2024年3月18日发(作者：富察水丹)
山东医药２０１１年第５１卷第４９期
脊髓小脑性共济失调３型的临床特征
和基因诊断
王子峰 ，李连平 ，曲立贞 ，苏净 ，李季春 ，曹霞
（１济宁医学院附属高唐县人民医院，山东高唐２５２８００；２济南军区总医院）
摘要：目的
方法
研究脊髓小脑性共济失调３型（ＳＣＡ３）的临床特征和基因诊断方法，探讨ＳＣＡ３的基因诊断程序。
在２个家系内４代２０例成员中共榆出１０
选取２个家系内患者及家系内正常人血样，提取基因组ＤＮＡ，应用ＳＣＡ３亚型引物，分别进行聚合酶链反应，
根据电泳结果回收基因异常条带，应用ＴＡ克隆测序技术测序。结果
例患者和１例症状前患者，均为ＳＣＡ３亚型，每代均可发病，男女均可受累，第１个家系平均发病年龄３４岁，第２个
家系平均发病年龄４８岁。以行走不稳、动作笨拙、感觉障碍为主要临床表现，ＣＡＧ重复序列为５１～６７次。结论
ＳＣＡ３为常染色体显性遗传疾病，是一种迟发、进展性的神经变性疾病，临床特征有共济失调、构音障碍等，ＣＡＧ晕
复序列数目的检测对于基因诊断和症状前诊断是一种十分有效的方法。
关键词：脊髓小脑性共济失调；常染色体显性遗传；聚合酶链反应；ＣＡＧ重复序列；遗传早现
中图分类号：Ｒ７４４ 文献标志码：Ｂ 文章编号：１００２—２６６Ｘ（２０１１）４９４）０６４－０３
脊髓小脑性共济失调是一种以肢体运动协调障
碍为主要特点的常染色体显性遗传疾病。基因学检
测是目前诊断遗传性脊髓小脑性共济失调（ＳＣＡ）的
岁，平均发病年龄４６岁，符合常染色体显性遗传规
律。先证者体征：神志清楚，言语清晰，颅神经检查
未发现异常，四肢肌力Ｖ级，肌张力正常，闭日难证
金标准。近１年来，本研究对其临床特征及基因诊
断方面的特征进行了探讨。现报告如下。
１资料与方法
征（＋），Ｔ 以下痛觉减退，双下肢末端触觉减退，双
侧膝关节以下振动觉减退，双侧腱反射对称减弱，病
理征未引出，颈软，脑膜刺激征阴性。家系１遗传家
１．１ 临床资料收集临床诊断为ＳＣＡ家系２０例，
系图：见图１（使用中国遗传咨询网家系图在线绘制
工具绘制）。家系２遗传家系图：见图２（使用中国
遗传咨询网家系图在线绘制工具绘制）。
均为汉族，其中患者１０例、家系内正常人１０例。家
系１：先证者（ｍ ６），男，３８岁。该家系来自山东地
区，家族无近亲结婚史。４代１７例成员中女性患者
２例，男性患者４例，发病年龄２５～３６岁，符合常染
色体显性遗传规律。先证者体征：构音不清，偶有饮
水呛咳，向右注视时可见慢眼动，向左注视时可见快
速眼震。双上肢近端肌肉、双侧胸锁乳突肌明显萎
缩，双上肢肌力Ｖ级，双下肢肌力Ⅳ级。可见肌肉束
颤。四肢肌张力增高。指鼻试验、双手轮替运动均
不稳准，右侧重于左侧。双上肢肱二头肌反射、肱三
头肌反射均活跃，双下肢膝腱反射、跟腱反射均亢
图１家系１遗传家系图
注：第Ⅲ代６为家系１先证者，口代表男性，ｏ代表女性，涂黑
代表患者，划斜线者代表已死亡
进。髌阵挛、踝阵挛均阳性。双侧Ｈｏｆｆｍａｎｓ征阳
性，双侧Ｂａｂｉｎｓｋｉ’Ｓ征阳性，余病理征未引出。脑膜
刺激征阴性。家系内其他部分患者可见眼球内陷、
双侧快速眼震等体征。家系２：先证者（Ⅲ６），女４６
岁，该家系来自山东地区，患者母亲、舅舅、１个弟弟
均有类似症状，４代１４例成员中女性患者２例，男
性患者２例，最高发病年龄５２岁，最低发病年龄４２
通讯作者
６４
图２家系２遗传家系图
注：第Ⅲ代１为先证者，口代表男性，ｏ代表女性，涂黑者代表患
者，划斜线者代表已死亡
１．２实验方法
山东医药２０１１年第５ｌ卷第４９期
１．２．１ ＰＣＲ反应使用ＴａＫａＲａ ＤＮＡ提取试剂盒
（大连宝生物工程有限公司提供）提取患者静脉血
中ＤＮＡ。ＳＣＡ３亚型引物的ＰＣＲ参照文献。２％琼
脂糖凝胶电泳后紫外灯下观察．ＰＣＲ扩增产物，发现
２个家系ＳＣＡ３引物ＰＣＲ扩增均发现异常条带，考
虑为ＳＣＡ３亚型。使用ＴａＫａＲａ Ａｇａｒｏｓｅ Ｇｅｌ ＤＮＡ
Ｐｕｒｉｉｆａｔｉｏｎ Ｋｉｔ Ｖｅｔ．２．０琼脂糖凝胶ＤＮＡ回收试剂盒
（大连宝生物工程有限公司提供）回收ＤＮＡ。
１．２．２ ＰＣＲ产物克隆及测序家系１先证者ＳＣＡ３
引物ＰＣＲ产物电泳结果，可见４００ ｂｐ大小异常条
带，回收此条带ＤＮＡ进行纯化。将已纯化ＰＣＲ产
物使用ＴａＫａＲａ ＤＮＡ Ｌｉｇａｔｉｏｎ Ｋｉｔ Ｖｅｒ．２．０（Ｃｏｄｅ Ｎｏ．
Ｄ６０２２）中的Ｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｉ直接和载体ｐＭＤ１８．Ｔ（Ｃｏｄｅ
Ｎｏ．Ｄ１０１Ａ）连接，连接产物热转化至Ｅ．ｃｏｌｉ Ｃｏｍｐｅ．
ｔｅｎｔ Ｃｅｌｌ ＪＭ１０９中，涂布平板（ＬＢ液体培养基），３７
℃过夜培养，观察有无菌落。然后挑取不同白色单
个菌落加入ＬＢ液体培养基中培养５ ｈ以上，以此菌
液为模板，使用Ｍ１３－４７／ＲＶ－Ｍ（Ｍ１３－４７碱基序列：
ＣＧＣ ＣＡＧ ＧＧＴ哪ＣＣＣ ＡＧＴ ＣＡＣ ＧＡＣ；ＲＶ—Ｍ碱
基序列：ＧＡＧ ＣＧＧ ＡＴＡ ＡＣＡ ＡＴｒ ＴＣＡ ＣＡＣ ＡＧＧ）
引物进行ＰＣＲ扩增，电泳检测。并同时移板（ＬＢ液
体培养基），挑选阳性克隆子进行基因序列测定。
将选定的含有阳性克隆的单菌落进行植菌，利用
ＴａＫａＲａ ＭｉｎｉＢＥＳＴ Ｐｌａｓｍｉｄ Ｐｕｒｉｉｆｃａｔｉｏｎ Ｋｉｔ Ｖｅｒ．２．０
（Ｃｏｄｅ Ｎｏ．ＤＶ８０１Ａ）提取质粒。在ＡＢＩ ＰＲＩＳＭ
３１３０ＸＬ型全自动ＤＮＡ测序仪上使用ＲＶ Ｍ引物对
质粒测序。
２ 结果
２．１部分患者琼脂糖凝胶电泳结果家系１先证
者及家系内其他患者，均可见一条约２５０ ｂｐ基因条
带和一条４００ ｂｐ异常基因条带。因等位基因一条
来自父方，一条来自母方，家系ｌ先证者为父系遗
传，因此２５０ ｂｐ基因条带来自等位基因的母系基
因，４００ ｂｐ异常基因条带来自等位基因的另一条父
系异常基因。家系１正常人ＳＣＡ３ ＰＣＲ产物均可见
约２５０ ｂｐ正常扩增条带。先证者儿子ＰＣＲ产物电
泳结果，未见异常电泳条带。家系２患者ＳＣＡ３ ＰＣＲ
扩增产物琼脂糖凝胶电泳均可见约４００ ｂｐ异常条
带。家系２正常人ＳＣＡ３ ＰＣＲ产物凝胶电泳扩增条
带均可见约２５０ ｂｐ左右正常电泳条带，未见异常基
因扩增带。
２．２ ２个家系患者发病特点及部分测序结果见
表１。
３讨论
脊髓小脑性共济失调３型是ＳＣＡ中最为常见
表１ ２个家系患者发病特点及部分测序结果
２．３ ２个家系部分患者ＳＣＡ３ ＰＣＲ扩增产物基因
测序见图１、图２、图３。
臌
图１ 家系１先证者ＰＣＲ扩增产物异常基因测序结果
注：ＣＡＧ重复序列数为６７个
图２家系１先证者儿子ＰＣＲ扩增产物基因测序图谱
注：ＣＡＧ碱基重复序列数为１３次
ｑ ｔ．ａ ｚ口ｎ ｔ ９ … ●ｑ ｊ‘ … …
２８０ ２９０ ３００ ３１０ ３２０ ３３０ ３４０ ３５０
图３家系２先证者ＰＣＲ扩增产物基因测序图谱
注：ＣＡＧ碱基重复序列数为５４次
６５
的类型，在汉族人群的脊髓小脑性共济失调中约占
５０％。ＳＣＡ３的临床表型具有高度的遗传异质性和
临床变异性，根据目前研究，大致分为５种不同临床
亚型 ，根据此种分型，家系１患者病情严重，发
病年龄较早，主要表现为小脑体征，同时伴有严重的
锥体系和锥体外系症状，部分患者可见突眼，属于第
１种亚型。家系２患者症状相对较轻，起病晚，伴有
周围神经病变为其特点，属于第３种亚型。
关于ＳＣＡ３亚型发病机制，研究表明系由突变
的ＣＡＧ重复碱基片段编码含有多聚谷氨酰胺片段
的蛋白所致病 Ｊ。正常人与患者的主要区别表现
在ＣＡＧ重复数目的不同，正常人ＣＡＧ重复数目一
般为ｌ２～４１次，患者６２—８４次。国内谢秋幼报道，
ＳＣＡ３患者ＣＡＧ重复数目为６７—８５次。本研究中
的２个ＳＣＡ３家系患者ＣＡＧ重复数目为５１～６７次，
明显低于谢秋幼等报道。且２个家系患者代间传递
中有明显的发病年龄提前趋势，从表ｌ可以看出家
系１患者发病年龄第３代比第２代提前，症状有加
重趋势；家系２患者发病年龄第３代比第２代也明
显提前５岁左右，症状程度类似。家系１患者临床
症状在代间传递中有明显的加重趋势。在此表中还
可看出，２个家系ＣＡＧ重复序列数在第３代患者中
比第２代明显增多。这也提示临床症状、发病年龄
均与ＣＡＧ重复数目有关，ＣＡＧ重复次数越多发病
年龄越小且症状越重 ，进一步证明了此前提到的
遗传早现现象。遗传早现现象主要在父系遗传中更
明显。家系１先证者属于父系遗传，也说明了这一
点。在家系２先证者属于母系遗传，家系２第３代
患者中ＣＡＧ重复序列数比第２代ＣＡＧ序列数无明
显增多，虽发病年龄提前，但症状无加重，需进一步
搜集病例分析母系遗传中ＳＣＡ３的表现。此外，家
系１中Ⅲ１ ＣＡＧ重复序列数为５３次，ｍ６ ＣＡＧ重复
序列数为６７次，但１１ １患者发病年龄比１１６发病年
龄提前９岁；家系２部分患者中ＣＡＧ重复序列数多
于家系１患者，但临床症状却较家系１患者轻，这种
现象可能与遗传异质性有关。由于不同患者具有不
同的遗传基础，从而导致遗传方式、病程进展、发病
年龄、预后以及复发风险、病情严重程度等都可能不
同。研究表明，遗传异质性的存在是导致遗传病病
种增多的原因之一。
家系２中Ｉ ３、Ｉ ４生前均没有共济失调症状，
死因也可排除ＳＣＡ类疾病，但在子代中出现了发病
山东医药２０１１年第５１卷第４９期
患者。这是因为ＣＡＧ重复片段所在的等位基因具
有多态性的特点 ］，如果等位基因携带有处于正常
与异常之间的ＣＡＧ重复数目（即所谓带有中间数目
的ＣＡＧ重复片段，国外报道ＳＣＡ３一般为４８～５１
次 ），由于ＣＡＧ重复片段的不稳定性，在下一代
中ＣＡＧ重复易发生新的突变发病，尤其在父系遗传
中更明显。因此推测家系２的Ｉ ３（男性，７５岁时去
世）可能携带有中间数目的ＣＡＧ重复片段。
ＳＣＡ３症状前患者，是指基因检测ＣＡＧ重复数
目异常，尚无临床症状的人。由于ＳＣＡ３是一种迟
发性神经变性疾病，因此症状前患者达到一定年龄
必定会出现症状。在目前尚无有效治疗方法的情况
下，基因学检查明确症状前诊断防止该病发生具有
重要意义。在本实验的家系１中，ｍ１属于症状前
患者，因为在留取血样时，患者尚未出现临床症状，
经基因检测ＣＡＧ重复数目为５３次，在随访２ ａ后患
者出现共济失调症状，且发病年龄较其父亲提前，症
状更重。这也证实了症状前基因诊断预测发病的准
确性。症状前诊断的重要意义在于使ＳＣＡ家系中
正常人对于自己是否发病有准确的预测，使症状前
患者在婚育年龄对下一代做到产前诊断，防止带有
异常基因的患儿出生。对于经基因诊断明确为
ＳＣＡ３或其他ＳＣＡ亚型的患者，对家系内正常人均
应留取血液进行基因学检测，筛选家系内的症状前
患者，一旦诊断ＣＡＧ重复序列异常，即可诊断成 ，
其致病基因的外显率为１００％。
参考文献：
［１］段晓慧，顾卫红，王国相．常染色体显性遗传脊髓小脑性共济失
调表型和基因型的相关性［Ｊ］．中日友好医院学报，２００８，２２：４１—
４３．
［２］殷鑫浈，张宝荣，吴鼎文，等．脊髓小脑性共济失调第７型的Ｉ临床
特征及基因突变研究［Ｊ］．遗传，２００７，２９（６）：６８８６９２．
［３］Ｄｉｉｒｒ Ａ，Ｓｔｅｖａｎｉｎ Ｇ，Ｃａｎｃｅｌ Ｇ，ｅｔ ａ１．Ｓｐｉｎｏｃｅｒｅｂｅｌｌａｒ ａｔａｘｉａ ３ ａｎｄ
Ｍａｃｈａｄｏ—Ｊｏｓｅｐｈ ｄｉｓｅａｓｅ：ｃｌｉｎｉｃａｌ，ｍｏｌｅｃｕｌａｒ，ａｎｄ ｎｅｕｒ０ｐａｔｈ０ｌｏｇｉｃａｌ
ｆｅａｔｕｒｅ［Ｊ］．Ａｎｎ Ｎｅｕｒｏｌ，１９９６，３９（４）：４９０４９９．
［４］Ｓａｋａｉ Ｔ，Ｋａｗａｋａｍｉ Ｈ＿Ｍａｃｈａｄｏ—Ｊｏｓｅｐｈ ｄｉｓｅａｓｅ：ａ ｐｒｏｐｏｓａｌ ｏｆ ｓｐａｓ—
ｔｉｃ ｐａｒａｐｌｅｇｉｃ ｓｕｂｔｙｐｅ［Ｊ］．Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，１９９６，４６（３）：８４６—８４７．
［５］Ｉｋｅｄａ Ｈ，Ｙａｍａｇｕｃｈｉ Ｍ，Ｓｕｇａｉ Ｓ．Ｅｘｐａｎｄｅｄ ｐｏｌｙｇｌｕｔａｍｉｎｅ ｉｎ ｔｈｅ
Ｍａｅｈａｄｏ—Ｊｏｓｅｐｈ Ｄｉｓｅａｓｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎｄｕｃｅｓ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ
ｖｉｖｏ￣Ｊ］．Ｎａｔ ｇｅｎｅｔ，１９９６，１３（２）：１９６—２０２．
［６］Ｖｉｋｔｏｒ Ｈｏｎｔｉ，ＬＯｓｚｌ６ Ｖ６ｃｓｅｉ．Ｇｅｎｅｔｉｃ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ｓｐｉ—
ｎｏｃｅｒｅｂｅｌｌａｒ ａｔａｘｉａｓ［Ｊ］． Ｎｅｕｒ０ｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ Ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，
２００５，１（２）：１２５—１３３．
（收稿日期：２０１１－０７－０９）
2024年3月18日发(作者：富察水丹)
山东医药２０１１年第５１卷第４９期
脊髓小脑性共济失调３型的临床特征
和基因诊断
王子峰 ，李连平 ，曲立贞 ，苏净 ，李季春 ，曹霞
（１济宁医学院附属高唐县人民医院，山东高唐２５２８００；２济南军区总医院）
摘要：目的
方法
研究脊髓小脑性共济失调３型（ＳＣＡ３）的临床特征和基因诊断方法，探讨ＳＣＡ３的基因诊断程序。
在２个家系内４代２０例成员中共榆出１０
选取２个家系内患者及家系内正常人血样，提取基因组ＤＮＡ，应用ＳＣＡ３亚型引物，分别进行聚合酶链反应，
根据电泳结果回收基因异常条带，应用ＴＡ克隆测序技术测序。结果
例患者和１例症状前患者，均为ＳＣＡ３亚型，每代均可发病，男女均可受累，第１个家系平均发病年龄３４岁，第２个
家系平均发病年龄４８岁。以行走不稳、动作笨拙、感觉障碍为主要临床表现，ＣＡＧ重复序列为５１～６７次。结论
ＳＣＡ３为常染色体显性遗传疾病，是一种迟发、进展性的神经变性疾病，临床特征有共济失调、构音障碍等，ＣＡＧ晕
复序列数目的检测对于基因诊断和症状前诊断是一种十分有效的方法。
关键词：脊髓小脑性共济失调；常染色体显性遗传；聚合酶链反应；ＣＡＧ重复序列；遗传早现
中图分类号：Ｒ７４４ 文献标志码：Ｂ 文章编号：１００２—２６６Ｘ（２０１１）４９４）０６４－０３
脊髓小脑性共济失调是一种以肢体运动协调障
碍为主要特点的常染色体显性遗传疾病。基因学检
测是目前诊断遗传性脊髓小脑性共济失调（ＳＣＡ）的
岁，平均发病年龄４６岁，符合常染色体显性遗传规
律。先证者体征：神志清楚，言语清晰，颅神经检查
未发现异常，四肢肌力Ｖ级，肌张力正常，闭日难证
金标准。近１年来，本研究对其临床特征及基因诊
断方面的特征进行了探讨。现报告如下。
１资料与方法
征（＋），Ｔ 以下痛觉减退，双下肢末端触觉减退，双
侧膝关节以下振动觉减退，双侧腱反射对称减弱，病
理征未引出，颈软，脑膜刺激征阴性。家系１遗传家
１．１ 临床资料收集临床诊断为ＳＣＡ家系２０例，
系图：见图１（使用中国遗传咨询网家系图在线绘制
工具绘制）。家系２遗传家系图：见图２（使用中国
遗传咨询网家系图在线绘制工具绘制）。
均为汉族，其中患者１０例、家系内正常人１０例。家
系１：先证者（ｍ ６），男，３８岁。该家系来自山东地
区，家族无近亲结婚史。４代１７例成员中女性患者
２例，男性患者４例，发病年龄２５～３６岁，符合常染
色体显性遗传规律。先证者体征：构音不清，偶有饮
水呛咳，向右注视时可见慢眼动，向左注视时可见快
速眼震。双上肢近端肌肉、双侧胸锁乳突肌明显萎
缩，双上肢肌力Ｖ级，双下肢肌力Ⅳ级。可见肌肉束
颤。四肢肌张力增高。指鼻试验、双手轮替运动均
不稳准，右侧重于左侧。双上肢肱二头肌反射、肱三
头肌反射均活跃，双下肢膝腱反射、跟腱反射均亢
图１家系１遗传家系图
注：第Ⅲ代６为家系１先证者，口代表男性，ｏ代表女性，涂黑
代表患者，划斜线者代表已死亡
进。髌阵挛、踝阵挛均阳性。双侧Ｈｏｆｆｍａｎｓ征阳
性，双侧Ｂａｂｉｎｓｋｉ’Ｓ征阳性，余病理征未引出。脑膜
刺激征阴性。家系内其他部分患者可见眼球内陷、
双侧快速眼震等体征。家系２：先证者（Ⅲ６），女４６
岁，该家系来自山东地区，患者母亲、舅舅、１个弟弟
均有类似症状，４代１４例成员中女性患者２例，男
性患者２例，最高发病年龄５２岁，最低发病年龄４２
通讯作者
６４
图２家系２遗传家系图
注：第Ⅲ代１为先证者，口代表男性，ｏ代表女性，涂黑者代表患
者，划斜线者代表已死亡
１．２实验方法
山东医药２０１１年第５ｌ卷第４９期
１．２．１ ＰＣＲ反应使用ＴａＫａＲａ ＤＮＡ提取试剂盒
（大连宝生物工程有限公司提供）提取患者静脉血
中ＤＮＡ。ＳＣＡ３亚型引物的ＰＣＲ参照文献。２％琼
脂糖凝胶电泳后紫外灯下观察．ＰＣＲ扩增产物，发现
２个家系ＳＣＡ３引物ＰＣＲ扩增均发现异常条带，考
虑为ＳＣＡ３亚型。使用ＴａＫａＲａ Ａｇａｒｏｓｅ Ｇｅｌ ＤＮＡ
Ｐｕｒｉｉｆａｔｉｏｎ Ｋｉｔ Ｖｅｔ．２．０琼脂糖凝胶ＤＮＡ回收试剂盒
（大连宝生物工程有限公司提供）回收ＤＮＡ。
１．２．２ ＰＣＲ产物克隆及测序家系１先证者ＳＣＡ３
引物ＰＣＲ产物电泳结果，可见４００ ｂｐ大小异常条
带，回收此条带ＤＮＡ进行纯化。将已纯化ＰＣＲ产
物使用ＴａＫａＲａ ＤＮＡ Ｌｉｇａｔｉｏｎ Ｋｉｔ Ｖｅｒ．２．０（Ｃｏｄｅ Ｎｏ．
Ｄ６０２２）中的Ｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｉ直接和载体ｐＭＤ１８．Ｔ（Ｃｏｄｅ
Ｎｏ．Ｄ１０１Ａ）连接，连接产物热转化至Ｅ．ｃｏｌｉ Ｃｏｍｐｅ．
ｔｅｎｔ Ｃｅｌｌ ＪＭ１０９中，涂布平板（ＬＢ液体培养基），３７
℃过夜培养，观察有无菌落。然后挑取不同白色单
个菌落加入ＬＢ液体培养基中培养５ ｈ以上，以此菌
液为模板，使用Ｍ１３－４７／ＲＶ－Ｍ（Ｍ１３－４７碱基序列：
ＣＧＣ ＣＡＧ ＧＧＴ哪ＣＣＣ ＡＧＴ ＣＡＣ ＧＡＣ；ＲＶ—Ｍ碱
基序列：ＧＡＧ ＣＧＧ ＡＴＡ ＡＣＡ ＡＴｒ ＴＣＡ ＣＡＣ ＡＧＧ）
引物进行ＰＣＲ扩增，电泳检测。并同时移板（ＬＢ液
体培养基），挑选阳性克隆子进行基因序列测定。
将选定的含有阳性克隆的单菌落进行植菌，利用
ＴａＫａＲａ ＭｉｎｉＢＥＳＴ Ｐｌａｓｍｉｄ Ｐｕｒｉｉｆｃａｔｉｏｎ Ｋｉｔ Ｖｅｒ．２．０
（Ｃｏｄｅ Ｎｏ．ＤＶ８０１Ａ）提取质粒。在ＡＢＩ ＰＲＩＳＭ
３１３０ＸＬ型全自动ＤＮＡ测序仪上使用ＲＶ Ｍ引物对
质粒测序。
２ 结果
２．１部分患者琼脂糖凝胶电泳结果家系１先证
者及家系内其他患者，均可见一条约２５０ ｂｐ基因条
带和一条４００ ｂｐ异常基因条带。因等位基因一条
来自父方，一条来自母方，家系ｌ先证者为父系遗
传，因此２５０ ｂｐ基因条带来自等位基因的母系基
因，４００ ｂｐ异常基因条带来自等位基因的另一条父
系异常基因。家系１正常人ＳＣＡ３ ＰＣＲ产物均可见
约２５０ ｂｐ正常扩增条带。先证者儿子ＰＣＲ产物电
泳结果，未见异常电泳条带。家系２患者ＳＣＡ３ ＰＣＲ
扩增产物琼脂糖凝胶电泳均可见约４００ ｂｐ异常条
带。家系２正常人ＳＣＡ３ ＰＣＲ产物凝胶电泳扩增条
带均可见约２５０ ｂｐ左右正常电泳条带，未见异常基
因扩增带。
２．２ ２个家系患者发病特点及部分测序结果见
表１。
３讨论
脊髓小脑性共济失调３型是ＳＣＡ中最为常见
表１ ２个家系患者发病特点及部分测序结果
２．３ ２个家系部分患者ＳＣＡ３ ＰＣＲ扩增产物基因
测序见图１、图２、图３。
臌
图１ 家系１先证者ＰＣＲ扩增产物异常基因测序结果
注：ＣＡＧ重复序列数为６７个
图２家系１先证者儿子ＰＣＲ扩增产物基因测序图谱
注：ＣＡＧ碱基重复序列数为１３次
ｑ ｔ．ａ ｚ口ｎ ｔ ９ … ●ｑ ｊ‘ … …
２８０ ２９０ ３００ ３１０ ３２０ ３３０ ３４０ ３５０
图３家系２先证者ＰＣＲ扩增产物基因测序图谱
注：ＣＡＧ碱基重复序列数为５４次
６５
的类型，在汉族人群的脊髓小脑性共济失调中约占
５０％。ＳＣＡ３的临床表型具有高度的遗传异质性和
临床变异性，根据目前研究，大致分为５种不同临床
亚型 ，根据此种分型，家系１患者病情严重，发
病年龄较早，主要表现为小脑体征，同时伴有严重的
锥体系和锥体外系症状，部分患者可见突眼，属于第
１种亚型。家系２患者症状相对较轻，起病晚，伴有
周围神经病变为其特点，属于第３种亚型。
关于ＳＣＡ３亚型发病机制，研究表明系由突变
的ＣＡＧ重复碱基片段编码含有多聚谷氨酰胺片段
的蛋白所致病 Ｊ。正常人与患者的主要区别表现
在ＣＡＧ重复数目的不同，正常人ＣＡＧ重复数目一
般为ｌ２～４１次，患者６２—８４次。国内谢秋幼报道，
ＳＣＡ３患者ＣＡＧ重复数目为６７—８５次。本研究中
的２个ＳＣＡ３家系患者ＣＡＧ重复数目为５１～６７次，
明显低于谢秋幼等报道。且２个家系患者代间传递
中有明显的发病年龄提前趋势，从表ｌ可以看出家
系１患者发病年龄第３代比第２代提前，症状有加
重趋势；家系２患者发病年龄第３代比第２代也明
显提前５岁左右，症状程度类似。家系１患者临床
症状在代间传递中有明显的加重趋势。在此表中还
可看出，２个家系ＣＡＧ重复序列数在第３代患者中
比第２代明显增多。这也提示临床症状、发病年龄
均与ＣＡＧ重复数目有关，ＣＡＧ重复次数越多发病
年龄越小且症状越重 ，进一步证明了此前提到的
遗传早现现象。遗传早现现象主要在父系遗传中更
明显。家系１先证者属于父系遗传，也说明了这一
点。在家系２先证者属于母系遗传，家系２第３代
患者中ＣＡＧ重复序列数比第２代ＣＡＧ序列数无明
显增多，虽发病年龄提前，但症状无加重，需进一步
搜集病例分析母系遗传中ＳＣＡ３的表现。此外，家
系１中Ⅲ１ ＣＡＧ重复序列数为５３次，ｍ６ ＣＡＧ重复
序列数为６７次，但１１ １患者发病年龄比１１６发病年
龄提前９岁；家系２部分患者中ＣＡＧ重复序列数多
于家系１患者，但临床症状却较家系１患者轻，这种
现象可能与遗传异质性有关。由于不同患者具有不
同的遗传基础，从而导致遗传方式、病程进展、发病
年龄、预后以及复发风险、病情严重程度等都可能不
同。研究表明，遗传异质性的存在是导致遗传病病
种增多的原因之一。
家系２中Ｉ ３、Ｉ ４生前均没有共济失调症状，
死因也可排除ＳＣＡ类疾病，但在子代中出现了发病
山东医药２０１１年第５１卷第４９期
患者。这是因为ＣＡＧ重复片段所在的等位基因具
有多态性的特点 ］，如果等位基因携带有处于正常
与异常之间的ＣＡＧ重复数目（即所谓带有中间数目
的ＣＡＧ重复片段，国外报道ＳＣＡ３一般为４８～５１
次 ），由于ＣＡＧ重复片段的不稳定性，在下一代
中ＣＡＧ重复易发生新的突变发病，尤其在父系遗传
中更明显。因此推测家系２的Ｉ ３（男性，７５岁时去
世）可能携带有中间数目的ＣＡＧ重复片段。
ＳＣＡ３症状前患者，是指基因检测ＣＡＧ重复数
目异常，尚无临床症状的人。由于ＳＣＡ３是一种迟
发性神经变性疾病，因此症状前患者达到一定年龄
必定会出现症状。在目前尚无有效治疗方法的情况
下，基因学检查明确症状前诊断防止该病发生具有
重要意义。在本实验的家系１中，ｍ１属于症状前
患者，因为在留取血样时，患者尚未出现临床症状，
经基因检测ＣＡＧ重复数目为５３次，在随访２ ａ后患
者出现共济失调症状，且发病年龄较其父亲提前，症
状更重。这也证实了症状前基因诊断预测发病的准
确性。症状前诊断的重要意义在于使ＳＣＡ家系中
正常人对于自己是否发病有准确的预测，使症状前
患者在婚育年龄对下一代做到产前诊断，防止带有
异常基因的患儿出生。对于经基因诊断明确为
ＳＣＡ３或其他ＳＣＡ亚型的患者，对家系内正常人均
应留取血液进行基因学检测，筛选家系内的症状前
患者，一旦诊断ＣＡＧ重复序列异常，即可诊断成 ，
其致病基因的外显率为１００％。
参考文献：
［１］段晓慧，顾卫红，王国相．常染色体显性遗传脊髓小脑性共济失
调表型和基因型的相关性［Ｊ］．中日友好医院学报，２００８，２２：４１—
４３．
［２］殷鑫浈，张宝荣，吴鼎文，等．脊髓小脑性共济失调第７型的Ｉ临床
特征及基因突变研究［Ｊ］．遗传，２００７，２９（６）：６８８６９２．
［３］Ｄｉｉｒｒ Ａ，Ｓｔｅｖａｎｉｎ Ｇ，Ｃａｎｃｅｌ Ｇ，ｅｔ ａ１．Ｓｐｉｎｏｃｅｒｅｂｅｌｌａｒ ａｔａｘｉａ ３ ａｎｄ
Ｍａｃｈａｄｏ—Ｊｏｓｅｐｈ ｄｉｓｅａｓｅ：ｃｌｉｎｉｃａｌ，ｍｏｌｅｃｕｌａｒ，ａｎｄ ｎｅｕｒ０ｐａｔｈ０ｌｏｇｉｃａｌ
ｆｅａｔｕｒｅ［Ｊ］．Ａｎｎ Ｎｅｕｒｏｌ，１９９６，３９（４）：４９０４９９．
［４］Ｓａｋａｉ Ｔ，Ｋａｗａｋａｍｉ Ｈ＿Ｍａｃｈａｄｏ—Ｊｏｓｅｐｈ ｄｉｓｅａｓｅ：ａ ｐｒｏｐｏｓａｌ ｏｆ ｓｐａｓ—
ｔｉｃ ｐａｒａｐｌｅｇｉｃ ｓｕｂｔｙｐｅ［Ｊ］．Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，１９９６，４６（３）：８４６—８４７．
［５］Ｉｋｅｄａ Ｈ，Ｙａｍａｇｕｃｈｉ Ｍ，Ｓｕｇａｉ Ｓ．Ｅｘｐａｎｄｅｄ ｐｏｌｙｇｌｕｔａｍｉｎｅ ｉｎ ｔｈｅ
Ｍａｅｈａｄｏ—Ｊｏｓｅｐｈ Ｄｉｓｅａｓｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎｄｕｃｅｓ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ
ｖｉｖｏ￣Ｊ］．Ｎａｔ ｇｅｎｅｔ，１９９６，１３（２）：１９６—２０２．
［６］Ｖｉｋｔｏｒ Ｈｏｎｔｉ，ＬＯｓｚｌ６ Ｖ６ｃｓｅｉ．Ｇｅｎｅｔｉｃ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ｓｐｉ—
ｎｏｃｅｒｅｂｅｌｌａｒ ａｔａｘｉａｓ［Ｊ］． Ｎｅｕｒ０ｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ Ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，
２００５，１（２）：１２５—１３３．
（收稿日期：２０１１－０７－０９）