2024年4月26日发(作者：却华灿)
高效液相色谱－电化学检测法测定人尿液中的
５－羟基吲哚乙酸和高香草酸＊
唐琴梅
（中国科学院上海药物研究所上海２０００３１）
提要报道用反相高效液相色谱－电化学检测法同时测定人尿液中的５－羟基吲哚乙酸（５－ＨＩＡＡ）和高香草酸
（ＨＶＡ方法简便、快速、灵敏，尿样酸化后离心经稀释直接用于高效液相色谱ＨＰＬＣ）分析。尿液中５－ＨＩＡＡ和
ＨＶＡ的浓度在．１２５２０ｇ／ｍＬ之间，回收率线性关系良好。测定了正常人和接触锰人群组尿液中的５－ＨＩＡＡ
和ＨＶＡ。
关键词反相高效液相色谱法，电化学检测。人尿，５－羟基吲哚乙酸，高香草酸
１前言
尿液，记录体积，取５ｍＬ尿液用６ｍｏｌ／Ｌ盐酸酸化至
尿液中儿茶酚胺和５－羟基色胺（５－ＨＴ）的酸性
ｐＨ３。以普通台式离心机离心，取上清尿液３ｍＬ于
代谢产物的测定常用溶剂提取法［１］或小柱［２４］进行－３０贮存备用。测定前解冻后于台式冷冻离心机
样品预处理，费时且成本高。Ｅｌｒｏｄ等［５］报道了直接
４５０００ｇ离心２０ｍｉｎ，取上清尿液１００Ｌ，用
测定稀释人尿液中的５－ＨＩＡＡ。本文探讨了同时测９００Ｌ超纯水稀释，取０５０Ｌ用于ＨＰＬＣ分析。
定人尿液中５－ＨＩＡＡ和ＨＶＡ的色谱条件，用该方
法测定了正常人和接触锰人群组１２小时尿液中的
３结果和讨论
５－ＨＩＡＡ和ＨＶＡ。
３．１色谱条件的优化
２实验部分
３．１．１电化学检测器工作电位对５－ＨＩＡＡＨＶＡ
及尿液中杂峰电化学响应的影响
２．１仪器和试剂
电化学检测器工作电位依次从６０Ｖ，０．６５Ｖ
Ｗａｔｅｒｓ Ｍ６０００ Ａ泵，Ｕ６Ｋ进样阀，ＬＣ－４Ｂ／１７
增至０．７０Ｖ时，尿液中的杂峰相应增加，５－ＨＩＡＡ的
型电化学检测器（Ｂｉｏａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｓｙｓｔｅｍ ＩＮＣ）及岛津
响应几乎不变。而ＨＶＡ由０．６０Ｖ增至．６５Ｖ时响
Ｃ－Ｒ３Ａ数据处理仪。５－ＨＩＡＡ为Ｆｌｕｋａ产品，ＨＶＡ
应增加了６０％，电位增至０．７０Ｖ时其响应仅增加
为Ｅ．Ｍｅｒｃｋ产品，其余为国产分析纯试剂，水为超
１０。为了减少杂峰的干扰及保持一定的灵敏度，工
纯水。
作电位选择了．６５Ｖ。
２．２色谱条件
３．１．２缓冲液ｐＨ及甲醇浓度对５－ＨＩＡＡ，ＨＶＡ及
色谱柱：预柱Ａｌｌｔｅｃｈ填料Ｃ１８
2024年4月26日发(作者：却华灿)
高效液相色谱－电化学检测法测定人尿液中的
５－羟基吲哚乙酸和高香草酸＊
唐琴梅
（中国科学院上海药物研究所上海２０００３１）
提要报道用反相高效液相色谱－电化学检测法同时测定人尿液中的５－羟基吲哚乙酸（５－ＨＩＡＡ）和高香草酸
（ＨＶＡ方法简便、快速、灵敏，尿样酸化后离心经稀释直接用于高效液相色谱ＨＰＬＣ）分析。尿液中５－ＨＩＡＡ和
ＨＶＡ的浓度在．１２５２０ｇ／ｍＬ之间，回收率线性关系良好。测定了正常人和接触锰人群组尿液中的５－ＨＩＡＡ
和ＨＶＡ。
关键词反相高效液相色谱法，电化学检测。人尿，５－羟基吲哚乙酸，高香草酸
１前言
尿液，记录体积，取５ｍＬ尿液用６ｍｏｌ／Ｌ盐酸酸化至
尿液中儿茶酚胺和５－羟基色胺（５－ＨＴ）的酸性
ｐＨ３。以普通台式离心机离心，取上清尿液３ｍＬ于
代谢产物的测定常用溶剂提取法［１］或小柱［２４］进行－３０贮存备用。测定前解冻后于台式冷冻离心机
样品预处理，费时且成本高。Ｅｌｒｏｄ等［５］报道了直接
４５０００ｇ离心２０ｍｉｎ，取上清尿液１００Ｌ，用
测定稀释人尿液中的５－ＨＩＡＡ。本文探讨了同时测９００Ｌ超纯水稀释，取０５０Ｌ用于ＨＰＬＣ分析。
定人尿液中５－ＨＩＡＡ和ＨＶＡ的色谱条件，用该方
法测定了正常人和接触锰人群组１２小时尿液中的
３结果和讨论
５－ＨＩＡＡ和ＨＶＡ。
３．１色谱条件的优化
２实验部分
３．１．１电化学检测器工作电位对５－ＨＩＡＡＨＶＡ
及尿液中杂峰电化学响应的影响
２．１仪器和试剂
电化学检测器工作电位依次从６０Ｖ，０．６５Ｖ
Ｗａｔｅｒｓ Ｍ６０００ Ａ泵，Ｕ６Ｋ进样阀，ＬＣ－４Ｂ／１７
增至０．７０Ｖ时，尿液中的杂峰相应增加，５－ＨＩＡＡ的
型电化学检测器（Ｂｉｏａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｓｙｓｔｅｍ ＩＮＣ）及岛津
响应几乎不变。而ＨＶＡ由０．６０Ｖ增至．６５Ｖ时响
Ｃ－Ｒ３Ａ数据处理仪。５－ＨＩＡＡ为Ｆｌｕｋａ产品，ＨＶＡ
应增加了６０％，电位增至０．７０Ｖ时其响应仅增加
为Ｅ．Ｍｅｒｃｋ产品，其余为国产分析纯试剂，水为超
１０。为了减少杂峰的干扰及保持一定的灵敏度，工
纯水。
作电位选择了．６５Ｖ。
２．２色谱条件
３．１．２缓冲液ｐＨ及甲醇浓度对５－ＨＩＡＡ，ＨＶＡ及
色谱柱：预柱Ａｌｌｔｅｃｈ填料Ｃ１８