2024年4月9日发(作者:嘉和豫)
小白菜对缺钙胁迫的反应
摘要:通过研究缺钙营养液处理对小白菜生长的影响。结果表明,在缺钙胁迫下,小白菜的生长受到抑
制,提高了POD的活性,降低了….
关键词:小白菜、缺钙、生长状况
钙是植物生长必需的营养元素之一。蔬菜对钙的需求量不仅高,而且在整个生长过程中的任何期都
需要。在钙不足的情况下,会引起作物生理失调,植株生长受阻,导致不结实或很少结实等,同时也会
引起其他生理病害的发生,严重地影响了蔬菜的生长。本实验对小白菜在缺钙胁迫后其生长及膜质氧化
系统的影响,探讨钙在植物生长中的作用。
1材料与方法
1.1材料培养及处理
实验于2010年10月在广西师范大学生理实验室举行,分别取6六个培养盆,洗净,做好标记,每
个培养盆中培养3株小白菜幼苗,实验组浇缺钙培养液,对照组浇完全培养液,培养三个星期后对其各
项指标进行测定。
1.2测定方法
1.2.1植物生长指标测定
培养三个星期之后,取缺钙组和对照组的三株长势最好的小白菜进行测定,分别测量其株高、叶
宽和叶长,并做好记录。
1.2.2细胞膜透性的测定
选取叶龄相似的植物叶片,用自来水将供试叶片冲洗,除去表面沾污物,再用蒸馏水冲洗1~2次,
用干净纱布轻轻吸干叶片表面水分,然后剪成约1cm的小叶片,注意除掉大叶脉。将剪下的小叶片混
合均匀,快速称取鲜样三份,每份1g,分别放入编号为A、B、C的三个烧杯中,然后分别在烧杯中加
入50ml蒸馏水。用电导仪分别测定A、B、C三杯的电导率,同时测定蒸馏水(空白)的电导率。接
着把A、B、C三杯放入沸水浴中煮沸10min中,冷却后至室温后再次测定电导率值,所测得的结果记
入表格中。
1.2.3丙二醛的含量测定
1.2.3.1 MDA的提取
称2g叶片,加入10%三氯乙酸(TCA)2ml及少量石英砂,研磨;进一步加入8mlTCA充分研磨,
接着把匀浆液以4000r/min离心10min,其上清液即为MDA提取液。
1.2.3.2 MDA显色反应及测定
取2ml MDA提取液(对照组取2ml 蒸馏水),在加2ml 0.6%TBA混匀,在试管上加棉塞,置沸
水中加热15min,迅速拿出水浴锅冷却,以4000r/min离心15min ,于波长532nm和450nm下测定
OD值。
1.2.4过氧化物酶
(POD)
活性的测定
1.2.4.1 POD酶液提取
称取适量植物材料剪碎(0.5~1g),加2mL 酶提取缓冲液冰浴研磨成匀浆转移到离心管(磷酸缓冲液
PH为7.2,含PVP 1%),3mL酶提取缓冲液冲洗研钵 后一并倒入离心管,4 000r/min离心15min,收
集上清液,测量提取液体积(低温分装保存备用)。
1.2.4.2 POD酶活性测定
取试管1做对照组,加POD反应混合液3mL 和1mL提取缓冲液混匀在470 nm下调零,试管2
加POD反应混合液3mL和1mL POD酶液混匀每隔一分钟测470 nm下OD值并记录。
1.2.5超氧化物岐化酶
(SOD)
的活性测定
1.2.5.1 SOD酶液提取
同POD酶提取方法一样
1.2.5.2 SOD酶活性测定
1.2.5.2.1 显色反应
取5支试管,分别编号,(3支测定管,2支对照管) 按照实验课本P99页表格按顺序加入试剂(3
支测定管加酶液, 2支对照管加缓冲液). 混匀后将1支对照管置暗处,其他各管于4000lx日光下反
应15min(要求各管受光情况一致,温度高,时间缩短,低时延长)。
1.2.5.2.2 SOD活性测定与计算
反应结束后,以不照光的对照管作空白进行调零,分别测定其他各管的OD560nm吸光度。并
记录好照光对照管的吸光度(ODC)和3支测定管的吸光度(ODS)
SOD活性单位:以抑制制氮蓝四唑 (NBT)光化还原的50%为一个酶活性单位(U)表示,
课本P100页公式计算SOD 活性
SOD活性(U/)=(OD
C
-OD
S
)×V/0.5×OD
C
×V
S
×t×m
3结果与分析
3.1缺钙胁迫对小白菜生长的影响
小白菜在培养三周后的生长指标的测定结果来看(表1),对照组的长势比缺钙组的长
势较好。说明了缺钙胁迫对小白菜的生长有了一定的影响,抑制了小白菜的正常生长。在
外表看来,两组并没有明显的异同,导致这种现象的原因可能是由于培养的时间比较短,
所以现象还不明显。
表1 小白菜生长指标测定
组
别
对照组 平均值 缺钙组 平均值
指
标
株高
叶宽
叶长
吸
光
空白
16cm
5cm
8cm
15cm
4.5cm
10cm
14cm
4cm
9cm
15cm
4.5cm
9cm
14cm
5.5cm
8.5cm
16cm 12cm
4cm 3.2cm
7.8cm 6cm
14cm
4.2cm
7.4cm
3.2细胞膜透性的测定
组
别
值
60uΩ
70 uΩ
82 uΩ
60 uΩ
1.94mΩ
2.04 mΩ
常温 沸水后
对照组
缺钙组
3.3丙二醛的含量测定
波
长
组
别
对照组 缺钙组
532nm 0.206 0.131
450nm
0.676 0.351
3.4
过氧化氢酶(POD)的检测
OD
470
时
间
1min
1.523
1.027
2min
2.097
0.796
3min
2.155
1.959
ΔOD
470
缺钙组
对照组
0.316
0.466
缺钙组POD酶活力=0.316*5/(0.01*0.5*1*3)=105.33U/
对照组POD酶活力=0.466*5/(0.01*0.5*1*3)=155.33U/
3.5
超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定
吸
光
OD
C
OD
S
平均值
组
值
别
缺钙组
对照组
0.658
1.699
0.296
0.298
0.290
1.260
0.842
0.848
0.295
0.983
实验组SOD活性=(0.658-0.295)*/(0.5*0.658*1*15*0.5)= 0.736U/
对照组SOD活性=(1.699-0.983)*/(0.5*1.699*1*15*0.5)=4.562U/
4讨论
4.1数据分析:
4.1.1两组数据比较缺钙胁迫处理的白菜各项生长指标(株高、叶宽、叶长)比对照组的小。其中对植
株叶长的差距n最为明显。
4.12在细胞膜透性结果:无论在常温或者煮沸条件下测量,对照组的透性比实验组好。
4.13实验组中的过氧化物酶(POD)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性明显小于对照组。
4.2结论:
在缺钙不足的情况下,会引起作物生理失调,植株生长受阻,导致过氧化物酶(POD)活性、超氧化
物歧化酶(SOD)降低,从而表现出生长指标减少。
4.3结果分析:
参考文献
2024年4月9日发(作者:嘉和豫)
小白菜对缺钙胁迫的反应
摘要:通过研究缺钙营养液处理对小白菜生长的影响。结果表明,在缺钙胁迫下,小白菜的生长受到抑
制,提高了POD的活性,降低了….
关键词:小白菜、缺钙、生长状况
钙是植物生长必需的营养元素之一。蔬菜对钙的需求量不仅高,而且在整个生长过程中的任何期都
需要。在钙不足的情况下,会引起作物生理失调,植株生长受阻,导致不结实或很少结实等,同时也会
引起其他生理病害的发生,严重地影响了蔬菜的生长。本实验对小白菜在缺钙胁迫后其生长及膜质氧化
系统的影响,探讨钙在植物生长中的作用。
1材料与方法
1.1材料培养及处理
实验于2010年10月在广西师范大学生理实验室举行,分别取6六个培养盆,洗净,做好标记,每
个培养盆中培养3株小白菜幼苗,实验组浇缺钙培养液,对照组浇完全培养液,培养三个星期后对其各
项指标进行测定。
1.2测定方法
1.2.1植物生长指标测定
培养三个星期之后,取缺钙组和对照组的三株长势最好的小白菜进行测定,分别测量其株高、叶
宽和叶长,并做好记录。
1.2.2细胞膜透性的测定
选取叶龄相似的植物叶片,用自来水将供试叶片冲洗,除去表面沾污物,再用蒸馏水冲洗1~2次,
用干净纱布轻轻吸干叶片表面水分,然后剪成约1cm的小叶片,注意除掉大叶脉。将剪下的小叶片混
合均匀,快速称取鲜样三份,每份1g,分别放入编号为A、B、C的三个烧杯中,然后分别在烧杯中加
入50ml蒸馏水。用电导仪分别测定A、B、C三杯的电导率,同时测定蒸馏水(空白)的电导率。接
着把A、B、C三杯放入沸水浴中煮沸10min中,冷却后至室温后再次测定电导率值,所测得的结果记
入表格中。
1.2.3丙二醛的含量测定
1.2.3.1 MDA的提取
称2g叶片,加入10%三氯乙酸(TCA)2ml及少量石英砂,研磨;进一步加入8mlTCA充分研磨,
接着把匀浆液以4000r/min离心10min,其上清液即为MDA提取液。
1.2.3.2 MDA显色反应及测定
取2ml MDA提取液(对照组取2ml 蒸馏水),在加2ml 0.6%TBA混匀,在试管上加棉塞,置沸
水中加热15min,迅速拿出水浴锅冷却,以4000r/min离心15min ,于波长532nm和450nm下测定
OD值。
1.2.4过氧化物酶
(POD)
活性的测定
1.2.4.1 POD酶液提取
称取适量植物材料剪碎(0.5~1g),加2mL 酶提取缓冲液冰浴研磨成匀浆转移到离心管(磷酸缓冲液
PH为7.2,含PVP 1%),3mL酶提取缓冲液冲洗研钵 后一并倒入离心管,4 000r/min离心15min,收
集上清液,测量提取液体积(低温分装保存备用)。
1.2.4.2 POD酶活性测定
取试管1做对照组,加POD反应混合液3mL 和1mL提取缓冲液混匀在470 nm下调零,试管2
加POD反应混合液3mL和1mL POD酶液混匀每隔一分钟测470 nm下OD值并记录。
1.2.5超氧化物岐化酶
(SOD)
的活性测定
1.2.5.1 SOD酶液提取
同POD酶提取方法一样
1.2.5.2 SOD酶活性测定
1.2.5.2.1 显色反应
取5支试管,分别编号,(3支测定管,2支对照管) 按照实验课本P99页表格按顺序加入试剂(3
支测定管加酶液, 2支对照管加缓冲液). 混匀后将1支对照管置暗处,其他各管于4000lx日光下反
应15min(要求各管受光情况一致,温度高,时间缩短,低时延长)。
1.2.5.2.2 SOD活性测定与计算
反应结束后,以不照光的对照管作空白进行调零,分别测定其他各管的OD560nm吸光度。并
记录好照光对照管的吸光度(ODC)和3支测定管的吸光度(ODS)
SOD活性单位:以抑制制氮蓝四唑 (NBT)光化还原的50%为一个酶活性单位(U)表示,
课本P100页公式计算SOD 活性
SOD活性(U/)=(OD
C
-OD
S
)×V/0.5×OD
C
×V
S
×t×m
3结果与分析
3.1缺钙胁迫对小白菜生长的影响
小白菜在培养三周后的生长指标的测定结果来看(表1),对照组的长势比缺钙组的长
势较好。说明了缺钙胁迫对小白菜的生长有了一定的影响,抑制了小白菜的正常生长。在
外表看来,两组并没有明显的异同,导致这种现象的原因可能是由于培养的时间比较短,
所以现象还不明显。
表1 小白菜生长指标测定
组
别
对照组 平均值 缺钙组 平均值
指
标
株高
叶宽
叶长
吸
光
空白
16cm
5cm
8cm
15cm
4.5cm
10cm
14cm
4cm
9cm
15cm
4.5cm
9cm
14cm
5.5cm
8.5cm
16cm 12cm
4cm 3.2cm
7.8cm 6cm
14cm
4.2cm
7.4cm
3.2细胞膜透性的测定
组
别
值
60uΩ
70 uΩ
82 uΩ
60 uΩ
1.94mΩ
2.04 mΩ
常温 沸水后
对照组
缺钙组
3.3丙二醛的含量测定
波
长
组
别
对照组 缺钙组
532nm 0.206 0.131
450nm
0.676 0.351
3.4
过氧化氢酶(POD)的检测
OD
470
时
间
1min
1.523
1.027
2min
2.097
0.796
3min
2.155
1.959
ΔOD
470
缺钙组
对照组
0.316
0.466
缺钙组POD酶活力=0.316*5/(0.01*0.5*1*3)=105.33U/
对照组POD酶活力=0.466*5/(0.01*0.5*1*3)=155.33U/
3.5
超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定
吸
光
OD
C
OD
S
平均值
组
值
别
缺钙组
对照组
0.658
1.699
0.296
0.298
0.290
1.260
0.842
0.848
0.295
0.983
实验组SOD活性=(0.658-0.295)*/(0.5*0.658*1*15*0.5)= 0.736U/
对照组SOD活性=(1.699-0.983)*/(0.5*1.699*1*15*0.5)=4.562U/
4讨论
4.1数据分析:
4.1.1两组数据比较缺钙胁迫处理的白菜各项生长指标(株高、叶宽、叶长)比对照组的小。其中对植
株叶长的差距n最为明显。
4.12在细胞膜透性结果:无论在常温或者煮沸条件下测量,对照组的透性比实验组好。
4.13实验组中的过氧化物酶(POD)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性明显小于对照组。
4.2结论:
在缺钙不足的情况下,会引起作物生理失调,植株生长受阻,导致过氧化物酶(POD)活性、超氧化
物歧化酶(SOD)降低,从而表现出生长指标减少。
4.3结果分析:
参考文献