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胸腹水脱落细胞流式细胞法DNA倍体分析的临床诊断价值医学论文.

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2024年5月25日发(作者:福鸿飞)

胸腹水脱落细胞流式细胞法DNA倍体分

析的临床诊断价值 医学论文

本文由中国论文范文收集整理。

【关键词】 胸腔积液,恶性;,DNA;,倍体;,胸部肿瘤;,流式细胞术

摘要: 目的 探讨胸腹水脱落细胞流式细胞法DNA倍体 分析 对诊断良

恶性胸腹水的临床价值。 方法 应用 流式细胞仪(FCM)对84例患者

(恶性肿瘤组35例,非恶性肿瘤组49例)的胸腹水脱落细胞进行DNA倍体分

析;以检出异倍体为恶性肿瘤判断标准,并与胸腹水常规脱落细胞学涂片检查

结果比较。 结果 (1)恶性肿瘤组25例检出异倍体,阳性检出率为

71.4%;常规细胞学法20例检出癌细胞,阳性检出率为57.1%;FCM法与细胞学

检查法联合检测28例阳性,检出率为80%。(2)在恶性肿瘤组的25例异倍体

中,17例病理检查检出癌细胞,8例未检出;而在20例常规细胞学检出癌细胞

的患者中,3例DNA倍体分析无异常。(3)非恶性肿瘤组8例DNA表现为异倍

体峰,但病理检查示间皮细胞活跃增殖,或未检出癌细胞。 结论 FCM法

的灵敏度较脱落细胞法高,但2种方法的检测结果存在一定的差异;FCMDNA倍

体分析在良恶性胸腹水的鉴别诊断上尤其当临床高度可疑而病理无法定性时,

可作为诊断的重要 参考 与补充。

关键词: 胸腔积液,恶性; DNA; 倍体; 胸部肿瘤; 流式细胞术

胸腹水是胸腹腔脏器病变常见的临床表现,其产生机制十分复杂,准确快

速地判定其良恶性对疾病的诊断、 治疗 有重要意义;有的疾病有时仅以胸、

腹水为首发唯一症状,给临床鉴别诊断带来许多困难。传统的判断方法主要依

靠胸腹水的常规脱落细胞学检查和生化指标检测,这些方法易受主客观因素 影

响 ,检出率较低。流式细胞术(FCM)具有对流动状态下的细胞进行快速大

量、多参数分析的特点,在肿瘤 研究 方面的应用越来越广。笔者应用FCM对

84例患者的胸腹水脱落细胞进行DNA倍体分析,并与胸腹水常规脱落细胞学涂

片检查结果比较,探讨DNA倍体分析对良恶性胸腹水的鉴别诊断价值。

1 临床资料

1.1 一般资料 84例中,男性50例,女性34例,年龄

(53,2±15.7)岁(21~99岁),均经临床诊断和病理细胞学检查确诊,并经

X线检查、CT、MRI证实。84例患者分为2组:(1)恶性肿瘤组(n=35):肺

癌19例,胃癌5例,肝癌4例,胰腺癌2例,卵巢癌2例,胆囊癌、附睾腺

癌、胸腺癌各1例。(2)非恶性肿瘤组(n=49):结核性胸膜炎17例,肝硬

化15例,肺梗死6例,脓胸4例,慢性胃炎3例,心功能衰竭2例,外伤2

例。

1.2 方法 (1)将新鲜胸水或腹水1000 r/min离心10 min,收集脱

落细胞,用pH 7.4、浓度0.01 mol/L的PBS洗涤2次,将悬液的细胞数调整

为106 mL1,备用。取上述悬液100 μL在DNAPre样品自动制备仪(美国

BeckmanCounter公司)上完成破膜、PI染色和固定等步骤,放置30 min后,

用300目的滤网过滤除去细胞团块和凝固块,备用。(2)DNA倍体分析:FCM

(EPICS XL 型,美国BeckmanCounter公司)检测染色处理后的悬液,每例测

定10 000个细胞,数据分析采用MCYCLE细胞周期分析软件,并以健康人外周

血淋巴细胞作为正常二倍体标准对照。(3)常规脱落细胞学涂片检查:结果判

断以病理科细胞学检查报告为准。(4)DNA异倍体的判断。根据 文献 制定

FCM诊断瘤细胞的标准如下:①在正常二倍体G0/G1峰以外出现另一G0/G1峰

作为标准,并且其DNA指数(DI=样品细胞G0/G1峰道值/标准细胞G0/G1峰道

值)>1.10或<0.90,且有相应的G2M峰出现。②若直方图中仅出现单一G0/G1

峰,则要求细胞周期中G2M期的细胞数>2.5%细胞总数;G0/G1峰的CV比值超

过正常的CV比值的平均值两倍的标准差。③G0/G1峰明显不对称。④若直方图

中二倍体细胞干系的增殖细胞数>10%细胞总数,即S期>10%,则定义为异倍体

出现。

2 结果

2.1 DNA倍体分析 FCM分析健康人外周血淋巴细胞获得的正常细胞周

期,其DNA含量直方图分为G0/G1期、S期、G2M期3个细胞峰,G0/G1、G2M

细胞峰DNA的含量呈正态分布,S期细胞峰是一个加宽的正态分布(图1)。依

据DNA异倍体的判断标准认为图B~E有异倍体出现,图F带有一个并非为异倍

体的“肩”峰。

A:正常细胞周期;B:正常二倍体峰外出现第二峰,C:S期>10%,D:

G0/G1峰明显不对称,E:G2M>2.5%;F:G0/G1峰带有一个“肩”.

图1 胸腹水脱落细胞的FCMDNA分析(略)

Fig 1 FCMDNA ploid analysis for the exfoliated cell

转贴于中国论文范文

关键词:细胞,诊断,价值,临床,分析,DNA,医学论文,胸腹水脱落细胞

流式细胞法DNA倍体分析的临床诊断价值 内容摘要:本文由中国论文范文收集

整理。 【关键词】 胸腔积液,恶性;,DNA;,倍体;,胸部肿瘤;,流式细胞术

摘要: 目的 探讨胸腹水脱落细胞流式细胞法DNA倍体 分析 对诊断良恶性胸腹

水的临床价值。 方法 应用 流式细胞仪(FCM)对84例患者(恶性肿瘤组35

例,非恶性肿瘤

2024年5月25日发(作者:福鸿飞)

胸腹水脱落细胞流式细胞法DNA倍体分

析的临床诊断价值 医学论文

本文由中国论文范文收集整理。

【关键词】 胸腔积液,恶性;,DNA;,倍体;,胸部肿瘤;,流式细胞术

摘要: 目的 探讨胸腹水脱落细胞流式细胞法DNA倍体 分析 对诊断良

恶性胸腹水的临床价值。 方法 应用 流式细胞仪(FCM)对84例患者

(恶性肿瘤组35例,非恶性肿瘤组49例)的胸腹水脱落细胞进行DNA倍体分

析;以检出异倍体为恶性肿瘤判断标准,并与胸腹水常规脱落细胞学涂片检查

结果比较。 结果 (1)恶性肿瘤组25例检出异倍体,阳性检出率为

71.4%;常规细胞学法20例检出癌细胞,阳性检出率为57.1%;FCM法与细胞学

检查法联合检测28例阳性,检出率为80%。(2)在恶性肿瘤组的25例异倍体

中,17例病理检查检出癌细胞,8例未检出;而在20例常规细胞学检出癌细胞

的患者中,3例DNA倍体分析无异常。(3)非恶性肿瘤组8例DNA表现为异倍

体峰,但病理检查示间皮细胞活跃增殖,或未检出癌细胞。 结论 FCM法

的灵敏度较脱落细胞法高,但2种方法的检测结果存在一定的差异;FCMDNA倍

体分析在良恶性胸腹水的鉴别诊断上尤其当临床高度可疑而病理无法定性时,

可作为诊断的重要 参考 与补充。

关键词: 胸腔积液,恶性; DNA; 倍体; 胸部肿瘤; 流式细胞术

胸腹水是胸腹腔脏器病变常见的临床表现,其产生机制十分复杂,准确快

速地判定其良恶性对疾病的诊断、 治疗 有重要意义;有的疾病有时仅以胸、

腹水为首发唯一症状,给临床鉴别诊断带来许多困难。传统的判断方法主要依

靠胸腹水的常规脱落细胞学检查和生化指标检测,这些方法易受主客观因素 影

响 ,检出率较低。流式细胞术(FCM)具有对流动状态下的细胞进行快速大

量、多参数分析的特点,在肿瘤 研究 方面的应用越来越广。笔者应用FCM对

84例患者的胸腹水脱落细胞进行DNA倍体分析,并与胸腹水常规脱落细胞学涂

片检查结果比较,探讨DNA倍体分析对良恶性胸腹水的鉴别诊断价值。

1 临床资料

1.1 一般资料 84例中,男性50例,女性34例,年龄

(53,2±15.7)岁(21~99岁),均经临床诊断和病理细胞学检查确诊,并经

X线检查、CT、MRI证实。84例患者分为2组:(1)恶性肿瘤组(n=35):肺

癌19例,胃癌5例,肝癌4例,胰腺癌2例,卵巢癌2例,胆囊癌、附睾腺

癌、胸腺癌各1例。(2)非恶性肿瘤组(n=49):结核性胸膜炎17例,肝硬

化15例,肺梗死6例,脓胸4例,慢性胃炎3例,心功能衰竭2例,外伤2

例。

1.2 方法 (1)将新鲜胸水或腹水1000 r/min离心10 min,收集脱

落细胞,用pH 7.4、浓度0.01 mol/L的PBS洗涤2次,将悬液的细胞数调整

为106 mL1,备用。取上述悬液100 μL在DNAPre样品自动制备仪(美国

BeckmanCounter公司)上完成破膜、PI染色和固定等步骤,放置30 min后,

用300目的滤网过滤除去细胞团块和凝固块,备用。(2)DNA倍体分析:FCM

(EPICS XL 型,美国BeckmanCounter公司)检测染色处理后的悬液,每例测

定10 000个细胞,数据分析采用MCYCLE细胞周期分析软件,并以健康人外周

血淋巴细胞作为正常二倍体标准对照。(3)常规脱落细胞学涂片检查:结果判

断以病理科细胞学检查报告为准。(4)DNA异倍体的判断。根据 文献 制定

FCM诊断瘤细胞的标准如下:①在正常二倍体G0/G1峰以外出现另一G0/G1峰

作为标准,并且其DNA指数(DI=样品细胞G0/G1峰道值/标准细胞G0/G1峰道

值)>1.10或<0.90,且有相应的G2M峰出现。②若直方图中仅出现单一G0/G1

峰,则要求细胞周期中G2M期的细胞数>2.5%细胞总数;G0/G1峰的CV比值超

过正常的CV比值的平均值两倍的标准差。③G0/G1峰明显不对称。④若直方图

中二倍体细胞干系的增殖细胞数>10%细胞总数,即S期>10%,则定义为异倍体

出现。

2 结果

2.1 DNA倍体分析 FCM分析健康人外周血淋巴细胞获得的正常细胞周

期,其DNA含量直方图分为G0/G1期、S期、G2M期3个细胞峰,G0/G1、G2M

细胞峰DNA的含量呈正态分布,S期细胞峰是一个加宽的正态分布(图1)。依

据DNA异倍体的判断标准认为图B~E有异倍体出现,图F带有一个并非为异倍

体的“肩”峰。

A:正常细胞周期;B:正常二倍体峰外出现第二峰,C:S期>10%,D:

G0/G1峰明显不对称,E:G2M>2.5%;F:G0/G1峰带有一个“肩”.

图1 胸腹水脱落细胞的FCMDNA分析(略)

Fig 1 FCMDNA ploid analysis for the exfoliated cell

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流式细胞法DNA倍体分析的临床诊断价值 内容摘要:本文由中国论文范文收集

整理。 【关键词】 胸腔积液,恶性;,DNA;,倍体;,胸部肿瘤;,流式细胞术

摘要: 目的 探讨胸腹水脱落细胞流式细胞法DNA倍体 分析 对诊断良恶性胸腹

水的临床价值。 方法 应用 流式细胞仪(FCM)对84例患者(恶性肿瘤组35

例,非恶性肿瘤

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