2024年4月6日发(作者：璩谷兰)
pCold-ProS2
编号
北京华越洋生物VECT4580
载体名称
pCold-‐ProS2
pCold-‐ProS2载体基本信息
载体名称:
pCold-‐ProS2
质粒类型: 大肠杆菌表达载体
高拷贝/低拷贝: 高拷贝
启动子:
CSPA
克隆方法: 多克隆位点，限制性内切酶
载体大小:
5025 bp
5' 测序引物及序列: pCold-‐F：5'-‐ACGCCATATCGCCGAAAGG-‐3'
3' 测序引物及序列: pCold-‐R：5'-‐GGCAGGGATCTTAGATTCTG-‐3'
载体标签:
ProS2
载体抗性: 氨苄青霉素（Ampicillin）
筛选标记:
-‐-‐
备注:
-‐-‐
稳定性:
-‐-‐
组成型: 诱导型表达
病毒/非病毒: 非病毒
pCold-‐ProS2载体质粒图谱和多克隆位点信息
pCold-‐ProS2载体简介
pCold ProS2 DNA 是一种融合的冷休克表达载体，使用来源于革兰氏阴性菌Myxococcus
xanthus中的Protein S作为可溶性标签。这种Protein S存在于粘细菌的孢子衣中，由173
个氨基酸残基组成，是一种非常稳定的可溶性蛋白质。将两个Protein S的N-‐末端结构域
串联，再结合ProS2 Tag的作用，就能使融合目的蛋白的稳定性和可溶性得到提高。此外，
由于目的蛋白和ProS2-‐Tag的相互作用性很低，因此可以将二者有效分离。 pCold ProS2
DNA Vector在cspA启动子的下游插入了5’非编码区(5’-‐UTR)、翻译增强元件(TEE)、
His-‐Tag序列、ProS2-‐Tag和多克隆位点(MCS)。在ProS2-‐Tag和多克隆位点(MCS)之间主
要是HRV3C Protease、Thrombin和Factor Xa的切断位点，用来消除融合蛋白质的标签。
此外，在cspA启动子下游还插入了lac operator，可以严格调控目的基因的表达。由于
本制品的启动子是大肠杆菌来源的，所以大部分大肠杆菌都可以作为表达宿主使用。总
之，pCold ProS2 DNA Vector提供的冷休克技术，能够促进蛋白质的正确折叠，增加目的
蛋白质的可溶性，对于一些棘手的目的蛋白质的表达是一个很好的选择。
pCold-‐ProS2 载体复制子是 ColE1 ori，质粒大小是 5025bp，带有 Ampicillin (氨苄青霉
素)抗性，可转化进大肠杆菌 DH5α，通过带有 Ampicillin (氨苄青霉素)抗性平板筛选大
量复制扩增，培养条件是 LB，37℃。pCold-‐ProS2 载体的启动子是 CSPA，并带有有 lac
操纵子，能在大肠杆菌DE3 工程菌（建议用 BL21 DE3 或 Rosetta DE3）中，用 IPTG 诱
导表达出重组蛋白，标签有 ProS2，可选用镍柱纯化。pCold-‐ProS2 载体的多克隆位点
有 HRV3C Protease、Thrombin 和 Factor Xa等酶切位点，可采用双酶切连接方法连接
目的基因，如果没有合适的酶切位点，可采用无缝克隆或者联系我们重新改造该载体。
其他大肠杆菌表达载体：
pBV221
pDsRed-Express2
pCold TF
pCold I
ptdTomato
pBV220
pCold IV
pE-SUMO
pET-52b(+)
pCold-GST
pCold III
pCold-ProS2
pAmCyan
pColdS-SUMO
pCold II
pBAD102/D-TOPO
pBAD202/D-TOPO
pBad/Myc-His B
pACYC184 pBAD/Thio-TOPO pBad/Myc-His C
pBad/His B pBad/Myc-His A pBad/His C
pBad/His A
pET-23c(+)
pET-12a(+)
pBad24
pQE-32
pQE-60
pET-50b(+)
pET-26b(+)
pET-14b
pET-20b(+)
pET-21a(+)
pET-27b(+)
pET-43.1c(+)
pET-44c(+)
pTrcHis2 B
pRSET-CFP
pET300/NT-DEST
pGEX-4T-3
pG-KJE8
pET-17b
pTf16
pSUMO
pKD3
pTYB2
pMAL-p5e
PinPoint Xa-3
pSP64
pET-5b(+)
pET-5a(+)
pkk232-8
pMAL-c5x
pET-43.1 EK/LIC
pET-31b(+)
pGEX-4T-2
pET-28b(+)
pBR322
pEcoli-6xHN-GFPuv
pGEX-2T
pTrcHis A
pGEX-6P-3
pGEX-5X-1
pMal-c2E
pBAD-TOPO
pET-23(+)
pET-11b(+)
pQE-82L
pQE-9
pQE-70
pET-49b(+)
pET-32a(+)
pET-16b
pET-21d(+)
pET-24a(+)
pET-28a(+)
pET-43.1b(+)
pET-46 EK/LIC
pTrcHis2 A
pRSET-EmGFP
pET301/CT-DEST
pGEX-5X-2
pGro7
pET102/D-TOPO
pET-28c(+)
pProEX HTc
pKD13
pTWIN2
pACYCDuet-1
PinPoint Xa-2
pTWIN1
pBad/gIII C
pMal-p4X
pCYB1
pMal-p2E
pET-41 EK/LIC
pET-3b(+)
pETDuet-1
pET-His
pKD4
pKJE7
pRSFDuet-1
pET-41b(+)
pGEX-6P-2
pGEX-2TK
pMal-c2X
pET-23b(+)
pET-12b(+)
pET-11a(+)
pQE-81L
pQE-16
pQE-40
pET-48b(+)
pET-21b(+)
pET-15b
pET-21c(+)
pET-24d(+)
pET-30a(+)
pET-43.1a(+)
pET-37b(+)
pET303/CT-His
pRSET-BFP
pGEM-T
pBlueScript SK(+)
pET-SUMO
pCDFDuet-1
pBluescript II SK(+)
pProEX HTb
pKD46
pBluescript II KS(-)
pEGM-11ZF(+)
PinPoint Xa-1
pTYB11
pBad/gIII B
pMal-p2G
pEZZ18
pMal-p2X
pMal-c4X
pET-41a(+)
pGEX-4T-1
pALEX a,b,c
pKD20
pRSET B
pCOLADuet-1
pET-42b(+)
pGEX-6P-1
pRSET A
pRSET C
pET-23a(+)
pET-12c(+)
pET-11c(+)
pQE-80L
pQE-31
pET-51b(+)
pET-47b(+)
pET-22b(+)
pET-19b
pET-21b(+)
pET-25b(+)
pET-42a(+)
pET-44a(+)
pTrcHis2 C
pET302/NT-His
pGFPuv
pBad43
pG-Tf2
pSE380
pMAL-p5x
pET-30b(+)
pProEX HTa
pTYB1
pTYB12
pEGM-7ZF(+)
pSP73
pTXB1
pBad/gIII A
pkk223-3
pBAD18
pET-44 EK/LIC
pTrcHis B
pGEX-3X
pTrc99a
pACYC177
pMXB10
pGEX-KG
pTrcHis C
pET-3a(+)
pGEX-5X-3
pMal-c2G
pQE-30
pET-45b(+)
pET-40b(+)
pET-32 Xa/LIC
pET-30 EK/LIC
pET-29a(+)
pET-23d(+)
pET-44b(+)
pET-33b(+)
pET-32c(+)
pET-30c(+)
pET-24c(+)
pET-11d(+)
pET-42c(+)
pET-39b(+)
pET-32b(+)
pET-29c(+)
pET-24b(+)
pBad33
pET-41c(+)
pET-32 EK/LIC
pET-30 Xa/LIC
pET-29b(+)
pET-24(+)
2024年4月6日发(作者：璩谷兰)
pCold-ProS2
编号
北京华越洋生物VECT4580
载体名称
pCold-‐ProS2
pCold-‐ProS2载体基本信息
载体名称:
pCold-‐ProS2
质粒类型: 大肠杆菌表达载体
高拷贝/低拷贝: 高拷贝
启动子:
CSPA
克隆方法: 多克隆位点，限制性内切酶
载体大小:
5025 bp
5' 测序引物及序列: pCold-‐F：5'-‐ACGCCATATCGCCGAAAGG-‐3'
3' 测序引物及序列: pCold-‐R：5'-‐GGCAGGGATCTTAGATTCTG-‐3'
载体标签:
ProS2
载体抗性: 氨苄青霉素（Ampicillin）
筛选标记:
-‐-‐
备注:
-‐-‐
稳定性:
-‐-‐
组成型: 诱导型表达
病毒/非病毒: 非病毒
pCold-‐ProS2载体质粒图谱和多克隆位点信息
pCold-‐ProS2载体简介
pCold ProS2 DNA 是一种融合的冷休克表达载体，使用来源于革兰氏阴性菌Myxococcus
xanthus中的Protein S作为可溶性标签。这种Protein S存在于粘细菌的孢子衣中，由173
个氨基酸残基组成，是一种非常稳定的可溶性蛋白质。将两个Protein S的N-‐末端结构域
串联，再结合ProS2 Tag的作用，就能使融合目的蛋白的稳定性和可溶性得到提高。此外，
由于目的蛋白和ProS2-‐Tag的相互作用性很低，因此可以将二者有效分离。 pCold ProS2
DNA Vector在cspA启动子的下游插入了5’非编码区(5’-‐UTR)、翻译增强元件(TEE)、
His-‐Tag序列、ProS2-‐Tag和多克隆位点(MCS)。在ProS2-‐Tag和多克隆位点(MCS)之间主
要是HRV3C Protease、Thrombin和Factor Xa的切断位点，用来消除融合蛋白质的标签。
此外，在cspA启动子下游还插入了lac operator，可以严格调控目的基因的表达。由于
本制品的启动子是大肠杆菌来源的，所以大部分大肠杆菌都可以作为表达宿主使用。总
之，pCold ProS2 DNA Vector提供的冷休克技术，能够促进蛋白质的正确折叠，增加目的
蛋白质的可溶性，对于一些棘手的目的蛋白质的表达是一个很好的选择。
pCold-‐ProS2 载体复制子是 ColE1 ori，质粒大小是 5025bp，带有 Ampicillin (氨苄青霉
素)抗性，可转化进大肠杆菌 DH5α，通过带有 Ampicillin (氨苄青霉素)抗性平板筛选大
量复制扩增，培养条件是 LB，37℃。pCold-‐ProS2 载体的启动子是 CSPA，并带有有 lac
操纵子，能在大肠杆菌DE3 工程菌（建议用 BL21 DE3 或 Rosetta DE3）中，用 IPTG 诱
导表达出重组蛋白，标签有 ProS2，可选用镍柱纯化。pCold-‐ProS2 载体的多克隆位点
有 HRV3C Protease、Thrombin 和 Factor Xa等酶切位点，可采用双酶切连接方法连接
目的基因，如果没有合适的酶切位点，可采用无缝克隆或者联系我们重新改造该载体。
其他大肠杆菌表达载体：
pBV221
pDsRed-Express2
pCold TF
pCold I
ptdTomato
pBV220
pCold IV
pE-SUMO
pET-52b(+)
pCold-GST
pCold III
pCold-ProS2
pAmCyan
pColdS-SUMO
pCold II
pBAD102/D-TOPO
pBAD202/D-TOPO
pBad/Myc-His B
pACYC184 pBAD/Thio-TOPO pBad/Myc-His C
pBad/His B pBad/Myc-His A pBad/His C
pBad/His A
pET-23c(+)
pET-12a(+)
pBad24
pQE-32
pQE-60
pET-50b(+)
pET-26b(+)
pET-14b
pET-20b(+)
pET-21a(+)
pET-27b(+)
pET-43.1c(+)
pET-44c(+)
pTrcHis2 B
pRSET-CFP
pET300/NT-DEST
pGEX-4T-3
pG-KJE8
pET-17b
pTf16
pSUMO
pKD3
pTYB2
pMAL-p5e
PinPoint Xa-3
pSP64
pET-5b(+)
pET-5a(+)
pkk232-8
pMAL-c5x
pET-43.1 EK/LIC
pET-31b(+)
pGEX-4T-2
pET-28b(+)
pBR322
pEcoli-6xHN-GFPuv
pGEX-2T
pTrcHis A
pGEX-6P-3
pGEX-5X-1
pMal-c2E
pBAD-TOPO
pET-23(+)
pET-11b(+)
pQE-82L
pQE-9
pQE-70
pET-49b(+)
pET-32a(+)
pET-16b
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pET-24a(+)
pET-28a(+)
pET-43.1b(+)
pET-46 EK/LIC
pTrcHis2 A
pRSET-EmGFP
pET301/CT-DEST
pGEX-5X-2
pGro7
pET102/D-TOPO
pET-28c(+)
pProEX HTc
pKD13
pTWIN2
pACYCDuet-1
PinPoint Xa-2
pTWIN1
pBad/gIII C
pMal-p4X
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pMal-p2E
pET-41 EK/LIC
pET-3b(+)
pETDuet-1
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pKD4
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pET-41b(+)
pGEX-6P-2
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pET-23b(+)
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pET-37b(+)
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pRSET-BFP
pGEM-T
pBlueScript SK(+)
pET-SUMO
pCDFDuet-1
pBluescript II SK(+)
pProEX HTb
pKD46
pBluescript II KS(-)
pEGM-11ZF(+)
PinPoint Xa-1
pTYB11
pBad/gIII B
pMal-p2G
pEZZ18
pMal-p2X
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pET-41a(+)
pGEX-4T-1
pALEX a,b,c
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pRSET B
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pET-42b(+)
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pET-23a(+)
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pTrcHis B
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pET-3a(+)
pGEX-5X-3
pMal-c2G
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pET-45b(+)
pET-40b(+)
pET-32 Xa/LIC
pET-30 EK/LIC
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pET-23d(+)
pET-44b(+)
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pET-32c(+)
pET-30c(+)
pET-24c(+)
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pBad33
pET-41c(+)
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pET-29b(+)
pET-24(+)