须保证每种材料都处于工作温度,凝胶装柱前需要脱气。
第
1
页共
4
页
3.2平衡
使用2~5倍柱床体积的平衡缓冲溶液平衡柱子,直至流出液的电导和pH同上样缓冲液的
电导和pH完全一致。平衡缓冲液一般是高盐浓度的缓冲液,如0.02~0.05mol/L的PBS中加
1~2.5mol/L(NH
4
)
2
SO
4
等。
3.3上样
(1)样品用平衡液配制,浑浊的样品要离心和过滤以后上样。
(2)一般情况是让目标产品结合在柱子上,用平衡液洗去杂质,再选择一种洗脱液洗下目
标产物。
(3)介质对样品组分吸附的程度取决于样品的疏水性质、流动相的离子强度和温度。盐浓
度大、温度高或样品组分疏水性强,介质对组分吸附牢。
3.4洗脱
采用降低盐浓度使吸附的生物分子被洗脱下来。添加表面活性剂或者有机溶剂可加强洗脱,
最常用的是低盐浓度缓冲液,如0.02~0.05mol/L的PBS。
3.5再生
(1)先用蒸馏水按操作流速冲洗3~5个柱床体积,然后用平衡液清洗3~5个柱床体积。
(2)再生时若有失活蛋白质或脂类物质洗不掉,可用在位清洗法除去。
3.6在位清洗
(1)对于以离子键结合上去的蛋白,可用0.5~1倍柱床体积的2MNaCl去除。
(2)对于沉淀蛋白、疏水性结合的蛋白或脂类,可以先用1倍柱床体积的0.1MNaOH冲
洗,再用平衡缓冲溶液清洗直至pH呈中性。
(3)对强疏水性结合的蛋白、脂类等,用4~10倍柱床体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,
需注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加,否则容易产生气泡。
第
2
页共
4
页
3.7存储
密封保存在4~30℃(保存溶液为20%乙醇)干燥、通风、清洁处,不可冷冻;用过的柱
子保存在4~8℃,20%乙醇溶液中。
3.8运输
运输中避免日晒、雨淋、重压,严禁与有毒、有害物品混运。
4.注意事项
(1)典型的配基和蛋白质结合强度由强到弱的顺序是:苯基(phenyl)、辛基(octyl)、
丁基(butyl)、异丙基(isopropyl)、醚(ether)。如果样品和介质结合紧密,可更换为弱介
质更容易洗脱下来。
(2)在疏水层析中,疏水介质和疏水配基对选择性影响非常大,以下因素的影响也不可忽
视:样品溶解度、纯化规模、所需规模的正确配基。
(3)由于强疏水蛋白质和疏水配基结合非常紧密,因此在筛选疏水介质时,如果样品是强
疏水蛋白质,可从低疏水性介质开始,选择在低盐浓度下得到最高分辨率和载量的介质。
(4)样品与层析介质必须用洗脱缓冲液彻底平衡后,才能进行柱层析。
(5)所装的柱床必须表面平整,无沟流及气泡,否则应重装。
(6)若是大规模纯化和捕获蛋白,采用非连续(间隔式)浓度变化洗脱,可以减少分离时
间和缓冲液用量。
(7)加样及整个洗脱过程中,严防柱面变干。
5.
订货信息
产品牌号货号
A3653302
A3653303
包装规格
25ml
100ml
ButylLargeScaleHP
第
3
页共
4
页
A3653304500ml
A36533051L
A36533065L
A365330710L
生产日期:见标签
使用期限:在适当的贮藏条件下可贮藏5年
注册人名称/生产企业:西安蓝晓科技新材料股份有限公司
注册人住址/生产地址:西安市高新开发区锦业路135号蓝晓科技园
售后服务单位:西安蓝晓科技新材料股份有限公司
邮政编码:710076
联系电话:86-29-81104050
传真:-8254
官方网站:
注册人名称/销售企业:苏州蓝晓生物科技有限公司
注册人地址/销售地址:苏州市区工业园区裕新路108号5楼525室
联系电话:*************
第
4
页共
4
页
2024年10月8日发(作者:吾魄)
ButylLargeScaleHP层析介质说明书
1.
产品介绍
ButylLargeScaleHP层析介质是蓝晓科技自主研发的一种新型疏水层析介质,是将苯基偶
联到高流速琼脂糖凝胶过滤层析介质上形成的强疏水性层析介质,它利用生物分子表面的疏水
基团与层析介质上的疏水基团相互作用强弱不同进行分离,疏水性强、载量高、流速快,广泛
应用于生物大分子的纯化分离。
2.
性能介绍
产品牌号
外观
种类
基质
配基
粒径d
50v
(μm)
pH稳定性
动态载量Q
B10
(mg/ml)
工作温度
耐压流速
化学稳定性
ButylLargeScaleHP
白色球状凝胶,无臭无味
强疏水填料
LargeScaleHP微球
丁基
~40
3~13(长期),2~14(短期,在位清洗[CIP])
~37(HSA)
4~30℃
Deltacp0.3MPa条件下,>220cm/h,柱床高20cm
1mol/L氢氧化钠;70%乙醇;30%异丙醇;0.5%SDS;10%乙二
醇;6mol/L盐酸胍;8mol/L尿素;3mol/L(NH
4
)
2
SO
4
二醇;6mol/L盐酸胍;8mol/L尿素;3mol/L(NH
4
)
2
SO
4
应用用于生物制药和生物工程下游生物大分子的分离纯化
3.使用方法
3.1装柱
装柱按照标准操作规程操作。必须保证每种材料都处于工作温度,凝胶装柱前需要脱气。
第
1
页共
4
页
3.2平衡
使用2~5倍柱床体积的平衡缓冲溶液平衡柱子,直至流出液的电导和pH同上样缓冲液的
电导和pH完全一致。平衡缓冲液一般是高盐浓度的缓冲液,如0.02~0.05mol/L的PBS中加
1~2.5mol/L(NH
4
)
2
SO
4
等。
3.3上样
(1)样品用平衡液配制,浑浊的样品要离心和过滤以后上样。
(2)一般情况是让目标产品结合在柱子上,用平衡液洗去杂质,再选择一种洗脱液洗下目
标产物。
(3)介质对样品组分吸附的程度取决于样品的疏水性质、流动相的离子强度和温度。盐浓
度大、温度高或样品组分疏水性强,介质对组分吸附牢。
3.4洗脱
采用降低盐浓度使吸附的生物分子被洗脱下来。添加表面活性剂或者有机溶剂可加强洗脱,
最常用的是低盐浓度缓冲液,如0.02~0.05mol/L的PBS。
3.5再生
(1)先用蒸馏水按操作流速冲洗3~5个柱床体积,然后用平衡液清洗3~5个柱床体积。
(2)再生时若有失活蛋白质或脂类物质洗不掉,可用在位清洗法除去。
3.6在位清洗
(1)对于以离子键结合上去的蛋白,可用0.5~1倍柱床体积的2MNaCl去除。
(2)对于沉淀蛋白、疏水性结合的蛋白或脂类,可以先用1倍柱床体积的0.1MNaOH冲
洗,再用平衡缓冲溶液清洗直至pH呈中性。
(3)对强疏水性结合的蛋白、脂类等,用4~10倍柱床体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,
需注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加,否则容易产生气泡。
第
2
页共
4
页
3.7存储
密封保存在4~30℃(保存溶液为20%乙醇)干燥、通风、清洁处,不可冷冻;用过的柱
子保存在4~8℃,20%乙醇溶液中。
3.8运输
运输中避免日晒、雨淋、重压,严禁与有毒、有害物品混运。
4.注意事项
(1)典型的配基和蛋白质结合强度由强到弱的顺序是:苯基(phenyl)、辛基(octyl)、
丁基(butyl)、异丙基(isopropyl)、醚(ether)。如果样品和介质结合紧密,可更换为弱介
质更容易洗脱下来。
(2)在疏水层析中,疏水介质和疏水配基对选择性影响非常大,以下因素的影响也不可忽
视:样品溶解度、纯化规模、所需规模的正确配基。
(3)由于强疏水蛋白质和疏水配基结合非常紧密,因此在筛选疏水介质时,如果样品是强
疏水蛋白质,可从低疏水性介质开始,选择在低盐浓度下得到最高分辨率和载量的介质。
(4)样品与层析介质必须用洗脱缓冲液彻底平衡后,才能进行柱层析。
(5)所装的柱床必须表面平整,无沟流及气泡,否则应重装。
(6)若是大规模纯化和捕获蛋白,采用非连续(间隔式)浓度变化洗脱,可以减少分离时
间和缓冲液用量。
(7)加样及整个洗脱过程中,严防柱面变干。
5.
订货信息
产品牌号货号
A3653302
A3653303
包装规格
25ml
100ml
ButylLargeScaleHP
第
3
页共
4
页
A3653304500ml
A36533051L
A36533065L
A365330710L
生产日期:见标签
使用期限:在适当的贮藏条件下可贮藏5年
注册人名称/生产企业:西安蓝晓科技新材料股份有限公司
注册人住址/生产地址:西安市高新开发区锦业路135号蓝晓科技园
售后服务单位:西安蓝晓科技新材料股份有限公司
邮政编码:710076
联系电话:86-29-81104050
传真:-8254
官方网站:
注册人名称/销售企业:苏州蓝晓生物科技有限公司
注册人地址/销售地址:苏州市区工业园区裕新路108号5楼525室
联系电话:*************
第
4
页共
4
页