2024年4月6日发(作者：本方雅)
常见缓冲溶液配制方法
乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7)：取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml，用10mol/L氢氧
化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)：取三羟甲基氨基甲烷12.14g，加水800ml，搅拌溶解，并稀释至
1000ml，用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)： 取氯化钙0.294g，加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使
溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)： 取三羟甲基氨基甲烷6.06g，加盐酸赖氨酸3.65g，氯化钠5.8g，
乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0。
乌洛托品缓冲液：取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml。
巴比妥缓冲液(pH7.4)：取巴比妥钠4.42g，加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH
值至7.4，滤过。
巴比妥缓冲液(pH8.6)：取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g，加水使溶解成2000ml。
巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)：取巴比妥钠5.05g，加氯化钠3.7g及水适量使溶解，另取明胶0.5g
加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml。
甲酸钠缓冲液(pH3.3)：取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，
再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30。
邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)： 取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必
要时用稀盐酸)调节pH值至5.6，加水稀释至1000ml，混匀。
枸橼酸盐缓冲液：取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇
稀释至100ml。
枸橼酸盐缓冲液(pH6.2)：取2.1％枸橼酸水溶液，用50％氢氧化钠溶液调节pH值至6.2。
枸橼酸－磷酸氢二钠缓冲液(pH4.0)：甲液：取枸橼酸21g或无水枸橼酸19.2g,加水使溶解成1000ml，
置冰箱内保存。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。 取上述甲液61.45ml与乙液38.55ml
混合，摇匀。
氨－氯化铵缓冲液(pH8.0)：取氯化铵1.07g，加水使溶解成100ml，再加稀氨溶液(1→30)调节pH值
至8.0。
氨－氯化铵缓冲液(pH10.0)：取氯化铵5.4g，加水20ml溶解后，加浓氯溶液35ml，再加水稀释至100ml。
硼砂－氯化钙缓冲液(pH8.0)：取硼砂0.572g与氯化钙2.94g，加水约800ml溶解后,用1mol/L盐酸
溶液约2.5ml调节pH值至8.0，加水稀释至1000ml。
硼砂－碳酸钠缓冲液(pH10.8～11.2)：取无水碳酸钠5.30g,加水使溶解成1000ml；另取硼砂1.91g，
加水使溶解成100ml。临用前取碳酸钠溶液973ml与硼砂溶液27ml，混匀。
硼酸－氯化钾缓冲液(pH9.0)：取硼酸3.09g,加0.1mol/L氯化钾溶液500ml使溶解，再加0.1mol/L
氢氧化钠溶液210ml。
醋酸盐缓冲液(pH3.5)：取醋酸铵25g，加水25ml溶解后，加7mol/L盐酸溶液38ml，用2mol/L盐酸
溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至3.5(电位法指示)，用水稀释至100ml，即得。
醋酸－锂盐缓冲液(pH3.0)：取冰醋酸50ml，加水800ml混合后，用氢氧化锂调节pH值至3.0，再加
水稀释至1000ml。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)：取醋酸钠5.1g，加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)：取无水醋酸钠20g，加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸
60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)：取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml，加每1ml含铜
1mg的硫酸铜溶液0.5ml，再加水稀释至1000ml。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5)：取醋酸钠18g，加冰醋酸9.8ml，再加水稀释至1000ml。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6)：取醋酸钠5.4g，加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加
- 1 -
水稀释至100ml。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0)：取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml。
醋酸－醋酸钾缓冲液(pH4.3)：取醋酸钾14g，加冰醋酸20.5ml，再加水稀释至1000ml。
醋酸－醋酸铵缓冲液(pH4.5)：取醋酸铵7.7g，加水50ml溶解后，加冰醋酸6ml与适量的水使成100ml。
醋酸－醋酸铵缓冲液(pH6.0)：取醋酸铵100g，加水300ml使溶解，加冰醋酸7ml，摇匀。
磷酸－三乙胺缓冲液：取磷酸约4ml与三乙胺约7ml，加50％甲醇稀释至1000ml，用磷酸调节pH值
至3.2。
磷酸盐缓冲液：取磷酸二氢钠38.0g，与磷酸氢二钠5.04g，加水使成1000ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH2.0)：甲液：取磷酸16.6ml，加水至1000ml，摇匀。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，
加水使溶解成1000ml。取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合，摇匀。
磷酸盐缓冲液(pH2.5)：取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至2.5，用水稀释至1000ml。
磷酸盐缓冲液(pH5.0)：取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量，用氢氧化钠试液调节pH值至5.0。
磷酸盐缓冲液(pH5.8)：取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml。
磷酸盐缓冲液(pH6.5)：取磷酸二氢钾0.68g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml，用水稀释至100ml。
磷酸盐缓冲液(pH6.6)：取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g，加水使溶解成400ml。
磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8)：取磷酸二氢钾6.8g，加水500ml使溶解，用0.1mol/L氢氧化钠溶液
调节pH值至6.8；另取胰酶10g，加水适量使溶解，将两液混合后,加水稀释至1000ml。
磷酸盐缓冲液(pH6.8)：取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml，用水
稀释至1000ml，摇匀。
磷酸盐缓冲液(pH7.0)：取磷酸二氢钾0.68g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml，用水稀释至100ml。
磷酸盐缓冲液(pH7.2)：取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml与0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml，加新沸过
的冷水稀释至200ml，摇匀。
磷酸盐缓冲液(pH7.3)：取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000ml，调节pH
值至7.3。
磷酸盐缓冲液(pH7.4)：取磷酸二氢钾1.36g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml，用水稀释至200ml。
磷酸盐缓冲液(pH7.6)：取磷酸二氢钾27.22g，加水使溶解成1000ml，取50ml，加0.2mol/L氢氧化
钠溶液42.4ml，再加水稀释至200ml。
磷酸盐缓冲液(pH7.8)：甲液：取磷酸氢二钠35.9g，加水溶解，并稀释至500ml。乙液：取磷酸二氢
钠2.76g，加水溶解，并稀释至100ml。取上述甲液91.5ml与乙液8.5ml混合，摇匀。
磷酸盐缓冲液(pH7.8～8.0)：取磷酸氢二钾5.59g与磷酸二氢钾0.41g，加水使溶解成1000ml，即得。
1.甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05M）：X ml 0.2M甘氨酸 +Y ml 0.2M盐酸 再加水稀释至200ml
pH
2.2
2.4
2.6
2.8
X/ml
50
50
50
50
Y/ml
44.0
32.4
24.2
16.8
pH
3.0
3.2
3.4
3.6
X/ml
50
50
50
50
Y/ml
11.4
8.2
6.4
5.0
甘氨酸分子量＝75.07 0.2M甘氨酸溶液含15.01g/L
2.邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05M）：X ml 0.2M邻苯二甲酸氢钾 +Y ml 0.2M盐酸 再加水稀释至20ml
pH
2.2
2.4
2.6
2.8
3.0
X/ml
5
5
5
5
5
Y/ml
4.670
3.960
3.295
2.642
2.032
- 2 -
pH
3.2
3.4
3.6
3.8
X/ml
5
5
5
5
Y/ml
1.470
0.990
0.597
0.263
邻苯二甲酸氢钾分子量＝2.4.23 0.2M邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85g/L
3.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液：X ml 0.2M Na
2
HPO
4
+Yml 0.1M柠檬酸
pH
2.2
2.4
2.6
2.8
3.0
3.2
3.4
3.6
3.8
4.0
X/ml
0.40
1.24
2.18
3.17
4.11
4.94
5.70
6.44
7.10
7.71
Y/ml
19.6
18.76
17.82
16.83
15.89
15.06
14.30
13.56
12.90
12.29
pH
4.2
4.4
4.6
4.8
5.0
5.2
5.4
5.6
5.8
6.0
X/ml
8.2
8.82
9.35
9.86
10.30
10.72
11.15
11.60
12.09
12.63
Y/ml
11.72
11.18
10.65
10.14
9.70
9.28
8.85
8.40
7.91
7.37
pH
6.2
6.4
6.6
6.8
7.0
7.2
7.4
7.6
7.8
8.0
X/ml
13.22
13.85
14.55
15.45
16.47
17.39
18.17
18.73
19.15
19.45
Y/ml
6.78
6.15
5.45
4.55
3.53
2.61
1.83
1.27
0.85
0.55
Na
2
HPO
4
分子量＝141.98 0.2M溶液含28.40g/L
Na
2
HPO
4
·2H
2
O分子量＝178.05 0.2M溶液含35.61g/L
C
6
H
8
O
7
·H
2
O分子量＝210.14 0.1M溶液含21.01g/L
4.柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液（先不配）
pH
2.2
3.1
3.3
4.3
5.3
5.8
6.5
钠离子浓度/M
0.20
0.20
0.20
0.20
0.35
0.45
0.38
柠檬酸C
6
H
8
O
7
·H
2
O/g
210
210
210
210
245
285
266
氢氧化钠NaOH/g
84
83
83
83
144
186
156
浓盐酸HCl/ml
160
116
106
45
58
105
126
终体积/L
10
10
10
10
10
10
10
使用时可以每升中加入1g酚，若最后pH有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
5.柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（0.1M）
pH
3.0
3.2
3.4
3.6
3.8
4.0
4.2
4.4
4.6
4.8
0.1M柠檬酸/ml
18.6
17.2
16.0
14.9
14.0
13.1
12.3
11.4
10.3
9.2
0.1 mol/L柠檬酸钠/mL
1.4
2.8
4.0
5.1
6.0
6.9
7.7
8.6
9.7
10.8
pH
5.0
5.2
5.4
5.6
5.8
6.0
6.2
6.4
6.6
0.1M柠檬酸/ml
8.2
7.3
6.4
5.5
4.7
3.8
2.8
2.0
1.4
柠檬酸C
6
H
8
O
7
·H
2
O/g
11.8
12.7
13.6
14.5
15.3
16.2
17.2
18.0
18.6
C
6
H
8
O
7
·H
2
O分子量＝210.14 0.1M溶液含21.01g/L；
Na
3
C
6
H
5
O
7
·2H
2
O分子量＝294.12 0.1M溶液含29.41g/L
6.乙酸-乙酸钠缓冲液（0.2M）
pH
3.6
3.8
4.0
4.2
0.2M NaAc/ml
0.75
1.20
1.80
2.65
0.2M HAC/ml
9.25
8.80
8.20
7.35
pH
4.4
4.6
4.8
5.0
0.2M NaAc/ml
3.70
4.90
5.90
7.00
- 3 -
0.2M HAC/ml
6.30
5.10
4.10
3.00
pH
5.2
5.4
5.6
5.8
0.2M NaAc/ml
7.90
8.60
9.10
9.40
0.2M HAC/ml
2.10
1.40
0.90
0.60
NaAc（三水）分子量＝136.09 0.2M溶液为27.22g/L
7.磷酸盐缓冲液
(1)磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2M）X ml 0.2M Na
2
HPO
4
/ml +Y ml 0.2M NaH
2
PO
4
/ml
pH
5.8
5.9
6.0
6.1
6.2
6.3
6.4
6.5
X/ml
8.0
10.0
12.3
15.0
18.5
22.5
26.5
31.5
Y/ml
92.0
90.0
87.7
85.0
81.5
77.5
73.5
68.5
pH
6.6
6.7
6.8
6.9
7.0
7.1
7.2
7.3
X/ml
37.5
43.5
49.5
55.0
61.0
67.0
72.0
77.0
Y/ml
62.5
56.5
51.0
45.0
39.0
33.0
28.0
23.0
pH
7.4
7.5
7.6
7.7
7.8
7.9
8.0
X/ml
81.0
84.0
87.0
89.5
91.5
93.0
94.7
Y/ml
19.0
16.0
13.0
10.5
8.5
7.0
5.3
Na
2
HPO
4
·2H
2
O分子量＝178.05 0.2M溶液含35.61g/L
Na
2
HPO
4
·12H
2
O分子量＝358.22 0.2M溶液含71.64g/L
NaH
2
PO
4
·H
2
O分子量＝138.01 0.2M溶液含27.6g/L
NaH
2
PO
4
·2H
2
O分子量＝156.03 0.2M溶液含31.21g/L
(2) 磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液（1/15M）X ml 1/15M Na
2
HPO
4
/ml +Y ml 1/15M KH
2
PO4/ml
pH
4.92
5.29
5.91
6.24
6.47
X/ml
0.10
0.50
1.00
2.00
3.00
Y/ml
9.90
9.50
9.00
8.00
7.00
pH
6.64
6.81
6.98
7.17
7.38
X/ml
4.00
5.00
6.00
7.00
8.00
Y/ml
6.00
5.00
4.00
3.00
2.00
pH
7.73
8.04
8.34
8.67
9.18
X/ml
9.00
9.50
9.75
9.90
10.00
Y/ml
1.00
0.50
0.25
0.10
0
Na
2
HPO
4
·2H
2
O分子量＝178.05 1/15M溶液含35.61g/L；KH
2
PO
4
分子量＝136.09 1/15M溶液含9.078g/L
8.磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05M）X ml 0.2M KH
2
PO
4
+Y ml 0.2M NaOH 再加水稀释至20ml
pH
5.8
6.0
6.2
6.4
pH
6.8
7.0
7.2
7.4
7.6
X/ml
5.0
5.0
5.0
5.1
X/ml
100
100
100
100
100
Y/ml
0.372
0.570
0.860
1.260
Y/ml
18.4
17.8
16.7
15.3
13.4
pH
6.6
6.8
7.0
7.2
pH
7.8
8.0
8.2
8.4
8.6
X/ml
5.1
5.2
5.2
5.3
X/ml
100
100
100
100
100
Y/ml
1.780
2.365
2.963
3.500
Y/ml
11.47
9.39
7.21
5.21
3.82
pH
7.4
7.6
7.8
8.0
pH
8.8
9.0
9.2
9.4
9.6
X/ml
5.3
5.4
5.4
5.4
X/ml
100
100
100
100
100
Y/ml
3.950
4.280
4.520
4.680
Y/ml
2.52
1.65
1.13
0.70
0.35
9.巴比妥钠-盐酸缓冲液（18℃）100 ml 0.04M巴比妥钠/ml +0.2M盐酸/ml
巴比妥钠分子量＝206.18 0.04M溶液为8.25g/L
-盐酸缓冲液50ml 0.1M三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液于X ml 0.1M盐酸混匀后，加水稀释至100ml
pH
7.1
7.2
7.3
7.4
X/ml
45.7
44.7
43.4
42.0
pH
7.5
7.6
7.7
7.8
X/ml
40.3
38.5
36.6
34.5
pH
7.9
8.0
8.1
8.2
X/ml
32.0
29.2
26.2
22.9
pH
8.3
8.4
8.5
8.6
X/ml
19.9
17.2
14.7
12.4
pH
8.7
8.8
8.9
X/ml
10.3
8.5
7.0
三羟甲基氨基甲烷(Tris)分子量＝121.14 0.1M溶液为12.114g/L。
- 4 -
Tris溶液可以从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。
11.硼酸-硼砂缓冲液（0.2M硼酸根）
pH
7.4
7.6
7.8
0.05M硼砂/ml
1.0
1.5
2.0
0.2M硼酸/ml
9.0
8.5
8.0
pH
8.0
8.2
8.4
0.05M硼砂/ml
3.0
3.5
4.5
0.2M硼酸/ml
7.0
6.5
5.5
pH
8.7
9.0
0.05M硼砂/ml
6.0
8.0
0.2M硼酸/ml
4.0
2.0
硼砂Na
2
B4O
7
·10H
2
O分子量＝381.43 0.05M(=0.2M硼酸根)溶液为19.07g/L
硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存
硼酸H
3
BO
3
分子量＝61.84 0.2M溶液为12.37g/L
12.甘氨酸-氢氧化钠缓冲液（0.05M）X ml 0.2M甘氨酸 +Y ml 0.2M氢氧化钠 再加水稀释至200ml
pH
8.6
8.8
9.0
9.2
X/ml
50
50
50
50
Y/ml
4.0
6.0
8.8
12.0
pH
9.4
9.6
9.8
10.0
X/ml
50
50
50
50
Y/ml
16.8
22.4
27.2
32.0
pH
10.4
10.6
X/ml
50
50
Y/ml
38.6
45.5
甘氨酸分子量＝75.07 0.2M甘氨酸溶液含15.01g/L
13.硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M硼酸根）X ml 0.05M硼砂 +Y ml 0.2M氢氧化钠 再加水稀释至200ml
pH
9.3
9.4
X/ml
50
50
Y/ml
6.0
11.0
pH
9.6
9.8
X/ml
50
50
Y/ml
23.0
34.0
pH
10.0
10.1
X/ml
50
50
Y/ml
43.0
46.0
硼砂Na
2
B
4
O
7
·10H
2
O分子量＝381.43 0.05M(=0.2M硼酸根)溶液为19.07g/L
14.碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M）Ca
2+
，Mg
2+
存在时不得使用
pH
20℃
9.16
9.40
9.51
9.78
9.90
10.14
10.28
10.53
10.83
37℃
8.77
9.12
9.40
9.50
9.72
9.90
10.08
10.28
10.57
0.1M Na
2
CO
3
(
ml
)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0.1M NaHCO
3
(
ml
)
9
8
7
6
5
4
3
2
1
Na
2
CO
3
·10H
2
O分子量＝286.2 0.1M溶液为28.62g/L
NaHCO
3
分子量＝84.0 0.1M溶液为8.40g/L
- 5 -
2024年4月6日发(作者：本方雅)
常见缓冲溶液配制方法
乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7)：取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml，用10mol/L氢氧
化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)：取三羟甲基氨基甲烷12.14g，加水800ml，搅拌溶解，并稀释至
1000ml，用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)： 取氯化钙0.294g，加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使
溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)： 取三羟甲基氨基甲烷6.06g，加盐酸赖氨酸3.65g，氯化钠5.8g，
乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0。
乌洛托品缓冲液：取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml。
巴比妥缓冲液(pH7.4)：取巴比妥钠4.42g，加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH
值至7.4，滤过。
巴比妥缓冲液(pH8.6)：取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g，加水使溶解成2000ml。
巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)：取巴比妥钠5.05g，加氯化钠3.7g及水适量使溶解，另取明胶0.5g
加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml。
甲酸钠缓冲液(pH3.3)：取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，
再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30。
邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)： 取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必
要时用稀盐酸)调节pH值至5.6，加水稀释至1000ml，混匀。
枸橼酸盐缓冲液：取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇
稀释至100ml。
枸橼酸盐缓冲液(pH6.2)：取2.1％枸橼酸水溶液，用50％氢氧化钠溶液调节pH值至6.2。
枸橼酸－磷酸氢二钠缓冲液(pH4.0)：甲液：取枸橼酸21g或无水枸橼酸19.2g,加水使溶解成1000ml，
置冰箱内保存。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。 取上述甲液61.45ml与乙液38.55ml
混合，摇匀。
氨－氯化铵缓冲液(pH8.0)：取氯化铵1.07g，加水使溶解成100ml，再加稀氨溶液(1→30)调节pH值
至8.0。
氨－氯化铵缓冲液(pH10.0)：取氯化铵5.4g，加水20ml溶解后，加浓氯溶液35ml，再加水稀释至100ml。
硼砂－氯化钙缓冲液(pH8.0)：取硼砂0.572g与氯化钙2.94g，加水约800ml溶解后,用1mol/L盐酸
溶液约2.5ml调节pH值至8.0，加水稀释至1000ml。
硼砂－碳酸钠缓冲液(pH10.8～11.2)：取无水碳酸钠5.30g,加水使溶解成1000ml；另取硼砂1.91g，
加水使溶解成100ml。临用前取碳酸钠溶液973ml与硼砂溶液27ml，混匀。
硼酸－氯化钾缓冲液(pH9.0)：取硼酸3.09g,加0.1mol/L氯化钾溶液500ml使溶解，再加0.1mol/L
氢氧化钠溶液210ml。
醋酸盐缓冲液(pH3.5)：取醋酸铵25g，加水25ml溶解后，加7mol/L盐酸溶液38ml，用2mol/L盐酸
溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至3.5(电位法指示)，用水稀释至100ml，即得。
醋酸－锂盐缓冲液(pH3.0)：取冰醋酸50ml，加水800ml混合后，用氢氧化锂调节pH值至3.0，再加
水稀释至1000ml。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)：取醋酸钠5.1g，加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)：取无水醋酸钠20g，加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸
60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)：取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml，加每1ml含铜
1mg的硫酸铜溶液0.5ml，再加水稀释至1000ml。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5)：取醋酸钠18g，加冰醋酸9.8ml，再加水稀释至1000ml。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6)：取醋酸钠5.4g，加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加
- 1 -
水稀释至100ml。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0)：取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml。
醋酸－醋酸钾缓冲液(pH4.3)：取醋酸钾14g，加冰醋酸20.5ml，再加水稀释至1000ml。
醋酸－醋酸铵缓冲液(pH4.5)：取醋酸铵7.7g，加水50ml溶解后，加冰醋酸6ml与适量的水使成100ml。
醋酸－醋酸铵缓冲液(pH6.0)：取醋酸铵100g，加水300ml使溶解，加冰醋酸7ml，摇匀。
磷酸－三乙胺缓冲液：取磷酸约4ml与三乙胺约7ml，加50％甲醇稀释至1000ml，用磷酸调节pH值
至3.2。
磷酸盐缓冲液：取磷酸二氢钠38.0g，与磷酸氢二钠5.04g，加水使成1000ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH2.0)：甲液：取磷酸16.6ml，加水至1000ml，摇匀。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，
加水使溶解成1000ml。取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合，摇匀。
磷酸盐缓冲液(pH2.5)：取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至2.5，用水稀释至1000ml。
磷酸盐缓冲液(pH5.0)：取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量，用氢氧化钠试液调节pH值至5.0。
磷酸盐缓冲液(pH5.8)：取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml。
磷酸盐缓冲液(pH6.5)：取磷酸二氢钾0.68g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml，用水稀释至100ml。
磷酸盐缓冲液(pH6.6)：取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g，加水使溶解成400ml。
磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8)：取磷酸二氢钾6.8g，加水500ml使溶解，用0.1mol/L氢氧化钠溶液
调节pH值至6.8；另取胰酶10g，加水适量使溶解，将两液混合后,加水稀释至1000ml。
磷酸盐缓冲液(pH6.8)：取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml，用水
稀释至1000ml，摇匀。
磷酸盐缓冲液(pH7.0)：取磷酸二氢钾0.68g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml，用水稀释至100ml。
磷酸盐缓冲液(pH7.2)：取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml与0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml，加新沸过
的冷水稀释至200ml，摇匀。
磷酸盐缓冲液(pH7.3)：取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000ml，调节pH
值至7.3。
磷酸盐缓冲液(pH7.4)：取磷酸二氢钾1.36g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml，用水稀释至200ml。
磷酸盐缓冲液(pH7.6)：取磷酸二氢钾27.22g，加水使溶解成1000ml，取50ml，加0.2mol/L氢氧化
钠溶液42.4ml，再加水稀释至200ml。
磷酸盐缓冲液(pH7.8)：甲液：取磷酸氢二钠35.9g，加水溶解，并稀释至500ml。乙液：取磷酸二氢
钠2.76g，加水溶解，并稀释至100ml。取上述甲液91.5ml与乙液8.5ml混合，摇匀。
磷酸盐缓冲液(pH7.8～8.0)：取磷酸氢二钾5.59g与磷酸二氢钾0.41g，加水使溶解成1000ml，即得。
1.甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05M）：X ml 0.2M甘氨酸 +Y ml 0.2M盐酸 再加水稀释至200ml
pH
2.2
2.4
2.6
2.8
X/ml
50
50
50
50
Y/ml
44.0
32.4
24.2
16.8
pH
3.0
3.2
3.4
3.6
X/ml
50
50
50
50
Y/ml
11.4
8.2
6.4
5.0
甘氨酸分子量＝75.07 0.2M甘氨酸溶液含15.01g/L
2.邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05M）：X ml 0.2M邻苯二甲酸氢钾 +Y ml 0.2M盐酸 再加水稀释至20ml
pH
2.2
2.4
2.6
2.8
3.0
X/ml
5
5
5
5
5
Y/ml
4.670
3.960
3.295
2.642
2.032
- 2 -
pH
3.2
3.4
3.6
3.8
X/ml
5
5
5
5
Y/ml
1.470
0.990
0.597
0.263
邻苯二甲酸氢钾分子量＝2.4.23 0.2M邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85g/L
3.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液：X ml 0.2M Na
2
HPO
4
+Yml 0.1M柠檬酸
pH
2.2
2.4
2.6
2.8
3.0
3.2
3.4
3.6
3.8
4.0
X/ml
0.40
1.24
2.18
3.17
4.11
4.94
5.70
6.44
7.10
7.71
Y/ml
19.6
18.76
17.82
16.83
15.89
15.06
14.30
13.56
12.90
12.29
pH
4.2
4.4
4.6
4.8
5.0
5.2
5.4
5.6
5.8
6.0
X/ml
8.2
8.82
9.35
9.86
10.30
10.72
11.15
11.60
12.09
12.63
Y/ml
11.72
11.18
10.65
10.14
9.70
9.28
8.85
8.40
7.91
7.37
pH
6.2
6.4
6.6
6.8
7.0
7.2
7.4
7.6
7.8
8.0
X/ml
13.22
13.85
14.55
15.45
16.47
17.39
18.17
18.73
19.15
19.45
Y/ml
6.78
6.15
5.45
4.55
3.53
2.61
1.83
1.27
0.85
0.55
Na
2
HPO
4
分子量＝141.98 0.2M溶液含28.40g/L
Na
2
HPO
4
·2H
2
O分子量＝178.05 0.2M溶液含35.61g/L
C
6
H
8
O
7
·H
2
O分子量＝210.14 0.1M溶液含21.01g/L
4.柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液（先不配）
pH
2.2
3.1
3.3
4.3
5.3
5.8
6.5
钠离子浓度/M
0.20
0.20
0.20
0.20
0.35
0.45
0.38
柠檬酸C
6
H
8
O
7
·H
2
O/g
210
210
210
210
245
285
266
氢氧化钠NaOH/g
84
83
83
83
144
186
156
浓盐酸HCl/ml
160
116
106
45
58
105
126
终体积/L
10
10
10
10
10
10
10
使用时可以每升中加入1g酚，若最后pH有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
5.柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（0.1M）
pH
3.0
3.2
3.4
3.6
3.8
4.0
4.2
4.4
4.6
4.8
0.1M柠檬酸/ml
18.6
17.2
16.0
14.9
14.0
13.1
12.3
11.4
10.3
9.2
0.1 mol/L柠檬酸钠/mL
1.4
2.8
4.0
5.1
6.0
6.9
7.7
8.6
9.7
10.8
pH
5.0
5.2
5.4
5.6
5.8
6.0
6.2
6.4
6.6
0.1M柠檬酸/ml
8.2
7.3
6.4
5.5
4.7
3.8
2.8
2.0
1.4
柠檬酸C
6
H
8
O
7
·H
2
O/g
11.8
12.7
13.6
14.5
15.3
16.2
17.2
18.0
18.6
C
6
H
8
O
7
·H
2
O分子量＝210.14 0.1M溶液含21.01g/L；
Na
3
C
6
H
5
O
7
·2H
2
O分子量＝294.12 0.1M溶液含29.41g/L
6.乙酸-乙酸钠缓冲液（0.2M）
pH
3.6
3.8
4.0
4.2
0.2M NaAc/ml
0.75
1.20
1.80
2.65
0.2M HAC/ml
9.25
8.80
8.20
7.35
pH
4.4
4.6
4.8
5.0
0.2M NaAc/ml
3.70
4.90
5.90
7.00
- 3 -
0.2M HAC/ml
6.30
5.10
4.10
3.00
pH
5.2
5.4
5.6
5.8
0.2M NaAc/ml
7.90
8.60
9.10
9.40
0.2M HAC/ml
2.10
1.40
0.90
0.60
NaAc（三水）分子量＝136.09 0.2M溶液为27.22g/L
7.磷酸盐缓冲液
(1)磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2M）X ml 0.2M Na
2
HPO
4
/ml +Y ml 0.2M NaH
2
PO
4
/ml
pH
5.8
5.9
6.0
6.1
6.2
6.3
6.4
6.5
X/ml
8.0
10.0
12.3
15.0
18.5
22.5
26.5
31.5
Y/ml
92.0
90.0
87.7
85.0
81.5
77.5
73.5
68.5
pH
6.6
6.7
6.8
6.9
7.0
7.1
7.2
7.3
X/ml
37.5
43.5
49.5
55.0
61.0
67.0
72.0
77.0
Y/ml
62.5
56.5
51.0
45.0
39.0
33.0
28.0
23.0
pH
7.4
7.5
7.6
7.7
7.8
7.9
8.0
X/ml
81.0
84.0
87.0
89.5
91.5
93.0
94.7
Y/ml
19.0
16.0
13.0
10.5
8.5
7.0
5.3
Na
2
HPO
4
·2H
2
O分子量＝178.05 0.2M溶液含35.61g/L
Na
2
HPO
4
·12H
2
O分子量＝358.22 0.2M溶液含71.64g/L
NaH
2
PO
4
·H
2
O分子量＝138.01 0.2M溶液含27.6g/L
NaH
2
PO
4
·2H
2
O分子量＝156.03 0.2M溶液含31.21g/L
(2) 磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液（1/15M）X ml 1/15M Na
2
HPO
4
/ml +Y ml 1/15M KH
2
PO4/ml
pH
4.92
5.29
5.91
6.24
6.47
X/ml
0.10
0.50
1.00
2.00
3.00
Y/ml
9.90
9.50
9.00
8.00
7.00
pH
6.64
6.81
6.98
7.17
7.38
X/ml
4.00
5.00
6.00
7.00
8.00
Y/ml
6.00
5.00
4.00
3.00
2.00
pH
7.73
8.04
8.34
8.67
9.18
X/ml
9.00
9.50
9.75
9.90
10.00
Y/ml
1.00
0.50
0.25
0.10
0
Na
2
HPO
4
·2H
2
O分子量＝178.05 1/15M溶液含35.61g/L；KH
2
PO
4
分子量＝136.09 1/15M溶液含9.078g/L
8.磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05M）X ml 0.2M KH
2
PO
4
+Y ml 0.2M NaOH 再加水稀释至20ml
pH
5.8
6.0
6.2
6.4
pH
6.8
7.0
7.2
7.4
7.6
X/ml
5.0
5.0
5.0
5.1
X/ml
100
100
100
100
100
Y/ml
0.372
0.570
0.860
1.260
Y/ml
18.4
17.8
16.7
15.3
13.4
pH
6.6
6.8
7.0
7.2
pH
7.8
8.0
8.2
8.4
8.6
X/ml
5.1
5.2
5.2
5.3
X/ml
100
100
100
100
100
Y/ml
1.780
2.365
2.963
3.500
Y/ml
11.47
9.39
7.21
5.21
3.82
pH
7.4
7.6
7.8
8.0
pH
8.8
9.0
9.2
9.4
9.6
X/ml
5.3
5.4
5.4
5.4
X/ml
100
100
100
100
100
Y/ml
3.950
4.280
4.520
4.680
Y/ml
2.52
1.65
1.13
0.70
0.35
9.巴比妥钠-盐酸缓冲液（18℃）100 ml 0.04M巴比妥钠/ml +0.2M盐酸/ml
巴比妥钠分子量＝206.18 0.04M溶液为8.25g/L
-盐酸缓冲液50ml 0.1M三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液于X ml 0.1M盐酸混匀后，加水稀释至100ml
pH
7.1
7.2
7.3
7.4
X/ml
45.7
44.7
43.4
42.0
pH
7.5
7.6
7.7
7.8
X/ml
40.3
38.5
36.6
34.5
pH
7.9
8.0
8.1
8.2
X/ml
32.0
29.2
26.2
22.9
pH
8.3
8.4
8.5
8.6
X/ml
19.9
17.2
14.7
12.4
pH
8.7
8.8
8.9
X/ml
10.3
8.5
7.0
三羟甲基氨基甲烷(Tris)分子量＝121.14 0.1M溶液为12.114g/L。
- 4 -
Tris溶液可以从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。
11.硼酸-硼砂缓冲液（0.2M硼酸根）
pH
7.4
7.6
7.8
0.05M硼砂/ml
1.0
1.5
2.0
0.2M硼酸/ml
9.0
8.5
8.0
pH
8.0
8.2
8.4
0.05M硼砂/ml
3.0
3.5
4.5
0.2M硼酸/ml
7.0
6.5
5.5
pH
8.7
9.0
0.05M硼砂/ml
6.0
8.0
0.2M硼酸/ml
4.0
2.0
硼砂Na
2
B4O
7
·10H
2
O分子量＝381.43 0.05M(=0.2M硼酸根)溶液为19.07g/L
硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存
硼酸H
3
BO
3
分子量＝61.84 0.2M溶液为12.37g/L
12.甘氨酸-氢氧化钠缓冲液（0.05M）X ml 0.2M甘氨酸 +Y ml 0.2M氢氧化钠 再加水稀释至200ml
pH
8.6
8.8
9.0
9.2
X/ml
50
50
50
50
Y/ml
4.0
6.0
8.8
12.0
pH
9.4
9.6
9.8
10.0
X/ml
50
50
50
50
Y/ml
16.8
22.4
27.2
32.0
pH
10.4
10.6
X/ml
50
50
Y/ml
38.6
45.5
甘氨酸分子量＝75.07 0.2M甘氨酸溶液含15.01g/L
13.硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M硼酸根）X ml 0.05M硼砂 +Y ml 0.2M氢氧化钠 再加水稀释至200ml
pH
9.3
9.4
X/ml
50
50
Y/ml
6.0
11.0
pH
9.6
9.8
X/ml
50
50
Y/ml
23.0
34.0
pH
10.0
10.1
X/ml
50
50
Y/ml
43.0
46.0
硼砂Na
2
B
4
O
7
·10H
2
O分子量＝381.43 0.05M(=0.2M硼酸根)溶液为19.07g/L
14.碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M）Ca
2+
，Mg
2+
存在时不得使用
pH
20℃
9.16
9.40
9.51
9.78
9.90
10.14
10.28
10.53
10.83
37℃
8.77
9.12
9.40
9.50
9.72
9.90
10.08
10.28
10.57
0.1M Na
2
CO
3
(
ml
)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0.1M NaHCO
3
(
ml
)
9
8
7
6
5
4
3
2
1
Na
2
CO
3
·10H
2
O分子量＝286.2 0.1M溶液为28.62g/L
NaHCO
3
分子量＝84.0 0.1M溶液为8.40g/L
- 5 -