2024年3月17日发(作者：庹以轩)

安徽医药Ａｎｈｕｉ　Ｍｅｄｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　２０１０　Ｆｅｂ；１４（２）　・１４１・　

紫杉醇诱导胃癌ＢＧＣ－８２３和ＳＧＣ一７９０１细胞凋亡作用的比较　

涂龙霞　，张林杰　

（１．淮北职业技术学院医学系，安徽淮北２３５０００；２．安徽医科大学基础医学院免疫学教研室，安徽合肥２３００２２）　

摘要：目的研究胃癌ＢＧＣ一８２３细胞和ＳＧＣ－７９０１细胞对紫杉醇诱导凋亡的敏感性。方法　用０．１～０．５　ｐ￣ｍｏｌ・Ｌ　紫杉醇作　

用于ＢＧＣ一８２３和ＳＧＣ－７９０１细胞，再用０．３　ｍ０１．Ｌ　紫杉醇对ＢＧＣ一８２３和ＳＧＣ一７９０１细胞分别作用０、６、１２、２４、３６、４８　ｈ，通过形　

态学观察及流式细胞术检测细胞凋亡率的变化。结果　（１）紫杉醇对两种胃癌细胞均有明显诱导凋亡作用，且均呈时间依赖　

性及剂量依赖性；（２）中分化的ＳＧＣ－７９０１细胞株对紫杉醇的敏感性明显高于低分化的ＢＧＣ一８２３细胞株。结论　不同分化程度　

的胃癌细胞株对紫杉醇的敏感性不同。　

关键词：紫杉醇；胃癌细胞；细胞凋亡；分化程度　

Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ—ｉｎｄｕｃｅｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　

ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｎｃｅｒ　ＢＧＣ．８２３　ａｎｄ　ＳＧＣ－７９０１　ｃｅｌｌｓ　

ＴＵ　Ｌｏｎｇ—ｘｉａ，ＺＨＡＮＧ　Ｌｉｎ－ｊｉｅ　

（Ｈｕａｉｂｅｉ　Ｖａｃａｔｉｏｎａｌ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｈｕａｉｂｅｉ　２３５０００，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｉｍ　Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ—ｉｎｄｕｃｅｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｇａｓｔｉｒｃ　ｃａｎｃｅｒ　ＢＧＣ－８２３　ａｎｄ　ＳＧＣ－７９０１　ｃｅｌｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　

Ｔｗｏ　ｇａｓｔｒｉｃ　ｃｎａｃｅｒ　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅｓ　ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　ＢＧＣ一８２３（１ｏｗ　ｄｅｇｒｅｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ）ａｎｄ　ＳＧＣ－７９０１（ｍｏｄｅｒａｔｅ　ｄｅｒｇｅｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ）ｗｅｒｅ　ｔｒｅａｔｅｄ　

ｗｉｔｈ　ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ　ｏｆ　ｖａｒｉｏｕｓ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（０．１，０．２，０．３，０．４，０．５　ｐ￣ｍｏｌ・Ｌ　）．Ｔｈｅｎ　ｔｈｅｙ　ｗｅｒｅ　ｔｒｅａｔｅｄ　０，６，１２，２４，３６，４８　ｈ　ｗｉｔｈ　ｐａｅｌｉｔａｘｅｌ　

ｗｉｔｈ　０．３　ｐ，ｍｏｌ・Ｌ～．Ｃｅｌｌ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ　ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｆｌｏｗ　ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｅｘａｍｉｎｅ　ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ—ｉｎｄｕｃｅｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｇａｓｔｒｉｃ　

ｃａｎｃｅｒ　ＢＧＣ一８２３　ａｎｄ　ＳＧＣ－７９０１　ｃｅｌｌｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ　ｗｅｒｅ　ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ　ｔｏ　ｔｗｏ　ｈｕｍａｎ　ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌｓ　ｉｎ　ｔｉｍｅ—ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ａｎｄ　ｄｏｓｅ—ｄｅ—　

ｐｅｎｄｅｎｔ　ｍａｎｎｅｒ．Ｍｏｄｅｒａｔｅ　ｄｅｇｒｅｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ　ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅ　ＳＧＣ－７９０１　ｉｓ　ｍｏｒｅ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ　ｔｏ　ｐａｅｌｉｔａｘｅｌ　ｔｈａｎ　ｌｏｗ　ｄｅｇｒｅｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ　

ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅ　ＢＧＣ一８２３．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ　ｏｎ　ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌｓ　Ｗａｓ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｂｅｔｗｅｅｎ　２　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅｓ．　

Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ；ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅｓ；ｄｅｇｒｅｅｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ；ｃｅｌｌ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　

胃癌是临床上最常见的恶性肿瘤之一，在全球范围内，胃　

研究。以便为临床筛选个体化治疗方案提供试验依据，前瞻　

癌的发病率位居所有恶性肿瘤的第二位，死亡率为癌症死亡　

性指导肿瘤患者化疗。　

的第４位…。在我国其发病率及死亡率居恶性肿瘤之首位。　

１材料与方法　

肿瘤的发生机制之一是由于正常的细胞凋亡过程被抑制，破　

１．１实验材料　人胃癌细胞系ＳＧＣ－７９０１及ＢＧＣ－８２３均购　

坏了细胞增殖与凋亡之间平衡的结果　。紫杉醇是近年来　

自中科院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究　

出现的一种新型抗癌药，它主要是通过作用于微管系统而抑　

所；紫杉醇（泰素，ＴＡＸＯＬ）为美国百时美施贵宝公司产品；　

制细胞分裂＿３　Ｊ。紫杉醇具有广泛的抗肿瘤作用，如卵巢癌、　

ＤＭＥＭ高糖培养基、胰酶（Ｔｒｙｐｓｉｎ）为ＧＩＢＣＯ公司产品；碘化　

乳腺癌、黑素瘤、肺癌等。为探讨不同分化程度胃癌细胞株对　

丙啶为Ｓｉｇｍａ公司产品。　

紫杉醇的敏感性，采用流式细胞仪对低分化的ＢＧＣ一８２３和中　

１．２实验方法　在培养瓶中常规培养胃癌细胞，将对数生　

分化的ＳＧＣ－７９０１胃癌细胞株在药物作用后的凋亡情况进行　长期的细胞接种于２４孔板上，１×１０　／孔，２４　ｈ待细胞贴壁生　

长后给予换液加药。选择一系列浓度的紫杉醇（０．１—０．５　

通讯作者：张林杰，男，教授，博士生导师，研究方向：肿瘤免疫　

ｐ￣ｍｏｌ・Ｌ　）作用于ＳＧＣ－７９０１和ＢＧＣ．８２３细胞，同时设立阴　

Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｌｊ３３＠ａｈｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ　

［６］　金昔陆，朱秀媛，王文杰，等．血浆中葛根素的高效液相色谱测　

ｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ　Ａｎａｌｙｓｉｓ，２００６，４１：５４９—５３．　

定法及其在狗体内的药代动力学［Ｊ］．药学学报，１９９７，３２（１０）：　

［１１］杜力军，於兰，常琪，等．新工艺制备的葛根黄酮的药代动力　

７８２—５．　

学研究［Ｊ］．中药药理与ｆ临床，１９９７，１３（２）：１９—２３．　

［７］张莉，黄熙，任平，等．三维ＨＰＬＣ法同步测定犬血浆中的　

［１２］张志荣，游学均，魏振平，等．愈风宁心胶囊在兔体内的药动学　

葛根素及阿魏酸［Ｊ］．沈阳药科大学学报，２００１，１８（１）：４５．　和生物利用度研究［Ｊ］．中国药学杂志，１９９７，３２（４）：２２４—６．　

［８］黄熙，任平，张莉．ＨＰＬＣ法测定犬口服养阴通脑颗粒后　［１３］吴燕红，苏子仁，赖小平，等．从小鼠体内的血药浓度时态曲线　

血浆中的葛根素［Ｊ］．中国药科大学学报，２００１，３２（２）：１２７—９．　与组织分布特征评价葛根素的给药途径［Ｊ］．中药新药与临床　

［９］　Ｊｅｅｖａｎ　Ｋ．Ｐｒａｓａｉｎ，Ｎｉｎｇ　Ｐｅｎｇ，Ｅｄｗ￣ｄ　Ａｃｏｓｔａ，ｅｔ　ａ１．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ　

药理，２００５，１６（２）：ｌ１２—５．　

ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ｐｕｅｒａｒｉｎ　ｉｎ　ｒａｔ　ｓｅｒｕｍ　ｂｙ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｔａｎｄｅｍ　ｍａｓｓ　

［１４］李颖，潘卫三，陈士林，等．葛根素及其磷脂复合物在Ｂｅａｇｌｅ　

ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ［Ｊ］．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ，２００７，２１：４１０－４．　犬体内的药动学比较［Ｊ］．中草药，２００６，３７（５）：５９６—７９６．　

［１０］Ｆｕｚｈｅｎｇ　Ｒｅｎ，Ｑｉｕｆａｎｇ　Ｊｉｎｇ，Ｙｏｎｇｊｉａ　Ｓｈｅｎ，ｅｔ　ａ１．Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｄｅｔｅｒ－　

［１５］郭东艳，杨大坚，陈士林．葛根素及其衍生物在大鼠体内的药代　

ｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｕｅｒａｒｉｎ　ｉｎ　ｄｏｇ　ｐｌａｓｍａ　ｂｙ　ＨＰＬＣ　ａｎｄ　ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｒｅｌａ－　

动力学研究［Ｊ］．陕西中医学院学报，２００８，３ｌ（１）：５２—４．　

ｔｉｖｅ　ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｓｕｓｔａｉｎｅｄ　ｒｅｌｅａｓｅ　ｔａｂｌｅｔｓ『Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｐｈａｒ．　

（收稿日期：２００９一ｌ１—２０）　

・

１４２・　安徽医药Ａｎｈｕｉ　Ｍｅｄｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　２０１０　Ｆｅｂ；１４（２）　

性对照，ＣＯ：温箱培养４８　ｈ后，相差显微镜下观察细胞生长　

现象，用胰酶消化法收集细胞，ＰＩ染色后于４℃冰箱过夜，次　

Ｅｔ上流式细胞仪检测细胞凋亡率。每组实验重复３次。绘制　

量效曲线。根据量效曲线Ｉｃ　。，用流式细胞仪检测ＩＣ　。紫杉　

醇作用ＳＧＣ－７９０１和ＢＧＣ一８２３不同时间（０，６，１２，２４，３６，４８　ｈ）　

的细胞凋亡率。每组实验重复３次。绘制时效曲线。　

１．３统计学方法　应用ＳＰＳＳ　１０．０软件进行统计分析，采用　

检验。　

２结果　

２．１　显微镜下观察紫杉醇诱导细胞凋亡　较低浓度的紫　

亡率明显增大，凋亡与药物作用时间呈正相关。同时还显示，　

紫杉醇作用相同时间，ＳＧＣ－７９０１组凋亡率均比ＢＧＣ．８２３高　

（Ｐ＜０．０５），也说明ＳＧＣ－７９０１对紫杉醇诱导的凋亡相对　

ＢＧＣ一８２３更具有敏感性。　

３讨论　

细胞凋亡是通过启动细胞自身的内部死亡机制而产生的　

一

种细胞死亡方式。诱导肿瘤细胞凋亡是许多抗肿瘤药物的　

胃癌一直缺乏有效且安全的化疗方案，传统的化疗方案疗效　

作用机制之一。胃癌是对化疗相对敏感的恶性肿瘤，对晚期　

在２０％～４０％。近年来紫杉醇作为一种新型抗癌药，在消化　

杉醇对ＳＧＣ－７９０１和ＢＧＣ一８２３即有诱导凋亡作用，镜下观察　

到细胞体积变小、染色质浓缩并聚集于核膜下呈境界分明的　

颗粒状或新月形小体，或细胞器形成凋亡小体。且随着紫杉　

醇浓度的增加，细胞开始变圆，逐渐脱离生长面，死亡细胞随　

之增多。这种现象在ＳＧＣ－７９０１细胞更为明显。　

２．２流式细胞仪分析紫杉醇诱导细胞凋亡　

２．２．１　不同浓度紫杉醇诱导ＳＧＣ－７９０１和ＢＧＣ一８２３细胞凋亡　

作用　将５种不同浓度的紫杉醇加入２种细胞株中培养４８　

ｈ，细胞凋亡率详见表１。紫杉醇药物组与对照组比较，　＝　

５Ｏ．３５，Ｐ＜０．０５；同浓度紫杉醇作用ＳＧＣ－７９０１与ＢＧＣ－８２３，　

２

＝

１４．３２，Ｐ＜０．０２５。　

表１不同浓度紫杉醇诱导ＳＧＣ－７９０１和　

ＢＧＣ－８２３细胞凋亡率（％）　

由表１可见，紫杉醇药物组的凋亡率明显高于对照组（Ｐ　

＜０．０５），且随着紫杉醇浓度的升高，两种胃癌细胞株的凋亡　

率明显增大，凋亡与药物浓度呈正相关。同时还显示同浓度　

紫杉醇作用，ＳＧＣ－７９０１组凋亡率均比ＢＧＣ一８２３高（Ｐ＜０．　

０５），说明ＳＧＣ－７９０１对紫杉醇诱导的凋亡相对ＢＧＣ一８２３更具　

有敏感性。　

２．２．２　０．３　Ｉｘｍｏｌ・ＬＩ１紫杉醇作用ＳＧＣ－７９０１和ＢＧＣ一８２３不　

同时间的细胞凋亡作用　选用０．３　ｐ．ｍｏｌ・ＬＩ１紫杉醇作用　

ＳＧＣ－７９０１和ＢＧＣ．８２３细胞０，６，１２，２４，３６，４８　ｈ，细胞凋亡率　

详见表２。紫杉醇药物组与对照组比较，Ｘ２＝１５．１７，Ｐ＜０．０５；　

紫杉醇作用ＳＧＣ－７９０１与ＢＧＣ一８２３相同时间比较，Ｘ２＝７６．２７，　

Ｐ＜０．０５　

表２　０．３　ｉｔｍｏｌ・Ｌ．１紫杉醇诱导ＳＧＣ－７９０１　

和ＢＧＣ－８２３细胞不同时间凋亡率／％　

由表２可见，紫杉醇药物组的凋亡率高于对照组（Ｐ＜　

０．０５），且随着紫杉醇作用时间的延长，两种胃癌细胞株的凋　

道肿瘤上受到广泛重视　。　

但是，由于患者的临床病理分期及病理组织学类型不同，　

中分化的ＳＧＣ－７９０１和低分化的ＢＧＣ一８２３细胞株对紫杉醇诱　

导的凋亡敏感性不同。本实验研究发现，流式细胞仪检测０、　

０．１—０．５　ｐ．ｍｏｌ・Ｌ　紫杉醇处理两种细胞４８　ｈ，紫杉醇药物　

组的细胞凋亡率均明显高于对照组，且凋亡与药物浓度呈正　

相关，从表１还可以看出，ＳＧＣ一７９０１细胞的ＩＣ　。为０．３　ｐ，ｍｏｌ・　

Ｌ～，而此浓度ＢＧＣ一８２３细胞凋亡率仅为３１．４％。选用０．３　

ｍｏ１．Ｌ　紫杉醇诱导两种细胞不同时间，从表２看出，凋亡　

具有时间依赖性，且ＳＧＣ－７９０１细胞达到Ｉｃ　的凋亡时间为４８　

ｈ左右，而４８　ｈ时ＢＧＣ一８２３细胞凋亡率只有３４．２％。ＩＣ　是　

衡量化疗药物敏感性的重要指标，Ｉｃ　。值越小表示肿瘤细胞　

对化疗药物的敏感性越大；反之则表示敏感性越小。说明中　

分化的ＳＧＣ－７９０１细胞对紫杉醇诱导的凋亡相对ＢＧＣ一８２３更　

具有敏感性。　

本试验结果表明，不同分化程度胃腺癌细胞对紫杉醇敏　

感程度不同，这与一些学者的研究结果一致　；肿瘤细胞分　

化程度越低，对同种化疗药物的敏感性越低，也符合传统观　

念。紫杉醇是目前治疗胃癌的较常用化疗药物，笔者建议对　

肿瘤分化程度中等的患者使用以紫杉醇为主的化疗方案，而　

对于低等分化的胃癌患者可根据病情、副作用和经济情况选　

择两种药物联合治疗。　

参考文献：　

［１］王彩莲，陈宝安．多西紫杉醇治疗晚期胃癌的进展［Ｊ］．现代医　

学，２００５，３３（１）：５３—５．　

［２］Ｐａｒｋ　ＹＮ，Ｃｈａｅ　ＫＪ，Ｋｉｍ　ＹＢ，ｅｔ　ａ１．Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ａｎｄ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｉｎ　

ｈｅｐａｔｏｅａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｔｏ　ｃｉｒｒｈｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ，２００１，９２　

（１１）ｚ２７３３—８．　

［３］Ｙａｍａｄａ　Ｙ，Ｓｈｉｒａｏ　Ｋ，Ｏｈｔｓｕ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｐｈａｓｅ　Ｈ　ｔｉｒａｌ　ｏｆ　ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ　ｂｙ　

ｔｈｒｅｅ　ｈｏｕｒ　ｉｎｆｕｓｉｏｎ　ｆｏｒ　ａｄｖａｎｃｅｄ　ｇａｓｔｉｒｃ　ｃａｎｃｅｒ　ｗｉｔｈ　ｓｈｏｒｔ　ｐｒｅｍｉｄｉｃａ－　

ｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｐｒｏｐｈｙｌａｘｓａｇａｕｎｓｔ　ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ　ｒｅａｃ—　

ｔｉｏｎｓ［Ｊ］．Ａｎｎ　Ｏｎｃｏｌ，２００１，１２（６）：１１３３—７．　

［４］　Ｊｏｒｄａｎ　ＭＡ，Ｗｉｌｓｏｎ　Ｌ．Ｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅｓ　ａｎｄ　ａｃｔｉｏｎ　ｆｉｌａｍｅｎｓ　ｄｙｎａｍｉｃ　ｔａｒ－　

ｇｅｔｓ　ｏｆｒ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ［Ｊ］．Ｃｕｒｒ　Ｏｐｉｎ　Ｃｅｌｌ　Ｂｏｉｌ，１９９８，１０　

（４）：１２３—３０．　

［５］　王崇树，魏寿江，赵国刚，等．消化系统肿瘤组织细胞来源、临床　

分期及病理类型与化疗药物敏感性的关系研究［Ｊ］．国外医学　

一

临床生物化学与检验学分册，２００５，２６（４）：２０９—１５．　

（收稿日期：２００９—０５—０７）　

2024年3月17日发(作者：庹以轩)

安徽医药Ａｎｈｕｉ　Ｍｅｄｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　２０１０　Ｆｅｂ；１４（２）　・１４１・　

紫杉醇诱导胃癌ＢＧＣ－８２３和ＳＧＣ一７９０１细胞凋亡作用的比较　

涂龙霞　，张林杰　

（１．淮北职业技术学院医学系，安徽淮北２３５０００；２．安徽医科大学基础医学院免疫学教研室，安徽合肥２３００２２）　

摘要：目的研究胃癌ＢＧＣ一８２３细胞和ＳＧＣ－７９０１细胞对紫杉醇诱导凋亡的敏感性。方法　用０．１～０．５　ｐ￣ｍｏｌ・Ｌ　紫杉醇作　

用于ＢＧＣ一８２３和ＳＧＣ－７９０１细胞，再用０．３　ｍ０１．Ｌ　紫杉醇对ＢＧＣ一８２３和ＳＧＣ一７９０１细胞分别作用０、６、１２、２４、３６、４８　ｈ，通过形　

态学观察及流式细胞术检测细胞凋亡率的变化。结果　（１）紫杉醇对两种胃癌细胞均有明显诱导凋亡作用，且均呈时间依赖　

性及剂量依赖性；（２）中分化的ＳＧＣ－７９０１细胞株对紫杉醇的敏感性明显高于低分化的ＢＧＣ一８２３细胞株。结论　不同分化程度　

的胃癌细胞株对紫杉醇的敏感性不同。　

关键词：紫杉醇；胃癌细胞；细胞凋亡；分化程度　

Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ—ｉｎｄｕｃｅｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　

ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｎｃｅｒ　ＢＧＣ．８２３　ａｎｄ　ＳＧＣ－７９０１　ｃｅｌｌｓ　

ＴＵ　Ｌｏｎｇ—ｘｉａ，ＺＨＡＮＧ　Ｌｉｎ－ｊｉｅ　

（Ｈｕａｉｂｅｉ　Ｖａｃａｔｉｏｎａｌ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｈｕａｉｂｅｉ　２３５０００，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｉｍ　Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ—ｉｎｄｕｃｅｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｇａｓｔｉｒｃ　ｃａｎｃｅｒ　ＢＧＣ－８２３　ａｎｄ　ＳＧＣ－７９０１　ｃｅｌｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　

Ｔｗｏ　ｇａｓｔｒｉｃ　ｃｎａｃｅｒ　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅｓ　ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　ＢＧＣ一８２３（１ｏｗ　ｄｅｇｒｅｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ）ａｎｄ　ＳＧＣ－７９０１（ｍｏｄｅｒａｔｅ　ｄｅｒｇｅｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ）ｗｅｒｅ　ｔｒｅａｔｅｄ　

ｗｉｔｈ　ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ　ｏｆ　ｖａｒｉｏｕｓ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（０．１，０．２，０．３，０．４，０．５　ｐ￣ｍｏｌ・Ｌ　）．Ｔｈｅｎ　ｔｈｅｙ　ｗｅｒｅ　ｔｒｅａｔｅｄ　０，６，１２，２４，３６，４８　ｈ　ｗｉｔｈ　ｐａｅｌｉｔａｘｅｌ　

ｗｉｔｈ　０．３　ｐ，ｍｏｌ・Ｌ～．Ｃｅｌｌ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ　ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｆｌｏｗ　ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｅｘａｍｉｎｅ　ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ—ｉｎｄｕｃｅｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｇａｓｔｒｉｃ　

ｃａｎｃｅｒ　ＢＧＣ一８２３　ａｎｄ　ＳＧＣ－７９０１　ｃｅｌｌｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ　ｗｅｒｅ　ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ　ｔｏ　ｔｗｏ　ｈｕｍａｎ　ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌｓ　ｉｎ　ｔｉｍｅ—ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ａｎｄ　ｄｏｓｅ—ｄｅ—　

ｐｅｎｄｅｎｔ　ｍａｎｎｅｒ．Ｍｏｄｅｒａｔｅ　ｄｅｇｒｅｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ　ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅ　ＳＧＣ－７９０１　ｉｓ　ｍｏｒｅ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ　ｔｏ　ｐａｅｌｉｔａｘｅｌ　ｔｈａｎ　ｌｏｗ　ｄｅｇｒｅｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ　

ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅ　ＢＧＣ一８２３．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ　ｏｎ　ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌｓ　Ｗａｓ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｂｅｔｗｅｅｎ　２　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅｓ．　

Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ；ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅｓ；ｄｅｇｒｅｅｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ；ｃｅｌｌ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　

胃癌是临床上最常见的恶性肿瘤之一，在全球范围内，胃　

研究。以便为临床筛选个体化治疗方案提供试验依据，前瞻　

癌的发病率位居所有恶性肿瘤的第二位，死亡率为癌症死亡　

性指导肿瘤患者化疗。　

的第４位…。在我国其发病率及死亡率居恶性肿瘤之首位。　

１材料与方法　

肿瘤的发生机制之一是由于正常的细胞凋亡过程被抑制，破　

１．１实验材料　人胃癌细胞系ＳＧＣ－７９０１及ＢＧＣ－８２３均购　

坏了细胞增殖与凋亡之间平衡的结果　。紫杉醇是近年来　

自中科院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究　

出现的一种新型抗癌药，它主要是通过作用于微管系统而抑　

所；紫杉醇（泰素，ＴＡＸＯＬ）为美国百时美施贵宝公司产品；　

制细胞分裂＿３　Ｊ。紫杉醇具有广泛的抗肿瘤作用，如卵巢癌、　

ＤＭＥＭ高糖培养基、胰酶（Ｔｒｙｐｓｉｎ）为ＧＩＢＣＯ公司产品；碘化　

乳腺癌、黑素瘤、肺癌等。为探讨不同分化程度胃癌细胞株对　

丙啶为Ｓｉｇｍａ公司产品。　

紫杉醇的敏感性，采用流式细胞仪对低分化的ＢＧＣ一８２３和中　

１．２实验方法　在培养瓶中常规培养胃癌细胞，将对数生　

分化的ＳＧＣ－７９０１胃癌细胞株在药物作用后的凋亡情况进行　长期的细胞接种于２４孔板上，１×１０　／孔，２４　ｈ待细胞贴壁生　

长后给予换液加药。选择一系列浓度的紫杉醇（０．１—０．５　

通讯作者：张林杰，男，教授，博士生导师，研究方向：肿瘤免疫　

ｐ￣ｍｏｌ・Ｌ　）作用于ＳＧＣ－７９０１和ＢＧＣ．８２３细胞，同时设立阴　

Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｌｊ３３＠ａｈｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ　

［６］　金昔陆，朱秀媛，王文杰，等．血浆中葛根素的高效液相色谱测　

ｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ　Ａｎａｌｙｓｉｓ，２００６，４１：５４９—５３．　

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ｔｉｖｅ　ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｓｕｓｔａｉｎｅｄ　ｒｅｌｅａｓｅ　ｔａｂｌｅｔｓ『Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｐｈａｒ．　

（收稿日期：２００９一ｌ１—２０）　

・

１４２・　安徽医药Ａｎｈｕｉ　Ｍｅｄｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　２０１０　Ｆｅｂ；１４（２）　

性对照，ＣＯ：温箱培养４８　ｈ后，相差显微镜下观察细胞生长　

现象，用胰酶消化法收集细胞，ＰＩ染色后于４℃冰箱过夜，次　

Ｅｔ上流式细胞仪检测细胞凋亡率。每组实验重复３次。绘制　

量效曲线。根据量效曲线Ｉｃ　。，用流式细胞仪检测ＩＣ　。紫杉　

醇作用ＳＧＣ－７９０１和ＢＧＣ一８２３不同时间（０，６，１２，２４，３６，４８　ｈ）　

的细胞凋亡率。每组实验重复３次。绘制时效曲线。　

１．３统计学方法　应用ＳＰＳＳ　１０．０软件进行统计分析，采用　

检验。　

２结果　

２．１　显微镜下观察紫杉醇诱导细胞凋亡　较低浓度的紫　

亡率明显增大，凋亡与药物作用时间呈正相关。同时还显示，　

紫杉醇作用相同时间，ＳＧＣ－７９０１组凋亡率均比ＢＧＣ．８２３高　

（Ｐ＜０．０５），也说明ＳＧＣ－７９０１对紫杉醇诱导的凋亡相对　

ＢＧＣ一８２３更具有敏感性。　

３讨论　

细胞凋亡是通过启动细胞自身的内部死亡机制而产生的　

一

种细胞死亡方式。诱导肿瘤细胞凋亡是许多抗肿瘤药物的　

胃癌一直缺乏有效且安全的化疗方案，传统的化疗方案疗效　

作用机制之一。胃癌是对化疗相对敏感的恶性肿瘤，对晚期　

在２０％～４０％。近年来紫杉醇作为一种新型抗癌药，在消化　

杉醇对ＳＧＣ－７９０１和ＢＧＣ一８２３即有诱导凋亡作用，镜下观察　

到细胞体积变小、染色质浓缩并聚集于核膜下呈境界分明的　

颗粒状或新月形小体，或细胞器形成凋亡小体。且随着紫杉　

醇浓度的增加，细胞开始变圆，逐渐脱离生长面，死亡细胞随　

之增多。这种现象在ＳＧＣ－７９０１细胞更为明显。　

２．２流式细胞仪分析紫杉醇诱导细胞凋亡　

２．２．１　不同浓度紫杉醇诱导ＳＧＣ－７９０１和ＢＧＣ一８２３细胞凋亡　

作用　将５种不同浓度的紫杉醇加入２种细胞株中培养４８　

ｈ，细胞凋亡率详见表１。紫杉醇药物组与对照组比较，　＝　

５Ｏ．３５，Ｐ＜０．０５；同浓度紫杉醇作用ＳＧＣ－７９０１与ＢＧＣ－８２３，　

２

＝

１４．３２，Ｐ＜０．０２５。　

表１不同浓度紫杉醇诱导ＳＧＣ－７９０１和　

ＢＧＣ－８２３细胞凋亡率（％）　

由表１可见，紫杉醇药物组的凋亡率明显高于对照组（Ｐ　

＜０．０５），且随着紫杉醇浓度的升高，两种胃癌细胞株的凋亡　

率明显增大，凋亡与药物浓度呈正相关。同时还显示同浓度　

紫杉醇作用，ＳＧＣ－７９０１组凋亡率均比ＢＧＣ一８２３高（Ｐ＜０．　

０５），说明ＳＧＣ－７９０１对紫杉醇诱导的凋亡相对ＢＧＣ一８２３更具　

有敏感性。　

２．２．２　０．３　Ｉｘｍｏｌ・ＬＩ１紫杉醇作用ＳＧＣ－７９０１和ＢＧＣ一８２３不　

同时间的细胞凋亡作用　选用０．３　ｐ．ｍｏｌ・ＬＩ１紫杉醇作用　

ＳＧＣ－７９０１和ＢＧＣ．８２３细胞０，６，１２，２４，３６，４８　ｈ，细胞凋亡率　

详见表２。紫杉醇药物组与对照组比较，Ｘ２＝１５．１７，Ｐ＜０．０５；　

紫杉醇作用ＳＧＣ－７９０１与ＢＧＣ一８２３相同时间比较，Ｘ２＝７６．２７，　

Ｐ＜０．０５　

表２　０．３　ｉｔｍｏｌ・Ｌ．１紫杉醇诱导ＳＧＣ－７９０１　

和ＢＧＣ－８２３细胞不同时间凋亡率／％　

由表２可见，紫杉醇药物组的凋亡率高于对照组（Ｐ＜　

０．０５），且随着紫杉醇作用时间的延长，两种胃癌细胞株的凋　

道肿瘤上受到广泛重视　。　

但是，由于患者的临床病理分期及病理组织学类型不同，　

中分化的ＳＧＣ－７９０１和低分化的ＢＧＣ一８２３细胞株对紫杉醇诱　

导的凋亡敏感性不同。本实验研究发现，流式细胞仪检测０、　

０．１—０．５　ｐ．ｍｏｌ・Ｌ　紫杉醇处理两种细胞４８　ｈ，紫杉醇药物　

组的细胞凋亡率均明显高于对照组，且凋亡与药物浓度呈正　

相关，从表１还可以看出，ＳＧＣ一７９０１细胞的ＩＣ　。为０．３　ｐ，ｍｏｌ・　

Ｌ～，而此浓度ＢＧＣ一８２３细胞凋亡率仅为３１．４％。选用０．３　

ｍｏ１．Ｌ　紫杉醇诱导两种细胞不同时间，从表２看出，凋亡　

具有时间依赖性，且ＳＧＣ－７９０１细胞达到Ｉｃ　的凋亡时间为４８　

ｈ左右，而４８　ｈ时ＢＧＣ一８２３细胞凋亡率只有３４．２％。ＩＣ　是　

衡量化疗药物敏感性的重要指标，Ｉｃ　。值越小表示肿瘤细胞　

对化疗药物的敏感性越大；反之则表示敏感性越小。说明中　

分化的ＳＧＣ－７９０１细胞对紫杉醇诱导的凋亡相对ＢＧＣ一８２３更　

具有敏感性。　

本试验结果表明，不同分化程度胃腺癌细胞对紫杉醇敏　

感程度不同，这与一些学者的研究结果一致　；肿瘤细胞分　

化程度越低，对同种化疗药物的敏感性越低，也符合传统观　

念。紫杉醇是目前治疗胃癌的较常用化疗药物，笔者建议对　

肿瘤分化程度中等的患者使用以紫杉醇为主的化疗方案，而　

对于低等分化的胃癌患者可根据病情、副作用和经济情况选　

择两种药物联合治疗。　

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一

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（收稿日期：２００９—０５—０７）