2024年10月23日发(作者：香博实)
山东医药２０１２年第５２卷第１期
ＴＲＰＶ６对人卵巢癌细胞株ＨＯ一８９１０ＰＭ
迁移的影响
林丽琼 ，黄维甄 ，陈健鹏。
（１汕头市妇女儿童医院，广东汕头５１５０４１；２惠州市中心人民医院；
３山东省立医院）
摘要：目的探讨ＴＲＰＶ６对卵巢癌细胞株ＨＯ－８９１０ＰＭ迁移能力的影响。方法细胞株分别瞬时转染ＴＲＰＶ６
的特异性ｓｉＲＮＡ干扰序列，然后分别通过ＲＴ—ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎ—ｂｌｏｔ检测ＨＯ－８９１０ＰＭ细胞干扰前后ＴＲＰＶ６基因和蛋
白表达变化，通过划痕试验和Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室试验检测ＴＲＰＶ６对ＨＯ一８９１０ＰＭ细胞迁移的影响。结果 ＲＴ—ＰＣＲ和
Ｗｅｓｔｅｒｎ—ｂｌｏｔ证实了ＴＲＰＶ６在人卵巢癌高转移细胞株ＨＯ一８９１０ＰＭ中的表达以及ＴＲＰＶ６ ＲＮＡ干扰序列的干扰效
率；划痕试验和Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室试验表明，与ＨＯ一８９１０ＰＭ阴性干扰对照细胞相比，ＨＯ－８９１０ＰＭ—ＴＲＰＶ６一ｓｉＲＮＡ１和ｓｉＲ—
ＮＡ２的迁移能力均显著下降（Ｐ＜０．０１）。结论卵巢癌细胞ＨＯ一８９１０ＰＭ中ＴＲＰＶ６的表达水平高低与该细胞迁移
能力高低呈正相关，ＴＲＰＶ６有可能成为卵巢癌转移预防和治疗的新靶点。
关键词：卵巢肿瘤；瞬时受体电位；细胞运动
中图分类号：Ｒ７３７．３１ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２－２６６Ｘ（２０１２）０１－００１３－０３
Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ＴＲＰＶ６ ｏｎ ｔｈｅ ｍｏｔｉｌｉｔｙ ｏｆ Ｈ０－８９１ ０ ＰＭ ｏｖａｒｙ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ
ＬＩＮ Ｌｉ—ｑｉｏｎｇ ，ＨＵＡＮＧ Ｗｅｉ—ｚｈｅｎ，ＣＨＥＮ Ｊｉａｎ－ｐｅｎｇ
（１ Ｓｈａｎｔｏｕ Ｍａｔｅｒｎｉｔｙ ａｎｄ Ｃｈｉｌｄ Ｈｙｇｉｅｎｅ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈａｎｔｏｕ ５１５０４１，Ｐ．Ｒ．Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｒａｎｓｉｅｎｔ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ Ｖ６（ＴＲＰＶ６）ｃｈａｎｎｅｌ ｏｎ ｔｈｅ ｍｏｔｉｌｉｔｙ ｏｆ
ＨＯ一８９１０ＰＭ ｏｖａｒｙ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ａｆｔｅｒ ｂｅｉｎｇ ｐｅｒｍａｎｅｎｔｌｙ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ｓｉＲＮＡ ｏｆ ｔｈｅ ＴＲＰＶ６ ｍＲＮＡ．ＴＲＰＶ６
ｍＲＮＡ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｕｓｉｎｇ ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ—ＰＣＲ ａｎｄ ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ ａｎａｌｙｓｉｓ，ａｎｄ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ
ＴＲＰＶ６ Ｏｉｌ ｍｏｔｉｌｉｔｙ ｏｆ ＨＯ＿８９ １０ＰＭ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｗｏｕｎｄ ｈｅａｌｉｎｇ ａｓｓａｙ ａｎｄ Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ ｃｈａｍｂｅｒ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ａｓｓａｙ．
Ｒｅｓｕｌｔｓ ＲＴ－ＰＣＲ ａｎｄ Ｗｅｓｔｅｒｎ—ｂｌｏｔ ｄｉｓｐｌａｙｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｏｆ ＴＲＰＶ６ ｇｅｎｅ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ＨＯ一８９１０ＰＭ
ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ ａｃｔｉｏｎ ｏｆ ＴＲＰＶ６ ＲＮＡ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ ｓｅｑｕｅｎｔｉＭ ｔｏ ＨＯ一８９１０ＰＭ ｃｅｌｌｓ．Ｗｏｕｎｄ ｈｅＭｉｎｇ ａｓｓａｙ ａｎｄ Ｔｒ－
ａｎｓｗｅｌｌ ｃｈａｍｂｅｒ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ａｓｓａｙ ｒｅｖｅＭｅｄ ｔｈａｔ ＴＲＰＶ６ ＲＮＡ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｔｈｅ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ｏｆ ＨＯ一
８９１０ＰＭ—ＴＲＰＶ６一ｓｉＲＮＡ ｃｅｌｌｓ（Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ ＴＲＰＶ６ ｈａｓ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｔｈｅ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ｏｆ ＨＯ一８９１０ＰＭ
ｃｅｌｌｓ．ＴＲＰＶ６，ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｍｉｇｈｔ ｈａｖｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ａｎ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｏｖａｒｙ ｃａｎｃｅｒ ａｓ ａ ｎｅｗ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｔａｒｇｅｔｓ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｏｖａｒｉａｎ ｎｅｏｐｌａｓｍｓ；ｔｒａｎｓｉｅｎｔ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｐｏｔｅｎｔｉｌ；ｃｅｌａｌ ｍｏｖｅｍｅｎｔ
Ｃａｎ作为细胞内特殊的第二信使，在肿瘤细胞
的迁移过程中起重要作用¨Ｊ。瞬时受体电位（ＴＲＰ）
通道是位于细胞膜上的一类重要的阳离子通道超家
族，ＴＲＰＶ６通道具有高度的ｃａ“选择性。ＴＲＰＶ６蛋
白不存于正常卵巢组织中 Ｊ，而在卵巢癌中的表达
８９１０ＰＭ购自中科院上海细胞生物学研究所。将细
胞接种在含１０％胎牛血清的ＲＰＭＩ一１６４０培养基中，
置３７℃、５％ＣＯ，、相对湿度９０％的培养箱中培养，
２ ｄ换液１次。细胞生长良好，呈单层贴壁生长。
１．２细胞瞬时干扰设计合成３条ｓｉＲＮＡ序列：
ＴＲＰＶ６－ｓｉＲＮＡ１：ＣＴＧ ＣＡＴ ＧＴＣ ＡＧＡ ＧＣＡ ＣＴＴ ＴＡＡ；
ＴＲＰＶ６一ｓｉＲＮＡ２：ＡＡＣ ＣＴＧ ＣＴＧ ＣＡＧ ＣＡＧ ＡＡＧ
ＡＧＧ；Ｃｏｎｔｒｏｌ：ＡＡＴ ＣＡＴ ＣＴＡ ＡＧＣ ＴＧＧ ＣｒＩＴＩ、ＴＧＣ。
显著升高 。２０１０年８月～２０１１年８月，我们运用
ＲＮＡ干扰方法沉默人高转移卵巢癌细胞株中ＴＲ．
ＰＶ６基因的表达，观察其对癌细胞迁移能力的影响，
探讨ＴＲＰＶ６基因在卵巢癌转移中的作用。
１材料与方法
消化细胞，接种６孔板，２４ ｈ后８０％贴壁，ＰＢＳ冲
洗，加入Ｏｐｔｉ－ＭＥＮ Ｉ。取３支ＥＰ管，标记ＴＲＰＶ６一
ｓｉＲＮＡ１、ｓｉＲＮＡ２和ＮＣ，ｓｉＲＮＡ和Ｌｉｐｏ２０００按２：１混
１．１ 细胞培养 人卵巢癌高转移细胞株ＨＯ一
基金项目：国家自然科学基金资助项目（８１１０２０５２）。
匀，Ｏｐｔｉ－ＭＥＮ Ｉ稀释，入孔，３７ ｃＣ、５％ＣＯ２ ２４ ｈ，弃培
养液，换１０％胎牛血清ＲＰＭＩ一１６４０培养４８ ｈ，观察
１ ３
干扰效果。
１．３ ＲＴ—ＰＣＲ取对数生长期细胞，抽提总ＲＮＡ，合
成ｃＤＮＡ，取２ 产物行ＰＣＲ扩增。ＴＲＰＶ６上游引
物：５ ＧＣＧ ＧＣＴ ＣＡＴ ＣＡＧ ＴＧＣ ＣＡＧ Ｃ ３ ；下游引物：
５ ＧＴＡ ＣＴＹ ＣＧＡ ＧＡＣ ＡＣＴ ＧＡＧ ＧＧＣ ３ ，扩增长度
７３７ ｂｐ。１％琼脂糖凝胶电泳并拍照。以ＧＡＰＤＨ为
内参，用ＴＲＰＶ６／ＧＡＰＤＨ代表ＴＲＰＶ６相对表达量。
１．４ Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ取对数生长期细胞加入裂解液
裂解１ ｈ，离心，ＢＣＡ法测定蛋白浓度。制８％分离
胶，５％积层胶。电泳，恒压８０ Ｖ，４０ ｒａｉｎ，溴酚蓝入
分离胶，提至１２０ Ｖ，电泳９０ ｍｉｎ至溴酚蓝达胶底。
据Ｍａｒｋｅｒ，切目的蛋白和内参，半干转膜：恒流８４
ｍＡ，１２０ ｍｉｎ，转至ＰＶＤＦ膜。封闭１．５ ｈ，ＴＢＳ－Ｔ洗
脱。山羊多抗ＴＲＰＶ６以１：３００稀释，４℃过夜。驴
抗山羊二抗１：５００稀释，３７ ｏＣ ２ ｈ，ＢｅｙｏＥＣＬ Ｐｌｕｓ发
光液显影。以ＴＲＰＶ６／￣一ａｃｔｉｎ代表ＴＲＰＶ６的相对
表达量。
１．５细胞划痕试验制备单细胞悬液，按２×１０
个／孔接种于２４孔板，３７ ｏＣ、５％ＣＯ２培养１０～１２
ｈ，在９０％融合单层细胞表面划一细痕，基础培养液
漂洗。加入无血清培养液，加入１０ Ｉｘｇ／ｍＬ丝裂霉
素排除增殖干扰。Ｉｍａｇｅ Ｊ软件计算２２ ｈ后迁移到
划痕区细胞单位面积数值变化，每组设３个复孔。
１．６ Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ用无血清ＰＲＭＩ．１６４０重悬细胞，调
整为（０．５～１．０）×１０。￣＇／ｍＬ。吸出内室培养液，加
５００ ＩＬＬ １０％胎牛血清培养液于外室，加３００ ｔｘＬ细
胞悬液及ｌ０ ｍＬ丝裂霉素于内室，３７℃、５％
ＣＯ 培养４８ ｈ。取出小室，吸掉培养液，擦掉未穿孔
细胞。小室结晶紫中染色２０ ｒａｉｎ，冲洗，风干。随机
取５个高倍视野观察计数。
１．７统计学方法采用ＳＰＳＳ１６．０软件，计量资料
朋 ±Ｓ表示，整体比较采用ＯＮＥ—ＷＡＹ ＡＮＯＶＡ，多
组均数与对照组均数多重比较采用Ｄｕｎｎｅｔｔ—ｔ检验。
Ｐ≤０．０５为差异有统计学意义。
２ 结果
２．１ ＲＴ—ＰＣＲ检测ＲＮＡ干扰对细胞ＴＲＰＶ６基因表
达的影响 琼脂糖凝胶电泳显示，细胞转染ｓｉＲＮＡ
结束２４ ｈ后，ＮＣ和ｓｉＲＮＡ１、ｓｉＲＮＡ２干扰组均可见
到大小为２０５ ｂｐ的目的基因ＴＲＰＶ６条带，但ＴＲ—
ＰＶ６干扰处理后的ｓｉＲＮＡ１、ｓｉＲＮＡ２干扰组的目的
条带与ＮＣ组比较显著减弱（Ｐ均＜０．０１），ｓｉＲＮＡ１
目的条带较ｓｉＲＮＡ２更弱。
２．２ Ｗｅｓｔｅｒｎ．ｂｌｏｔ检测ＲＮＡ干扰对细胞ＴＲＰＶ６蛋
白表达的影响 细胞转染ｓｉＲＮＡ结束４８ ｈ后，ＮＣ
组、ｓｉＲＮＡ１及ｓｉＲＮＡ２干扰组均检测到ＴＲＰＶ６表
１４
山东医药２０１２年第５２卷第１期
达，与ＮＣ组相比，ｓｉＲＮＡ１、ｓｉＲＮＡ２干扰组均出现不
同程度的ＴＲＰＶ６表达量显著下降（Ｐ均＜０．０１）。
２．３细胞划痕试验结果ＴＲＰＶ６表达降低后，ｓｉＲ—
ＮＡ１和ｓｉＲＮＡ２干扰组细胞迁移能力均显著低于
ＮＣ组（Ｐ均＜０．０１）。
２．４ Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室试验结果Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室试验
开始４８ ｈ后分别观察各组细胞迁移穿孔数量，结果
表明，降低ＴＲＰＶ６表达后，ｓｉＲＮＡ１、ｓｉＲＮＡ２干扰组
的穿孔细胞数均显著低于ＮＣ组（Ｐ均＜０．０１），ｓｉＲ．
ＮＡ１干扰组低于ｓｉＲＮＡ２干扰组。
３讨论
肿瘤转移包括黏附、侵袭和迁移三个过程，影响
其中任一环节均有可能影响肿瘤的转移能力。ＴＲＰ
是一个新发现的通道，目前对ＴＲＰ通道蛋白在肿瘤
组织中的表达情况尚未进行大规模研究，仅有４个
研究报道ＴＲＰ家族中的ＴＲＰＭ１、ＴＲＰＭ７、ＴＲＰＭ８和
ＴＲＰＶ６分别调控鼠恶性黑色素瘤Ｂ１６一Ｆ１／１０细胞、
人鼻咽癌５—８Ｆ细胞、人胶质细胞瘤ＤＢＴＲＧ细胞及
人肝细胞癌ＨｅｐＧ２细胞的迁移 。
本研究首先应用ＲＴ—ＰＣＲ及Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ从基
因和蛋白水平验证了ＴＲＰＶ６在ＨＯ－８９１０ＰＭ中的表
达及运用ＲＮＡｉ的干扰效率。接下来应用细胞划痕
及Ｔｒａｎｗｅｌｌ小室试验观察了ＴＲＰＶ６干扰后卵巢癌
细胞迁移行为的改变。Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室试验结果显
示，降低ＴＲＰＶ６表达后ＨＯ一８９１０ＰＭ的穿孔细胞显
著减少，说明细胞迁移能力明显减弱。单层细胞划
痕后观察０、２０ ｈ细胞迁移情况，降低ＴＲＰＶ６表达
的细胞迁移单位面积较正常ＨＯ一８９１０ＰＭ细胞及阴
性干扰的ＨＯ一８９１０ＰＭ细胞减少，也说明细胞迁移能
力显著减弱。本研究结合了两种不同但平行的实验
结果，反复验证了下调ＴＲＰＶ６的表达水平可显著降
低ＨＯ一８９１０ＰＭ细胞的迁移能力，显示出ＴＲＰＶ６的
表达水平与卵巢癌细胞的迁移能力呈正相关。我们
证实了ＴＲＰＶ６可能是正向调控卵巢癌细胞侵袭转
移的重要分子之一，但确切的结论还需要进一步的
实验来验证。
ＴＲＰＶ６通道具有高度的Ｃａ 选择性，存在于几
乎所有与ｃａ 转运有关的组织器官。ＴＲＰＶ６在肾脏
和小肠中均有表达，其调控与肾和小肠上皮细胞对
ｃａ 重吸收作用有关，因此又称为“上皮钙通道”。
ｃａ 是细胞内特殊的第二信使，ｃａ 相关的信号通路
与细胞的移动能力相关，细胞迁移的很多阶段都与
Ｃａ 的调节有关 。很多研究表明，Ｃａ 通道以及介
导的Ｃａ 内流在很多种类的细胞迁移中扮演着非常
重要的角色，细胞内钙信号的改变涉及肿瘤细胞的侵
山东医药２０１２年第５２卷第１期
袭和迁移，比如人乳腺癌细胞ＭＤＡ—ＭＢ．２３ １及人纤维
肉瘤细胞ＨＴ１０８０ｌ８ Ｊ。肿瘤细胞中的乳腺癌ＭＤＡ—
［４］Ｃｈｅｎ ｊＰ，Ｌｕａｎ Ｙ，Ｙｏｕ ＣＸ，ｅｔ ａ１．ＴＲＰＭ７ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｔｈｅ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ
ｏｆ ｈｕｍａｎ ｎａｓｏｐｈａｒｙｎｇｅａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｃｅｌｌ ｂｙ ｍｅｄｉａｔｉｎｇ Ｃａ ｉｎｆｌｕｘ
ＭＢ．２３１细胞的转移便是由细胞中的钙库调控式通道
及其所介导的ｃａ 内流所调控 Ｊ。
综上所述，卵巢癌细胞Ｈｅ一８９１０ＰＭ中ＴＲＰＶ６
［Ｊ］．Ｃｅｌｌ Ｃａｌｃｉｕｍ，２０１０，４７（５）：４２５－４３２．
［５］Ｗｏｎｄｅｒｇｅｍ Ｒ，Ｅｃａｙ ＴＷ，Ｍａｈｉｅｕ Ｆ，ｅｔ ａ１．ＨＧＦ／ＳＦ ａｎｄ ｍｅｎｔｈｏｌ
ｉｎｃｒｅａｓｅ ｈｕｍａｎ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ｃｅｌｌ ｃａｌｃｉｕｍ ａｎｄ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｂｉｏ－
ｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ，２００８，３７２（１）：２１０—２１５．
的表达水平高低与该细胞迁移能力高低呈正相关，
ＴＲＰＶ６很有可能成为卵巢癌转移预防和治疗的新
靶点。关于ＴＲＰＶ６调控ＨＯ一８９１０ＰＭ细胞及其他卵
巢癌细胞迁移的具体分子机制仍需进一步研究。
参考文献：
［１］Ｐｒｅｖａｒｓｋａｙａ Ｎ，Ｓｋｒｙｍａ Ｒ，Ｓｈｕｈａ Ｙ．Ｃａｌｃｉｕｍ ｉｎ ｔｕｍｏｕｒ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ：
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６１８．
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ｔｉｏｎ ｂｙ ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ／ｓｃａｔｔｅｒ ｆａｃｔｏｒ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｈｅｐａｔｏｂｌａｓ－
ｔｏｍａ（ＨｅｐＧ２）ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｃｅｌｌ Ｃａｌｃｉｕｍ，２００４，３６（３３）：１９－２８．
［７］Ｊａｃｑｕｅｓ—Ｆｆｉｅｋｅ ＢＴ，Ｓｅｏｗ Ｙ，Ｇｏｔｔｌｉｅｂ ＰＡ，ｅｔ ａ１．Ｃａ“ｉｎｆｌｕｘ
ｔｈｒｏｕｇｈ ｍｅｃｈａｎｏｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｃｈａｎｎｅｌｓ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｎｅｕｒｉｔｅ ｏｕｔｇｒｏｗｔｈ ｉｎ ０ｐ—
ｐｏｓｉｔｉｏｎ ｔｏ ｏｔｈｅｒ ｉｎｆｌｕｘ ｐａｔｈｗａｙｓ ａｎｄ ｒｅｌｅａｓｅ ｆｒｏｍ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｓｔｏｒｅｓ
［Ｊ］．Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，２００６，２６（１）：５６５６－５６６４．
［８］Ｙａｎｇ Ｓ，Ｚｈａｎｇ ＪＪ，Ｈｕａｎｇ ＸＹ．Ｏｒａｉｌ ａｎｄ ＳＴＩＭＩ ａｒｅ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｆｏｒ
ｂｒｅａｓｔ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ［Ｊ］，Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ，２００９，
１５（２）：１２４－１３４．
［２］Ｐｅｎｇ ＪＢ，Ｂｒｏｗｎ ＥＭ，Ｈｅｄｉｇｅｒ ＭＡ．Ａｐｉｃａｌ ｅｎｔｒｙ ｃｈａｎｎｅｌｓ ｉｎ ｃａｌｃｉ．
ｏｎ ｔｒｎｓｐｏｒｔａｉｎｇ ｅｐｉｔｈｅｌｉａ［Ｊ］．Ｎｅｗｓ Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｓｃｉ，２００３，１８：１５８—
１６３．
［９］Ｈｕａｎｇ ＪＢ，Ｋｉｎｄｚｅｌｓｋｉｉ ＡＬ，Ｃｌａｒｋ ＡＪ，ｅｔ ａ１．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｈａｎ—
ｎｅｌｓ ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ ｃａｌｃｉｕｍ ｓｐｉｋｅｓ ａｎｄ ｗａｖｅｓ ｉｎ ＨＴ１０８０ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌｓ：
［３］Ｐｒｅｖａｒｓｋａｙａ Ｎ，Ｚｈａｎｇ Ｌ，Ｂａｒｒｉｔｔ Ｇ．ＴＲＰ ｃｈａｎｎｅｌｓ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．
Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ，２００７，１７７２（８）：９３７－９４６．
ｔｈｅｉｒ ａｐｐａｒｅｎｔ ｒｏｌｅｓ ｉｎ ｃｅｌｌ ｍｏｔｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｉｎｖａｓｉｏｎ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，
２００４，６４（７）：２４８２－２４８９． （收稿日期：２０１１－１１—１６）
・
个案报告・
罕见家族性高胆固醇血症１例报告
郭斌斌，赖晓阳
（南昌大学第二附属医院，南昌３３０００６）
患儿女，７岁。因臀部黄色丘疹５年、增多增大
１年来我院诊治。患儿２岁时发现臀部有一约１ ｃｍ
进一步随访中。
ｘ３ ｃｍ黄色丘疹，外院查血脂增高，约３个月后局
部皮疹逐渐增多增大。近１年来，全身皮疹增多增
大，速度增快。父母非近亲结婚，家族中其父兄弟姐
讨论：家族性高胆固醇血症（ＦＨ）是一种以血浆
低密度脂蛋白与胆固醇水平升高为特征的常染色体
显性遗传障碍疾病，又称家族性高１３脂蛋白血症。
好发于儿童，可导致各种心血管疾病并发症。其病
因是由于肝脏表面特异性的ＬＤＬ受体数目减少或
缺乏，导致循环中ＬＤＬ．Ｃ的清除能力下降。根据
ＬＤＬ受体的数目，分为杂合子型和纯合子型。杂合
子型ＦＨ血浆胆固醇介于３００～４００ ｍｇ／ｄＬ，发生率
为１／１ ０００ ０００；纯合子则介于６００—１ ２００ ｍｇ／ｄＬ，
发生率为１／５００～１／１ ０００，大多数患者在４０岁以前
即发病。根据本患者的临床特点，诊断为纯合子型。
根据ＷＨＯ分类，ＦＨ属高脂血症Ⅱ型，ＩＩ ａ型者只有
高ｐ脂蛋白血症，而前ｐ脂蛋白正常，多数病例ＴＣ
升高，而ＴＧ正常。本病例自幼发病，皮损及血管损
妹１ １人全部及其部分子女均有高胆固醇血症、高血
压。查体：ＢＰ ９０／６０ ｍｍＨｇ，神志清，发育正常，营养
良好，心肺腹部无异常，臀部可见１ ｃｍ×３ ａｍ大小
结节状融合性橘黄色瘤，其表面凹凸不平，基底呈暗
红色炎性改变，质较韧。双膝可见对称分布的结节
性黄色瘤，为类圆形状黄豆大小结节，大小不一。皮
肤科诊断为结节疹性黄色瘤。实验室检查：肝肾功
能、电解质等均正常，总胆固醇２１．７ ｍｍｏｌ／Ｌ，低密
度脂蛋白１８．２ ｍｍｏｌｆＬ。脂蛋白电泳、皮肤病理、心
脏彩超未查。患儿颈部彩超示：双侧颈总、颈内、颈
外动脉血流阻力指数偏高。诊断为家族性高胆固醇
血症。入院后口服他汀类降脂药，臀部、肘关节、膝
关节伸侧较大斑块给予手术切除，目前仍在
通讯作者
害逐年加重，血清中Ｔｃ与ＴＤＬ增高，ＴＧ正常，其父
母均有血脂增高，应属于Ⅱａ型。本病的预后与发
病年龄、血管损害范围和部位有关，治疗上主要采取
饮食控制及降脂治疗。如上述治疗效果均不理想
时，尚可采用ＬＤＬ分离术、肝脏移植等方法。
（收稿Ｅｔ期：２０１１—１０．１５）
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2024年10月23日发(作者：香博实)
山东医药２０１２年第５２卷第１期
ＴＲＰＶ６对人卵巢癌细胞株ＨＯ一８９１０ＰＭ
迁移的影响
林丽琼 ，黄维甄 ，陈健鹏。
（１汕头市妇女儿童医院，广东汕头５１５０４１；２惠州市中心人民医院；
３山东省立医院）
摘要：目的探讨ＴＲＰＶ６对卵巢癌细胞株ＨＯ－８９１０ＰＭ迁移能力的影响。方法细胞株分别瞬时转染ＴＲＰＶ６
的特异性ｓｉＲＮＡ干扰序列，然后分别通过ＲＴ—ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎ—ｂｌｏｔ检测ＨＯ－８９１０ＰＭ细胞干扰前后ＴＲＰＶ６基因和蛋
白表达变化，通过划痕试验和Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室试验检测ＴＲＰＶ６对ＨＯ一８９１０ＰＭ细胞迁移的影响。结果 ＲＴ—ＰＣＲ和
Ｗｅｓｔｅｒｎ—ｂｌｏｔ证实了ＴＲＰＶ６在人卵巢癌高转移细胞株ＨＯ一８９１０ＰＭ中的表达以及ＴＲＰＶ６ ＲＮＡ干扰序列的干扰效
率；划痕试验和Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室试验表明，与ＨＯ一８９１０ＰＭ阴性干扰对照细胞相比，ＨＯ－８９１０ＰＭ—ＴＲＰＶ６一ｓｉＲＮＡ１和ｓｉＲ—
ＮＡ２的迁移能力均显著下降（Ｐ＜０．０１）。结论卵巢癌细胞ＨＯ一８９１０ＰＭ中ＴＲＰＶ６的表达水平高低与该细胞迁移
能力高低呈正相关，ＴＲＰＶ６有可能成为卵巢癌转移预防和治疗的新靶点。
关键词：卵巢肿瘤；瞬时受体电位；细胞运动
中图分类号：Ｒ７３７．３１ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２－２６６Ｘ（２０１２）０１－００１３－０３
Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ＴＲＰＶ６ ｏｎ ｔｈｅ ｍｏｔｉｌｉｔｙ ｏｆ Ｈ０－８９１ ０ ＰＭ ｏｖａｒｙ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ
ＬＩＮ Ｌｉ—ｑｉｏｎｇ ，ＨＵＡＮＧ Ｗｅｉ—ｚｈｅｎ，ＣＨＥＮ Ｊｉａｎ－ｐｅｎｇ
（１ Ｓｈａｎｔｏｕ Ｍａｔｅｒｎｉｔｙ ａｎｄ Ｃｈｉｌｄ Ｈｙｇｉｅｎｅ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈａｎｔｏｕ ５１５０４１，Ｐ．Ｒ．Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｒａｎｓｉｅｎｔ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ Ｖ６（ＴＲＰＶ６）ｃｈａｎｎｅｌ ｏｎ ｔｈｅ ｍｏｔｉｌｉｔｙ ｏｆ
ＨＯ一８９１０ＰＭ ｏｖａｒｙ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ａｆｔｅｒ ｂｅｉｎｇ ｐｅｒｍａｎｅｎｔｌｙ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ｓｉＲＮＡ ｏｆ ｔｈｅ ＴＲＰＶ６ ｍＲＮＡ．ＴＲＰＶ６
ｍＲＮＡ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｕｓｉｎｇ ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ—ＰＣＲ ａｎｄ ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ ａｎａｌｙｓｉｓ，ａｎｄ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ
ＴＲＰＶ６ Ｏｉｌ ｍｏｔｉｌｉｔｙ ｏｆ ＨＯ＿８９ １０ＰＭ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｗｏｕｎｄ ｈｅａｌｉｎｇ ａｓｓａｙ ａｎｄ Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ ｃｈａｍｂｅｒ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ａｓｓａｙ．
Ｒｅｓｕｌｔｓ ＲＴ－ＰＣＲ ａｎｄ Ｗｅｓｔｅｒｎ—ｂｌｏｔ ｄｉｓｐｌａｙｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｏｆ ＴＲＰＶ６ ｇｅｎｅ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ＨＯ一８９１０ＰＭ
ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ ａｃｔｉｏｎ ｏｆ ＴＲＰＶ６ ＲＮＡ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ ｓｅｑｕｅｎｔｉＭ ｔｏ ＨＯ一８９１０ＰＭ ｃｅｌｌｓ．Ｗｏｕｎｄ ｈｅＭｉｎｇ ａｓｓａｙ ａｎｄ Ｔｒ－
ａｎｓｗｅｌｌ ｃｈａｍｂｅｒ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ａｓｓａｙ ｒｅｖｅＭｅｄ ｔｈａｔ ＴＲＰＶ６ ＲＮＡ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｔｈｅ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ｏｆ ＨＯ一
８９１０ＰＭ—ＴＲＰＶ６一ｓｉＲＮＡ ｃｅｌｌｓ（Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ ＴＲＰＶ６ ｈａｓ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｔｈｅ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ｏｆ ＨＯ一８９１０ＰＭ
ｃｅｌｌｓ．ＴＲＰＶ６，ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｍｉｇｈｔ ｈａｖｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ａｎ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｏｖａｒｙ ｃａｎｃｅｒ ａｓ ａ ｎｅｗ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｔａｒｇｅｔｓ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｏｖａｒｉａｎ ｎｅｏｐｌａｓｍｓ；ｔｒａｎｓｉｅｎｔ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｐｏｔｅｎｔｉｌ；ｃｅｌａｌ ｍｏｖｅｍｅｎｔ
Ｃａｎ作为细胞内特殊的第二信使，在肿瘤细胞
的迁移过程中起重要作用¨Ｊ。瞬时受体电位（ＴＲＰ）
通道是位于细胞膜上的一类重要的阳离子通道超家
族，ＴＲＰＶ６通道具有高度的ｃａ“选择性。ＴＲＰＶ６蛋
白不存于正常卵巢组织中 Ｊ，而在卵巢癌中的表达
８９１０ＰＭ购自中科院上海细胞生物学研究所。将细
胞接种在含１０％胎牛血清的ＲＰＭＩ一１６４０培养基中，
置３７℃、５％ＣＯ，、相对湿度９０％的培养箱中培养，
２ ｄ换液１次。细胞生长良好，呈单层贴壁生长。
１．２细胞瞬时干扰设计合成３条ｓｉＲＮＡ序列：
ＴＲＰＶ６－ｓｉＲＮＡ１：ＣＴＧ ＣＡＴ ＧＴＣ ＡＧＡ ＧＣＡ ＣＴＴ ＴＡＡ；
ＴＲＰＶ６一ｓｉＲＮＡ２：ＡＡＣ ＣＴＧ ＣＴＧ ＣＡＧ ＣＡＧ ＡＡＧ
ＡＧＧ；Ｃｏｎｔｒｏｌ：ＡＡＴ ＣＡＴ ＣＴＡ ＡＧＣ ＴＧＧ ＣｒＩＴＩ、ＴＧＣ。
显著升高 。２０１０年８月～２０１１年８月，我们运用
ＲＮＡ干扰方法沉默人高转移卵巢癌细胞株中ＴＲ．
ＰＶ６基因的表达，观察其对癌细胞迁移能力的影响，
探讨ＴＲＰＶ６基因在卵巢癌转移中的作用。
１材料与方法
消化细胞，接种６孔板，２４ ｈ后８０％贴壁，ＰＢＳ冲
洗，加入Ｏｐｔｉ－ＭＥＮ Ｉ。取３支ＥＰ管，标记ＴＲＰＶ６一
ｓｉＲＮＡ１、ｓｉＲＮＡ２和ＮＣ，ｓｉＲＮＡ和Ｌｉｐｏ２０００按２：１混
１．１ 细胞培养 人卵巢癌高转移细胞株ＨＯ一
基金项目：国家自然科学基金资助项目（８１１０２０５２）。
匀，Ｏｐｔｉ－ＭＥＮ Ｉ稀释，入孔，３７ ｃＣ、５％ＣＯ２ ２４ ｈ，弃培
养液，换１０％胎牛血清ＲＰＭＩ一１６４０培养４８ ｈ，观察
１ ３
干扰效果。
１．３ ＲＴ—ＰＣＲ取对数生长期细胞，抽提总ＲＮＡ，合
成ｃＤＮＡ，取２ 产物行ＰＣＲ扩增。ＴＲＰＶ６上游引
物：５ ＧＣＧ ＧＣＴ ＣＡＴ ＣＡＧ ＴＧＣ ＣＡＧ Ｃ ３ ；下游引物：
５ ＧＴＡ ＣＴＹ ＣＧＡ ＧＡＣ ＡＣＴ ＧＡＧ ＧＧＣ ３ ，扩增长度
７３７ ｂｐ。１％琼脂糖凝胶电泳并拍照。以ＧＡＰＤＨ为
内参，用ＴＲＰＶ６／ＧＡＰＤＨ代表ＴＲＰＶ６相对表达量。
１．４ Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ取对数生长期细胞加入裂解液
裂解１ ｈ，离心，ＢＣＡ法测定蛋白浓度。制８％分离
胶，５％积层胶。电泳，恒压８０ Ｖ，４０ ｒａｉｎ，溴酚蓝入
分离胶，提至１２０ Ｖ，电泳９０ ｍｉｎ至溴酚蓝达胶底。
据Ｍａｒｋｅｒ，切目的蛋白和内参，半干转膜：恒流８４
ｍＡ，１２０ ｍｉｎ，转至ＰＶＤＦ膜。封闭１．５ ｈ，ＴＢＳ－Ｔ洗
脱。山羊多抗ＴＲＰＶ６以１：３００稀释，４℃过夜。驴
抗山羊二抗１：５００稀释，３７ ｏＣ ２ ｈ，ＢｅｙｏＥＣＬ Ｐｌｕｓ发
光液显影。以ＴＲＰＶ６／￣一ａｃｔｉｎ代表ＴＲＰＶ６的相对
表达量。
１．５细胞划痕试验制备单细胞悬液，按２×１０
个／孔接种于２４孔板，３７ ｏＣ、５％ＣＯ２培养１０～１２
ｈ，在９０％融合单层细胞表面划一细痕，基础培养液
漂洗。加入无血清培养液，加入１０ Ｉｘｇ／ｍＬ丝裂霉
素排除增殖干扰。Ｉｍａｇｅ Ｊ软件计算２２ ｈ后迁移到
划痕区细胞单位面积数值变化，每组设３个复孔。
１．６ Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ用无血清ＰＲＭＩ．１６４０重悬细胞，调
整为（０．５～１．０）×１０。￣＇／ｍＬ。吸出内室培养液，加
５００ ＩＬＬ １０％胎牛血清培养液于外室，加３００ ｔｘＬ细
胞悬液及ｌ０ ｍＬ丝裂霉素于内室，３７℃、５％
ＣＯ 培养４８ ｈ。取出小室，吸掉培养液，擦掉未穿孔
细胞。小室结晶紫中染色２０ ｒａｉｎ，冲洗，风干。随机
取５个高倍视野观察计数。
１．７统计学方法采用ＳＰＳＳ１６．０软件，计量资料
朋 ±Ｓ表示，整体比较采用ＯＮＥ—ＷＡＹ ＡＮＯＶＡ，多
组均数与对照组均数多重比较采用Ｄｕｎｎｅｔｔ—ｔ检验。
Ｐ≤０．０５为差异有统计学意义。
２ 结果
２．１ ＲＴ—ＰＣＲ检测ＲＮＡ干扰对细胞ＴＲＰＶ６基因表
达的影响 琼脂糖凝胶电泳显示，细胞转染ｓｉＲＮＡ
结束２４ ｈ后，ＮＣ和ｓｉＲＮＡ１、ｓｉＲＮＡ２干扰组均可见
到大小为２０５ ｂｐ的目的基因ＴＲＰＶ６条带，但ＴＲ—
ＰＶ６干扰处理后的ｓｉＲＮＡ１、ｓｉＲＮＡ２干扰组的目的
条带与ＮＣ组比较显著减弱（Ｐ均＜０．０１），ｓｉＲＮＡ１
目的条带较ｓｉＲＮＡ２更弱。
２．２ Ｗｅｓｔｅｒｎ．ｂｌｏｔ检测ＲＮＡ干扰对细胞ＴＲＰＶ６蛋
白表达的影响 细胞转染ｓｉＲＮＡ结束４８ ｈ后，ＮＣ
组、ｓｉＲＮＡ１及ｓｉＲＮＡ２干扰组均检测到ＴＲＰＶ６表
１４
山东医药２０１２年第５２卷第１期
达，与ＮＣ组相比，ｓｉＲＮＡ１、ｓｉＲＮＡ２干扰组均出现不
同程度的ＴＲＰＶ６表达量显著下降（Ｐ均＜０．０１）。
２．３细胞划痕试验结果ＴＲＰＶ６表达降低后，ｓｉＲ—
ＮＡ１和ｓｉＲＮＡ２干扰组细胞迁移能力均显著低于
ＮＣ组（Ｐ均＜０．０１）。
２．４ Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室试验结果Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室试验
开始４８ ｈ后分别观察各组细胞迁移穿孔数量，结果
表明，降低ＴＲＰＶ６表达后，ｓｉＲＮＡ１、ｓｉＲＮＡ２干扰组
的穿孔细胞数均显著低于ＮＣ组（Ｐ均＜０．０１），ｓｉＲ．
ＮＡ１干扰组低于ｓｉＲＮＡ２干扰组。
３讨论
肿瘤转移包括黏附、侵袭和迁移三个过程，影响
其中任一环节均有可能影响肿瘤的转移能力。ＴＲＰ
是一个新发现的通道，目前对ＴＲＰ通道蛋白在肿瘤
组织中的表达情况尚未进行大规模研究，仅有４个
研究报道ＴＲＰ家族中的ＴＲＰＭ１、ＴＲＰＭ７、ＴＲＰＭ８和
ＴＲＰＶ６分别调控鼠恶性黑色素瘤Ｂ１６一Ｆ１／１０细胞、
人鼻咽癌５—８Ｆ细胞、人胶质细胞瘤ＤＢＴＲＧ细胞及
人肝细胞癌ＨｅｐＧ２细胞的迁移 。
本研究首先应用ＲＴ—ＰＣＲ及Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ从基
因和蛋白水平验证了ＴＲＰＶ６在ＨＯ－８９１０ＰＭ中的表
达及运用ＲＮＡｉ的干扰效率。接下来应用细胞划痕
及Ｔｒａｎｗｅｌｌ小室试验观察了ＴＲＰＶ６干扰后卵巢癌
细胞迁移行为的改变。Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室试验结果显
示，降低ＴＲＰＶ６表达后ＨＯ一８９１０ＰＭ的穿孔细胞显
著减少，说明细胞迁移能力明显减弱。单层细胞划
痕后观察０、２０ ｈ细胞迁移情况，降低ＴＲＰＶ６表达
的细胞迁移单位面积较正常ＨＯ一８９１０ＰＭ细胞及阴
性干扰的ＨＯ一８９１０ＰＭ细胞减少，也说明细胞迁移能
力显著减弱。本研究结合了两种不同但平行的实验
结果，反复验证了下调ＴＲＰＶ６的表达水平可显著降
低ＨＯ一８９１０ＰＭ细胞的迁移能力，显示出ＴＲＰＶ６的
表达水平与卵巢癌细胞的迁移能力呈正相关。我们
证实了ＴＲＰＶ６可能是正向调控卵巢癌细胞侵袭转
移的重要分子之一，但确切的结论还需要进一步的
实验来验证。
ＴＲＰＶ６通道具有高度的Ｃａ 选择性，存在于几
乎所有与ｃａ 转运有关的组织器官。ＴＲＰＶ６在肾脏
和小肠中均有表达，其调控与肾和小肠上皮细胞对
ｃａ 重吸收作用有关，因此又称为“上皮钙通道”。
ｃａ 是细胞内特殊的第二信使，ｃａ 相关的信号通路
与细胞的移动能力相关，细胞迁移的很多阶段都与
Ｃａ 的调节有关 。很多研究表明，Ｃａ 通道以及介
导的Ｃａ 内流在很多种类的细胞迁移中扮演着非常
重要的角色，细胞内钙信号的改变涉及肿瘤细胞的侵
山东医药２０１２年第５２卷第１期
袭和迁移，比如人乳腺癌细胞ＭＤＡ—ＭＢ．２３ １及人纤维
肉瘤细胞ＨＴ１０８０ｌ８ Ｊ。肿瘤细胞中的乳腺癌ＭＤＡ—
［４］Ｃｈｅｎ ｊＰ，Ｌｕａｎ Ｙ，Ｙｏｕ ＣＸ，ｅｔ ａ１．ＴＲＰＭ７ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｔｈｅ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ
ｏｆ ｈｕｍａｎ ｎａｓｏｐｈａｒｙｎｇｅａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｃｅｌｌ ｂｙ ｍｅｄｉａｔｉｎｇ Ｃａ ｉｎｆｌｕｘ
ＭＢ．２３１细胞的转移便是由细胞中的钙库调控式通道
及其所介导的ｃａ 内流所调控 Ｊ。
综上所述，卵巢癌细胞Ｈｅ一８９１０ＰＭ中ＴＲＰＶ６
［Ｊ］．Ｃｅｌｌ Ｃａｌｃｉｕｍ，２０１０，４７（５）：４２５－４３２．
［５］Ｗｏｎｄｅｒｇｅｍ Ｒ，Ｅｃａｙ ＴＷ，Ｍａｈｉｅｕ Ｆ，ｅｔ ａ１．ＨＧＦ／ＳＦ ａｎｄ ｍｅｎｔｈｏｌ
ｉｎｃｒｅａｓｅ ｈｕｍａｎ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ｃｅｌｌ ｃａｌｃｉｕｍ ａｎｄ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｂｉｏ－
ｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ，２００８，３７２（１）：２１０—２１５．
的表达水平高低与该细胞迁移能力高低呈正相关，
ＴＲＰＶ６很有可能成为卵巢癌转移预防和治疗的新
靶点。关于ＴＲＰＶ６调控ＨＯ一８９１０ＰＭ细胞及其他卵
巢癌细胞迁移的具体分子机制仍需进一步研究。
参考文献：
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ｎｅｌｓ ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ ｃａｌｃｉｕｍ ｓｐｉｋｅｓ ａｎｄ ｗａｖｅｓ ｉｎ ＨＴ１０８０ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌｓ：
［３］Ｐｒｅｖａｒｓｋａｙａ Ｎ，Ｚｈａｎｇ Ｌ，Ｂａｒｒｉｔｔ Ｇ．ＴＲＰ ｃｈａｎｎｅｌｓ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．
Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ，２００７，１７７２（８）：９３７－９４６．
ｔｈｅｉｒ ａｐｐａｒｅｎｔ ｒｏｌｅｓ ｉｎ ｃｅｌｌ ｍｏｔｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｉｎｖａｓｉｏｎ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，
２００４，６４（７）：２４８２－２４８９． （收稿日期：２０１１－１１—１６）
・
个案报告・
罕见家族性高胆固醇血症１例报告
郭斌斌，赖晓阳
（南昌大学第二附属医院，南昌３３０００６）
患儿女，７岁。因臀部黄色丘疹５年、增多增大
１年来我院诊治。患儿２岁时发现臀部有一约１ ｃｍ
进一步随访中。
ｘ３ ｃｍ黄色丘疹，外院查血脂增高，约３个月后局
部皮疹逐渐增多增大。近１年来，全身皮疹增多增
大，速度增快。父母非近亲结婚，家族中其父兄弟姐
讨论：家族性高胆固醇血症（ＦＨ）是一种以血浆
低密度脂蛋白与胆固醇水平升高为特征的常染色体
显性遗传障碍疾病，又称家族性高１３脂蛋白血症。
好发于儿童，可导致各种心血管疾病并发症。其病
因是由于肝脏表面特异性的ＬＤＬ受体数目减少或
缺乏，导致循环中ＬＤＬ．Ｃ的清除能力下降。根据
ＬＤＬ受体的数目，分为杂合子型和纯合子型。杂合
子型ＦＨ血浆胆固醇介于３００～４００ ｍｇ／ｄＬ，发生率
为１／１ ０００ ０００；纯合子则介于６００—１ ２００ ｍｇ／ｄＬ，
发生率为１／５００～１／１ ０００，大多数患者在４０岁以前
即发病。根据本患者的临床特点，诊断为纯合子型。
根据ＷＨＯ分类，ＦＨ属高脂血症Ⅱ型，ＩＩ ａ型者只有
高ｐ脂蛋白血症，而前ｐ脂蛋白正常，多数病例ＴＣ
升高，而ＴＧ正常。本病例自幼发病，皮损及血管损
妹１ １人全部及其部分子女均有高胆固醇血症、高血
压。查体：ＢＰ ９０／６０ ｍｍＨｇ，神志清，发育正常，营养
良好，心肺腹部无异常，臀部可见１ ｃｍ×３ ａｍ大小
结节状融合性橘黄色瘤，其表面凹凸不平，基底呈暗
红色炎性改变，质较韧。双膝可见对称分布的结节
性黄色瘤，为类圆形状黄豆大小结节，大小不一。皮
肤科诊断为结节疹性黄色瘤。实验室检查：肝肾功
能、电解质等均正常，总胆固醇２１．７ ｍｍｏｌ／Ｌ，低密
度脂蛋白１８．２ ｍｍｏｌｆＬ。脂蛋白电泳、皮肤病理、心
脏彩超未查。患儿颈部彩超示：双侧颈总、颈内、颈
外动脉血流阻力指数偏高。诊断为家族性高胆固醇
血症。入院后口服他汀类降脂药，臀部、肘关节、膝
关节伸侧较大斑块给予手术切除，目前仍在
通讯作者
害逐年加重，血清中Ｔｃ与ＴＤＬ增高，ＴＧ正常，其父
母均有血脂增高，应属于Ⅱａ型。本病的预后与发
病年龄、血管损害范围和部位有关，治疗上主要采取
饮食控制及降脂治疗。如上述治疗效果均不理想
时，尚可采用ＬＤＬ分离术、肝脏移植等方法。
（收稿Ｅｔ期：２０１１—１０．１５）
１ ５