2024年4月6日发(作者：校俊民)
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第２９卷第６期
右江民族医学院学报
Ｖｏ１．２９ Ｎｏ．６
２００７年１２月
Ｊｏｕｍａｌ ｏｆ Ｙｏｕｊｉａｎｇ Ｍｅｄｉａｃｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｆｏｒ Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ
Ｏｃｔ．２００７
乳腺癌组织中Ｐ３３ ＮＧ 蛋白的表达及临床意义①
韦建宝 ，卢运龙 ，陈山荣 ，黄永秩
（１．右江民族医学院附属医院普外科，广西百色５３３０００；
２．右江民族医学院病理学教研室，广西百色５３３０００）
摘要：目的探讨抑癌基因Ｐ３３ ＮＧ 蛋白表达与乳腺癌发生、发展的关系。方法用Ｓ—Ｐ免疫组织化学法检测９０例
乳腺癌标本中Ｐ３３ｒｍ 蛋白的表达。结果Ｐ３３ｒｍ 蛋白在乳腺癌组织中表达的阳性率为３８．８９％（３５／９０），在癌旁组织为
７５．５６％（６８／９０），两者比较差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１）。Ｐ３３ｒｍ 蛋白的低表达与肿瘤大小、腋窝淋巴结转移数目有
明显关系（Ｐ＜０．０５或０．０１），与年龄、病理类型和病理分级无明显关系。结论Ｐ３３ ＮＧ０基因是一个抑癌基因，它的低
表达与乳腺癌的发生、发展有密切关系。 。
关键词：乳腺肿瘤；蛋白质类；Ｐ３３ ＮＧ ；基因表达；免疫组织化学
中图分类号：Ｒ７３７．９ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１—５８１７（２００７）０６—０８７５—０２
Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｐ３３ ＮＧ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ａｎｄ ｉｔｓ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｃｅ
ＷＥＩ Ｊｉａｎ—ｂａｏ ，ＬＵ ｇＨｎ－－ｌｏｎｇ２，ＣＨＥＮ Ｓｈａｎ—ｒｏｎｇ ，ＨＵＡＮＧ Ｙｏｎｇ—ｚｈｉ２
（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｓｕｒｇｅｒｙ，蛳ｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｙｏ ｉａｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｆｏ
Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ，Ｂａｉｓｅ，Ｇｕａｎｇｘｉ ５３３０００，Ｃｈｉｎａ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＰａｔｈｏｌｏｇｙ，Ｙｏｕｊｉａｎｇ
Ｍｅｄｉｃａｌ ＣｏｌｌｅｇｅｆｏｒＮａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ，Ｂａｉｓｅ，Ｇｕａｎｇｘｉ ５３３０００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ Ｐ３３ＩＮＧ１ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ ａｎｄ
ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｆ ｂｒｅａｓｔ ｃａｒｃｉｎｏｍａ． Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｐ３３ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ９０ ｓａｍｐｌｅｓ ｏｆ ｂｒｅａｓｔ ｃａｒｃｉ—
ｎｏｍａ Ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄ ｂｙ Ｓ—Ｐ ｉｍｍｕｎｏ—ｈｉｓｔｃｏｈｅｍｉｃａｌ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ． Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｏｆ Ｐ３３ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘ—
ｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ９０ ｓａｍｐｌｓｅ ｏｆ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒｏｕｓ ｔｉｓｓｕｅｓ Ｗａｓ ３８．８９％（３５／９０），ａｎｄ ７５．５６％（６８／９０）ｉｎ ｔｈｅ ａｄｊａｃｅｎｔ ｂｒｅａｓｔ
ｔｉｓｕｅｓ．Ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅｍ（Ｐ＜０．０１）．Ｔｈｅ ｌＯＷ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｐ３３ ｐｒｏ—
ｔｅｉｎ ｉＳ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｕｍｏｒ ｓｉｚｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｍｅｔｓａｔａｔｉｃ ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅｓ（Ｐ＜０．０５ ｏｒ ０．Ｏ１）。ｂｕｔ ｈａｄ
ｎｏ ｒｅｌａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ａｇｅ，ｐａｔｈｏｌｏｇｉａｃｌ ｔｙｐｅ ａｎｄ ｐａｔｈｏｌｏｇｉａｃｌ ｇｒａｄｅ．
Ｃｏｎｃｌ
ｕｓｉｏｎ Ｐ３３ ＮＧ ｇｅｎｅ ｉｓ ａｎ ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ｇｅｎｅ
，
ｉｔｓ
——
ｌｏｗ ｅｘｐｒｓｅｓｉｏｎ ｉｓ ｓｉｇｎｉｆｉａｃｎｔｌｙ ｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ ａｎｄ ｐｒｏｇｒｓｅｓ ｏｆ ｂｒｅａｓｔ ａｃｒｃｉｎｏｍａ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｂｒｅａｓｔ ｎｅｏｐｌｓａｍｓ；ｐｒｏｔｅｉｎｓ；Ｐ３３ ；ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ；ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｃｏｈｅｍｉｓｔｒｙ
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，它的发生、发展与
剂公司；结果判断方法：免疫组化染色片，随机选择每张片内的
癌基因的激活和抑癌基因的失活有密切的关系。ＩＮＧ１（ｉｎ．
５个高倍镜视野（×４００倍），每个视野计数１００个细胞。总计
ｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ ｇｒｏｗｔｈ一１）是一个新近发现的抑癌基因。它的过表达
５００个，细胞核和（或）胞浆内有棕黄色颗粒者为Ｐ３３ ＮＧ０蛋白阳
可抑制细胞生长和繁殖。促进细胞凋亡；它的低表达与肿瘤的
性细胞，无棕黄色染色颗粒者为阴性细胞，阳性细胞数≥１０％
发生、发展有关。笔者通过检测Ｐ３３ ０蛋白在９０例乳腺癌组 定为阳性片，＜１０％为阴性片。
织中的表达，探讨其与乳腺癌各临床病理因素的关系及Ｉｊ缶床意
１．３．３统计学处理计数资料采用ｘ 检验。
义。
２结果
ｌ资料与方法
２．１ Ｐ３３ ＮＧ０蛋白在乳腺癌组织中的表达情况Ｐ３３ ＮＧ’蛋白的
１．１标本来源收集我院２００４年１月～２００６年１２月手术治
阳性着色为黄色或棕黄色，大多数位于细胞核，少数胞浆也着
疗、临床资料完整的９０例乳腺癌组织石蜡标本。
色；Ｐ３３ 蛋白在乳腺癌组织中表达的阳性率为３８．８９％（３５／
１．２一般资料本组９０例乳腺癌患者均为女性，年龄２３－－６７
９０），在癌旁组织为７５．５６％（６８／９０），两者比较差异有高度显著
岁，平均４５岁；所有患者均行改良根治术，术前均未行放化疗。
性（）（２：２４．７２，Ｐ＜０．Ｏ１）。
１．３实验方法
２．２ Ｐ３３ｒＮＧ’蛋白表达与乳腺癌各临床病理因素的关系
１．３．１常规病理学检查常规切片和ＨＥ染色后用光学显微
Ｐ３３ ’蛋白的表达与肿瘤大小、腋窝淋巴结转移的数目有显著
镜观察，组织学分级参照国际乳腺癌组织学分级标准。
相关，瘤灶＜２ｃｍ或２～５ｃｍ组的乳腺癌组织Ｐ３３ ’蛋白阳性
１．３．２免疫组化检测免疫组化染色用链霉素抗生物素一过
表达率明显高于瘤灶＞５ｃｍ组者（Ｐ＜０．０５），腋窝淋巴结转移
氧化物酶（Ｓ—Ｐ）法（高温高压抗原修复后按试剂盒说明步骤进
数目为≤３枚组的乳腺癌组织Ｐ３３ ＮＧ 蛋白阳性表达率明显高
行，ＤＡＢ染色），Ｐ３３多克隆抗体购自加拿大的Ｓｔｒｅｓｓｇｅｎ生物试 于淋巴结转移数目≥４枚组者（Ｐ均＜０．０１），而在不同的年龄
①基金项目：广西卫生厅立项课题（项目编号： ００４０３５）
・－－——
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２００７年 右江民族医学院学报 第６期
段、组织学类型和病理分级组Ｐ３３ｎｍ 蛋白阳性表达率差异均
无显著性（Ｐ＞０．０５），见表１。
表１ Ｐ３３ ＮＧ 蛋白表达与乳腺癌各临床
低表达与乳腺癌的发生发展有密切的关系。这与有关的文献
报道基本一致Ｌ５．６Ｊ。由此可见，Ｐ３３Ｉ￣ 基因在乳腺肿瘤中是一
个抑癌基因，在细胞的癌变、肿瘤的转移过程中有重要的作用，
它的表达水平可以作为乳腺肿瘤进展和转移的一个生物学指
标。
３．２作用原理
病理因素的关系（ ，％）
Ｐ３３Ｉ￣ 基因在细胞周期中如何起作用呢？
Ｇａｒｋａｖｔｓｅｖ等 对鼠胚胎纤维细胞等的研究发现，ＩＮＧ１基因所
编码的Ｐ３３ｎ＇￣ 蛋白为Ｐ５３结合蛋白，Ｐ５３抑制细胞生长的作用
需要Ｐ３３ｔｓｃ 参与。转染实验表明Ｐ５３的转录激活作用依赖于
Ｐ３３Ｉ￣
没有Ｐ３３ｎｍ 的参与，Ｐ５３的抑制作用明显减弱。ｓｈｉ．
ｎｏｕｒａ等－８ 利用转基因技术研究Ｐ３３ｎｍ 和Ｐ５３共同转染胶质
，
注：与＜２ｃｍ组比较，ａ：ｘ２＝４．４７，与２－－５ｃｍ组比较＇ｂ： ：
４．５４，Ｐ均＜０．０５；与＜３枚组比较，ｃ： ＝１５．４１，ｄ： ＝６．９４，
Ｐ均＜０．０１
３讨论
３．１ Ｐ３３ 的构型及作用 ＩＮＧ１基因是近年克隆出来的一
个新的候选抑癌基因。Ｇａｒｋａｖｔｓｅｖ等…采用ｃＤＮＡ消减杂交方
法建立了一种富含所需序列的ｃＤＮＡ文库中构建较简便的
ＧＳＥｓ（ｇｅｎｅｔｉｃ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｅｌｅｍｅｎｔｓ）文库的方法，并结合体内选
择技术成功地克隆了一种命名为ＩＮＧ１的候选抑癌基因。
（ ｋａｖｔＳｅｖ【 Ｊ和ｚｅｒｅＩ１１Ｓｋｉ【３ Ｊ等用荧光原位杂交和放射杂交法进
一
步证实ＩＮＧ１基因定位于人染色体１３ｑ３３＿３ ，蛋白产物
Ｐ３３ｒＮｃｌ蛋白为核蛋白。Ｇｕｎｄｕｚ Ｍ等Ｌ４］通过酶切分析发现
ＩＮＧ１基因是由三个外显子和两个内含子组成，ＩＮＧ１ ｍＲＮＡ至
少可形成三种不同的剪接方式，编码三种以上不同分子量的蛋
白，其中Ｐ３３ ＮＧ’蛋白是ＩＮＧ１基因的主要表达产物。它的过表
达可抑制细胞生长和繁殖，促进细胞凋亡；它的低表达可促进
细胞生长和繁殖。
本组９０例乳腺癌病人中，Ｉ）＝；３ ’蛋白在乳腺癌组织中表
达的阳性率为３８．８９％（３５／９０），在癌旁组织为７５．５６％（６８／
９０），两者比较差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１）；同时Ｐ３３ 蛋
白的低表达与肿瘤大小、腋窝淋巴结转移数目有显著相关，瘤
灶＜２ｃｍ或２～５ｃｍ组的乳腺癌组织Ｐ３３ 蛋白阳性表达率
明显高于瘤灶５ｃｍ组者，腋窝淋巴结转移数目为≤３枚组的
乳腺癌组织Ｐ３３ 蛋白阳性表达率明显高于淋巴结转移数目
≥４枚组者，而在不同的年龄段、组织学类型和病理分级组
Ｐ３３ １蛋白阳性表达率差异均无显著性。表明Ｐ３３ 蛋白的
－－・——
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瘤细胞系，观察胶质瘤细胞凋亡情况，结果发现利用腺病毒介
导的Ｐ５３和Ｐ３３ｎｍ 基因共同转染胶质瘤细胞系，其细胞的死
亡率要明显高于任何一种单一基因的转染细胞。Ｐ３３ｎｍ 被认
为是一种与Ｐ５３共同参与细胞信号通路，是Ｐ５３的分子伴侣，
它对细胞周期调节功能的发挥部分依赖于Ｐ５３的激活，从而对
细胞周期起负调控作用。Ｐ２１ｗＡＦ 是野生型Ｐ５３的激活片段，
当ＤＮＡ损伤时，Ｐ５３上升通过８转化生长方式诱导Ｐ２ｌＷａＦＩ产
生，从而导致细胞Ｇｌ期阻滞和凋亡Ｌ９Ｊ。据此推断，Ｐ３３Ｉ￣ 调控
细胞周期的作用机理与Ｐ５３、Ｐ２１ｗＡＦ 有着相互依赖和相互促进
的作用。目前，我们已着手这方面的研究，相关结果将后续报
道。
参考文献：
［１］Ｇａｒｋａｖｔｓｅｖ Ｉ，Ｋａｚａｒｏｖ Ａ，Ｇｕｄｋｏｖ Ｋ，ｅｔ ａ１．Ｓｕｐｐｒｅｓｉｏｎ ｏｆ
ｔｈｅ ｎｏｖｅｌ ｇｒｏｗｔｈ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ Ｐ３３／ＩＮＧｌ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ
ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ，１９９６，１４（３）：４１５—４２０．
［２］ Ｇａｒｋａｖｔｓｅｖ Ｉ，Ｄｅｍｅｔｒｉｃｋ Ｄ，Ｒｉａｂｏｗｏｌ Ｋ．Ｃｅｌｌｕｌａｒ ｌｏｃｄｉｚａ—
ｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｍａｐｐｉｎｇ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌ ｃａｎｄｉｄａｔｅ ｔｕｍｏｒ
ｓｕｐｐｒｍｓｏｒ ｇｅｎｅ（ＩＮＧ１）［Ｊ］．Ｃｙｔｏｇｅｎｅｔ Ｃｅｌｌ Ｇｅｎｅｔ，１９９７，
７６（３—４）：１７６—１７８．
［３］ Ｚｅｒｅｍｓｋｉ Ｍ，Ｈｏｒｒｉｇａｎ ＳＫ，Ｇｒｌｇｏｒｉａｎ ＩＡ，ｅｔ ａ１．Ｉｘｒ￣ｌｉｚａ—
ｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｅｍｌｄｉｄａｔｅ ｔｕｍｏｒ ｓｕｐｐｒｍｓｏｒ ｇｅｎｅ ＩＮＧ１ ｔｏ ｈｕｍａｎ
ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ １３ｑ３４［Ｊ］．Ｓｏｍａｔ Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ Ｇｅｎｅｔ，１９９７，２３
（３）：２３３—２３６．
［４］ ＧｕｎｄＵＺ Ｍ，Ｏｕｃｈｉｄａ Ｍ，Ｆｕｋｕｓｈｉｍａ Ｋ，ａｔ ｅ１．Ｇｅｎｏｍｉｃ
ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ＩＮＧ ｌ ｇｅｎｅ ｎａｄ ｔｕｍｏｒ—ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｍＨ—
ｔａｔｉｏｎ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｉｎ ｈｅａｄ ａｎｄ ｎｅｃｋ ｓｑｕａｍｏｕｓ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ
［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，２０００，６０（１２）：３１４３—３１４６．
［５］章烨，王雅杰，姜斌，等．ＩＮＧｌｂ基因蛋白在乳腺癌组织中
的表达及临床意义［Ｊ］．临床肿瘤学杂志，２００４，９（５）：４５２
—
４５５．
［６］王大维，张金廷，李庆星，等．Ｐ３３ ＮＧ 在口腔鳞状细胞癌中
的表达及其临床意义［Ｊ］．实用口腔医学杂志，２００６，２２
（６）：８１１—８１３．
［７］ Ｇａｒｋａｖｔ￣ｖ Ｉ，Ｇｒｉｇｏｒｉａｎ ＬＡ，Ｏｓｓｏｖｓｋａｙａ ＶＳ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ
ｃａｎｄｉｄａｔｅ ｔｕｍｏｒ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐ３３／ＩＮＧ１ ｃｏｏｐｅｒａｔｅｓ ｗｉｔｈ ｐ５３
ｉｎ ｃｅｌｌ ｇｒｏｗｔｈ ｃｏｎｔｒｏｌ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，１９９８，３９１（６６６４）：２９５
—
２９８．
［８］ Ｓｈｉｎｏｕｒａ Ｎ，Ｍｕｒ￣ｍｌａｔｓｕ Ｙ，Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ａｄｅｎ—
ｏｖｉｒｕｓ—ｒｅｅｄｉａｔｅｄ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｏｆ ｐ３３／ＩＮＧ１ ｗｉｔｈ ｐ５３ ｄｒａｓｔｉｃａｌｌｙ
ａｕｇｍｅｎｔｓ ａｐｏｐｔｃｖｓｉｓ ｉｎ ｇｌｉｏｍａｓ ｌ Ｊ ｊ．Ｃ￣ｍｃｅｒ Ｒｅｓ，１９９９，５９
（２１）：５５２１—５５２８．
［９］Ｃｏｘ ＬＳ。Ｍｕｈｉｐｌｅ ｐａｔｈｗａｙｓ ｃｏＤｔｒｏｌ ｃｅｌｌ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ｔｒａｎｓｆｏｒ—
ｍａｔｉｏｎ：ｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇ ａｎｄ ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｉ）５３ ａｎｄ
ｌ Ｃｉｐｌ／ｗＡＦｌ／Ｓｍｌｉｌ［Ｊ］．Ｐａｔｈｏｌ，１９９７，１８３（７）：１３４—
１４０．
收稿日期：２００７—０７—１７
2024年4月6日发(作者：校俊民)
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第２９卷第６期
右江民族医学院学报
Ｖｏ１．２９ Ｎｏ．６
２００７年１２月
Ｊｏｕｍａｌ ｏｆ Ｙｏｕｊｉａｎｇ Ｍｅｄｉａｃｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｆｏｒ Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ
Ｏｃｔ．２００７
乳腺癌组织中Ｐ３３ ＮＧ 蛋白的表达及临床意义①
韦建宝 ，卢运龙 ，陈山荣 ，黄永秩
（１．右江民族医学院附属医院普外科，广西百色５３３０００；
２．右江民族医学院病理学教研室，广西百色５３３０００）
摘要：目的探讨抑癌基因Ｐ３３ ＮＧ 蛋白表达与乳腺癌发生、发展的关系。方法用Ｓ—Ｐ免疫组织化学法检测９０例
乳腺癌标本中Ｐ３３ｒｍ 蛋白的表达。结果Ｐ３３ｒｍ 蛋白在乳腺癌组织中表达的阳性率为３８．８９％（３５／９０），在癌旁组织为
７５．５６％（６８／９０），两者比较差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１）。Ｐ３３ｒｍ 蛋白的低表达与肿瘤大小、腋窝淋巴结转移数目有
明显关系（Ｐ＜０．０５或０．０１），与年龄、病理类型和病理分级无明显关系。结论Ｐ３３ ＮＧ０基因是一个抑癌基因，它的低
表达与乳腺癌的发生、发展有密切关系。 。
关键词：乳腺肿瘤；蛋白质类；Ｐ３３ ＮＧ ；基因表达；免疫组织化学
中图分类号：Ｒ７３７．９ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１—５８１７（２００７）０６—０８７５—０２
Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｐ３３ ＮＧ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ａｎｄ ｉｔｓ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｃｅ
ＷＥＩ Ｊｉａｎ—ｂａｏ ，ＬＵ ｇＨｎ－－ｌｏｎｇ２，ＣＨＥＮ Ｓｈａｎ—ｒｏｎｇ ，ＨＵＡＮＧ Ｙｏｎｇ—ｚｈｉ２
（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｓｕｒｇｅｒｙ，蛳ｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｙｏ ｉａｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｆｏ
Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ，Ｂａｉｓｅ，Ｇｕａｎｇｘｉ ５３３０００，Ｃｈｉｎａ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＰａｔｈｏｌｏｇｙ，Ｙｏｕｊｉａｎｇ
Ｍｅｄｉｃａｌ ＣｏｌｌｅｇｅｆｏｒＮａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ，Ｂａｉｓｅ，Ｇｕａｎｇｘｉ ５３３０００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ Ｐ３３ＩＮＧ１ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ ａｎｄ
ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｆ ｂｒｅａｓｔ ｃａｒｃｉｎｏｍａ． Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｐ３３ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ９０ ｓａｍｐｌｅｓ ｏｆ ｂｒｅａｓｔ ｃａｒｃｉ—
ｎｏｍａ Ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄ ｂｙ Ｓ—Ｐ ｉｍｍｕｎｏ—ｈｉｓｔｃｏｈｅｍｉｃａｌ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ． Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｏｆ Ｐ３３ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘ—
ｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ９０ ｓａｍｐｌｓｅ ｏｆ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒｏｕｓ ｔｉｓｓｕｅｓ Ｗａｓ ３８．８９％（３５／９０），ａｎｄ ７５．５６％（６８／９０）ｉｎ ｔｈｅ ａｄｊａｃｅｎｔ ｂｒｅａｓｔ
ｔｉｓｕｅｓ．Ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅｍ（Ｐ＜０．０１）．Ｔｈｅ ｌＯＷ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｐ３３ ｐｒｏ—
ｔｅｉｎ ｉＳ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｕｍｏｒ ｓｉｚｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｍｅｔｓａｔａｔｉｃ ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅｓ（Ｐ＜０．０５ ｏｒ ０．Ｏ１）。ｂｕｔ ｈａｄ
ｎｏ ｒｅｌａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ａｇｅ，ｐａｔｈｏｌｏｇｉａｃｌ ｔｙｐｅ ａｎｄ ｐａｔｈｏｌｏｇｉａｃｌ ｇｒａｄｅ．
Ｃｏｎｃｌ
ｕｓｉｏｎ Ｐ３３ ＮＧ ｇｅｎｅ ｉｓ ａｎ ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ｇｅｎｅ
，
ｉｔｓ
——
ｌｏｗ ｅｘｐｒｓｅｓｉｏｎ ｉｓ ｓｉｇｎｉｆｉａｃｎｔｌｙ ｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ ａｎｄ ｐｒｏｇｒｓｅｓ ｏｆ ｂｒｅａｓｔ ａｃｒｃｉｎｏｍａ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｂｒｅａｓｔ ｎｅｏｐｌｓａｍｓ；ｐｒｏｔｅｉｎｓ；Ｐ３３ ；ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ；ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｃｏｈｅｍｉｓｔｒｙ
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，它的发生、发展与
剂公司；结果判断方法：免疫组化染色片，随机选择每张片内的
癌基因的激活和抑癌基因的失活有密切的关系。ＩＮＧ１（ｉｎ．
５个高倍镜视野（×４００倍），每个视野计数１００个细胞。总计
ｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ ｇｒｏｗｔｈ一１）是一个新近发现的抑癌基因。它的过表达
５００个，细胞核和（或）胞浆内有棕黄色颗粒者为Ｐ３３ ＮＧ０蛋白阳
可抑制细胞生长和繁殖。促进细胞凋亡；它的低表达与肿瘤的
性细胞，无棕黄色染色颗粒者为阴性细胞，阳性细胞数≥１０％
发生、发展有关。笔者通过检测Ｐ３３ ０蛋白在９０例乳腺癌组 定为阳性片，＜１０％为阴性片。
织中的表达，探讨其与乳腺癌各临床病理因素的关系及Ｉｊ缶床意
１．３．３统计学处理计数资料采用ｘ 检验。
义。
２结果
ｌ资料与方法
２．１ Ｐ３３ ＮＧ０蛋白在乳腺癌组织中的表达情况Ｐ３３ ＮＧ’蛋白的
１．１标本来源收集我院２００４年１月～２００６年１２月手术治
阳性着色为黄色或棕黄色，大多数位于细胞核，少数胞浆也着
疗、临床资料完整的９０例乳腺癌组织石蜡标本。
色；Ｐ３３ 蛋白在乳腺癌组织中表达的阳性率为３８．８９％（３５／
１．２一般资料本组９０例乳腺癌患者均为女性，年龄２３－－６７
９０），在癌旁组织为７５．５６％（６８／９０），两者比较差异有高度显著
岁，平均４５岁；所有患者均行改良根治术，术前均未行放化疗。
性（）（２：２４．７２，Ｐ＜０．Ｏ１）。
１．３实验方法
２．２ Ｐ３３ｒＮＧ’蛋白表达与乳腺癌各临床病理因素的关系
１．３．１常规病理学检查常规切片和ＨＥ染色后用光学显微
Ｐ３３ ’蛋白的表达与肿瘤大小、腋窝淋巴结转移的数目有显著
镜观察，组织学分级参照国际乳腺癌组织学分级标准。
相关，瘤灶＜２ｃｍ或２～５ｃｍ组的乳腺癌组织Ｐ３３ ’蛋白阳性
１．３．２免疫组化检测免疫组化染色用链霉素抗生物素一过
表达率明显高于瘤灶＞５ｃｍ组者（Ｐ＜０．０５），腋窝淋巴结转移
氧化物酶（Ｓ—Ｐ）法（高温高压抗原修复后按试剂盒说明步骤进
数目为≤３枚组的乳腺癌组织Ｐ３３ ＮＧ 蛋白阳性表达率明显高
行，ＤＡＢ染色），Ｐ３３多克隆抗体购自加拿大的Ｓｔｒｅｓｓｇｅｎ生物试 于淋巴结转移数目≥４枚组者（Ｐ均＜０．０１），而在不同的年龄
①基金项目：广西卫生厅立项课题（项目编号： ００４０３５）
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２００７年 右江民族医学院学报 第６期
段、组织学类型和病理分级组Ｐ３３ｎｍ 蛋白阳性表达率差异均
无显著性（Ｐ＞０．０５），见表１。
表１ Ｐ３３ ＮＧ 蛋白表达与乳腺癌各临床
低表达与乳腺癌的发生发展有密切的关系。这与有关的文献
报道基本一致Ｌ５．６Ｊ。由此可见，Ｐ３３Ｉ￣ 基因在乳腺肿瘤中是一
个抑癌基因，在细胞的癌变、肿瘤的转移过程中有重要的作用，
它的表达水平可以作为乳腺肿瘤进展和转移的一个生物学指
标。
３．２作用原理
病理因素的关系（ ，％）
Ｐ３３Ｉ￣ 基因在细胞周期中如何起作用呢？
Ｇａｒｋａｖｔｓｅｖ等 对鼠胚胎纤维细胞等的研究发现，ＩＮＧ１基因所
编码的Ｐ３３ｎ＇￣ 蛋白为Ｐ５３结合蛋白，Ｐ５３抑制细胞生长的作用
需要Ｐ３３ｔｓｃ 参与。转染实验表明Ｐ５３的转录激活作用依赖于
Ｐ３３Ｉ￣
没有Ｐ３３ｎｍ 的参与，Ｐ５３的抑制作用明显减弱。ｓｈｉ．
ｎｏｕｒａ等－８ 利用转基因技术研究Ｐ３３ｎｍ 和Ｐ５３共同转染胶质
，
注：与＜２ｃｍ组比较，ａ：ｘ２＝４．４７，与２－－５ｃｍ组比较＇ｂ： ：
４．５４，Ｐ均＜０．０５；与＜３枚组比较，ｃ： ＝１５．４１，ｄ： ＝６．９４，
Ｐ均＜０．０１
３讨论
３．１ Ｐ３３ 的构型及作用 ＩＮＧ１基因是近年克隆出来的一
个新的候选抑癌基因。Ｇａｒｋａｖｔｓｅｖ等…采用ｃＤＮＡ消减杂交方
法建立了一种富含所需序列的ｃＤＮＡ文库中构建较简便的
ＧＳＥｓ（ｇｅｎｅｔｉｃ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｅｌｅｍｅｎｔｓ）文库的方法，并结合体内选
择技术成功地克隆了一种命名为ＩＮＧ１的候选抑癌基因。
（ ｋａｖｔＳｅｖ【 Ｊ和ｚｅｒｅＩ１１Ｓｋｉ【３ Ｊ等用荧光原位杂交和放射杂交法进
一
步证实ＩＮＧ１基因定位于人染色体１３ｑ３３＿３ ，蛋白产物
Ｐ３３ｒＮｃｌ蛋白为核蛋白。Ｇｕｎｄｕｚ Ｍ等Ｌ４］通过酶切分析发现
ＩＮＧ１基因是由三个外显子和两个内含子组成，ＩＮＧ１ ｍＲＮＡ至
少可形成三种不同的剪接方式，编码三种以上不同分子量的蛋
白，其中Ｐ３３ ＮＧ’蛋白是ＩＮＧ１基因的主要表达产物。它的过表
达可抑制细胞生长和繁殖，促进细胞凋亡；它的低表达可促进
细胞生长和繁殖。
本组９０例乳腺癌病人中，Ｉ）＝；３ ’蛋白在乳腺癌组织中表
达的阳性率为３８．８９％（３５／９０），在癌旁组织为７５．５６％（６８／
９０），两者比较差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１）；同时Ｐ３３ 蛋
白的低表达与肿瘤大小、腋窝淋巴结转移数目有显著相关，瘤
灶＜２ｃｍ或２～５ｃｍ组的乳腺癌组织Ｐ３３ 蛋白阳性表达率
明显高于瘤灶５ｃｍ组者，腋窝淋巴结转移数目为≤３枚组的
乳腺癌组织Ｐ３３ 蛋白阳性表达率明显高于淋巴结转移数目
≥４枚组者，而在不同的年龄段、组织学类型和病理分级组
Ｐ３３ １蛋白阳性表达率差异均无显著性。表明Ｐ３３ 蛋白的
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瘤细胞系，观察胶质瘤细胞凋亡情况，结果发现利用腺病毒介
导的Ｐ５３和Ｐ３３ｎｍ 基因共同转染胶质瘤细胞系，其细胞的死
亡率要明显高于任何一种单一基因的转染细胞。Ｐ３３ｎｍ 被认
为是一种与Ｐ５３共同参与细胞信号通路，是Ｐ５３的分子伴侣，
它对细胞周期调节功能的发挥部分依赖于Ｐ５３的激活，从而对
细胞周期起负调控作用。Ｐ２１ｗＡＦ 是野生型Ｐ５３的激活片段，
当ＤＮＡ损伤时，Ｐ５３上升通过８转化生长方式诱导Ｐ２ｌＷａＦＩ产
生，从而导致细胞Ｇｌ期阻滞和凋亡Ｌ９Ｊ。据此推断，Ｐ３３Ｉ￣ 调控
细胞周期的作用机理与Ｐ５３、Ｐ２１ｗＡＦ 有着相互依赖和相互促进
的作用。目前，我们已着手这方面的研究，相关结果将后续报
道。
参考文献：
［１］Ｇａｒｋａｖｔｓｅｖ Ｉ，Ｋａｚａｒｏｖ Ａ，Ｇｕｄｋｏｖ Ｋ，ｅｔ ａ１．Ｓｕｐｐｒｅｓｉｏｎ ｏｆ
ｔｈｅ ｎｏｖｅｌ ｇｒｏｗｔｈ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ Ｐ３３／ＩＮＧｌ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ
ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ，１９９６，１４（３）：４１５—４２０．
［２］ Ｇａｒｋａｖｔｓｅｖ Ｉ，Ｄｅｍｅｔｒｉｃｋ Ｄ，Ｒｉａｂｏｗｏｌ Ｋ．Ｃｅｌｌｕｌａｒ ｌｏｃｄｉｚａ—
ｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｍａｐｐｉｎｇ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌ ｃａｎｄｉｄａｔｅ ｔｕｍｏｒ
ｓｕｐｐｒｍｓｏｒ ｇｅｎｅ（ＩＮＧ１）［Ｊ］．Ｃｙｔｏｇｅｎｅｔ Ｃｅｌｌ Ｇｅｎｅｔ，１９９７，
７６（３—４）：１７６—１７８．
［３］ Ｚｅｒｅｍｓｋｉ Ｍ，Ｈｏｒｒｉｇａｎ ＳＫ，Ｇｒｌｇｏｒｉａｎ ＩＡ，ｅｔ ａ１．Ｉｘｒ￣ｌｉｚａ—
ｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｅｍｌｄｉｄａｔｅ ｔｕｍｏｒ ｓｕｐｐｒｍｓｏｒ ｇｅｎｅ ＩＮＧ１ ｔｏ ｈｕｍａｎ
ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ １３ｑ３４［Ｊ］．Ｓｏｍａｔ Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ Ｇｅｎｅｔ，１９９７，２３
（３）：２３３—２３６．
［４］ ＧｕｎｄＵＺ Ｍ，Ｏｕｃｈｉｄａ Ｍ，Ｆｕｋｕｓｈｉｍａ Ｋ，ａｔ ｅ１．Ｇｅｎｏｍｉｃ
ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ＩＮＧ ｌ ｇｅｎｅ ｎａｄ ｔｕｍｏｒ—ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｍＨ—
ｔａｔｉｏｎ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｉｎ ｈｅａｄ ａｎｄ ｎｅｃｋ ｓｑｕａｍｏｕｓ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ
［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，２０００，６０（１２）：３１４３—３１４６．
［５］章烨，王雅杰，姜斌，等．ＩＮＧｌｂ基因蛋白在乳腺癌组织中
的表达及临床意义［Ｊ］．临床肿瘤学杂志，２００４，９（５）：４５２
—
４５５．
［６］王大维，张金廷，李庆星，等．Ｐ３３ ＮＧ 在口腔鳞状细胞癌中
的表达及其临床意义［Ｊ］．实用口腔医学杂志，２００６，２２
（６）：８１１—８１３．
［７］ Ｇａｒｋａｖｔ￣ｖ Ｉ，Ｇｒｉｇｏｒｉａｎ ＬＡ，Ｏｓｓｏｖｓｋａｙａ ＶＳ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ
ｃａｎｄｉｄａｔｅ ｔｕｍｏｒ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐ３３／ＩＮＧ１ ｃｏｏｐｅｒａｔｅｓ ｗｉｔｈ ｐ５３
ｉｎ ｃｅｌｌ ｇｒｏｗｔｈ ｃｏｎｔｒｏｌ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，１９９８，３９１（６６６４）：２９５
—
２９８．
［８］ Ｓｈｉｎｏｕｒａ Ｎ，Ｍｕｒ￣ｍｌａｔｓｕ Ｙ，Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ａｄｅｎ—
ｏｖｉｒｕｓ—ｒｅｅｄｉａｔｅｄ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｏｆ ｐ３３／ＩＮＧ１ ｗｉｔｈ ｐ５３ ｄｒａｓｔｉｃａｌｌｙ
ａｕｇｍｅｎｔｓ ａｐｏｐｔｃｖｓｉｓ ｉｎ ｇｌｉｏｍａｓ ｌ Ｊ ｊ．Ｃ￣ｍｃｅｒ Ｒｅｓ，１９９９，５９
（２１）：５５２１—５５２８．
［９］Ｃｏｘ ＬＳ。Ｍｕｈｉｐｌｅ ｐａｔｈｗａｙｓ ｃｏＤｔｒｏｌ ｃｅｌｌ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ｔｒａｎｓｆｏｒ—
ｍａｔｉｏｎ：ｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇ ａｎｄ ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｉ）５３ ａｎｄ
ｌ Ｃｉｐｌ／ｗＡＦｌ／Ｓｍｌｉｌ［Ｊ］．Ｐａｔｈｏｌ，１９９７，１８３（７）：１３４—
１４０．
收稿日期：２００７—０７—１７