2024年2月28日发(作者：仙元彤)
８７０ＬａｂｅｌｅｄＩｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ＆ＣｌｉｎＭｅｄ，Ｍａｙ．２０２０，Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．５免疫比浊法测定Ｄ二聚体假阳性结果的甄别与处理方法王宏丽，曾甲子（首都医科大学附属北京妇产医院检验科，北京１００００６）摘要：目的 探讨免疫比浊法测定Ｄ二聚体假阳性结果的甄别及处理方法。方法 回顾性研究。收集本院２０１６年至２０１７年凝血五项中Ｄ二聚体单纯性增高，且数值大于３ｍｇ／Ｌ的患者３０２例为研究对象。其中妇科炎症患者７１例，妇科良性肿瘤患者８３例，妇科恶性肿瘤患者１４８例（卵巢癌５２例，宫颈癌６６例，内膜癌３０例）。分别采用ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ试验在Ｓｙｓｍｅｘｃｓ５１００检测平台上测定纤维蛋白降解产物（ＦＤＰ），Ｄ二聚体及Ｄ二聚体稀释试验，并通过ＶＩＤＡＳ３０检测平台进行验证。结果 ３０２份标本中２８５份标本结果相符，符合率为９４．４％，并呈正相关，此时判定Ｄ二聚体检测值为真值。１７份标本结果不符，不符合率为５．６％。表现为：Ｄ二聚体结果阳性，ＦＤＰ结果阴性，Ｄ二聚体稀释试验结果随稀释倍数的增加而进行性下降且幅度很大，ＶＩＤＡＳ试验验证为阴性。此时判定Ｄ二聚体结果为假阳性。结论 免疫比浊法测定Ｄ二聚体时，可以通过Ｄ二聚体，ＦＤＰ及Ｄ二聚体稀释试验联合检测来减少Ｄ二聚体假阳性的出现，为临床提供准确的检测报告。关键词：异嗜性抗体； 免疫比浊法； Ｄ二聚体； ＦＤＰ； 假阳性中图分类号：Ｒ３９２３３ 文献标识码：ＡＴｈｅＳｃｒｅｅｎｉｎｇａｎｄＯｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎＳｔｒａｔｅｇｙｏｆＦａｌｓｅＰｏｓｉｔｉｖｅＲｅｓｕｌｔｓｏｆＤｄｉｍｅｒｂｙＩｍｍｕｎｏｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｙＷＡＮＧＨｏｎｇｌｉ，ＺＥＮＧＪｉａｚｉ（ＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＢｅｉｊｉｎｇＯｂｓｔｅｔｒｉｃｓａｎｄＧｙｎｅｃｏｌｏｇｙＨｏｓｐｉｔａｌ，ＣａｐｉｔａｌＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００００６）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｓｃｒｅｅｎｉｎｇａｎｄｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｓｔｒａｔｅｇｙｏｆｆａｌｓｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆＤｄｉｍｅｒｕｓｉｎｇｉｍｍｕｎｏｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｙ．ＭｅｔｈｏｄｓＡｒｅｔｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅｓｔｕｄｙｗａｓｃｏｎｄｕｃｔｅｄ．Ａｔｏｔａｌｏｆ３０２ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｉｎｃｒｅａｓｅｄＤｄｉｍｅｒ（＞３ｍｇ／Ｌ）ｉｎｔｈｅｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎｔｅｓｔｉｎＢｅｉｊｉｎｇＯｂｓｔｅｔｒｉｃｓａｎｄＧｙｎｅｃｏｌｏｇｙＨｏｓｐｉｔａｌｆｒｏｍ２０１６ｔｏ２０１７ｗｅｒｅｅｎｒｏｌｌｅｄｉｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙ．Ａｍｏｎｇｔｈｅｍ，７１ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｇｙｎｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，８３ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｇｙｎｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｂｅｎｉｇｎｔｕｍｏｒｓ，１４８ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｇｙｎｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｍａｌｉｇｎａｎｔｔｕｍｏｒｓ（５２ｃａｓｅｓｏｆｏｖａｒｉａｎｃａｎｃｅｒ，６６ｃａｓｅｓｏｆｃｅｒｖｉｃａｌｃａｎｃｅｒ，３０ｃａｓｅｓｏｆｅｎｄｏｍｅｔｒｉａｌｃａｎｃｅｒ）．Ｆｉｂｒｉｎｏｇｅｎｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｐｒｏｄｕｃｔ（ＦＤＰ），ＤｄｉｍｅｒａｎｄＤｄｉｍｅｒｄｉｌｕｔｉｏｎｔｅｓｔｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｉｎｎｏｖａｎｃｅａｓｓａｙｏｎＳｙｓｍｅｘｃｓ５１００ｐｌａｔｆｏｒｍ，ａｎｄｖｅｒｉｆｉｅｄｂｙＶＩＤＡＳ３０ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｐｌａｔｆｏｒｍ．Ｒｅｓｕｌｔｓ２８５ｏｆ３０２ｓｐｅｃｉｍｅｎｓｓｈｏｗｅｄｃｏｎｓｉｓｔｅｎｃｉｅｓｉｎＦＤＰａｎｄＤｄｉｍｅｒｔｅｓｔｓｗｉｔｈａｐｏｓｉｔｉｖｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ，ｗｉｔｈｔｈｅｃｏｉｎｃｉｄｅｎｃｅｒａｔｅ９４．４％．ＴｈｅｓｅｖａｌｕｅｓｏｆＤｄｉｍｅｒｗｅｒｅｒｅｇａｒｄｅｄａｓｔｈｅｇｒｏｕｎｄｔｒｕｔｈｖａｌｕｅｓｏｆＤｄｉｍｅｒｄｅｔｅｃｔｉｏｎ．１７ｓｐｅｃｉｍｅｎｓｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄｉｎｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔＦＤＰａｎｄＤｄｉｍｅｒｖａｌｕｅｓ，ｐｒｅｓｅｎｔｅｄａｓａｐｏｓｉｔｉｖｅＤｄｉｍｅｒｒｅｓｕｌｔａｌｏｎｇｗｉｔｈｎｅｇａｔｉｖｅｒｅｓｕｌｔｓｉｎＦＤＰａｎｄＶＩＤＡＳｔｅｓｔｓ．Ｔｈｅｓｅｒｅｓｕｌｔｓｗｅｒｅｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄａｓｔｈｅｆａｌｓｅｐｏｓｉｔｉｖｅ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＷｈｅｎＤｄｉｍｅｒｉｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｉｍｍｕｎｏｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｙ，ｒｅｓｅａｒｃｈｅｒｓｃａｎｒｅｄｕｃｅｔｈｅｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅｏｆｆａｌｓｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒｅｓｕｌｔｓｂｙｃｏｍｂｉｎｇＤｄｉｍｅｒ，ＦＤＰａｎｄＤｄｉｍｅｒｄｉｌｕｔｉｏｎｔｅｓｔ，ｗｈｉｃｈｃｏｕｌｄｐｒｏｖｉｄｅｍｏｒｅａｃｃｕｒａｔｅｃｌｉｎｉｃａｌｒｅｐｏｒｔｓｏｆＤｄｉｍｅｒ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｈｅｔｅｒｏｐｈｉｌｉｃａｎｔｉｂｏｄｙ； Ｉｍｍｕｎｏｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｙ； Ｄｄｉｍｅｒ； ＦＤＰ； ＦａｌｓｅｐｏｓｉｔｉｖｅＤＯＩ：１０．１１７４８／ｂｊｍｙ．ｉｓｓｎ．１００６－１７０３．２０２０．０５．０３２收稿日期：２０１９１００９；修回日期：２０１９１１２０基金项目：首都医科大学附属北京妇产医院院内课题（编号：ＦＣＹＹＱＮ２０１６０７）作者简介：王宏丽（１９７７—），女，大学本科，主管技师。Ｔｅｌ：１３６１１３０１５６６；Ｅｍａｉｌ：ＰＥＫ００１＠１６３．ｃｏｍ
标记免疫分析与临床 ２０２０年５月第２７卷第５期８７１ １．４ 仪器性能 Ｃｓ５１００全自动凝血分析仪测定Ｄ二聚体的精密度，ＣＶ批内：５．７８％，ＣＶ室内：６．６２％；准确度为９５．８１％，特异性：４２％；分析灵敏度：９７％。ｍｉｎｉＶＩＤＡＳ／ＶＩＤＡＳ３０全自动荧光免疫分析仪测定Ｄ二聚体的精密度，ＣＶ批内：３．１１％，ＣＶ室内：４．３５％；准确度为９７．６２％，特异性：９２％；分析灵敏度：９８％。 ２ 方法 ２．１ Ｄ二聚体及稀释实验测定 标本于１５００×ｇ Ｄ二聚体（ＤＤ）是交联纤维蛋白经纤溶酶水１３］解作用所产生的一种特异性纤维蛋白降解产物［，Ｄ二聚体水平的增高反映了体内继发性纤溶活性增强，可作为高凝状态较为敏感的指标，是纤维蛋白降解产物和纤溶亢进的分子标志物，当血管内血栓形成时产生大量交联纤维蛋白，纤溶酶活性继发性增４］，因此，检测血浆Ｄ二强，血浆Ｄ二聚体水平增高［聚体水平对血栓性疾病的诊断及溶栓治疗监测等有重要意义，也是鉴别原发性和继发性纤溶的良好指标。纤维蛋白／纤维蛋白原降解产物（ＦＤＰ）是在纤溶酶的作用下，血液中的纤维蛋白／纤维蛋白原被溶解所产生的各种降解产物的总称［５］。ＦＤＰ既是纤溶系统活性的筛选指标之一，也是体内凝血系统继发纤溶时较灵敏的实验指标，常和Ｄ二聚体联合检测，来判断临床一些由于凝血和纤溶失衡而导致的疾病［６］。但是Ｄ二聚体的假性增高会导致医生对患者病情的错误判断及治疗。本研究通过Ｄ二聚体、Ｄ二聚体稀释试验和ＦＤＰ试验的结果变化来分析Ｄ二聚体是否为假阳性及对出现假阳性的处理方法，力求Ｄ二聚体结果的准确性。材料和方法 １ 材料 １．１ 研究对象 收集本院２０１６年至２０１７年凝血五项中Ｄ二聚体单纯增高，且数值大于３ｍｇ／Ｌ的患者３０２例为研究对象。其中妇科炎症患者７１例，平均年龄５２．０±９．１岁，妇科良性肿瘤８３例，平均年龄５５．３±１１．２岁，妇科恶性肿瘤１４８例（卵巢癌５２例，宫颈癌６６例，内膜癌３０例），平均年龄５７．４±８．９岁。每例患者抽取０．１０９ｍｏｌ／Ｌ枸橼酸钠１∶９抗凝新鲜静脉血２．７ｍＬ，于采血后２ｈ内进行凝血五项检测，选取血浆Ｄ二聚体单纯增高，且数值大于３ｍｇ／Ｌ的患者，进行Ｄ二聚体稀释８倍、１６倍、３２倍、６４倍、１２８倍的稀释试验，及ＦＤＰ水平检测。 １．２ 试剂 德国西门子公司的Ｓｉｍｍｅｎｓ ＨｅａｌｔｈｃａｒＤｉａｇｎｏｓｔｉｃｓＰｒｏｄｕｃｔｓＧｍｂｈ的ＩＮＮ０ＶＡＮＣＥＤ二聚体试剂，及ＦＤＰ的ＬａｔｅｘＴｅｓｔＢＬ２ＰＦＯＰ试剂；ＶＩＤＡＳ试剂盒及配套质控品购于法国ＢｉｏＭｅｒｉｅｕｘ公司。 １．３ 仪器 Ｃｓ５１００全自动凝血分析仪为日本Ｓｙｓｍｅｘ公司产品；ｍｉｎｉＶＩＤＡＳ／ＶＩＤＡＳ３０全自动荧光免疫分析仪为法国ＢｉｏＭ＆ｉｅｕｘ公司产品。离心１５ｍｉｎ，使用ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ试剂在ＳｙｓｍｅｘＣｓ５１０００全自动凝血分析仪测定Ｄ二聚体、Ｄ二聚体稀释实验，使用ＶＩＤＡＳ试剂在ＶＩＤＡＳ３０检测平台上测定Ｄ二聚体。使用ＦＤＰ的ＬａｔｅｘＴｅｓｔＢＬ２ＰＦＯＰ试剂在ＳｙｓｍｅｘＣｓ５１０００全自动凝血分析仪检测ＦＤＰ。每次检测标本前，确保Ｄ二聚体高水平和低水平及ＦＤＰ的质量控制均在控。 ２．２ ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ试验测定结果分析 本实验室ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ试验的Ｄ二聚体参考范围上限为０．５５ｍｇ／ＬＦＥＵ，ＦＤＰ参考范围上线为５μｇ／ｍＬ。①总体分析ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ试验测定Ｄ二聚体的正常结果与异常结果的符合性，将入组血浆分别稀释８倍、１６倍、３２倍、６４倍、１２８倍后测定Ｄ二聚体，观察其变化趋势是否一致。如果Ｄ二聚体检测及Ｄ二聚体稀释实验检测的结果呈一致性就说明此结果为真阳性，如果Ｄ二聚体检测结果，随着稀释倍数的增加而呈现下降趋势，二者结果不一致，就说明此结果为假阳性。②通过第三方ＶＩＤＡＳ３０检测平台验证Ｄ二聚体试验测定结果的准确性。③进一步分析ＬａｔｅｘＴｅｓｔＢＬ２ＰＦＯＰ实验测定的ＦＤＰ结果与Ｄ二聚体测定结果的符合性，来进一步分析Ｄ二聚体结果的真假性。④通过分析所有实验结果得出结论，找到处理方法。 ３ 统计学处理 统计学处理应用ＳＰＳＳ１６．０统计软件进行分析，数据以ｘ±ｓ表示，两样本间比较采用ｔ检验，Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。结 果 １ 各组患者Ｄ二聚体、Ｄ二聚体稀释试验测定结果 各组患者Ｄ二聚体、Ｄ二聚体稀释试验测定结果分析，ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ试验检测３０２份标本，结果为：
８７２２８５份标本为Ｄ二聚体真性增高的患者，其Ｄ二聚体检测、Ｄ二聚体稀释实验结果均增高，其变化趋势一致。１７份为Ｄ二聚体假性增高患者，其Ｄ二聚ＬａｂｅｌｅｄＩｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ＆ＣｌｉｎＭｅｄ，Ｍａｙ．２０２０，Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．５体检测值增高，Ｄ二聚体稀释实验，随稀释倍数的增长而逐渐下降，其二者变化趋势不一致。阳性符合率为：９４．４％，不符合率为５．６％。见表１。表１ 各组患者Ｄ二聚体、Ｄ二聚体稀释试验、测定结果的比较（ｍｇ／Ｌ）组别Ｄ二聚体真性增高Ｄ二聚体假性增高组别Ｄ二聚体真性增高Ｄ二聚体假性增高例数２８５１７例数２８５１７Ｄ二聚体原倍１４．７８（３．２３～３２．８）１５．０７（３．３５～３３．５）Ｄ二聚体３２倍稀释１４．４５（３．２９～３２．１９）７．４１（１．７８～１５．６）Ｄ二聚体８倍稀释１４．８２（３．４５～３３．１）１３．６２（３．０５～３０．３）Ｄ二聚体６４倍稀释１５．１８（３．３０～３３．６７）４．９５（０．４５～１０．３４）Ｄ二聚体１６倍稀释１５．１（３．３１～３３．５１）１０．１７（２．１５～２２．５）Ｄ二聚体１２８倍稀释１５．０５（３．５８～３３．６９）３．８３（０．４７～６．１３） ２ 各组患者ＦＤＰ实验与Ｄ二聚体实验检测结果分析 ２８５份标本其ＦＤＰ实验与Ｄ二聚体实验检测结果变化趋势一致，１７份样本其ＦＤＰ实验结果为阴性，Ｄ二聚体实验检测结果为阳性，变化趋势不一致。见表２。表２ 各组患者ＦＤＰ与Ｄ二聚体值比较组别Ｄ二聚体真性增高Ｄ二聚体假性增高例数２８５１７纤维蛋白降解产物（ｇ／ｍＬ）μ３４．１２（７．４１～７５．６６）１．７７（１．２３～４．７８）Ｄ二聚体（ｍｇ／Ｌ）１４．７８（３．２３～３２．８））１５．０７（３．３５～３３．５ ３ ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ试验测定结果的验证 通过ＶＩＤＡＳ３０试验平台对３０２份标本做进一步检测，ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ试验组与ＶＩＤＡＳ３０试验平台检测结果的符合率达９４．４％（２８５／３０２），仅有５．６％（１７／３０２）不符合，均为Ｄ二聚体假阳性。见表３。表３ ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ试验检测结果的验证（ｍｇ／Ｌ）组别Ｄ二聚体真性增高Ｄ二聚体假性增高例数２８５１７ＶＩＤＡＳ３０试验平台检测Ｄ二聚体结果１４．３２（３．０５～３３．６３）０．．３１（０．２３～０．４８）ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ试验测定Ｄ二聚体结果１４．７８（３．２３～３２．８））１５．０７（３．３５～３３．５讨 论 血浆Ｄ二聚体作为体内凝血系统的激活和促进纤维蛋白形成的标志，已广泛用于临床监测血栓７９］形成及继发性纤溶［。Ｄ二聚体定量检测的方法可测定Ｄ二聚体水平。 ＤＥＭＰＦＬＥ指出Ｄ二聚体测定结果很大一部分取决于单克隆抗体性质。一般Ｄ二聚体单克隆抗体的抗原决定簇位点在由Ｘ１１因子诱导的纤维蛋白单体的交联部位。ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ和ｍｉｎｉＶＩＤＡＳ的单克隆抗体及抗体识别的抗原表位不同。ｍｉｎｉＶＩＤＡＳ的Ｄ二聚体检测是一种定量ＥＬＩＳＡ法，它将两步的“三明治”免疫酶学方法与最终的荧光检测结合起来。本研究中ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ试验所用抗体试剂与抗原的结合位点为８Ｄ３，检测中等大小的纤维蛋白降解片段，报告单位为ＦＥＵ。在免疫测定中，影响检测结果的干扰困素较多，这些干扰因素是一些与被检物质化学结构不同但活性相似的物质，如异嗜性抗体（ｈｅｔｅｍｐｈｉｌｅａｎｔｉｂｏｄｙ，ＨＡ）、人抗动物抗体（ｈｕｍａｎａｎｔｉａｎｉｍａｌａｎｔｉｂｏｄｙ，ＨＡＡＡ）、自身抗体、类风湿因子主要有酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）和乳胶增强透射比浊法。ＥＬＩＳＡ法是目前公认的检测方法，ＶＩＤＡＳ试验采用了这一原理，但ＥＬＩＳＡ法的操作较复杂且耗时长，不适合在标本量大、自动化要求高、报告时间１０１３］要求短的临床实验室普遍开展［。目前，大部分全自动凝血分析仪采用乳胶增强透射比浊法，本研究所用仪器为ＣＳ５１００。胶乳增强透射比浊法测定血浆Ｄ二聚体水平，是将Ｄ二聚体的抗体包被在胶乳颗粒上，当抗原抗体结合形成免疫复合物时，反应体系的透光率降低，当达到稳定的下降速度时（线性期），透光率变化速率与Ｄ二聚体水平呈正比，由此
标记免疫分析与临床 ２０２０年５月第２７卷第５期８７３出版社，２０１２：３５８３７９．［３］ＫＬＩＮＥＪＡ，ＨＯＧＧＭＭ，ＣＯＵＲＴＮＥＹＤＭ，ｅｔａｌ．Ｄｄｉｍｅｒｔｈｒｅｓｈｏｌｄｉｎｃｒｅａｓｅｗｉｔｈｐｒｅｔｅｓｔｐｒｏｂａｂｉｌｉｔｙｕｎｌｉｋｅｌｙｆｏｒｐｕｌｍｏｎａｒｙｅｍｂｏｌｉｓｍｔｏｄｅｃｒｅａｓｅｕｎｎｅｃｅｓｓａｒｙｃｏｍｐｕｔｅｒｉｚｅｄｔｏｍｏｇｒａｐｈｉｃｐｕｌｍｏｎａｒｙａｎｇｉｏｇｒａｐｈｙ［Ｊ］．ＪＴｈｒｏｍｂＨａｅｍｏｓｔ，２０１２，１０（４）：５７２５８１．［４］黄荣宁，陈显源，林英，等．Ｄ二聚体、血气分析测定在慢性阻塞性肺疾病中的价值探讨［Ｊ］．海南医学，２０１２，２３（１）：８２．［５］张碧玉，唐宁，曹文静，等．纤维蛋白（原）降解产物定量检测方法的建立与评价［Ｊ］．微循环学杂志，２００７，１７（１）：４６４８．［６］王鸿利，王学峰．Ｄ二聚体检测的方法及其临床应用［Ｊ］．中华（ＲＦ）和其他蛋白等。其中，异嗜性抗体的存在是影响免疫测定的重要因素之一。它通过非特异性结合，桥联捕获抗体、标记抗体或标记抗原从而干扰测定，使测定结果与临床表现不符［１４］导致误诊。有文献报道指出自身免疫性疾病患者、肿瘤患者体内存在异嗜性抗体，胶乳增强透射比浊法测定血浆Ｄ二聚体水平时可能出现假阳性结果。造成患者误诊及１５］研究指出：ＲＦ（类风湿因子）错误治疗。章梁君等［是一种变性的ＩｇＧ，它与天然的ＩｇＧ结合能力较差，但易与免疫复合物ＩｇＧ发生聚集反应，使血浆Ｄ二聚体检测结果偏高。因此，需进一步做抗干扰实验来证实其是否为真阳性。肖明峰等［１６］的研究得出，类风湿因子阳性的标本用ＩＮＮＯＶＡＮＣＥＤｄｉｍｅｒ试剂检测Ｄ二聚体结果影响度为１１．６８％。并且随着类风湿因子水平的升高，干扰越明显．而ＩＮＮＯＶＡＮＣＥＤｄｉｍｅｒ试剂的干扰较ＤｄｉｍｅｒＰＬＵＳ试剂更为明显。异嗜性抗体、类风湿因子等引起的一些Ｄ二聚体检测的假性升高，能够导致静脉血栓及ＤＩＣ的错误诊断和不当治疗，应引起重视。 本研究显示，当出现与临床不符的可疑结果时，特别是Ｄ二聚体单项增高时，我们检验人员应该加做Ｄ二聚体稀释试验及ＦＤＰ的检测，如Ｄ二聚体稀释试验及ＦＤＰ的检测结果与Ｄ二聚体原液检测结果相符呈正相关时，此时则考虑Ｄ二聚体检测结果为真阳性，如Ｄ二聚体稀释试验及ＦＤＰ的检测结果与Ｄ二聚体原液检测结果不相符，表现为ＦＤＰ检测值在正常范围，Ｄ二聚体检测值随着稀释倍数的增加，呈线性下降时，我们应该考虑Ｄ二聚体假阳性的可能性。并及时与临床联系，寻找干扰原因，运用多种检验技术进行检验，力求得出较为准确的结果。参考文献［１］ＡＹＣ，ＶＯＲＭＩＴＴＡＧＲ，ＤＵＮＫＬＥＲＤ，ｅｔａｌ．Ｄｄｉｍｅｒａｎｄｐｒｏｔｈｒｏｍｂｉｎｆｒａｇｍｅｎｔ１＋２ｐｒｅｄｉｃｔｖｅｎｏｕｓｔｈｒｏｍｂｏｅｍｂｏｌｉｓｍｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈＣａｎｃｅｒ：ｒｅｓｕｌｔｓｆｒｏｍｔｈｅＶｉｅｎｎａｃａｎｃｅｒａｎｄｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓｓｔｕｄｙ［Ｊ］．ＪＣｌｉｎＯｎｃｏｌ，２００９，２７（２５）：４１２４４１２９．［２］许文荣，王建中．临床血液学检验［Ｍ］．第５版．北京：人民卫生医学杂志，２００４，８４（２）：１７１１７３．［７］ＴＲＩＰＯＬＩＡ．ＤＤｉｍｅｒｔｅｓｔｉｎｇｉｎｌａｂｏｒａｔｏｒｙｐｒａｃｔｉｃｅ［Ｊ］．ＣｌｉｎＣｈｅｍ，２０１１，５７：１２５６１２６２．［８］胡云建，陶凤荣，王厚东，等．Ｄ二聚体测定在肺栓塞诊断中的应用价值［Ｊ］．中华检验医学杂志，２００２，２５：９５９７．［９］ＷＡＮＧＹ，ＬＩＵＺＨ，ＺＨＡＮＧＨＬ，ｅｔａｌ．ＰｒｅｄｉｃｔｉｖｅｖａｌｕｅｏｆＤＤｉｍｅｒｔｅｓｔｆｏｒｒｅｃｕｒｒｅｎｔｖｅｎｏｕｓｔｈｒｏｍｂｅｅｍｂｏｌｉｓｍａｔｈｏｓｐｉｔａｌｄｉｓｃｈａｒｇｅｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｃｕｔｅｐｕｌｍｏｎａｒｙｅｍｂｏｌｉｓｍ［Ｊ］．ＪＴｈｍｍｂＴｈｒｏｍｂｏｌｙｓ，２０１１，３２：４１０４１６．［１０］ＭＯＵＮＴＡＩＮＤ，ＪＡＣＯＢＳＩ，ＨＡＩＧＡ．ＴｈｅＶＩＤＡＳＤＤｉｍｅｒｔｅｓｔｆｏｒｖｅｎｏｕｓｔｈｒｏｍｂｏｅｍｂｏｌｉｓｍ：ａｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅｓｕｒｖｅｉｌｌａｎｃｅｓｔｕｄｙｓｈｏｗｓｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅｏｆｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙａｎｄｓｐｅｃｉｆｉｅｉｔｙｗｈｅｎｕｓｅｄｉｎｎｏｒｍａｌｃｌｉｎｉｃａｌｐｒａｃｔｉｃｅ［Ｊ］．ＡｍＪＥｍｅｒｇＭｅｄ，２００７，２５（４）：４６４４７１．［１１］ＲＩＧＨＩＮＩＭ，ＰＥＲＲＩＥＲＡ，ＤｅＭＯＥＤＯＯＳＥＰ，ｅｔａｌ．ＤＤｉｍｅｒｆｏｒｖｅｎｏｕｓｔｈｒｏｍｂｏｅｍｂｏｌｉｓｍｄｉａｇｎｏｓｉｓ：２０ｙｅａｒｓｌａｔｅｒ［Ｊ］．ＪＴｈｍｍｂＨａｅｍｏｓｔ，２００８，６（７）：１０５９１０７１．［１２］ＳＡＬＶＡＧＮＯＧＬ，ＬＩＰＰＩＧ，ＭＡＲＭＡＴＯＦ，ｅｔａｌ．ＡｎａｌｙｔｉｃａｌｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆＡｘＳＹＭ，ＨｅｍｏｓＩＬＤＤＨＳａｎｄＩｎｎｏｖａｎｃｅＤＤｉｍｅｒｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓｗｉｔｈｔｈｅＶｉｄａｓＤＤｉｍｅｒ［Ｊ］．ＩｎｔＪＬａｂＨｅｍａｔｏｌ，２００９，３１（４）：４７５４７７．［１３］ＭＩＣＨＩＥＬＳＪＪ，ＧＡＤＩＳＳＥＵＲＡ，ｖａｎｄｅｒＰＬＡＮＫＥＮＭ，ｅｔａｌ．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｃｃｕｒａｃｉｅｓｏｆｒａｐｉｄｅｎｚｙｍｅ，ｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ，ＴｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｉｃａｎｄａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎＤＤｉｍｅｒａｓｓａｙｓｆｏｒｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓｅｘｃｌｕｓｉｏｎ：ｉｍｐａｃｔｏｎｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｗｏｒｋｕｐｓｏｆｏｕｔｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｓｕｓｐｅｃｔｅｄｄｅｅｐｖｅｉｎｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓａｎｄｐｕｌｍｏｎａｒｙｅｍｂｏｌｉｓｍ［Ｊ］．ＳｅｍｉｎＴｈｒｏｍｂＨｅｍｏｓｔ，２００６，３２（７）：６７８６９３．［１４］韦维．异嗜性抗体在免疫测定中干扰的研究进展［Ｊ］．国际检验医学杂志，２０１０，３１（１０）：１１２３１１２６．［１５］章梁君，陈茂林，钟辉秀，等．自身免疫性疾病Ｄ二聚体水平测定及其临床意义［Ｊ］．检验医学，２０１６，４１（５）：６６６６６９．［１６］肖明锋，吴芝兰，刘基铎，等．类风湿因子对免疫比浊法测定Ｄ二聚体结果的干扰分析［Ｊ］．国际检验医学杂志，２０１３，３４（１８）：２４４３２４４４．
2024年2月28日发(作者：仙元彤)
８７０ＬａｂｅｌｅｄＩｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ＆ＣｌｉｎＭｅｄ，Ｍａｙ．２０２０，Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．５免疫比浊法测定Ｄ二聚体假阳性结果的甄别与处理方法王宏丽，曾甲子（首都医科大学附属北京妇产医院检验科，北京１００００６）摘要：目的 探讨免疫比浊法测定Ｄ二聚体假阳性结果的甄别及处理方法。方法 回顾性研究。收集本院２０１６年至２０１７年凝血五项中Ｄ二聚体单纯性增高，且数值大于３ｍｇ／Ｌ的患者３０２例为研究对象。其中妇科炎症患者７１例，妇科良性肿瘤患者８３例，妇科恶性肿瘤患者１４８例（卵巢癌５２例，宫颈癌６６例，内膜癌３０例）。分别采用ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ试验在Ｓｙｓｍｅｘｃｓ５１００检测平台上测定纤维蛋白降解产物（ＦＤＰ），Ｄ二聚体及Ｄ二聚体稀释试验，并通过ＶＩＤＡＳ３０检测平台进行验证。结果 ３０２份标本中２８５份标本结果相符，符合率为９４．４％，并呈正相关，此时判定Ｄ二聚体检测值为真值。１７份标本结果不符，不符合率为５．６％。表现为：Ｄ二聚体结果阳性，ＦＤＰ结果阴性，Ｄ二聚体稀释试验结果随稀释倍数的增加而进行性下降且幅度很大，ＶＩＤＡＳ试验验证为阴性。此时判定Ｄ二聚体结果为假阳性。结论 免疫比浊法测定Ｄ二聚体时，可以通过Ｄ二聚体，ＦＤＰ及Ｄ二聚体稀释试验联合检测来减少Ｄ二聚体假阳性的出现，为临床提供准确的检测报告。关键词：异嗜性抗体； 免疫比浊法； Ｄ二聚体； ＦＤＰ； 假阳性中图分类号：Ｒ３９２３３ 文献标识码：ＡＴｈｅＳｃｒｅｅｎｉｎｇａｎｄＯｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎＳｔｒａｔｅｇｙｏｆＦａｌｓｅＰｏｓｉｔｉｖｅＲｅｓｕｌｔｓｏｆＤｄｉｍｅｒｂｙＩｍｍｕｎｏｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｙＷＡＮＧＨｏｎｇｌｉ，ＺＥＮＧＪｉａｚｉ（ＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＢｅｉｊｉｎｇＯｂｓｔｅｔｒｉｃｓａｎｄＧｙｎｅｃｏｌｏｇｙＨｏｓｐｉｔａｌ，ＣａｐｉｔａｌＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００００６）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｓｃｒｅｅｎｉｎｇａｎｄｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｓｔｒａｔｅｇｙｏｆｆａｌｓｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆＤｄｉｍｅｒｕｓｉｎｇｉｍｍｕｎｏｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｙ．ＭｅｔｈｏｄｓＡｒｅｔｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅｓｔｕｄｙｗａｓｃｏｎｄｕｃｔｅｄ．Ａｔｏｔａｌｏｆ３０２ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｉｎｃｒｅａｓｅｄＤｄｉｍｅｒ（＞３ｍｇ／Ｌ）ｉｎｔｈｅｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎｔｅｓｔｉｎＢｅｉｊｉｎｇＯｂｓｔｅｔｒｉｃｓａｎｄＧｙｎｅｃｏｌｏｇｙＨｏｓｐｉｔａｌｆｒｏｍ２０１６ｔｏ２０１７ｗｅｒｅｅｎｒｏｌｌｅｄｉｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙ．Ａｍｏｎｇｔｈｅｍ，７１ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｇｙｎｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，８３ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｇｙｎｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｂｅｎｉｇｎｔｕｍｏｒｓ，１４８ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｇｙｎｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｍａｌｉｇｎａｎｔｔｕｍｏｒｓ（５２ｃａｓｅｓｏｆｏｖａｒｉａｎｃａｎｃｅｒ，６６ｃａｓｅｓｏｆｃｅｒｖｉｃａｌｃａｎｃｅｒ，３０ｃａｓｅｓｏｆｅｎｄｏｍｅｔｒｉａｌｃａｎｃｅｒ）．Ｆｉｂｒｉｎｏｇｅｎｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｐｒｏｄｕｃｔ（ＦＤＰ），ＤｄｉｍｅｒａｎｄＤｄｉｍｅｒｄｉｌｕｔｉｏｎｔｅｓｔｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｉｎｎｏｖａｎｃｅａｓｓａｙｏｎＳｙｓｍｅｘｃｓ５１００ｐｌａｔｆｏｒｍ，ａｎｄｖｅｒｉｆｉｅｄｂｙＶＩＤＡＳ３０ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｐｌａｔｆｏｒｍ．Ｒｅｓｕｌｔｓ２８５ｏｆ３０２ｓｐｅｃｉｍｅｎｓｓｈｏｗｅｄｃｏｎｓｉｓｔｅｎｃｉｅｓｉｎＦＤＰａｎｄＤｄｉｍｅｒｔｅｓｔｓｗｉｔｈａｐｏｓｉｔｉｖｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ，ｗｉｔｈｔｈｅｃｏｉｎｃｉｄｅｎｃｅｒａｔｅ９４．４％．ＴｈｅｓｅｖａｌｕｅｓｏｆＤｄｉｍｅｒｗｅｒｅｒｅｇａｒｄｅｄａｓｔｈｅｇｒｏｕｎｄｔｒｕｔｈｖａｌｕｅｓｏｆＤｄｉｍｅｒｄｅｔｅｃｔｉｏｎ．１７ｓｐｅｃｉｍｅｎｓｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄｉｎｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔＦＤＰａｎｄＤｄｉｍｅｒｖａｌｕｅｓ，ｐｒｅｓｅｎｔｅｄａｓａｐｏｓｉｔｉｖｅＤｄｉｍｅｒｒｅｓｕｌｔａｌｏｎｇｗｉｔｈｎｅｇａｔｉｖｅｒｅｓｕｌｔｓｉｎＦＤＰａｎｄＶＩＤＡＳｔｅｓｔｓ．Ｔｈｅｓｅｒｅｓｕｌｔｓｗｅｒｅｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄａｓｔｈｅｆａｌｓｅｐｏｓｉｔｉｖｅ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＷｈｅｎＤｄｉｍｅｒｉｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｉｍｍｕｎｏｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｙ，ｒｅｓｅａｒｃｈｅｒｓｃａｎｒｅｄｕｃｅｔｈｅｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅｏｆｆａｌｓｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒｅｓｕｌｔｓｂｙｃｏｍｂｉｎｇＤｄｉｍｅｒ，ＦＤＰａｎｄＤｄｉｍｅｒｄｉｌｕｔｉｏｎｔｅｓｔ，ｗｈｉｃｈｃｏｕｌｄｐｒｏｖｉｄｅｍｏｒｅａｃｃｕｒａｔｅｃｌｉｎｉｃａｌｒｅｐｏｒｔｓｏｆＤｄｉｍｅｒ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｈｅｔｅｒｏｐｈｉｌｉｃａｎｔｉｂｏｄｙ； Ｉｍｍｕｎｏｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｙ； Ｄｄｉｍｅｒ； ＦＤＰ； ＦａｌｓｅｐｏｓｉｔｉｖｅＤＯＩ：１０．１１７４８／ｂｊｍｙ．ｉｓｓｎ．１００６－１７０３．２０２０．０５．０３２收稿日期：２０１９１００９；修回日期：２０１９１１２０基金项目：首都医科大学附属北京妇产医院院内课题（编号：ＦＣＹＹＱＮ２０１６０７）作者简介：王宏丽（１９７７—），女，大学本科，主管技师。Ｔｅｌ：１３６１１３０１５６６；Ｅｍａｉｌ：ＰＥＫ００１＠１６３．ｃｏｍ
标记免疫分析与临床 ２０２０年５月第２７卷第５期８７１ １．４ 仪器性能 Ｃｓ５１００全自动凝血分析仪测定Ｄ二聚体的精密度，ＣＶ批内：５．７８％，ＣＶ室内：６．６２％；准确度为９５．８１％，特异性：４２％；分析灵敏度：９７％。ｍｉｎｉＶＩＤＡＳ／ＶＩＤＡＳ３０全自动荧光免疫分析仪测定Ｄ二聚体的精密度，ＣＶ批内：３．１１％，ＣＶ室内：４．３５％；准确度为９７．６２％，特异性：９２％；分析灵敏度：９８％。 ２ 方法 ２．１ Ｄ二聚体及稀释实验测定 标本于１５００×ｇ Ｄ二聚体（ＤＤ）是交联纤维蛋白经纤溶酶水１３］解作用所产生的一种特异性纤维蛋白降解产物［，Ｄ二聚体水平的增高反映了体内继发性纤溶活性增强，可作为高凝状态较为敏感的指标，是纤维蛋白降解产物和纤溶亢进的分子标志物，当血管内血栓形成时产生大量交联纤维蛋白，纤溶酶活性继发性增４］，因此，检测血浆Ｄ二强，血浆Ｄ二聚体水平增高［聚体水平对血栓性疾病的诊断及溶栓治疗监测等有重要意义，也是鉴别原发性和继发性纤溶的良好指标。纤维蛋白／纤维蛋白原降解产物（ＦＤＰ）是在纤溶酶的作用下，血液中的纤维蛋白／纤维蛋白原被溶解所产生的各种降解产物的总称［５］。ＦＤＰ既是纤溶系统活性的筛选指标之一，也是体内凝血系统继发纤溶时较灵敏的实验指标，常和Ｄ二聚体联合检测，来判断临床一些由于凝血和纤溶失衡而导致的疾病［６］。但是Ｄ二聚体的假性增高会导致医生对患者病情的错误判断及治疗。本研究通过Ｄ二聚体、Ｄ二聚体稀释试验和ＦＤＰ试验的结果变化来分析Ｄ二聚体是否为假阳性及对出现假阳性的处理方法，力求Ｄ二聚体结果的准确性。材料和方法 １ 材料 １．１ 研究对象 收集本院２０１６年至２０１７年凝血五项中Ｄ二聚体单纯增高，且数值大于３ｍｇ／Ｌ的患者３０２例为研究对象。其中妇科炎症患者７１例，平均年龄５２．０±９．１岁，妇科良性肿瘤８３例，平均年龄５５．３±１１．２岁，妇科恶性肿瘤１４８例（卵巢癌５２例，宫颈癌６６例，内膜癌３０例），平均年龄５７．４±８．９岁。每例患者抽取０．１０９ｍｏｌ／Ｌ枸橼酸钠１∶９抗凝新鲜静脉血２．７ｍＬ，于采血后２ｈ内进行凝血五项检测，选取血浆Ｄ二聚体单纯增高，且数值大于３ｍｇ／Ｌ的患者，进行Ｄ二聚体稀释８倍、１６倍、３２倍、６４倍、１２８倍的稀释试验，及ＦＤＰ水平检测。 １．２ 试剂 德国西门子公司的Ｓｉｍｍｅｎｓ ＨｅａｌｔｈｃａｒＤｉａｇｎｏｓｔｉｃｓＰｒｏｄｕｃｔｓＧｍｂｈ的ＩＮＮ０ＶＡＮＣＥＤ二聚体试剂，及ＦＤＰ的ＬａｔｅｘＴｅｓｔＢＬ２ＰＦＯＰ试剂；ＶＩＤＡＳ试剂盒及配套质控品购于法国ＢｉｏＭｅｒｉｅｕｘ公司。 １．３ 仪器 Ｃｓ５１００全自动凝血分析仪为日本Ｓｙｓｍｅｘ公司产品；ｍｉｎｉＶＩＤＡＳ／ＶＩＤＡＳ３０全自动荧光免疫分析仪为法国ＢｉｏＭ＆ｉｅｕｘ公司产品。离心１５ｍｉｎ，使用ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ试剂在ＳｙｓｍｅｘＣｓ５１０００全自动凝血分析仪测定Ｄ二聚体、Ｄ二聚体稀释实验，使用ＶＩＤＡＳ试剂在ＶＩＤＡＳ３０检测平台上测定Ｄ二聚体。使用ＦＤＰ的ＬａｔｅｘＴｅｓｔＢＬ２ＰＦＯＰ试剂在ＳｙｓｍｅｘＣｓ５１０００全自动凝血分析仪检测ＦＤＰ。每次检测标本前，确保Ｄ二聚体高水平和低水平及ＦＤＰ的质量控制均在控。 ２．２ ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ试验测定结果分析 本实验室ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ试验的Ｄ二聚体参考范围上限为０．５５ｍｇ／ＬＦＥＵ，ＦＤＰ参考范围上线为５μｇ／ｍＬ。①总体分析ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ试验测定Ｄ二聚体的正常结果与异常结果的符合性，将入组血浆分别稀释８倍、１６倍、３２倍、６４倍、１２８倍后测定Ｄ二聚体，观察其变化趋势是否一致。如果Ｄ二聚体检测及Ｄ二聚体稀释实验检测的结果呈一致性就说明此结果为真阳性，如果Ｄ二聚体检测结果，随着稀释倍数的增加而呈现下降趋势，二者结果不一致，就说明此结果为假阳性。②通过第三方ＶＩＤＡＳ３０检测平台验证Ｄ二聚体试验测定结果的准确性。③进一步分析ＬａｔｅｘＴｅｓｔＢＬ２ＰＦＯＰ实验测定的ＦＤＰ结果与Ｄ二聚体测定结果的符合性，来进一步分析Ｄ二聚体结果的真假性。④通过分析所有实验结果得出结论，找到处理方法。 ３ 统计学处理 统计学处理应用ＳＰＳＳ１６．０统计软件进行分析，数据以ｘ±ｓ表示，两样本间比较采用ｔ检验，Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。结 果 １ 各组患者Ｄ二聚体、Ｄ二聚体稀释试验测定结果 各组患者Ｄ二聚体、Ｄ二聚体稀释试验测定结果分析，ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ试验检测３０２份标本，结果为：
８７２２８５份标本为Ｄ二聚体真性增高的患者，其Ｄ二聚体检测、Ｄ二聚体稀释实验结果均增高，其变化趋势一致。１７份为Ｄ二聚体假性增高患者，其Ｄ二聚ＬａｂｅｌｅｄＩｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ＆ＣｌｉｎＭｅｄ，Ｍａｙ．２０２０，Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．５体检测值增高，Ｄ二聚体稀释实验，随稀释倍数的增长而逐渐下降，其二者变化趋势不一致。阳性符合率为：９４．４％，不符合率为５．６％。见表１。表１ 各组患者Ｄ二聚体、Ｄ二聚体稀释试验、测定结果的比较（ｍｇ／Ｌ）组别Ｄ二聚体真性增高Ｄ二聚体假性增高组别Ｄ二聚体真性增高Ｄ二聚体假性增高例数２８５１７例数２８５１７Ｄ二聚体原倍１４．７８（３．２３～３２．８）１５．０７（３．３５～３３．５）Ｄ二聚体３２倍稀释１４．４５（３．２９～３２．１９）７．４１（１．７８～１５．６）Ｄ二聚体８倍稀释１４．８２（３．４５～３３．１）１３．６２（３．０５～３０．３）Ｄ二聚体６４倍稀释１５．１８（３．３０～３３．６７）４．９５（０．４５～１０．３４）Ｄ二聚体１６倍稀释１５．１（３．３１～３３．５１）１０．１７（２．１５～２２．５）Ｄ二聚体１２８倍稀释１５．０５（３．５８～３３．６９）３．８３（０．４７～６．１３） ２ 各组患者ＦＤＰ实验与Ｄ二聚体实验检测结果分析 ２８５份标本其ＦＤＰ实验与Ｄ二聚体实验检测结果变化趋势一致，１７份样本其ＦＤＰ实验结果为阴性，Ｄ二聚体实验检测结果为阳性，变化趋势不一致。见表２。表２ 各组患者ＦＤＰ与Ｄ二聚体值比较组别Ｄ二聚体真性增高Ｄ二聚体假性增高例数２８５１７纤维蛋白降解产物（ｇ／ｍＬ）μ３４．１２（７．４１～７５．６６）１．７７（１．２３～４．７８）Ｄ二聚体（ｍｇ／Ｌ）１４．７８（３．２３～３２．８））１５．０７（３．３５～３３．５ ３ ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ试验测定结果的验证 通过ＶＩＤＡＳ３０试验平台对３０２份标本做进一步检测，ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ试验组与ＶＩＤＡＳ３０试验平台检测结果的符合率达９４．４％（２８５／３０２），仅有５．６％（１７／３０２）不符合，均为Ｄ二聚体假阳性。见表３。表３ ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ试验检测结果的验证（ｍｇ／Ｌ）组别Ｄ二聚体真性增高Ｄ二聚体假性增高例数２８５１７ＶＩＤＡＳ３０试验平台检测Ｄ二聚体结果１４．３２（３．０５～３３．６３）０．．３１（０．２３～０．４８）ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ试验测定Ｄ二聚体结果１４．７８（３．２３～３２．８））１５．０７（３．３５～３３．５讨 论 血浆Ｄ二聚体作为体内凝血系统的激活和促进纤维蛋白形成的标志，已广泛用于临床监测血栓７９］形成及继发性纤溶［。Ｄ二聚体定量检测的方法可测定Ｄ二聚体水平。 ＤＥＭＰＦＬＥ指出Ｄ二聚体测定结果很大一部分取决于单克隆抗体性质。一般Ｄ二聚体单克隆抗体的抗原决定簇位点在由Ｘ１１因子诱导的纤维蛋白单体的交联部位。ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ和ｍｉｎｉＶＩＤＡＳ的单克隆抗体及抗体识别的抗原表位不同。ｍｉｎｉＶＩＤＡＳ的Ｄ二聚体检测是一种定量ＥＬＩＳＡ法，它将两步的“三明治”免疫酶学方法与最终的荧光检测结合起来。本研究中ＩＮＮＯＶＡＮＣＥ试验所用抗体试剂与抗原的结合位点为８Ｄ３，检测中等大小的纤维蛋白降解片段，报告单位为ＦＥＵ。在免疫测定中，影响检测结果的干扰困素较多，这些干扰因素是一些与被检物质化学结构不同但活性相似的物质，如异嗜性抗体（ｈｅｔｅｍｐｈｉｌｅａｎｔｉｂｏｄｙ，ＨＡ）、人抗动物抗体（ｈｕｍａｎａｎｔｉａｎｉｍａｌａｎｔｉｂｏｄｙ，ＨＡＡＡ）、自身抗体、类风湿因子主要有酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）和乳胶增强透射比浊法。ＥＬＩＳＡ法是目前公认的检测方法，ＶＩＤＡＳ试验采用了这一原理，但ＥＬＩＳＡ法的操作较复杂且耗时长，不适合在标本量大、自动化要求高、报告时间１０１３］要求短的临床实验室普遍开展［。目前，大部分全自动凝血分析仪采用乳胶增强透射比浊法，本研究所用仪器为ＣＳ５１００。胶乳增强透射比浊法测定血浆Ｄ二聚体水平，是将Ｄ二聚体的抗体包被在胶乳颗粒上，当抗原抗体结合形成免疫复合物时，反应体系的透光率降低，当达到稳定的下降速度时（线性期），透光率变化速率与Ｄ二聚体水平呈正比，由此
标记免疫分析与临床 ２０２０年５月第２７卷第５期８７３出版社，２０１２：３５８３７９．［３］ＫＬＩＮＥＪＡ，ＨＯＧＧＭＭ，ＣＯＵＲＴＮＥＹＤＭ，ｅｔａｌ．Ｄｄｉｍｅｒｔｈｒｅｓｈｏｌｄｉｎｃｒｅａｓｅｗｉｔｈｐｒｅｔｅｓｔｐｒｏｂａｂｉｌｉｔｙｕｎｌｉｋｅｌｙｆｏｒｐｕｌｍｏｎａｒｙｅｍｂｏｌｉｓｍｔｏｄｅｃｒｅａｓｅｕｎｎｅｃｅｓｓａｒｙｃｏｍｐｕｔｅｒｉｚｅｄｔｏｍｏｇｒａｐｈｉｃｐｕｌｍｏｎａｒｙａｎｇｉｏｇｒａｐｈｙ［Ｊ］．ＪＴｈｒｏｍｂＨａｅｍｏｓｔ，２０１２，１０（４）：５７２５８１．［４］黄荣宁，陈显源，林英，等．Ｄ二聚体、血气分析测定在慢性阻塞性肺疾病中的价值探讨［Ｊ］．海南医学，２０１２，２３（１）：８２．［５］张碧玉，唐宁，曹文静，等．纤维蛋白（原）降解产物定量检测方法的建立与评价［Ｊ］．微循环学杂志，２００７，１７（１）：４６４８．［６］王鸿利，王学峰．Ｄ二聚体检测的方法及其临床应用［Ｊ］．中华（ＲＦ）和其他蛋白等。其中，异嗜性抗体的存在是影响免疫测定的重要因素之一。它通过非特异性结合，桥联捕获抗体、标记抗体或标记抗原从而干扰测定，使测定结果与临床表现不符［１４］导致误诊。有文献报道指出自身免疫性疾病患者、肿瘤患者体内存在异嗜性抗体，胶乳增强透射比浊法测定血浆Ｄ二聚体水平时可能出现假阳性结果。造成患者误诊及１５］研究指出：ＲＦ（类风湿因子）错误治疗。章梁君等［是一种变性的ＩｇＧ，它与天然的ＩｇＧ结合能力较差，但易与免疫复合物ＩｇＧ发生聚集反应，使血浆Ｄ二聚体检测结果偏高。因此，需进一步做抗干扰实验来证实其是否为真阳性。肖明峰等［１６］的研究得出，类风湿因子阳性的标本用ＩＮＮＯＶＡＮＣＥＤｄｉｍｅｒ试剂检测Ｄ二聚体结果影响度为１１．６８％。并且随着类风湿因子水平的升高，干扰越明显．而ＩＮＮＯＶＡＮＣＥＤｄｉｍｅｒ试剂的干扰较ＤｄｉｍｅｒＰＬＵＳ试剂更为明显。异嗜性抗体、类风湿因子等引起的一些Ｄ二聚体检测的假性升高，能够导致静脉血栓及ＤＩＣ的错误诊断和不当治疗，应引起重视。 本研究显示，当出现与临床不符的可疑结果时，特别是Ｄ二聚体单项增高时，我们检验人员应该加做Ｄ二聚体稀释试验及ＦＤＰ的检测，如Ｄ二聚体稀释试验及ＦＤＰ的检测结果与Ｄ二聚体原液检测结果相符呈正相关时，此时则考虑Ｄ二聚体检测结果为真阳性，如Ｄ二聚体稀释试验及ＦＤＰ的检测结果与Ｄ二聚体原液检测结果不相符，表现为ＦＤＰ检测值在正常范围，Ｄ二聚体检测值随着稀释倍数的增加，呈线性下降时，我们应该考虑Ｄ二聚体假阳性的可能性。并及时与临床联系，寻找干扰原因，运用多种检验技术进行检验，力求得出较为准确的结果。参考文献［１］ＡＹＣ，ＶＯＲＭＩＴＴＡＧＲ，ＤＵＮＫＬＥＲＤ，ｅｔａｌ．Ｄｄｉｍｅｒａｎｄｐｒｏｔｈｒｏｍｂｉｎｆｒａｇｍｅｎｔ１＋２ｐｒｅｄｉｃｔｖｅｎｏｕｓｔｈｒｏｍｂｏｅｍｂｏｌｉｓｍｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈＣａｎｃｅｒ：ｒｅｓｕｌｔｓｆｒｏｍｔｈｅＶｉｅｎｎａｃａｎｃｅｒａｎｄｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓｓｔｕｄｙ［Ｊ］．ＪＣｌｉｎＯｎｃｏｌ，２００９，２７（２５）：４１２４４１２９．［２］许文荣，王建中．临床血液学检验［Ｍ］．第５版．北京：人民卫生医学杂志，２００４，８４（２）：１７１１７３．［７］ＴＲＩＰＯＬＩＡ．ＤＤｉｍｅｒｔｅｓｔｉｎｇｉｎｌａｂｏｒａｔｏｒｙｐｒａｃｔｉｃｅ［Ｊ］．ＣｌｉｎＣｈｅｍ，２０１１，５７：１２５６１２６２．［８］胡云建，陶凤荣，王厚东，等．Ｄ二聚体测定在肺栓塞诊断中的应用价值［Ｊ］．中华检验医学杂志，２００２，２５：９５９７．［９］ＷＡＮＧＹ，ＬＩＵＺＨ，ＺＨＡＮＧＨＬ，ｅｔａｌ．ＰｒｅｄｉｃｔｉｖｅｖａｌｕｅｏｆＤＤｉｍｅｒｔｅｓｔｆｏｒｒｅｃｕｒｒｅｎｔｖｅｎｏｕｓｔｈｒｏｍｂｅｅｍｂｏｌｉｓｍａｔｈｏｓｐｉｔａｌｄｉｓｃｈａｒｇｅｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｃｕｔｅｐｕｌｍｏｎａｒｙｅｍｂｏｌｉｓｍ［Ｊ］．ＪＴｈｍｍｂＴｈｒｏｍｂｏｌｙｓ，２０１１，３２：４１０４１６．［１０］ＭＯＵＮＴＡＩＮＤ，ＪＡＣＯＢＳＩ，ＨＡＩＧＡ．ＴｈｅＶＩＤＡＳＤＤｉｍｅｒｔｅｓｔｆｏｒｖｅｎｏｕｓｔｈｒｏｍｂｏｅｍｂｏｌｉｓｍ：ａｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅｓｕｒｖｅｉｌｌａｎｃｅｓｔｕｄｙｓｈｏｗｓｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅｏｆｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙａｎｄｓｐｅｃｉｆｉｅｉｔｙｗｈｅｎｕｓｅｄｉｎｎｏｒｍａｌｃｌｉｎｉｃａｌｐｒａｃｔｉｃｅ［Ｊ］．ＡｍＪＥｍｅｒｇＭｅｄ，２００７，２５（４）：４６４４７１．［１１］ＲＩＧＨＩＮＩＭ，ＰＥＲＲＩＥＲＡ，ＤｅＭＯＥＤＯＯＳＥＰ，ｅｔａｌ．ＤＤｉｍｅｒｆｏｒｖｅｎｏｕｓｔｈｒｏｍｂｏｅｍｂｏｌｉｓｍｄｉａｇｎｏｓｉｓ：２０ｙｅａｒｓｌａｔｅｒ［Ｊ］．ＪＴｈｍｍｂＨａｅｍｏｓｔ，２００８，６（７）：１０５９１０７１．［１２］ＳＡＬＶＡＧＮＯＧＬ，ＬＩＰＰＩＧ，ＭＡＲＭＡＴＯＦ，ｅｔａｌ．ＡｎａｌｙｔｉｃａｌｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆＡｘＳＹＭ，ＨｅｍｏｓＩＬＤＤＨＳａｎｄＩｎｎｏｖａｎｃｅＤＤｉｍｅｒｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓｗｉｔｈｔｈｅＶｉｄａｓＤＤｉｍｅｒ［Ｊ］．ＩｎｔＪＬａｂＨｅｍａｔｏｌ，２００９，３１（４）：４７５４７７．［１３］ＭＩＣＨＩＥＬＳＪＪ，ＧＡＤＩＳＳＥＵＲＡ，ｖａｎｄｅｒＰＬＡＮＫＥＮＭ，ｅｔａｌ．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｃｃｕｒａｃｉｅｓｏｆｒａｐｉｄｅｎｚｙｍｅ，ｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ，ＴｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｉｃａｎｄａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎＤＤｉｍｅｒａｓｓａｙｓｆｏｒｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓｅｘｃｌｕｓｉｏｎ：ｉｍｐａｃｔｏｎｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｗｏｒｋｕｐｓｏｆｏｕｔｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｓｕｓｐｅｃｔｅｄｄｅｅｐｖｅｉｎｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓａｎｄｐｕｌｍｏｎａｒｙｅｍｂｏｌｉｓｍ［Ｊ］．ＳｅｍｉｎＴｈｒｏｍｂＨｅｍｏｓｔ，２００６，３２（７）：６７８６９３．［１４］韦维．异嗜性抗体在免疫测定中干扰的研究进展［Ｊ］．国际检验医学杂志，２０１０，３１（１０）：１１２３１１２６．［１５］章梁君，陈茂林，钟辉秀，等．自身免疫性疾病Ｄ二聚体水平测定及其临床意义［Ｊ］．检验医学，２０１６，４１（５）：６６６６６９．［１６］肖明锋，吴芝兰，刘基铎，等．类风湿因子对免疫比浊法测定Ｄ二聚体结果的干扰分析［Ｊ］．国际检验医学杂志，２０１３，３４（１８）：２４４３２４４４．