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己糖激酶法测定血清葡萄糖假性偏低原因探讨

IT圈 admin 28浏览 0评论

2024年5月9日发(作者:公羊良骏)

756・ 

堕堇 查 堡!旦筮2o鲞箜!朔』o1lm ra calMedicalTechniques,Julv 2013,v01.20,No.7 

医学检验・ 

己糖激酶法测定血清葡萄糖假性偏低原因探讨 

江苏省张家港市中医医院(2156oo) 

随着生活水平的提高,人们的饮食结构和种类都发生了 

杨天平杨

果 

萍王芳 

2结 

很大的变化,使糖尿病的发病率逐年增加。高血糖的患者在 

门急诊常常遇到,但是低血糖(血糖<2.8 reotol/L)的患者也不 

少见,而后者较前者的危险性更大,因为低血糖时会出现交 

见表1。结果表明,假性低血糖组在读点时间(读数点)调 

整前后测定结果差异有统计学意义(,==O.973,P<O.01);而健康 

对照组的测定结果良好,比较差异无统计学意义(尸>O.05);高 

感神经兴奋和中枢神经异常,超过6 h的低血糖可导致中枢 

神经系统的不可逆损害[1]。所以,低血糖的检出应该引起实验 

室的高度重视,为临床诊断治疗提供准确可靠的结果是实验 

医学的目标。用己糖激酶(HK)法测定血清葡萄糖时偶尔会遇 

到与临床表现不符且反应曲线异常的低血糖标本,称为假性 

低血糖。本实验室分析了2009年8月至2012年2月以来所 

监测到的假性低血糖标本l8例,分析了患者的病种及原因, 

并根据测定方法的理论基础对反映参数的读点时间作了调 

整,按规定校准仪器。将异常低血糖组、健康对照组、高血糖 

组的标本分别在读点时间调整前后测定血清葡萄糖,将每组 

调整前后的结果进行统计分析.现报告如下。 

1资料与方法 

1.I临床资料:假性低血糖组为2010年1月至2012年2月 

本实验室检测的患者标本18例,健康对照组40名为同期本 

院体检标本(排除高血糖),高血糖组40例为同期本院的门 

急诊及病房高血糖标本(血糖>15.0 mmol/L)。 

1.2试剂:南京威特曼公司生产的葡萄糖己糖激酶法测定试 

剂盒。 

1.3仪器:Olympus AU 2700全自动生化分析仪,科大创新有 

限公司中佳分公司的KDC一80低速离心机。 

1.4方法:参数设定为:s2 、R1 240 tLL、R2 60 、Wl 

340 am、W2 410 nm、FIRST POINT 10—27、SECOND POINT 

O~10、FIRST OD LIMIT一2.0~2.5、SECOND OD LIMIT一2.0~2.5。 

后根据假性低血糖组反应曲线异常的特点将参数中的读点 

时间调整为FIRST POINT 10~15,其他不变。血糖标本为早晨 

空腹用含有分离胶的生化真空管抽取静脉血5 mL,标本放 

37℃水浴箱30 min,后以3 000 r/min的转速离心10 arin,将 

3组标本血清在Au 2700的时间参数(读点时间)调整前后分 

别测定血糖。健康对照组和高血糖组的反应曲线在l5点和 

27点的吸光度(A)值几乎相当,读点取l0~15点和10~27的 

A值没有本质差别,所以改变读点时间对葡萄糖测定值差异 

无统计学意义。假性低血糖反应曲线A值在15点达到最高 

峰以后呈下降趋势,27点的OD值较15点的A值降低很多, 

读取lO~27点的A值差比10~l5点的的 值差低了很多,由 

此导致假性低血糖结果。。 

1.5统计学处理:采用SPSS 10.0软件进行统计分析,结果 

用 表示,相关性分析采用直线回归分析,P<0.05为差异 

有统计学意义。 

血糖组的测定结果,二者相关性良好,结果差异无统计学意义 

(r==0.991,/%0.05)。 

表1 3组标本的葡萄糖测定值在参数调整前 

和调整后的结果相关性分析(; )mmo儿 

3讨 论 

HK法是目前国际上公认的测定血糖的参考方法。HK催 

化样品中的葡萄糖与三磷酸腺苷(ATP)反应,产生6磷酸葡 

萄糖(G.6.P)及二磷酸腺苷(ADP)。葡萄糖.6一磷酸脱氢酶 

(G6PD)存在时,G一6.P同烟酸胺腺嘌呤二核苷磷酸(NADP+) 

作用,产生还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(NADPH)及6一磷 

酸葡萄糖酸。NADPH在340 nm处有一吸收峰,在加入的 

己糖激酶、ATP、G6PD和NADP+足够时,其A值大小与样品 

中的葡萄糖浓度成正比。此反应可迅速完成,因此用终点法 

测定。 

假性低血糖的产生有很多原因,对于HK法检测葡萄糖 

来说:①细菌性来源的G6PD也可以利用NAD+1弋替NADP- ̄tl, 

所以在急性重症患者和感染性患者常常会出现,这在本实验 

室检测到的假性低血糖标本中占22例;②白血病患者当白细 

胞升高时也常常会出现假性低血糖翻,可能是白细胞和血小板 

增生极度活跃,代谢旺盛,消耗葡萄糖增多翻,而由于血小板增 

高明显,血流相对缓慢,组织利用葡萄糖增多,导致静脉血葡 

萄糖浓度可能显著下降,但动脉血和毛细血管血的葡萄糖浓 

度正常;③真性红细胞增多症嗍和继发性红细胞增多症阎。由 

于红细胞极度增生,大量红细胞对葡萄糖的消耗利用增多,而 

红细胞内HK、G6PD活性异常增强,使葡萄糖消耗更快导致 

血糖假性降低;④吴健等同认为贫血患者由于组织缺氧,导致 

三羧酸循环障碍,同时丙酮酸、 .羟丁酸浓度增高,血糖将不 

同程度地消耗NADPH,从而使两点终点法(HK法)测定葡萄 

糖时NADPH的生成与葡萄糖不成等量关系fq',因此使用HK 

法测定血糖时也会出现假性低血糖;⑤标本溶血。红细胞内的 

有机酸酯和一些酶类释放入血清,消耗了试剂中的NADPH, 

从而使HK法葡萄糖测定结果下降嗍;⑥急慢性肝脏疾病患 

者、心肌疾病患者由于低密度脂蛋白(LDH)增高可能干扰了 

医技杂志2013年7月第2O卷第7期Journal ofP—racti—cal丛 di Te£ g 盟 血 垫1 : Q:2 

757・ 

HK法检测血糖的特异性引起血糖假性偏低。 

…1 周天龙.假性低血糖常见原因分析.微循环学,2009,19(2): 

经过HK法测定血糖的理论分析和反应曲线的研究发 

4748. 

现,假性低血糖组的反应曲线27点减去1O点的吸光度差比 

【2】杜伟鹏.白血病假性低血糖57例原因分析.中国临床研究, 

15点减去l0点的吸光度差低了很多,以此计算出的血糖浓 

2011,24(5):418.419. 

度一定比实际的血糖浓度低。这样对于反应曲线异常的低血 

f3】刘晓峰,陈越,陈雪礼,等.慢性粒细胞自血病伴假性低血糖 

糖标本可以将读数点从l0~27改为1O~15(因为10~15基本 

2例.江西医学,2005,23(5):496. 

是反应从初始到高峰,正常反应曲线在达峰以后达到平衡, 

f4】虞容豪,刘雁.真性红细胞增多症伴假性低血糖5例分析.实 

而假性低血糖反应曲线达峰以后很快下降偏离正常线性,读 

用医学杂志,2002,18(9):962. 

『5 邓小军,许辉.继发性红细胞增多症引起假性第血糖1例.国 5]

点应该是从基线到高峰),这样可以有效避免假性低血糖的 

际检验医学杂志,20o7,28(7):669. 

结果出现。对此,李立和171已发现过类似现象,究其原因可能 

f61吴健,马达,王万相,等.贫血患者血糖测定方法探讨.江西 

’是标本中的LDH、羟丁酸脱氢酶(HBDH)等浓度过高导致曲 

医学检验,2005,23(3):277. 

线异常,此现象在血糖不太高的几类患者中易出现HK法假 

f7]李立和.己糖激酶法测定某些类型贫血患者血糖时可产生假 

性低血糖。通过对本实验室的高血糖和正常血糖反应曲线观 

性偏低.检验医学。2004,19(4):343—346. 

察,可以与丁俊青等喂出的葡萄糖氧化酶法测定高血糖“倒 

【81郑铁生,邹光楣,章尧.糖尿病实验室检查及方法学评价.临 

钩现象”相区别。通过参数中读点时间改动以后所测的假性 

床生物化学检验,2004,1(1):157. 

低血糖标本的血糖结果与血糖仪测试结果比较相似,与患者 

【9] 丁俊青,侯振宁,宋玉平.应重视葡萄糖氧化酶法血糖测定时 

的反应也比较相符,质量控制血清的血糖测定结果也很好, 

的“倒钩现象”.河南外科学杂志,2007,13(5):99. 

实验结果表明修改读点时间是可行的。 

(收稿日期:2013.03.19) 

参考文献 

生育期女性254名血常规检测结果分析及临床意义 

中国人民解放军第264医I ̄(030001) 丁如 

缺铁性贫血(iron deficiency anemia,IDA)是临床上最常 

缺铁性贫血诊断标准的占94名占74.O%,而127例同年龄段 

见的一种贫血,尤其是在多数发展中国家的生育年龄女性, 

体检女性中,仅有34名(26.8%)符合该诊断标准。其中妊娠 

婴幼儿以及生长发育期的少年中发病较多。正常情况下,机 期女性缺铁性贫血患者群比例远高于同年龄段其他女性。 

体内铁的吸收和排泄保持动态平衡,当需要增加、铁摄人不 

3讨 论 

足及急慢性失血等情况下造成长期铁的负平衡而致缺铁。 当机体因铁需要量增加和(或)铁吸收减少使体内储存铁 

IDA是临床常见病之一,是体内贮存铁缺乏影响血红蛋白合 

耗尽而缺乏,叉不能得到足够补充,致使合成血红蛋白的铁不 

成所引起的贫血,也是各型贫血中最多见的类型IlJ。 足所引起的贫血,称为IDA。通过上述研究可以比较充分地说 

1资料与方法 

明,妊娠期女性罹患IDA的概率远远高于其他健康女性。IDA 

1.1一般资料:收集2012年l2月至2013年3月处于生育 是妊娠最常见的合并症,据世界卫生组织(WHO)统计,世界 

期年龄的女性254名,年龄23 35岁,平均26岁。其中127 各地发生率为40%~90%,其发生原因与多种因素密切相关, 

名为我院妇产科住院的处于妊娠期(包括围生期)女性,127 

由于大多数并无比较明显的临床症状而被医生及患者本身所 

名为来自体检中心同年龄段的女性, 

忽视,然而,IDA可能引起的后果是比较严重的,如孕妇先兆 

1.2数据来源:用加有乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝剂真空采 

性子痫、产后大出血、产褥感染、贫血性心脏病以及胎儿宫内 

血管收集待检患者血常规标本,将送检标本充分混匀,采用 

生长受限、足月低体质量儿等,严重危害孕妇及胎儿的身体健 

Sysmex XE一2100D全自动血液分析仪进行检测。 

康,因此应当加强重视并采取相应措施,有效地预防和应对妊 

1.3诊断标准:女性血红蛋白<110 g/L,孕妇<100轧;平均 娠期IDA的发生。 

红细胞体积(MCv)<8O m,平均红细胞血红蛋白含量(McH) 

参考文献 

<26 Pg,平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)<0.31;红细胞形态 

f1】张之南,沈娣.血液病诊断及疗效标准.2版.北京:科技出版 

可有明显低色素表现12]。 

社,1998:10. 

2结 果 

[2】许文荣,王建中.临床血液学与检验.4版.北京:人民卫生出 

254名处于生育期年龄女性血常规检查中,127名为妊娠 

版社,2007:3. 

期(包括围生期)女性,其余127名为来自体检中心同年龄段 

(收稿日期:2013—03。21) 

的女性。仪器检测显示:在妊娠期127名女性当中,符合上述 

2024年5月9日发(作者:公羊良骏)

756・ 

堕堇 查 堡!旦筮2o鲞箜!朔』o1lm ra calMedicalTechniques,Julv 2013,v01.20,No.7 

医学检验・ 

己糖激酶法测定血清葡萄糖假性偏低原因探讨 

江苏省张家港市中医医院(2156oo) 

随着生活水平的提高,人们的饮食结构和种类都发生了 

杨天平杨

果 

萍王芳 

2结 

很大的变化,使糖尿病的发病率逐年增加。高血糖的患者在 

门急诊常常遇到,但是低血糖(血糖<2.8 reotol/L)的患者也不 

少见,而后者较前者的危险性更大,因为低血糖时会出现交 

见表1。结果表明,假性低血糖组在读点时间(读数点)调 

整前后测定结果差异有统计学意义(,==O.973,P<O.01);而健康 

对照组的测定结果良好,比较差异无统计学意义(尸>O.05);高 

感神经兴奋和中枢神经异常,超过6 h的低血糖可导致中枢 

神经系统的不可逆损害[1]。所以,低血糖的检出应该引起实验 

室的高度重视,为临床诊断治疗提供准确可靠的结果是实验 

医学的目标。用己糖激酶(HK)法测定血清葡萄糖时偶尔会遇 

到与临床表现不符且反应曲线异常的低血糖标本,称为假性 

低血糖。本实验室分析了2009年8月至2012年2月以来所 

监测到的假性低血糖标本l8例,分析了患者的病种及原因, 

并根据测定方法的理论基础对反映参数的读点时间作了调 

整,按规定校准仪器。将异常低血糖组、健康对照组、高血糖 

组的标本分别在读点时间调整前后测定血清葡萄糖,将每组 

调整前后的结果进行统计分析.现报告如下。 

1资料与方法 

1.I临床资料:假性低血糖组为2010年1月至2012年2月 

本实验室检测的患者标本18例,健康对照组40名为同期本 

院体检标本(排除高血糖),高血糖组40例为同期本院的门 

急诊及病房高血糖标本(血糖>15.0 mmol/L)。 

1.2试剂:南京威特曼公司生产的葡萄糖己糖激酶法测定试 

剂盒。 

1.3仪器:Olympus AU 2700全自动生化分析仪,科大创新有 

限公司中佳分公司的KDC一80低速离心机。 

1.4方法:参数设定为:s2 、R1 240 tLL、R2 60 、Wl 

340 am、W2 410 nm、FIRST POINT 10—27、SECOND POINT 

O~10、FIRST OD LIMIT一2.0~2.5、SECOND OD LIMIT一2.0~2.5。 

后根据假性低血糖组反应曲线异常的特点将参数中的读点 

时间调整为FIRST POINT 10~15,其他不变。血糖标本为早晨 

空腹用含有分离胶的生化真空管抽取静脉血5 mL,标本放 

37℃水浴箱30 min,后以3 000 r/min的转速离心10 arin,将 

3组标本血清在Au 2700的时间参数(读点时间)调整前后分 

别测定血糖。健康对照组和高血糖组的反应曲线在l5点和 

27点的吸光度(A)值几乎相当,读点取l0~15点和10~27的 

A值没有本质差别,所以改变读点时间对葡萄糖测定值差异 

无统计学意义。假性低血糖反应曲线A值在15点达到最高 

峰以后呈下降趋势,27点的OD值较15点的A值降低很多, 

读取lO~27点的A值差比10~l5点的的 值差低了很多,由 

此导致假性低血糖结果。。 

1.5统计学处理:采用SPSS 10.0软件进行统计分析,结果 

用 表示,相关性分析采用直线回归分析,P<0.05为差异 

有统计学意义。 

血糖组的测定结果,二者相关性良好,结果差异无统计学意义 

(r==0.991,/%0.05)。 

表1 3组标本的葡萄糖测定值在参数调整前 

和调整后的结果相关性分析(; )mmo儿 

3讨 论 

HK法是目前国际上公认的测定血糖的参考方法。HK催 

化样品中的葡萄糖与三磷酸腺苷(ATP)反应,产生6磷酸葡 

萄糖(G.6.P)及二磷酸腺苷(ADP)。葡萄糖.6一磷酸脱氢酶 

(G6PD)存在时,G一6.P同烟酸胺腺嘌呤二核苷磷酸(NADP+) 

作用,产生还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(NADPH)及6一磷 

酸葡萄糖酸。NADPH在340 nm处有一吸收峰,在加入的 

己糖激酶、ATP、G6PD和NADP+足够时,其A值大小与样品 

中的葡萄糖浓度成正比。此反应可迅速完成,因此用终点法 

测定。 

假性低血糖的产生有很多原因,对于HK法检测葡萄糖 

来说:①细菌性来源的G6PD也可以利用NAD+1弋替NADP- ̄tl, 

所以在急性重症患者和感染性患者常常会出现,这在本实验 

室检测到的假性低血糖标本中占22例;②白血病患者当白细 

胞升高时也常常会出现假性低血糖翻,可能是白细胞和血小板 

增生极度活跃,代谢旺盛,消耗葡萄糖增多翻,而由于血小板增 

高明显,血流相对缓慢,组织利用葡萄糖增多,导致静脉血葡 

萄糖浓度可能显著下降,但动脉血和毛细血管血的葡萄糖浓 

度正常;③真性红细胞增多症嗍和继发性红细胞增多症阎。由 

于红细胞极度增生,大量红细胞对葡萄糖的消耗利用增多,而 

红细胞内HK、G6PD活性异常增强,使葡萄糖消耗更快导致 

血糖假性降低;④吴健等同认为贫血患者由于组织缺氧,导致 

三羧酸循环障碍,同时丙酮酸、 .羟丁酸浓度增高,血糖将不 

同程度地消耗NADPH,从而使两点终点法(HK法)测定葡萄 

糖时NADPH的生成与葡萄糖不成等量关系fq',因此使用HK 

法测定血糖时也会出现假性低血糖;⑤标本溶血。红细胞内的 

有机酸酯和一些酶类释放入血清,消耗了试剂中的NADPH, 

从而使HK法葡萄糖测定结果下降嗍;⑥急慢性肝脏疾病患 

者、心肌疾病患者由于低密度脂蛋白(LDH)增高可能干扰了 

医技杂志2013年7月第2O卷第7期Journal ofP—racti—cal丛 di Te£ g 盟 血 垫1 : Q:2 

757・ 

HK法检测血糖的特异性引起血糖假性偏低。 

…1 周天龙.假性低血糖常见原因分析.微循环学,2009,19(2): 

经过HK法测定血糖的理论分析和反应曲线的研究发 

4748. 

现,假性低血糖组的反应曲线27点减去1O点的吸光度差比 

【2】杜伟鹏.白血病假性低血糖57例原因分析.中国临床研究, 

15点减去l0点的吸光度差低了很多,以此计算出的血糖浓 

2011,24(5):418.419. 

度一定比实际的血糖浓度低。这样对于反应曲线异常的低血 

f3】刘晓峰,陈越,陈雪礼,等.慢性粒细胞自血病伴假性低血糖 

糖标本可以将读数点从l0~27改为1O~15(因为10~15基本 

2例.江西医学,2005,23(5):496. 

是反应从初始到高峰,正常反应曲线在达峰以后达到平衡, 

f4】虞容豪,刘雁.真性红细胞增多症伴假性低血糖5例分析.实 

而假性低血糖反应曲线达峰以后很快下降偏离正常线性,读 

用医学杂志,2002,18(9):962. 

『5 邓小军,许辉.继发性红细胞增多症引起假性第血糖1例.国 5]

点应该是从基线到高峰),这样可以有效避免假性低血糖的 

际检验医学杂志,20o7,28(7):669. 

结果出现。对此,李立和171已发现过类似现象,究其原因可能 

f61吴健,马达,王万相,等.贫血患者血糖测定方法探讨.江西 

’是标本中的LDH、羟丁酸脱氢酶(HBDH)等浓度过高导致曲 

医学检验,2005,23(3):277. 

线异常,此现象在血糖不太高的几类患者中易出现HK法假 

f7]李立和.己糖激酶法测定某些类型贫血患者血糖时可产生假 

性低血糖。通过对本实验室的高血糖和正常血糖反应曲线观 

性偏低.检验医学。2004,19(4):343—346. 

察,可以与丁俊青等喂出的葡萄糖氧化酶法测定高血糖“倒 

【81郑铁生,邹光楣,章尧.糖尿病实验室检查及方法学评价.临 

钩现象”相区别。通过参数中读点时间改动以后所测的假性 

床生物化学检验,2004,1(1):157. 

低血糖标本的血糖结果与血糖仪测试结果比较相似,与患者 

【9] 丁俊青,侯振宁,宋玉平.应重视葡萄糖氧化酶法血糖测定时 

的反应也比较相符,质量控制血清的血糖测定结果也很好, 

的“倒钩现象”.河南外科学杂志,2007,13(5):99. 

实验结果表明修改读点时间是可行的。 

(收稿日期:2013.03.19) 

参考文献 

生育期女性254名血常规检测结果分析及临床意义 

中国人民解放军第264医I ̄(030001) 丁如 

缺铁性贫血(iron deficiency anemia,IDA)是临床上最常 

缺铁性贫血诊断标准的占94名占74.O%,而127例同年龄段 

见的一种贫血,尤其是在多数发展中国家的生育年龄女性, 

体检女性中,仅有34名(26.8%)符合该诊断标准。其中妊娠 

婴幼儿以及生长发育期的少年中发病较多。正常情况下,机 期女性缺铁性贫血患者群比例远高于同年龄段其他女性。 

体内铁的吸收和排泄保持动态平衡,当需要增加、铁摄人不 

3讨 论 

足及急慢性失血等情况下造成长期铁的负平衡而致缺铁。 当机体因铁需要量增加和(或)铁吸收减少使体内储存铁 

IDA是临床常见病之一,是体内贮存铁缺乏影响血红蛋白合 

耗尽而缺乏,叉不能得到足够补充,致使合成血红蛋白的铁不 

成所引起的贫血,也是各型贫血中最多见的类型IlJ。 足所引起的贫血,称为IDA。通过上述研究可以比较充分地说 

1资料与方法 

明,妊娠期女性罹患IDA的概率远远高于其他健康女性。IDA 

1.1一般资料:收集2012年l2月至2013年3月处于生育 是妊娠最常见的合并症,据世界卫生组织(WHO)统计,世界 

期年龄的女性254名,年龄23 35岁,平均26岁。其中127 各地发生率为40%~90%,其发生原因与多种因素密切相关, 

名为我院妇产科住院的处于妊娠期(包括围生期)女性,127 

由于大多数并无比较明显的临床症状而被医生及患者本身所 

名为来自体检中心同年龄段的女性, 

忽视,然而,IDA可能引起的后果是比较严重的,如孕妇先兆 

1.2数据来源:用加有乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝剂真空采 

性子痫、产后大出血、产褥感染、贫血性心脏病以及胎儿宫内 

血管收集待检患者血常规标本,将送检标本充分混匀,采用 

生长受限、足月低体质量儿等,严重危害孕妇及胎儿的身体健 

Sysmex XE一2100D全自动血液分析仪进行检测。 

康,因此应当加强重视并采取相应措施,有效地预防和应对妊 

1.3诊断标准:女性血红蛋白<110 g/L,孕妇<100轧;平均 娠期IDA的发生。 

红细胞体积(MCv)<8O m,平均红细胞血红蛋白含量(McH) 

参考文献 

<26 Pg,平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)<0.31;红细胞形态 

f1】张之南,沈娣.血液病诊断及疗效标准.2版.北京:科技出版 

可有明显低色素表现12]。 

社,1998:10. 

2结 果 

[2】许文荣,王建中.临床血液学与检验.4版.北京:人民卫生出 

254名处于生育期年龄女性血常规检查中,127名为妊娠 

版社,2007:3. 

期(包括围生期)女性,其余127名为来自体检中心同年龄段 

(收稿日期:2013—03。21) 

的女性。仪器检测显示:在妊娠期127名女性当中,符合上述 

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