2024年6月12日发(作者：帖清雅)
GC法测定阿托伐他汀钙关键中间体ATS-9
吕一甫;徐桂清;郝乐辰;曾淑芸;李杰;贾淑红;姜玉钦;李伟
【摘 要】建立了一种检测阿托伐他汀钙关键中间体(ATS-9)含量的气相色谱法.采
用Agilent DB-624(30 m×0.32 mm,1.8μm)毛细管气相色谱柱,高纯氮为载气,氢
火焰离子化检测器检测,程序升温,1,2-二氯乙烷为稀释溶剂,正十六烷为内标
物.ATS-9在0.8128～4.0638 mg·mL-1(r=0.9995)范围内,线性关系良好,平均回收
率为99.68％,RSD为1.26％.
【期刊名称】《合成化学》
【年(卷),期】2018(026)009
【总页数】4页(P695-698)
【关键词】阿托伐他汀钙中间体;ATS-9;气相色谱;含量测定
【作 者】吕一甫;徐桂清;郝乐辰;曾淑芸;李杰;贾淑红;姜玉钦;李伟
【作者单位】天方药业有限公司,河南驻马店 463000;河南师范大学化学化工学院,
河南新乡 453007;河南师范大学化学化工学院,河南新乡 453007;河南师范大学化
学化工学院,河南新乡 453007;河南师范大学化学化工学院,河南新乡 453007;河南
师范大学化学化工学院,河南新乡 453007;天方药业有限公司,河南驻马店 463000;
河南师范大学化学化工学院,河南新乡 453007;河南师范大学化学化工学院,河南新
乡 453007
【正文语种】中 文
【中图分类】O657.7+1
阿托伐他汀钙(atorvastatin calcium， 1)，商品名为立普妥(Lipitor)，是HMG-
CoA还原酶选择性、竞争性抑制剂，属于第三代全合成的他汀类调血脂药。1的
合成方法繁多[1-4]，但Paal-Knorr法目前仍是经典合成方法[5-6]，其核心是将
关键中间体(4R,6R)-6-胺乙基-2,2-二甲基-1,3-二氧六环-4-乙酸叔丁酯(ATS-9)和
4-氟-α-(2-甲基-1-氧代丙基)-γ-氧代-N,β-二苯基苯丁酰胺(M-4)[7]进行缩合，再
经脱保护、水解、成盐等反应得到1。
ATS-9作为合成1的关键中间体，其含量直接影响后续反应的投料，并最终影响
1的质量和收率，故其合成和纯度至关重要。目前，ATS-9的合成已有多篇文献报
道[8-11]，但其质量仅通过气相色谱面积归一化法测定纯度[11]判断。然而ATS-9
中可能含有高沸点物质，在该条件下无法检测出来，因此仅靠纯度判断其质量是不
合适的。测定ATS-9的纯度对判断其质量非常合理和必要。目前尚未见ATS-9纯
度测定方法的报道。
本文建立了一种准确测定ATS-9纯度的方法。即采用气相色谱法，选用Agilent
DB-624毛细管柱，以正十六烷为内标，测定ATS-9纯度。并对分析方法进行了
验证。
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
Thermo Scientific Trace 1300型气相色谱仪[Agilent DB-624毛细管柱(30
m×0.32 mm， 1.8 μm)，程序升温：柱温150 ℃， 2 min；40 ℃·min-1,
220 ℃， 3 min； 20 ℃·min-1，240 ℃，8 min；进样口温度300 ℃；柱流速：
2.5 mL·min-1，分流比10/1；检测器：氢火焰离子化检测器(FID)，温度300 ℃；
载气：高纯N2；进样量：2 μL；内标物：正十六烷；Chromeleon 7.1 色谱工作
站]。
ATS-9对照品，含量98%，多伦多研究化学品公司；ATS-9供试品，自制；正十
六烷，分析纯，中国医药公司上海化学试剂采购供应站；1,2-二氯乙烷和无水乙醇
等试剂均为分析纯。
1.2 溶液配制
以1,2-二氯乙烷为溶剂分别配制：(1)内标储备溶液、(2)对照品储备液和(3)供试品
储备液，浓度均为20 mg·mL-1，(4)供试品溶液，浓度10 mg·mL-1。
2 结果与讨论
2.1 色谱柱及色谱条件的选择
分别使用Thermo Fisher TG-5MS、 Agilent DB-624、 Thermo Fisher TG-624
和Rtx®-5 Amine等不同极性毛细管气相色谱柱以恒温和程序升温的方式对ATS-
9进行检测，结果表明中等极性柱Agilent DB-624在程序升温的情况下对ATS-9
及其杂质分离效果最好，峰形较佳。
2.2 稀释溶剂的选择
由于ATS-9是无色至淡黄绿色黏稠液体，直接进样重现性很差，且对进样针的伤
害较大，须用溶剂稀释后进行测定。用1,2-二氯乙烷、甲醇、DMSO、二氯甲烷、
DMF、丙酮等不同溶剂稀释ATS-9后测定，结果表明：只有1,2-二氯乙烷对
ATS-9和内标物正十六烷均有良好的溶解能力，稳定性好，无分层，且不干扰主
峰及其它色谱峰的分离，故1,2-二氯乙烷为最佳稀释溶剂。
2.3 定量方法及内标物的选择
最初采用操作方便的外标法定量，但测定结果表明方法重现性极差，无法准确定量。
试用内标法，方法重现性好，误差小，最终选择内标法定量。分别以正十二烷、正
十四烷、正十六烷和正十七烷为内标物对ATS-9进行测定，结果显示正十六烷与
ATS-9出峰时间相近且与ATS-9能完全分离，在ATS-9出峰位置无干扰，故正十
六烷为最佳内标物。
Time/min图1典型气相色谱图*Figure 1Typical Gas Chromatograms*A: 空白
溶剂，B: ATS-9对照品溶液，C: ATS-9供试品溶液峰1：1,2-二氯乙烷，峰2：
TS-9，峰3：正十六烷。表1 相对校正因子Table 1 The relative correction
factor
对照品浓度/mg·mL-10.811.622.032.443.253.664.06校正因子2.392 32.298
42.22582.129 02.091 22.003 92.081 1平均校正因子2.174 5RSD/%6.28
表2 ATS-9加样回收率试验Table 2 Sample recovery rate test of ATS-9No.样
品中含量/mg对照品加入量/mg测得量/mg回收率/%平均回收率
/%RSD/%18.229.6917.3398.8628.549.6918.35101.0538.539.6918.2199.7448.
148.0816.0798.4358.178.0816.1598.8168.038.0815.97100.4278.716.4615.29
98.6588.066.4614.4099.0898.976.4615.41102.0999.681.26
2.4 方法学考察
(1) 系统适用性试验
在上述色谱条件下，分别取1,2-二氯乙烷(空白溶剂)、ATS-9对照品溶液、ATS-9
供试品溶液进样测定，记录色谱图(图1)。在ATS-9出峰位置无杂质干扰，且其与
内标物和相邻杂质分离度均大于1.5，以ATS-9计，理论塔板数不低于80 000。
(2) 线性试验及校正因子
分别精密量取对照品储备液0.2、 0.4、 0.5、 0.6、 0.8、 0.9、 1.0 mL于5 mL
容量瓶中，各加入内标储备液0.4 mL，用1,2-二氯乙烷稀释定容，制备系列浓度
溶液进样测定，记录色谱图。每个浓度进样3次。以对照品峰面积与内标物峰面
积之比为纵坐标，以对照品质量与内标物质量比值为横坐标，进行线性回归，回归
方程为y=0.502 4x-0.056 6，相关系数r=0.999 5，结果表明：ATS-9在0.812
8～4.063 8 mg·mL-1有良好的线性关系。根据每一个浓度所得对照品峰面积和内
标峰面积，计算不同浓度下校正因子(表1)。
(3) 重复性试验
精密称取ATS-9供试品(批号20150121)6份，按“1.2”方法制供试品溶液，进
行色谱测定，每份平行测定3次，结果表明ATS-9平均含量为99.67%， RSD为
0.65%。
(4) 精密度试验
精密量取对照品储备液0.8 mL于5 mL容量瓶中，加入内标溶液0.4 mL，用1,2-
二氯乙烷稀释定容。按“1.3”项下方法，平行进样6次，所得对照品峰面积与内
标物峰面积之比的RSD为1.38%。
(5) 溶液稳定性试验
供试品溶液不稳定，在常温长时间放置后，含量测定结果误差大，因此，考察了供
试品溶液的稳定性。
精密量取供试品储备液适量于5 mL容量瓶中，加入内标溶液0.4 mL，用1,2-二
氯乙烷稀释定容。按“1.3”项下方法，分别在0、 1、 2.5、 3.5、 4.5、 5.5、
6.5、 7、 9、 12 h进样，结果表明，供试品溶液在6.5 h内稳定，供试品峰面积
与内标物峰面积之比的RSD为0.57%，平均含量为99.66%，含量RSD为0.50%。
(6) 加样回收率试验
精密称取9份已知含量的ATS-9(批号20150119)于10 mL容量瓶中，用1,2-二
氯乙烷稀释定容，即得供试品储备溶液；分别精密量取0.8 mL于5 mL容量瓶中，
再分别加入对照品储备溶液0.96、 0.8、 0.64 mL(相当于ATS-9含量120%、
100%、 80%含量的对照品)，各加入内标储备溶液0.4 mL，用1,2-二氯乙烷稀释
定容，即得供试品溶液。每份平行进样3次进行测定。ATS-9平均回收率为
99.68%， RSD为1.26%，数据见表2。
(7) 样品测定
精密称取ATS-9供试品(批号20141012、 20141101、 20141205)适量，按
“1.2”方法平行制备两份供试品溶液，每份平行进样3次。结果所得ATS-9平均
含量分别为99.41%、 99.62%和100.10%。
通过对稀释溶剂、色谱柱、内标物的筛选，对检测条件进行优化，建立了一种GC
法测定阿托伐他汀钙关键中间体ATS-9含量的方法。ATS-9在0.812 8～4.063 8
mg·mL-1(r=0.999 5)线性关系良好，平均回收率为99.68%， RSD为1.26%。
参考文献
【相关文献】
[1] 张亚平,杨淑莲,陈芬儿. HPLC法检测阿托伐他汀钙有关物质的含量及光学纯度[J].药物分析杂
志,2010,30(12):2311-2313.
[2] KELVIN L B, DONALD E B, CARL F D, et al. The convergent synthesis of CI-981,an
optically active,highly potent,tissue selective inhibitor of HMG-CoA
reductase[J].Tetrahedron Lett,1992,33(17):2283-2284.
[3] LIU J J, HSU C C, WONG C H. Sequential aldol condensation catalyzed by DERA mutant
Ser238Asp and a formal total synthesis of atorvastatin[J].Tetrahedron
Lett,2004,45(11):2439-2441.
[4] RAJESHWAR R S, HIMABINDU V, PRATAP R P, et al. An efficient synthesis of highly
substituted pyrrole and bis pyrrole derivatives[J].J Heterocyclic Chem,2007,44(4):923-926.
[5] 张宜凡,虞心红. 调血脂药阿托伐他汀钙的合成研究进展[J].中国药业,2010,19(21):4-6.
[6] 徐颂. 阿托伐他汀钙合成路线[J].中国新药杂志,2006,15(22):1913-1917.
[7] BULTER D E, LE T V, MILLAR A, et al. Process for the synthesis of (5R)-l,1-dimethylethyl-
6-eyano-5-hydroxy-3-oxo-hexanoate:US 5155251[P].1992.
[8] STANISLAY R. A new way to tert-butyl[(4R,6R)-6-aminoethyl-2,2-dimethyl-1,3-dioxan-
4-yl] acetate,a key intermediate of Atorvastatin synthesis[J].Synthetic
Commun,2003,33(13):2275-2283.
[9] 张立光,於学良,吴芝园,等. 阿托伐他汀钙中间体的合成[J].中国医药工业杂志,2013,44(10):975-
977.
[10] BROWER P L, BUTLER D E, DEERING C F, et al. The synthesis of (4R-cis)-1,1-
dimethylethyl 6-cyanomethyl-2,2-dimethyl-1,3-dioxane-4-acetate,a key intermediate for
the preparation of CI-981,a highly potent,tissue selective inhibitor of HMG-CoA
reductase[J].Tetrahedron Lett,1992,33(17):2279-2282.
[11] XIONG F J, LI J, CHEN X F, et al. An improved process for chiron synthesis of the
atorvastatin side chain[J].Tetrahedron-Asymmetr,2014,25(16-17):1205-1208.
2024年6月12日发(作者：帖清雅)
GC法测定阿托伐他汀钙关键中间体ATS-9
吕一甫;徐桂清;郝乐辰;曾淑芸;李杰;贾淑红;姜玉钦;李伟
【摘 要】建立了一种检测阿托伐他汀钙关键中间体(ATS-9)含量的气相色谱法.采
用Agilent DB-624(30 m×0.32 mm,1.8μm)毛细管气相色谱柱,高纯氮为载气,氢
火焰离子化检测器检测,程序升温,1,2-二氯乙烷为稀释溶剂,正十六烷为内标
物.ATS-9在0.8128～4.0638 mg·mL-1(r=0.9995)范围内,线性关系良好,平均回收
率为99.68％,RSD为1.26％.
【期刊名称】《合成化学》
【年(卷),期】2018(026)009
【总页数】4页(P695-698)
【关键词】阿托伐他汀钙中间体;ATS-9;气相色谱;含量测定
【作 者】吕一甫;徐桂清;郝乐辰;曾淑芸;李杰;贾淑红;姜玉钦;李伟
【作者单位】天方药业有限公司,河南驻马店 463000;河南师范大学化学化工学院,
河南新乡 453007;河南师范大学化学化工学院,河南新乡 453007;河南师范大学化
学化工学院,河南新乡 453007;河南师范大学化学化工学院,河南新乡 453007;河南
师范大学化学化工学院,河南新乡 453007;天方药业有限公司,河南驻马店 463000;
河南师范大学化学化工学院,河南新乡 453007;河南师范大学化学化工学院,河南新
乡 453007
【正文语种】中 文
【中图分类】O657.7+1
阿托伐他汀钙(atorvastatin calcium， 1)，商品名为立普妥(Lipitor)，是HMG-
CoA还原酶选择性、竞争性抑制剂，属于第三代全合成的他汀类调血脂药。1的
合成方法繁多[1-4]，但Paal-Knorr法目前仍是经典合成方法[5-6]，其核心是将
关键中间体(4R,6R)-6-胺乙基-2,2-二甲基-1,3-二氧六环-4-乙酸叔丁酯(ATS-9)和
4-氟-α-(2-甲基-1-氧代丙基)-γ-氧代-N,β-二苯基苯丁酰胺(M-4)[7]进行缩合，再
经脱保护、水解、成盐等反应得到1。
ATS-9作为合成1的关键中间体，其含量直接影响后续反应的投料，并最终影响
1的质量和收率，故其合成和纯度至关重要。目前，ATS-9的合成已有多篇文献报
道[8-11]，但其质量仅通过气相色谱面积归一化法测定纯度[11]判断。然而ATS-9
中可能含有高沸点物质，在该条件下无法检测出来，因此仅靠纯度判断其质量是不
合适的。测定ATS-9的纯度对判断其质量非常合理和必要。目前尚未见ATS-9纯
度测定方法的报道。
本文建立了一种准确测定ATS-9纯度的方法。即采用气相色谱法，选用Agilent
DB-624毛细管柱，以正十六烷为内标，测定ATS-9纯度。并对分析方法进行了
验证。
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
Thermo Scientific Trace 1300型气相色谱仪[Agilent DB-624毛细管柱(30
m×0.32 mm， 1.8 μm)，程序升温：柱温150 ℃， 2 min；40 ℃·min-1,
220 ℃， 3 min； 20 ℃·min-1，240 ℃，8 min；进样口温度300 ℃；柱流速：
2.5 mL·min-1，分流比10/1；检测器：氢火焰离子化检测器(FID)，温度300 ℃；
载气：高纯N2；进样量：2 μL；内标物：正十六烷；Chromeleon 7.1 色谱工作
站]。
ATS-9对照品，含量98%，多伦多研究化学品公司；ATS-9供试品，自制；正十
六烷，分析纯，中国医药公司上海化学试剂采购供应站；1,2-二氯乙烷和无水乙醇
等试剂均为分析纯。
1.2 溶液配制
以1,2-二氯乙烷为溶剂分别配制：(1)内标储备溶液、(2)对照品储备液和(3)供试品
储备液，浓度均为20 mg·mL-1，(4)供试品溶液，浓度10 mg·mL-1。
2 结果与讨论
2.1 色谱柱及色谱条件的选择
分别使用Thermo Fisher TG-5MS、 Agilent DB-624、 Thermo Fisher TG-624
和Rtx®-5 Amine等不同极性毛细管气相色谱柱以恒温和程序升温的方式对ATS-
9进行检测，结果表明中等极性柱Agilent DB-624在程序升温的情况下对ATS-9
及其杂质分离效果最好，峰形较佳。
2.2 稀释溶剂的选择
由于ATS-9是无色至淡黄绿色黏稠液体，直接进样重现性很差，且对进样针的伤
害较大，须用溶剂稀释后进行测定。用1,2-二氯乙烷、甲醇、DMSO、二氯甲烷、
DMF、丙酮等不同溶剂稀释ATS-9后测定，结果表明：只有1,2-二氯乙烷对
ATS-9和内标物正十六烷均有良好的溶解能力，稳定性好，无分层，且不干扰主
峰及其它色谱峰的分离，故1,2-二氯乙烷为最佳稀释溶剂。
2.3 定量方法及内标物的选择
最初采用操作方便的外标法定量，但测定结果表明方法重现性极差，无法准确定量。
试用内标法，方法重现性好，误差小，最终选择内标法定量。分别以正十二烷、正
十四烷、正十六烷和正十七烷为内标物对ATS-9进行测定，结果显示正十六烷与
ATS-9出峰时间相近且与ATS-9能完全分离，在ATS-9出峰位置无干扰，故正十
六烷为最佳内标物。
Time/min图1典型气相色谱图*Figure 1Typical Gas Chromatograms*A: 空白
溶剂，B: ATS-9对照品溶液，C: ATS-9供试品溶液峰1：1,2-二氯乙烷，峰2：
TS-9，峰3：正十六烷。表1 相对校正因子Table 1 The relative correction
factor
对照品浓度/mg·mL-10.811.622.032.443.253.664.06校正因子2.392 32.298
42.22582.129 02.091 22.003 92.081 1平均校正因子2.174 5RSD/%6.28
表2 ATS-9加样回收率试验Table 2 Sample recovery rate test of ATS-9No.样
品中含量/mg对照品加入量/mg测得量/mg回收率/%平均回收率
/%RSD/%18.229.6917.3398.8628.549.6918.35101.0538.539.6918.2199.7448.
148.0816.0798.4358.178.0816.1598.8168.038.0815.97100.4278.716.4615.29
98.6588.066.4614.4099.0898.976.4615.41102.0999.681.26
2.4 方法学考察
(1) 系统适用性试验
在上述色谱条件下，分别取1,2-二氯乙烷(空白溶剂)、ATS-9对照品溶液、ATS-9
供试品溶液进样测定，记录色谱图(图1)。在ATS-9出峰位置无杂质干扰，且其与
内标物和相邻杂质分离度均大于1.5，以ATS-9计，理论塔板数不低于80 000。
(2) 线性试验及校正因子
分别精密量取对照品储备液0.2、 0.4、 0.5、 0.6、 0.8、 0.9、 1.0 mL于5 mL
容量瓶中，各加入内标储备液0.4 mL，用1,2-二氯乙烷稀释定容，制备系列浓度
溶液进样测定，记录色谱图。每个浓度进样3次。以对照品峰面积与内标物峰面
积之比为纵坐标，以对照品质量与内标物质量比值为横坐标，进行线性回归，回归
方程为y=0.502 4x-0.056 6，相关系数r=0.999 5，结果表明：ATS-9在0.812
8～4.063 8 mg·mL-1有良好的线性关系。根据每一个浓度所得对照品峰面积和内
标峰面积，计算不同浓度下校正因子(表1)。
(3) 重复性试验
精密称取ATS-9供试品(批号20150121)6份，按“1.2”方法制供试品溶液，进
行色谱测定，每份平行测定3次，结果表明ATS-9平均含量为99.67%， RSD为
0.65%。
(4) 精密度试验
精密量取对照品储备液0.8 mL于5 mL容量瓶中，加入内标溶液0.4 mL，用1,2-
二氯乙烷稀释定容。按“1.3”项下方法，平行进样6次，所得对照品峰面积与内
标物峰面积之比的RSD为1.38%。
(5) 溶液稳定性试验
供试品溶液不稳定，在常温长时间放置后，含量测定结果误差大，因此，考察了供
试品溶液的稳定性。
精密量取供试品储备液适量于5 mL容量瓶中，加入内标溶液0.4 mL，用1,2-二
氯乙烷稀释定容。按“1.3”项下方法，分别在0、 1、 2.5、 3.5、 4.5、 5.5、
6.5、 7、 9、 12 h进样，结果表明，供试品溶液在6.5 h内稳定，供试品峰面积
与内标物峰面积之比的RSD为0.57%，平均含量为99.66%，含量RSD为0.50%。
(6) 加样回收率试验
精密称取9份已知含量的ATS-9(批号20150119)于10 mL容量瓶中，用1,2-二
氯乙烷稀释定容，即得供试品储备溶液；分别精密量取0.8 mL于5 mL容量瓶中，
再分别加入对照品储备溶液0.96、 0.8、 0.64 mL(相当于ATS-9含量120%、
100%、 80%含量的对照品)，各加入内标储备溶液0.4 mL，用1,2-二氯乙烷稀释
定容，即得供试品溶液。每份平行进样3次进行测定。ATS-9平均回收率为
99.68%， RSD为1.26%，数据见表2。
(7) 样品测定
精密称取ATS-9供试品(批号20141012、 20141101、 20141205)适量，按
“1.2”方法平行制备两份供试品溶液，每份平行进样3次。结果所得ATS-9平均
含量分别为99.41%、 99.62%和100.10%。
通过对稀释溶剂、色谱柱、内标物的筛选，对检测条件进行优化，建立了一种GC
法测定阿托伐他汀钙关键中间体ATS-9含量的方法。ATS-9在0.812 8～4.063 8
mg·mL-1(r=0.999 5)线性关系良好，平均回收率为99.68%， RSD为1.26%。
参考文献
【相关文献】
[1] 张亚平,杨淑莲,陈芬儿. HPLC法检测阿托伐他汀钙有关物质的含量及光学纯度[J].药物分析杂
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optically active,highly potent,tissue selective inhibitor of HMG-CoA
reductase[J].Tetrahedron Lett,1992,33(17):2283-2284.
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Ser238Asp and a formal total synthesis of atorvastatin[J].Tetrahedron
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