2024年3月17日发(作者：束小星)
维生素E的含量测定（GC）
一、目的要求
1、 掌握GC内标法测定药物含量的方法和计算。
2、 熟悉气相色谱仪的工作原理和操作方法。
二、主要仪器与药品
岛津GC－14B气相色谱仪，DB-5毛细管柱；
维生素E对照品、维生素E样品、正三十二烷、正己烷。
三、实验方法
色谱条件与系统适应性实验：柱温为295℃，进样室温度300℃，检测器温度310℃；
理论板数按维生素E峰计算应不低于5000，维生素E峰
与内标物质峰的分离度应大于2，拖尾因子0.95～1.05。
校正因子测定：取三十二烷0.0025g，加正己烷溶解并稀释成每1ml中含1.0mg的溶液，
摇匀，作为内标溶液。另取维生素E对照品0.0253g，置棕色具塞锥形
瓶中，精密加入内标溶液10ml，密塞，振摇使溶解（
维生素E对照品
溶液浓度2.53mg/ml），
取1
µL注入气相色谱仪，记录色谱图及各参数，重
复进样3次，计算校正因子。
样品测定：取维生素E0.0236g，置棕色具塞锥形瓶中，精密
加入内标溶液10ml，密塞，
振摇使溶解（
维生素E样品溶液浓度2.36mg/ml），
取1
µL注入气相色谱仪，
记录色谱图及各参数，重复进样3次，计算含量。
计算方法：校正因子（f）=(A
内标
×C
对照
)
/
(A
对照
×C
内标
)
C
样品
＝f×C
内标
×A
样品
/
A
内标
Ve含量＝C
样品
/
C
样品配制浓度
×100％
RSD=SD
/
平均值
A—峰面积，C—浓度
四、实验结果与讨论
溶剂定位：t＝1.745min；内标定位：9.420min；维生素E定位：t＝9.765min。
保留时间（min） 峰面积 R 理论板数 拖尾因子
① 9.432 22618.1 7.273 58649 0.975
9.823 58987.2 2.391 51721 0.774
对照品 ② 9.415 4683.5 2.339 62936 1.045
9.782 11103.1 2.339 56726 0.962
③ 9.415 2947.4 83.508 60627 1.127
9.790 6712.6 2.309 51371 0.941
① 9.432 5146.5 2.306 65612 1.009
9.790 11280.4 2.306 56823 1.033
样品 ② 9.423 1773.6 83.598 63048 1.027
9.782 3951.1 2.328 60850 1.032
③ 9.446 9574.9 2.225 60949 0.983
9.760 21759.5 2.225 53188 1.006
计算结果：
对照品 ①f＝0.970
②f=1.067
③f=1.111
平均f＝1.049，RSD=6.88％
样品 ①Ve含量＝97.4％
②Ve含量＝99.0％
③Ve含量＝101.0％
Ve平均含量＝99.1％，RSD=1.82％
Ve含量符合规定（90.0％～110.0％）。
讨论及注意事项：1、维生素E对氧十分敏感，遇光、空气可被氧化。
2、氮气必须是最先开，最后关。
3、进样操作时，为获得良好的精密度和色谱峰形状，进样时速度要快而果断，
并且每次进样速度、留针时间应保持一致。此次实验中平行实验之间色谱峰面
积相差很大，进样操作造成的误差较大，另外仪器本身也存在一定误差。
4、严禁在高温下打开柱温箱门，以免固定相流失。若要开柱温箱门，必须先
降柱温至50℃以下。
5、内标法的准确性较高，操作条件和进样量的稍许变动对定量结果的影响不
大。但每个试样的分析，都要进行两次称量，不适合大批量试样的快速分析。
6、内标物要满足以下要求：
（a）试样中不含有该物质；
（b）与被测组分性质比较接近；
（c）不与试样发生化学反应；
（d）出峰位置应位于被测组分附近，且无组分峰影响。
、
03药学 洪琴 3031901061
2024年3月17日发(作者：束小星)
维生素E的含量测定（GC）
一、目的要求
1、 掌握GC内标法测定药物含量的方法和计算。
2、 熟悉气相色谱仪的工作原理和操作方法。
二、主要仪器与药品
岛津GC－14B气相色谱仪，DB-5毛细管柱；
维生素E对照品、维生素E样品、正三十二烷、正己烷。
三、实验方法
色谱条件与系统适应性实验：柱温为295℃，进样室温度300℃，检测器温度310℃；
理论板数按维生素E峰计算应不低于5000，维生素E峰
与内标物质峰的分离度应大于2，拖尾因子0.95～1.05。
校正因子测定：取三十二烷0.0025g，加正己烷溶解并稀释成每1ml中含1.0mg的溶液，
摇匀，作为内标溶液。另取维生素E对照品0.0253g，置棕色具塞锥形
瓶中，精密加入内标溶液10ml，密塞，振摇使溶解（
维生素E对照品
溶液浓度2.53mg/ml），
取1
µL注入气相色谱仪，记录色谱图及各参数，重
复进样3次，计算校正因子。
样品测定：取维生素E0.0236g，置棕色具塞锥形瓶中，精密
加入内标溶液10ml，密塞，
振摇使溶解（
维生素E样品溶液浓度2.36mg/ml），
取1
µL注入气相色谱仪，
记录色谱图及各参数，重复进样3次，计算含量。
计算方法：校正因子（f）=(A
内标
×C
对照
)
/
(A
对照
×C
内标
)
C
样品
＝f×C
内标
×A
样品
/
A
内标
Ve含量＝C
样品
/
C
样品配制浓度
×100％
RSD=SD
/
平均值
A—峰面积，C—浓度
四、实验结果与讨论
溶剂定位：t＝1.745min；内标定位：9.420min；维生素E定位：t＝9.765min。
保留时间（min） 峰面积 R 理论板数 拖尾因子
① 9.432 22618.1 7.273 58649 0.975
9.823 58987.2 2.391 51721 0.774
对照品 ② 9.415 4683.5 2.339 62936 1.045
9.782 11103.1 2.339 56726 0.962
③ 9.415 2947.4 83.508 60627 1.127
9.790 6712.6 2.309 51371 0.941
① 9.432 5146.5 2.306 65612 1.009
9.790 11280.4 2.306 56823 1.033
样品 ② 9.423 1773.6 83.598 63048 1.027
9.782 3951.1 2.328 60850 1.032
③ 9.446 9574.9 2.225 60949 0.983
9.760 21759.5 2.225 53188 1.006
计算结果：
对照品 ①f＝0.970
②f=1.067
③f=1.111
平均f＝1.049，RSD=6.88％
样品 ①Ve含量＝97.4％
②Ve含量＝99.0％
③Ve含量＝101.0％
Ve平均含量＝99.1％，RSD=1.82％
Ve含量符合规定（90.0％～110.0％）。
讨论及注意事项：1、维生素E对氧十分敏感，遇光、空气可被氧化。
2、氮气必须是最先开，最后关。
3、进样操作时，为获得良好的精密度和色谱峰形状，进样时速度要快而果断，
并且每次进样速度、留针时间应保持一致。此次实验中平行实验之间色谱峰面
积相差很大，进样操作造成的误差较大，另外仪器本身也存在一定误差。
4、严禁在高温下打开柱温箱门，以免固定相流失。若要开柱温箱门，必须先
降柱温至50℃以下。
5、内标法的准确性较高，操作条件和进样量的稍许变动对定量结果的影响不
大。但每个试样的分析，都要进行两次称量，不适合大批量试样的快速分析。
6、内标物要满足以下要求：
（a）试样中不含有该物质；
（b）与被测组分性质比较接近；
（c）不与试样发生化学反应；
（d）出峰位置应位于被测组分附近，且无组分峰影响。
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03药学 洪琴 3031901061