2024年5月21日发(作者:欧阳雅昶)
裂解法包括化学裂解、酶裂解和机械裂解.化学裂解和酶裂解通常是比较温和的方法,通常
会很少使DNA 断裂。
化学裂解和酶裂解法主要是裂解液处理法,主要根据不同的目的,裂解液的组成有所不同,
主要有提取核酸和蛋白两中.在提取RNA或DNA时,我们主要是要充分裂解细胞,得到更
多的核酸;如果我们的目的是蛋白,那要根据蛋白的位置、特性等因素考虑裂解液。
蛋白定位
全细胞
细胞质(可溶性蛋白)
细胞质(细胞骨架等不溶性蛋白)
细胞膜
细胞核
线粒体
裂解液种类
NP-40 或RIPA
Tris-HCL
Tris-Triton
NP-40 或RIPA
RIPA
RIPA
1、去垢剂
SDS,NP-40,TritonX-100这三种去垢剂的作用强弱是不同的。
SDS属于离子型去垢剂,最厉害,基本可以把细胞完全破掉,DNA会释放出来,裂解液变
得很粘稠。
NP-40是很温和的去垢剂,1%浓度的基本可以破坏掉胞膜,而对核膜破坏的作用弱,结合
特定的buffer可以获得胞浆蛋白。
TritonX-100的能力介于NP40和SDS 之间,偏向于NP40,也是常用的细胞裂解液成分
之一,在保护蛋白活性方面有一定作用(SDS基本会使蛋白变性失活)。
货号
abs9160
abs9117
abs9149
产品名称
NP-40裂解液
SDS裂解液
Triton X-100
规格
100ml
100ml
100ml/500ml
2、RIPA裂解液
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer),是一种传统的细胞组织快速裂解液,对组织和细胞都
有较好的裂解作用,主要是从动物组织和动物细胞中抽取的可溶性蛋白。RIPA的配方有很
多种,根据其裂解强度的不同,大致可分为强、中、弱三类,应用上会有一些差异。
产品货号
abs9229abs9231abs9228abs9230
RIPA裂解液(强)
产品名称 RIPA裂解液(强)
(不含抑制剂)
1% Triton
1% Triton
X-100,1%脱氧
有效成分
胆酸钠,0.1%
酸钠,0.1% SDS
SDS
裂解强度
对膜蛋白的提取
对胞浆蛋白的提
优秀
取
对核蛋白的提取 优秀 优秀 良好 较好
优秀 优秀 优秀
强
优秀
强
优秀
中
良好
温和
一般
0.1% SDS 钠
X-100,1%脱氧胆脱氧胆酸钠,0.25%脱氧胆酸
1% NP-40,0.5%1% NP-40,
RIPA裂解液(中) RIPA裂解液(弱)
2024年5月21日发(作者:欧阳雅昶)
裂解法包括化学裂解、酶裂解和机械裂解.化学裂解和酶裂解通常是比较温和的方法,通常
会很少使DNA 断裂。
化学裂解和酶裂解法主要是裂解液处理法,主要根据不同的目的,裂解液的组成有所不同,
主要有提取核酸和蛋白两中.在提取RNA或DNA时,我们主要是要充分裂解细胞,得到更
多的核酸;如果我们的目的是蛋白,那要根据蛋白的位置、特性等因素考虑裂解液。
蛋白定位
全细胞
细胞质(可溶性蛋白)
细胞质(细胞骨架等不溶性蛋白)
细胞膜
细胞核
线粒体
裂解液种类
NP-40 或RIPA
Tris-HCL
Tris-Triton
NP-40 或RIPA
RIPA
RIPA
1、去垢剂
SDS,NP-40,TritonX-100这三种去垢剂的作用强弱是不同的。
SDS属于离子型去垢剂,最厉害,基本可以把细胞完全破掉,DNA会释放出来,裂解液变
得很粘稠。
NP-40是很温和的去垢剂,1%浓度的基本可以破坏掉胞膜,而对核膜破坏的作用弱,结合
特定的buffer可以获得胞浆蛋白。
TritonX-100的能力介于NP40和SDS 之间,偏向于NP40,也是常用的细胞裂解液成分
之一,在保护蛋白活性方面有一定作用(SDS基本会使蛋白变性失活)。
货号
abs9160
abs9117
abs9149
产品名称
NP-40裂解液
SDS裂解液
Triton X-100
规格
100ml
100ml
100ml/500ml
2、RIPA裂解液
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer),是一种传统的细胞组织快速裂解液,对组织和细胞都
有较好的裂解作用,主要是从动物组织和动物细胞中抽取的可溶性蛋白。RIPA的配方有很
多种,根据其裂解强度的不同,大致可分为强、中、弱三类,应用上会有一些差异。
产品货号
abs9229abs9231abs9228abs9230
RIPA裂解液(强)
产品名称 RIPA裂解液(强)
(不含抑制剂)
1% Triton
1% Triton
X-100,1%脱氧
有效成分
胆酸钠,0.1%
酸钠,0.1% SDS
SDS
裂解强度
对膜蛋白的提取
对胞浆蛋白的提
优秀
取
对核蛋白的提取 优秀 优秀 良好 较好
优秀 优秀 优秀
强
优秀
强
优秀
中
良好
温和
一般
0.1% SDS 钠
X-100,1%脱氧胆脱氧胆酸钠,0.25%脱氧胆酸
1% NP-40,0.5%1% NP-40,
RIPA裂解液(中) RIPA裂解液(弱)