2024年4月5日发(作者：贯深)
鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验
鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验（Ames试验，Salmonella Typhimurium / Reverse Mutation
Assay）于 1975年建立并不断发展完善，目前已被世界各国广为采用，已经成为毒理学实
验室必需开展的重要实验项目。Ames实验用于检测待分析物质的致突变作用，该验灵敏、
高效、检测范围广。
Ames 试验原理
Ames 试验利用鼠伤寒沙门氏组氨酸营养缺陷型菌株，该缺陷型菌株不能合成组氨酸，故在
缺乏组氨酸的培养基上，仅少数自发回复突变的细菌生长；假如有致突变物存在，则营养缺
陷型的细菌诱导回复突变成原养型，因而能生长形成菌落，据此判断受试物是否为致突变物。
某些致突变物需要代谢活化后才能引起回复突变， 故需加入经诱导剂诱导的大鼠肝制备的
S9混合液。北京汇智泰康医药技术有限公司针对Ames试验开发Ames试剂盒， 本试剂盒省
去了培养基成分准备、诱导 S9 制备、菌株 鉴定、菌株培养等时间，可以直接使用，大大
缩短了实验周期；试剂盒各成分均经过严格的质量检测，无杂菌污染，菌株特性与活菌数目
以及诱导 S9 活性均符合 Ames 试验要求，实验结果准确、可靠、重现性高。Ames试剂盒
应用广泛，可进行食品与饮用水、化学品、洗涤剂、消毒剂、食品添加剂、药物残留、化妆
品、容器与包装材料等多个方面的遗传毒理学检测。
Ames试验导则
1 范围
本规范确定了鼠伤寒沙门氏菌／回复突变试验的基本原则、要求和方法。
本规范适用于化妆品原料及其产品的基因突变检测。
2 规范性引用文件
OECD Guidelines for Testing of Chemicals (No.471,Adopted:21,July 1997)。
3 定义
3.1
回复突变（Reverse mutation）
细菌在化学致突变物作用下由营养缺陷型回变到原养型(prototroph)。
3.2
基因突变
（Gene mutation）
在化学致突变物作用下细胞DNA中碱基对的排列顺序发生变化。
3.3
碱基置换突变
（Base substitution mutation）
引起DNA链上一个或几个碱基对的置换。
碱基置换有转换(transition)和颠换(transversion)两种形式。
转换是DNA链上的一个嘧啶被另一嘧啶所替代，或一个嘌呤被另一嘌呤所代替。
颠换是DNA链上的一个嘧啶被另一嘌呤所替代，或一个嘌呤被另一嘧啶所代替。
3.4
移码突变（ Frameshift mutation）
引起DNA链上增加或缺失一个或多个碱基对。
3.5
鼠伤寒沙门氏菌/回复突变试验（ Salmonella typhimurium/reverse mutation assay）
利用一组鼠伤寒沙门氏组氨酸缺陷型试验菌株测定引起沙门氏菌碱基置换或移码突变
的化学物质所诱发的组氨酸缺陷型(his-)→原养型(his+)回复突变的试验方法。
3.6 S
9
经多氯联苯(PCB混合物)或苯巴比
钠和
β-萘黄酮结合诱导的大鼠制备肝匀浆，在9000g
下离心10min后的肝匀浆上清液。
4 原理
鼠伤寒沙门氏组氨酸营养缺陷型菌株不能合成组氨酸，故在缺乏组氨酸的培养基上，仅少数
自发回复突变的细菌生长。假如有致突变物存在，则营养缺陷型的细菌回复突变成原养型，
因而能生长形成菌落，据此判断受试物是否为致突变物。可使用北京汇智泰康医药技术有限
公司研发生产的Ames试剂盒，试剂盒省去了培养基成分准备、诱导 S9 制备、菌株 鉴定、
菌株培养等时间，可以直接使用，大大缩短了实验周期。
某些致突变物需要代谢活化后才能引起回复突变，
故需加入经诱导剂诱导的大鼠肝制备的
S
9
混合液。
5
仪器和设备
培养箱、恒温水浴、振荡水浴摇床、压力蒸汽消毒器、干热烤箱、低温冰箱(-80℃) 或液氮
生物容器、普通冰箱、天平(精密度0.1g和0.0001g)、混匀振荡器、匀浆器、菌落计数器、
低温高速离心机，玻璃器皿等。
6 培养基和试剂
6.1
0.5mmol/L组氨酸-0.5mmol/L生物素溶液
成分：
L-组氨酸(MW
155)
78mg
D-生物素(MW
244) 122mg
2024年4月5日发(作者：贯深)
鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验
鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验（Ames试验，Salmonella Typhimurium / Reverse Mutation
Assay）于 1975年建立并不断发展完善，目前已被世界各国广为采用，已经成为毒理学实
验室必需开展的重要实验项目。Ames实验用于检测待分析物质的致突变作用，该验灵敏、
高效、检测范围广。
Ames 试验原理
Ames 试验利用鼠伤寒沙门氏组氨酸营养缺陷型菌株，该缺陷型菌株不能合成组氨酸，故在
缺乏组氨酸的培养基上，仅少数自发回复突变的细菌生长；假如有致突变物存在，则营养缺
陷型的细菌诱导回复突变成原养型，因而能生长形成菌落，据此判断受试物是否为致突变物。
某些致突变物需要代谢活化后才能引起回复突变， 故需加入经诱导剂诱导的大鼠肝制备的
S9混合液。北京汇智泰康医药技术有限公司针对Ames试验开发Ames试剂盒， 本试剂盒省
去了培养基成分准备、诱导 S9 制备、菌株 鉴定、菌株培养等时间，可以直接使用，大大
缩短了实验周期；试剂盒各成分均经过严格的质量检测，无杂菌污染，菌株特性与活菌数目
以及诱导 S9 活性均符合 Ames 试验要求，实验结果准确、可靠、重现性高。Ames试剂盒
应用广泛，可进行食品与饮用水、化学品、洗涤剂、消毒剂、食品添加剂、药物残留、化妆
品、容器与包装材料等多个方面的遗传毒理学检测。
Ames试验导则
1 范围
本规范确定了鼠伤寒沙门氏菌／回复突变试验的基本原则、要求和方法。
本规范适用于化妆品原料及其产品的基因突变检测。
2 规范性引用文件
OECD Guidelines for Testing of Chemicals (No.471,Adopted:21,July 1997)。
3 定义
3.1
回复突变（Reverse mutation）
细菌在化学致突变物作用下由营养缺陷型回变到原养型(prototroph)。
3.2
基因突变
（Gene mutation）
在化学致突变物作用下细胞DNA中碱基对的排列顺序发生变化。
3.3
碱基置换突变
（Base substitution mutation）
引起DNA链上一个或几个碱基对的置换。
碱基置换有转换(transition)和颠换(transversion)两种形式。
转换是DNA链上的一个嘧啶被另一嘧啶所替代，或一个嘌呤被另一嘌呤所代替。
颠换是DNA链上的一个嘧啶被另一嘌呤所替代，或一个嘌呤被另一嘧啶所代替。
3.4
移码突变（ Frameshift mutation）
引起DNA链上增加或缺失一个或多个碱基对。
3.5
鼠伤寒沙门氏菌/回复突变试验（ Salmonella typhimurium/reverse mutation assay）
利用一组鼠伤寒沙门氏组氨酸缺陷型试验菌株测定引起沙门氏菌碱基置换或移码突变
的化学物质所诱发的组氨酸缺陷型(his-)→原养型(his+)回复突变的试验方法。
3.6 S
9
经多氯联苯(PCB混合物)或苯巴比
钠和
β-萘黄酮结合诱导的大鼠制备肝匀浆，在9000g
下离心10min后的肝匀浆上清液。
4 原理
鼠伤寒沙门氏组氨酸营养缺陷型菌株不能合成组氨酸，故在缺乏组氨酸的培养基上，仅少数
自发回复突变的细菌生长。假如有致突变物存在，则营养缺陷型的细菌回复突变成原养型，
因而能生长形成菌落，据此判断受试物是否为致突变物。可使用北京汇智泰康医药技术有限
公司研发生产的Ames试剂盒，试剂盒省去了培养基成分准备、诱导 S9 制备、菌株 鉴定、
菌株培养等时间，可以直接使用，大大缩短了实验周期。
某些致突变物需要代谢活化后才能引起回复突变，
故需加入经诱导剂诱导的大鼠肝制备的
S
9
混合液。
5
仪器和设备
培养箱、恒温水浴、振荡水浴摇床、压力蒸汽消毒器、干热烤箱、低温冰箱(-80℃) 或液氮
生物容器、普通冰箱、天平(精密度0.1g和0.0001g)、混匀振荡器、匀浆器、菌落计数器、
低温高速离心机，玻璃器皿等。
6 培养基和试剂
6.1
0.5mmol/L组氨酸-0.5mmol/L生物素溶液
成分：
L-组氨酸(MW
155)
78mg
D-生物素(MW
244) 122mg