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Butyl Large Scale HP 层析介质说明书

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2024年10月8日发(作者:吾魄)

ButylLargeScaleHP层析介质说明书

1.

产品介绍

ButylLargeScaleHP层析介质是蓝晓科技自主研发的一种新型疏水层析介质,是将苯基偶

联到高流速琼脂糖凝胶过滤层析介质上形成的强疏水性层析介质,它利用生物分子表面的疏水

基团与层析介质上的疏水基团相互作用强弱不同进行分离,疏水性强、载量高、流速快,广泛

应用于生物大分子的纯化分离。

2.

性能介绍

产品牌号

外观

种类

基质

配基

粒径d

50v

(μm)

pH稳定性

动态载量Q

B10

(mg/ml)

工作温度

耐压流速

化学稳定性

ButylLargeScaleHP

白色球状凝胶,无臭无味

强疏水填料

LargeScaleHP微球

丁基

~40

3~13(长期),2~14(短期,在位清洗[CIP])

~37(HSA)

4~30℃

Deltacp0.3MPa条件下,>220cm/h,柱床高20cm

1mol/L氢氧化钠;70%乙醇;30%异丙醇;0.5%SDS;10%乙二

醇;6mol/L盐酸胍;8mol/L尿素;3mol/L(NH

4

2

SO

4

二醇;6mol/L盐酸胍;8mol/L尿素;3mol/L(NH

4

2

SO

4

应用用于生物制药和生物工程下游生物大分子的分离纯化

3.使用方法

3.1装柱

装柱按照标准操作规程操作。必须保证每种材料都处于工作温度,凝胶装柱前需要脱气。

1

页共

4

3.2平衡

使用2~5倍柱床体积的平衡缓冲溶液平衡柱子,直至流出液的电导和pH同上样缓冲液的

电导和pH完全一致。平衡缓冲液一般是高盐浓度的缓冲液,如0.02~0.05mol/L的PBS中加

1~2.5mol/L(NH

4

2

SO

4

等。

3.3上样

(1)样品用平衡液配制,浑浊的样品要离心和过滤以后上样。

(2)一般情况是让目标产品结合在柱子上,用平衡液洗去杂质,再选择一种洗脱液洗下目

标产物。

(3)介质对样品组分吸附的程度取决于样品的疏水性质、流动相的离子强度和温度。盐浓

度大、温度高或样品组分疏水性强,介质对组分吸附牢。

3.4洗脱

采用降低盐浓度使吸附的生物分子被洗脱下来。添加表面活性剂或者有机溶剂可加强洗脱,

最常用的是低盐浓度缓冲液,如0.02~0.05mol/L的PBS。

3.5再生

(1)先用蒸馏水按操作流速冲洗3~5个柱床体积,然后用平衡液清洗3~5个柱床体积。

(2)再生时若有失活蛋白质或脂类物质洗不掉,可用在位清洗法除去。

3.6在位清洗

(1)对于以离子键结合上去的蛋白,可用0.5~1倍柱床体积的2MNaCl去除。

(2)对于沉淀蛋白、疏水性结合的蛋白或脂类,可以先用1倍柱床体积的0.1MNaOH冲

洗,再用平衡缓冲溶液清洗直至pH呈中性。

(3)对强疏水性结合的蛋白、脂类等,用4~10倍柱床体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,

需注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加,否则容易产生气泡。

2

页共

4

3.7存储

密封保存在4~30℃(保存溶液为20%乙醇)干燥、通风、清洁处,不可冷冻;用过的柱

子保存在4~8℃,20%乙醇溶液中。

3.8运输

运输中避免日晒、雨淋、重压,严禁与有毒、有害物品混运。

4.注意事项

(1)典型的配基和蛋白质结合强度由强到弱的顺序是:苯基(phenyl)、辛基(octyl)、

丁基(butyl)、异丙基(isopropyl)、醚(ether)。如果样品和介质结合紧密,可更换为弱介

质更容易洗脱下来。

(2)在疏水层析中,疏水介质和疏水配基对选择性影响非常大,以下因素的影响也不可忽

视:样品溶解度、纯化规模、所需规模的正确配基。

(3)由于强疏水蛋白质和疏水配基结合非常紧密,因此在筛选疏水介质时,如果样品是强

疏水蛋白质,可从低疏水性介质开始,选择在低盐浓度下得到最高分辨率和载量的介质。

(4)样品与层析介质必须用洗脱缓冲液彻底平衡后,才能进行柱层析。

(5)所装的柱床必须表面平整,无沟流及气泡,否则应重装。

(6)若是大规模纯化和捕获蛋白,采用非连续(间隔式)浓度变化洗脱,可以减少分离时

间和缓冲液用量。

(7)加样及整个洗脱过程中,严防柱面变干。

5.

订货信息

产品牌号货号

A3653302

A3653303

包装规格

25ml

100ml

ButylLargeScaleHP

3

页共

4

A3653304500ml

A36533051L

A36533065L

A365330710L

生产日期:见标签

使用期限:在适当的贮藏条件下可贮藏5年

注册人名称/生产企业:西安蓝晓科技新材料股份有限公司

注册人住址/生产地址:西安市高新开发区锦业路135号蓝晓科技园

售后服务单位:西安蓝晓科技新材料股份有限公司

邮政编码:710076

联系电话:86-29-81104050

传真:-8254

官方网站:

注册人名称/销售企业:苏州蓝晓生物科技有限公司

注册人地址/销售地址:苏州市区工业园区裕新路108号5楼525室

联系电话:*************

4

页共

4

2024年10月8日发(作者:吾魄)

ButylLargeScaleHP层析介质说明书

1.

产品介绍

ButylLargeScaleHP层析介质是蓝晓科技自主研发的一种新型疏水层析介质,是将苯基偶

联到高流速琼脂糖凝胶过滤层析介质上形成的强疏水性层析介质,它利用生物分子表面的疏水

基团与层析介质上的疏水基团相互作用强弱不同进行分离,疏水性强、载量高、流速快,广泛

应用于生物大分子的纯化分离。

2.

性能介绍

产品牌号

外观

种类

基质

配基

粒径d

50v

(μm)

pH稳定性

动态载量Q

B10

(mg/ml)

工作温度

耐压流速

化学稳定性

ButylLargeScaleHP

白色球状凝胶,无臭无味

强疏水填料

LargeScaleHP微球

丁基

~40

3~13(长期),2~14(短期,在位清洗[CIP])

~37(HSA)

4~30℃

Deltacp0.3MPa条件下,>220cm/h,柱床高20cm

1mol/L氢氧化钠;70%乙醇;30%异丙醇;0.5%SDS;10%乙二

醇;6mol/L盐酸胍;8mol/L尿素;3mol/L(NH

4

2

SO

4

二醇;6mol/L盐酸胍;8mol/L尿素;3mol/L(NH

4

2

SO

4

应用用于生物制药和生物工程下游生物大分子的分离纯化

3.使用方法

3.1装柱

装柱按照标准操作规程操作。必须保证每种材料都处于工作温度,凝胶装柱前需要脱气。

1

页共

4

3.2平衡

使用2~5倍柱床体积的平衡缓冲溶液平衡柱子,直至流出液的电导和pH同上样缓冲液的

电导和pH完全一致。平衡缓冲液一般是高盐浓度的缓冲液,如0.02~0.05mol/L的PBS中加

1~2.5mol/L(NH

4

2

SO

4

等。

3.3上样

(1)样品用平衡液配制,浑浊的样品要离心和过滤以后上样。

(2)一般情况是让目标产品结合在柱子上,用平衡液洗去杂质,再选择一种洗脱液洗下目

标产物。

(3)介质对样品组分吸附的程度取决于样品的疏水性质、流动相的离子强度和温度。盐浓

度大、温度高或样品组分疏水性强,介质对组分吸附牢。

3.4洗脱

采用降低盐浓度使吸附的生物分子被洗脱下来。添加表面活性剂或者有机溶剂可加强洗脱,

最常用的是低盐浓度缓冲液,如0.02~0.05mol/L的PBS。

3.5再生

(1)先用蒸馏水按操作流速冲洗3~5个柱床体积,然后用平衡液清洗3~5个柱床体积。

(2)再生时若有失活蛋白质或脂类物质洗不掉,可用在位清洗法除去。

3.6在位清洗

(1)对于以离子键结合上去的蛋白,可用0.5~1倍柱床体积的2MNaCl去除。

(2)对于沉淀蛋白、疏水性结合的蛋白或脂类,可以先用1倍柱床体积的0.1MNaOH冲

洗,再用平衡缓冲溶液清洗直至pH呈中性。

(3)对强疏水性结合的蛋白、脂类等,用4~10倍柱床体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,

需注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加,否则容易产生气泡。

2

页共

4

3.7存储

密封保存在4~30℃(保存溶液为20%乙醇)干燥、通风、清洁处,不可冷冻;用过的柱

子保存在4~8℃,20%乙醇溶液中。

3.8运输

运输中避免日晒、雨淋、重压,严禁与有毒、有害物品混运。

4.注意事项

(1)典型的配基和蛋白质结合强度由强到弱的顺序是:苯基(phenyl)、辛基(octyl)、

丁基(butyl)、异丙基(isopropyl)、醚(ether)。如果样品和介质结合紧密,可更换为弱介

质更容易洗脱下来。

(2)在疏水层析中,疏水介质和疏水配基对选择性影响非常大,以下因素的影响也不可忽

视:样品溶解度、纯化规模、所需规模的正确配基。

(3)由于强疏水蛋白质和疏水配基结合非常紧密,因此在筛选疏水介质时,如果样品是强

疏水蛋白质,可从低疏水性介质开始,选择在低盐浓度下得到最高分辨率和载量的介质。

(4)样品与层析介质必须用洗脱缓冲液彻底平衡后,才能进行柱层析。

(5)所装的柱床必须表面平整,无沟流及气泡,否则应重装。

(6)若是大规模纯化和捕获蛋白,采用非连续(间隔式)浓度变化洗脱,可以减少分离时

间和缓冲液用量。

(7)加样及整个洗脱过程中,严防柱面变干。

5.

订货信息

产品牌号货号

A3653302

A3653303

包装规格

25ml

100ml

ButylLargeScaleHP

3

页共

4

A3653304500ml

A36533051L

A36533065L

A365330710L

生产日期:见标签

使用期限:在适当的贮藏条件下可贮藏5年

注册人名称/生产企业:西安蓝晓科技新材料股份有限公司

注册人住址/生产地址:西安市高新开发区锦业路135号蓝晓科技园

售后服务单位:西安蓝晓科技新材料股份有限公司

邮政编码:710076

联系电话:86-29-81104050

传真:-8254

官方网站:

注册人名称/销售企业:苏州蓝晓生物科技有限公司

注册人地址/销售地址:苏州市区工业园区裕新路108号5楼525室

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