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胶原酶Ⅱ使用说明

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2024年4月22日发(作者:环芫华)

胶原酶Ⅱ使用说明

货号:C8150

保存:-20°C,至少1年。

溶解性:

胶原酶Ⅱ可以用TESCAbuffer(50mMTES,0.36mM氯化钙,pH7.4,37°C)配制成1-2

mg/ml。也可以用含钙镁的PBS、含钙镁的hanks或不含血清的培养基配制。配完后分装,

避免反复冻融。

酶活定义:

1个胶原消化单位(CDU):在pH7.4,37℃以及钙离子存在的条件下,以每5小时从胶原

中释放的多肽相当于茚三酮显色1微摩尔亮氨酸量为一个活性单位。

1FALGPA单位:在pH7.5、25℃以及钙离子存在的条件下,一个FALGPA水解单位每分钟

可水解1.0μmol呋喃基丙烯酰基-Leu-Gly-Pro-Ala。

产品说明:

胶原酶Ⅱ为粗品,用于分离脂肪细胞,也可以用于分离各种组织、肿瘤,尤其是上皮组织。

外观为黑棕色粉末。分子量68,000到125,000,最适PH为6.3-8.8。胶原酶能够特异性结合

-R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-序列中的中性氨基酸(X)和甘氨酸之间的肽键。该粗品是溶组织梭

菌分泌的混合酶。主要为胶原酶、中性蛋白酶和梭菌蛋白酶。其中梭菌蛋白酶是被氧化的、

最不活泼的酶,组织的分离必须依靠胶原酶和中性蛋白酶两者共同作用。

激活剂:Ca,每摩尔酶需要4g钙离子激活。

抑制剂:EGTA、还原性谷胱甘肽、β-巯基乙醇、巯基乙酸钠、8-羟基喹啉、2,2'-联吡啶等。

底物:不同类型的胶原是其天然底物,而一些合成的多肽也可以作为其底物,比如:

N-CBZ-gly-pro-gly-gly-pro-ala(Km=0.71mM)、N-CBZ-gly-pro-leu-gly-pro、

N-(3-(2-furyl)acryloyl)-leu-gly-pro-ala(FALGPA)、4-Phenylazo

benzyloxycarbonyl-pro-leu-gly-pro-D-arg、N-2,4-Dinitrophenyl-

2+

pro-gln-gly-ile-ala-gly-gln-D-arg。除此之外

N-Succinyl-gly-pro-leu-glypro7-amido-4-methylcoumarin是类胶原酶的肽酶的底物。

N-(2,4-Dinitrophenyl)-proleu-gly-leu-trp-ala-D-arg氨基酸化合物是脊椎动物胶原酶

的底物。

2024年4月22日发(作者:环芫华)

胶原酶Ⅱ使用说明

货号:C8150

保存:-20°C,至少1年。

溶解性:

胶原酶Ⅱ可以用TESCAbuffer(50mMTES,0.36mM氯化钙,pH7.4,37°C)配制成1-2

mg/ml。也可以用含钙镁的PBS、含钙镁的hanks或不含血清的培养基配制。配完后分装,

避免反复冻融。

酶活定义:

1个胶原消化单位(CDU):在pH7.4,37℃以及钙离子存在的条件下,以每5小时从胶原

中释放的多肽相当于茚三酮显色1微摩尔亮氨酸量为一个活性单位。

1FALGPA单位:在pH7.5、25℃以及钙离子存在的条件下,一个FALGPA水解单位每分钟

可水解1.0μmol呋喃基丙烯酰基-Leu-Gly-Pro-Ala。

产品说明:

胶原酶Ⅱ为粗品,用于分离脂肪细胞,也可以用于分离各种组织、肿瘤,尤其是上皮组织。

外观为黑棕色粉末。分子量68,000到125,000,最适PH为6.3-8.8。胶原酶能够特异性结合

-R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-序列中的中性氨基酸(X)和甘氨酸之间的肽键。该粗品是溶组织梭

菌分泌的混合酶。主要为胶原酶、中性蛋白酶和梭菌蛋白酶。其中梭菌蛋白酶是被氧化的、

最不活泼的酶,组织的分离必须依靠胶原酶和中性蛋白酶两者共同作用。

激活剂:Ca,每摩尔酶需要4g钙离子激活。

抑制剂:EGTA、还原性谷胱甘肽、β-巯基乙醇、巯基乙酸钠、8-羟基喹啉、2,2'-联吡啶等。

底物:不同类型的胶原是其天然底物,而一些合成的多肽也可以作为其底物,比如:

N-CBZ-gly-pro-gly-gly-pro-ala(Km=0.71mM)、N-CBZ-gly-pro-leu-gly-pro、

N-(3-(2-furyl)acryloyl)-leu-gly-pro-ala(FALGPA)、4-Phenylazo

benzyloxycarbonyl-pro-leu-gly-pro-D-arg、N-2,4-Dinitrophenyl-

2+

pro-gln-gly-ile-ala-gly-gln-D-arg。除此之外

N-Succinyl-gly-pro-leu-glypro7-amido-4-methylcoumarin是类胶原酶的肽酶的底物。

N-(2,4-Dinitrophenyl)-proleu-gly-leu-trp-ala-D-arg氨基酸化合物是脊椎动物胶原酶

的底物。

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