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费氏中华根瘤菌内源质粒的不相容性及其在质粒消除中的应用

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2024年6月1日发(作者:从静雅)

费氏中华根瘤菌内源质粒的不相容性及其在质粒消除中的

应用

41 卷 4 期 Vol . 41 No . 4 微生物学报 2001 年 8 月 Acta

Microbiologica Si nica August 2001

费氏中华根瘤菌内源质粒的不相容性

3及其在质粒消除中的应用

33 缪礼鸿 周俊初

( )农业部农业微生物重点实验室 华中农业大学 武汉 430070

( ) 摘 要 :用 Tn52Mob2sacB 转座子标记费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium f

redii HN01 和 WWG18 的 内源质粒 ;在含有 10 %蔗糖的 TY 培养基上进行了质粒

消除试验以鉴定其功能 。将 HN01 的 标记共生质粒 pSymHN01b 转入费氏中华根

瘤菌 WWG18SR 和 C361SR 中 ,质粒快速检测 、质粒 消除和植物盆栽结瘤试验结

果证明 : HN01 的共生质粒与 WWG18SR 的共生质粒具有不相容 性 ,但能与其非共

生质粒相容 。相反 , HN01 的共生质粒可与 C361SR 的共生质粒相容 ,但与其 中

一个非共生质粒具有不相容性 。利用费氏中华根瘤菌不同菌株质粒间的不相容性 ,

本研究 成功地消除了 WWG18SR 的共生质粒和 C361SR 的一个非共生质粒 。

关键词 :费氏中华根瘤菌 , 质粒 , 不相容性

() 文章编号 :000126209 28 中图分类号 :Q939. 11 文献标识

码 :A

快生根瘤菌一般含有一到多个内源大质粒 ,其与豆科植物共生结瘤 、固氮有

关的基因 1 ,2 () 多定位于一个称为共生质粒 pSym的大质粒上;其余为非共生质

粒 。鉴定根瘤菌质粒

功能的方法主要是消除该质粒和将其转移到其他菌株中去以考察其性状的改

变 。由于大

多数根瘤菌质粒十分稳定且难于消除 ,并且只有极少数质粒具有自我转移功

能 ,所以迄今

有关根瘤菌非共生质粒的功能所知甚少 。已有的研究结果表明 ,根瘤菌的某

些非共生质

3 ,7 粒与菌株的结瘤竞争能力 、固氮效率 、胞外多糖产生以及对抗生素降

解等有关。 某些根瘤菌的内源质粒 ,包括共生质粒和非共生质粒可以在不同种属

的根瘤菌之间 、

8 ,13 根瘤菌与土壤杆菌之间以一定的频率进行自我转移或诱动转移与表达,

一些研究者

14 已经观察到不同根瘤菌质粒之间的不亲和性现象。根瘤菌与土壤杆菌质粒

之间的不

15 相容特性已被用来消除土壤杆菌的某些用常规方法难已消除的内源质粒。

本文报道了 3 株费氏中华根瘤菌质粒间的不相容性及在质粒消除研究中的应

用 。

1 材料和方法

1. 1 材料

() 1. 1. 1 菌株及质粒 见表 1。

1. 1. 2 培养基与培养条件 :大肠杆菌用 LB 培养基 、于 37 ?下培养 ;根瘤

菌和土壤杆菌用

TY 培养基 、于 28 ?下培养 ;根瘤菌菌落形态比较用 YMA 培养基 ; 根瘤菌

蔗糖敏感性验证

2024年6月1日发(作者:从静雅)

费氏中华根瘤菌内源质粒的不相容性及其在质粒消除中的

应用

41 卷 4 期 Vol . 41 No . 4 微生物学报 2001 年 8 月 Acta

Microbiologica Si nica August 2001

费氏中华根瘤菌内源质粒的不相容性

3及其在质粒消除中的应用

33 缪礼鸿 周俊初

( )农业部农业微生物重点实验室 华中农业大学 武汉 430070

( ) 摘 要 :用 Tn52Mob2sacB 转座子标记费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium f

redii HN01 和 WWG18 的 内源质粒 ;在含有 10 %蔗糖的 TY 培养基上进行了质粒

消除试验以鉴定其功能 。将 HN01 的 标记共生质粒 pSymHN01b 转入费氏中华根

瘤菌 WWG18SR 和 C361SR 中 ,质粒快速检测 、质粒 消除和植物盆栽结瘤试验结

果证明 : HN01 的共生质粒与 WWG18SR 的共生质粒具有不相容 性 ,但能与其非共

生质粒相容 。相反 , HN01 的共生质粒可与 C361SR 的共生质粒相容 ,但与其 中

一个非共生质粒具有不相容性 。利用费氏中华根瘤菌不同菌株质粒间的不相容性 ,

本研究 成功地消除了 WWG18SR 的共生质粒和 C361SR 的一个非共生质粒 。

关键词 :费氏中华根瘤菌 , 质粒 , 不相容性

() 文章编号 :000126209 28 中图分类号 :Q939. 11 文献标识

码 :A

快生根瘤菌一般含有一到多个内源大质粒 ,其与豆科植物共生结瘤 、固氮有

关的基因 1 ,2 () 多定位于一个称为共生质粒 pSym的大质粒上;其余为非共生质

粒 。鉴定根瘤菌质粒

功能的方法主要是消除该质粒和将其转移到其他菌株中去以考察其性状的改

变 。由于大

多数根瘤菌质粒十分稳定且难于消除 ,并且只有极少数质粒具有自我转移功

能 ,所以迄今

有关根瘤菌非共生质粒的功能所知甚少 。已有的研究结果表明 ,根瘤菌的某

些非共生质

3 ,7 粒与菌株的结瘤竞争能力 、固氮效率 、胞外多糖产生以及对抗生素降

解等有关。 某些根瘤菌的内源质粒 ,包括共生质粒和非共生质粒可以在不同种属

的根瘤菌之间 、

8 ,13 根瘤菌与土壤杆菌之间以一定的频率进行自我转移或诱动转移与表达,

一些研究者

14 已经观察到不同根瘤菌质粒之间的不亲和性现象。根瘤菌与土壤杆菌质粒

之间的不

15 相容特性已被用来消除土壤杆菌的某些用常规方法难已消除的内源质粒。

本文报道了 3 株费氏中华根瘤菌质粒间的不相容性及在质粒消除研究中的应

用 。

1 材料和方法

1. 1 材料

() 1. 1. 1 菌株及质粒 见表 1。

1. 1. 2 培养基与培养条件 :大肠杆菌用 LB 培养基 、于 37 ?下培养 ;根瘤

菌和土壤杆菌用

TY 培养基 、于 28 ?下培养 ;根瘤菌菌落形态比较用 YMA 培养基 ; 根瘤菌

蔗糖敏感性验证

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