2024年5月7日发(作者：士元)
第
28
卷第
2
期
Vol．28No．2
荆楚理工学院学报
JournalofJingchuUniversityofTechnology
2013
年
4
月
Apr．2013
紫外分光光度法测定丹皮酚
－
羟丙基
－
β
－
环糊精
的包合率
张冕
（
荆楚理工学院化工与药学院
，
湖北荆门
448000）
摘要
：
建立了丹皮酚
－
羟丙基
－
β
－
环糊精的包合率测定方法
。
采用紫外分光光度法测定丹皮酚
－
羟丙
基
－
β
－
环糊精包合物中丹皮酚的含量
，
由此计算包合率
。
结果表明
：
丹皮酚在
274nm
处有最大吸收
，
浓度
2
在
10．0～80．0
μ
g/mL
范围内与吸光度呈良好的线性关系
，
回归方程为
：A=0．0081c+0．0937（Ｒ=0．9997），
ＲSD
为
0．32%（n=9）。
本方法操作简便易行
，
平均回收率为
99．81%，
具有良好的重现性和精密度
。
关键词
：
丹皮酚
；
包合物
；
包合率
；
羟丙基
－
β
－
环糊精
中图分类号
：Ｒ927．2
文献标志码
：A
文章编号
：1008－4657（2013）02－0010－03
PAE）
是毛茛科植物牡丹的根皮和萝摩科植物徐长卿全草的主要活性成分
，
丹皮酚
（Paeonolum，
具
有抗过敏
、
抗炎
、
扩张血管
、
抗心律失常
、
抗菌
、
镇静
、
催眠
、
解热
、
镇痛
、
抑制肿瘤细胞增殖等多种药理活
性
，
临床上用于治疗风湿痛
、
胃痛和其他疼痛
、
湿疹
、
过敏性皮炎等
。PAE
为酚类化合物
，
具有熔点低
、
易挥发
、
水溶性差
、
见光易分解的特点
，
导致其生物利用度低
。
因此
，
提高水溶性
、
增加稳定性有望能改
［1－3］
。
善其生物利用度
［4－7］
。
近年来
，
环糊精包合技术的应用日益广泛
，
药物经包合后
，
溶解性得到改善
，
稳定性得到提高
本实验在前期研究的基础上选用羟丙基
－
β
－
环糊精
（HP－
β
－CD）
为包合材料
，
采用饱和水溶液法制
［8－11］
。
备包合物
，
采用紫外分光光度法测定包合物中丹皮酚的含量
，
进而计算得到包合率
1
仪器和试剂
梅特勒
－
托利多电子天平
（
上海梅特勒
－
托利多仪器有限公司
）；FD－101S
集热式磁力搅拌器
（
巩
义市予华仪器有限责任公司
）；DZF6050
真空干燥箱
（
巩义市予华仪器有限责任公司
）；
紫外分光光度计
（
北京普析通用仪器有限责任公司
）；PAE（
江西吉安华美香料提炼厂
，
纯度
＞99%）；PAE
对照品
（
中国
药品生物制品检定所
，
批号
：110708－200506）；HP－
β
－CD（
进口分装
，
广州罗盖特中国有限公司赠
20121124、20121125）；
水为新制多效蒸馏送
）；PAE－HP－
β
－CD
包合物
（
实验室自制
，
批号
：20121123、
水
；
其余试剂及试药均为分析纯
。
2
2．1
2．2
方法与结果
对照品储备液的配制
精密称取
PAE
对照品适量
，
用无水乙醇配制成浓度为
1．0mg/mL
的对照品溶液
，
备用
。
样品溶液的配制
准确称取
PAE－HP－
β
－CD
包合物适量
，
用无水乙醇溶解后
，
转移至
100mL
容量瓶中
，
超声后用
蒸馏水稀释至刻度
，
摇匀
，
用
0．45
μ
m
微孔滤膜过滤
，
取续滤液作为样品溶液备用
。
收稿日期
：2013－03－02
基金项目
：
荆楚理工学院校级课题
（ZＲ201110）。
作者简介
：
张冕
（1980－），
女
，
湖北京山人
，
荆楚理工学院讲师
，
硕士
。
研究方向
：
药物新剂型与新技术
。
10
2．3
2．3．1
PAE
的测定
检测波长的确定
分别取
PAE
对照品溶液
、
空白
HP－
β
－CD
包合物的无水乙醇溶液
、
样品溶液
，
用紫外分光光度计
在
200～400nm
范围进行扫描
，
结果见图
1～3。
结果表明
PAE
在
274nm
处有最大吸收
，
而
HP－
β
－
CD
在此处对
PAE
的测定无干扰
，
故选取
274nm
为测定波长
。
图
1PAE
紫外扫描图图
2
空白
HP－
β
－CD
包合物紫外扫描图
图
3
样品溶液的紫外扫描图
2．3．2
工作曲线的绘制
20．0、40．0、60．0、
精密移取上述对照品储备液适量
，
以无水乙醇为稀释剂
，
配制成浓度为
10．0、
80．0
μ
g/mL
的系列对照品溶液
，
以无水乙醇为空白
，
在
274nm
波长处测吸光度
A，
以
A
为纵坐标
、
浓度
2
c
为横坐标进行线性回归
，
得回归方程为
A=0．0081c+0．0937（Ｒ=0．9997），
表明
PAE
浓度在
10．0～
80．0
μ
g/mL
范围内与吸光度线性关系良好
。
2．3．3
重复性实验
准确称取
PAE－HP－
β
－CD
包合物
5
份
，
照
2．2
项下方法制备样品溶液
，
分别测定各样品溶液的吸
0．485、0．489、0．483、0．485，ＲSD=0．47%（n=5），
光度
，
分别为
0．484、
表明测定方法的重复性良好
。
2．3．4
精密度实验
取浓度为
40．0
μ
g/mL
的
PAE
对照品溶液
，
于
274nm
处测定吸光度
，
连续测定
5
次
，
吸光度分别为
0．420、0．421、0．418、0．421、0．419，ＲSD=0．31%（n=5），
表明方法精密度良好
。
同条件下每隔
1d
0．419、0．420、0．423、0．418，ＲSD=0．46%（n=5），
测定一次
，
连续测定
5d，
吸光度分别为
0．421、
表明
方法日间精密度良好
。
2．3．5
稳定性实验
2、4、8、12h
时测定
，0．173、
取浓度为
10．0
μ
g/mL
的
PAE
对照品溶液于
1、
吸光度分别为
0．174、
0．170、0．169、0．172，ＲSD=1．21%（n=5），
说明样品在
12h
内基本稳定
，
满足测定的需要
。
2．3．6
加样回收实验
11
2、3mL，
准确吸取
9
份已知浓度的样品溶液适量
，
分别加入
60．0
μ
g/mL
对照品溶液
1、
无水乙醇定
ＲSD
为
0．32%，
容至
10mL，
在
274nm
波长处测定吸光度
。
求得平均回收率为
99．81%，
结果见表
1。
表
1
序号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
样品含量
（
μ
g）
151．26
151．26
151．26
151．26
151．26
151．26
151．26
151．26
151．26
加入量
（
μ
g）
60
60
60
120
120
120
180
180
180
PAE－HP－
β
－CD
包合物的加样回收率
测得量
（
μ
g）
211．11
211．41
210．14
270．80
269．93
271．04
330．31
330．85
331．05
回收率
（%）
99．93
100．07
99．47
99．83
99．51
99．92
99．71
99．88
99．94
99．810．32
平均回收率
（%）ＲSD（%）
2．4PAE－HP－
β
－CD
包合物的包合率测定
按
2．2
项下制备样品溶液
，
在
274nm
处测定吸光度
，
计算包合物中
PAE
的量
，
再按下式计算包合
PAE－HP－
β
－CD
包合物的平均包合率为
95．08%，
率
，
结果见表
2。
从表
2
中可得
，
包合效果好
。
包合率
=
X
1
×100%
X
0
式中
：X
0
—PAE
的投药总量
；X
1
—
包合物中
PAE
的量
。
表
2
批号
20121123
20121124
20121125
PAE－HP－
β
－CD
包合物包合率的测定结果
包合率
（%）
94．19
95．30
95．76
95．080．85
平均包合率
（%）ＲSD（%）PAE
投料总量
（mg）
包合物中
PAE（mg）
55．65
55．73
55．68
52．42
53．11
53．32
3
结论
本实验建立了
PAE－HP－
β
－CD
包合物包合率的测定方法
，
利用紫外分光光度法测定包合物经脱
进而计算其包合率
，
得到
PAE－HP－
β
－CD
包合物的平均包合率为
95．08%。
方法包后的药物含量
，
学验证结果表明
：
此方法简便易行
，
重现性好
，
准确度高
，
结果准确可靠
。
参考文献
：
［1］
杨正生
，J］．
中国药物与临床
，2011，11（5）：545－547．
彭振辉
，
姚青海
，
等
．
丹皮酚的药理作用研究进展
［
［2］
郭齐
，J］．
中医药信息
，2009，26（1）：20－22．
李贻奎
，
王志国
，
等
．
丹皮酚药理研究进展
［
［3］
杨宗发
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中国医院药学杂志
，2009，29（5）：
江尚飞
，
张荣发
，
等
．
均匀设计法筛选丹皮酚β
－
环糊精包合物片处方
［
352－354．
［4］
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，2009，3（1）：189－191．
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，
赵胜芳
，
等
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β
－
环糊精包合技术在中药药剂中的应用
［
［5］
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β
－
环糊精及其衍生物在中药制剂中的研究进展
［J］．
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，2009，16（5）：90．
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王晓东
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王晓
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超分子包合技术在新药研制中的应用
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［7］
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分子科学学报
，2012，28（5）：422－426．
王德堂
，
万芳
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相溶解度法研究不同环糊精对丹皮酚的增溶作用
［
［8］
罗丹丹
，J］．
光谱实验室
，2012，29
刘宏明
，
刘国栋
，
等
．
紫外分光光度法测定葛根素
－
二甲基
－
β
－
环糊精的包合率
［
（5）：2874－2877．
［9］
刘宏明
，J］．
光谱实验室
，2012，29（3）：1334
谭群友
，
柳珊
，
等
．
紫外分光光度法测定吴茱萸碱
－
β
－
环糊精的包合率
［
－1337．
［10］
喻录容
，J］．
光谱实验室
，2012，29（3）：1930－1933．
何先元
．
紫外分光光度法测定葛根素
－
β
－
环糊精的包合率
［
［11］
李嫄
，J］．
光谱实验室
，2012，29（1）：371
谭群友
，
邓波
，
等
．
紫外分光光度法测定溴新斯的明
－
β
－
环糊精的包合率
［
－374．
［
责任编辑
：
寸晓非
］
12
2024年5月7日发(作者：士元)
第
28
卷第
2
期
Vol．28No．2
荆楚理工学院学报
JournalofJingchuUniversityofTechnology
2013
年
4
月
Apr．2013
紫外分光光度法测定丹皮酚
－
羟丙基
－
β
－
环糊精
的包合率
张冕
（
荆楚理工学院化工与药学院
，
湖北荆门
448000）
摘要
：
建立了丹皮酚
－
羟丙基
－
β
－
环糊精的包合率测定方法
。
采用紫外分光光度法测定丹皮酚
－
羟丙
基
－
β
－
环糊精包合物中丹皮酚的含量
，
由此计算包合率
。
结果表明
：
丹皮酚在
274nm
处有最大吸收
，
浓度
2
在
10．0～80．0
μ
g/mL
范围内与吸光度呈良好的线性关系
，
回归方程为
：A=0．0081c+0．0937（Ｒ=0．9997），
ＲSD
为
0．32%（n=9）。
本方法操作简便易行
，
平均回收率为
99．81%，
具有良好的重现性和精密度
。
关键词
：
丹皮酚
；
包合物
；
包合率
；
羟丙基
－
β
－
环糊精
中图分类号
：Ｒ927．2
文献标志码
：A
文章编号
：1008－4657（2013）02－0010－03
PAE）
是毛茛科植物牡丹的根皮和萝摩科植物徐长卿全草的主要活性成分
，
丹皮酚
（Paeonolum，
具
有抗过敏
、
抗炎
、
扩张血管
、
抗心律失常
、
抗菌
、
镇静
、
催眠
、
解热
、
镇痛
、
抑制肿瘤细胞增殖等多种药理活
性
，
临床上用于治疗风湿痛
、
胃痛和其他疼痛
、
湿疹
、
过敏性皮炎等
。PAE
为酚类化合物
，
具有熔点低
、
易挥发
、
水溶性差
、
见光易分解的特点
，
导致其生物利用度低
。
因此
，
提高水溶性
、
增加稳定性有望能改
［1－3］
。
善其生物利用度
［4－7］
。
近年来
，
环糊精包合技术的应用日益广泛
，
药物经包合后
，
溶解性得到改善
，
稳定性得到提高
本实验在前期研究的基础上选用羟丙基
－
β
－
环糊精
（HP－
β
－CD）
为包合材料
，
采用饱和水溶液法制
［8－11］
。
备包合物
，
采用紫外分光光度法测定包合物中丹皮酚的含量
，
进而计算得到包合率
1
仪器和试剂
梅特勒
－
托利多电子天平
（
上海梅特勒
－
托利多仪器有限公司
）；FD－101S
集热式磁力搅拌器
（
巩
义市予华仪器有限责任公司
）；DZF6050
真空干燥箱
（
巩义市予华仪器有限责任公司
）；
紫外分光光度计
（
北京普析通用仪器有限责任公司
）；PAE（
江西吉安华美香料提炼厂
，
纯度
＞99%）；PAE
对照品
（
中国
药品生物制品检定所
，
批号
：110708－200506）；HP－
β
－CD（
进口分装
，
广州罗盖特中国有限公司赠
20121124、20121125）；
水为新制多效蒸馏送
）；PAE－HP－
β
－CD
包合物
（
实验室自制
，
批号
：20121123、
水
；
其余试剂及试药均为分析纯
。
2
2．1
2．2
方法与结果
对照品储备液的配制
精密称取
PAE
对照品适量
，
用无水乙醇配制成浓度为
1．0mg/mL
的对照品溶液
，
备用
。
样品溶液的配制
准确称取
PAE－HP－
β
－CD
包合物适量
，
用无水乙醇溶解后
，
转移至
100mL
容量瓶中
，
超声后用
蒸馏水稀释至刻度
，
摇匀
，
用
0．45
μ
m
微孔滤膜过滤
，
取续滤液作为样品溶液备用
。
收稿日期
：2013－03－02
基金项目
：
荆楚理工学院校级课题
（ZＲ201110）。
作者简介
：
张冕
（1980－），
女
，
湖北京山人
，
荆楚理工学院讲师
，
硕士
。
研究方向
：
药物新剂型与新技术
。
10
2．3
2．3．1
PAE
的测定
检测波长的确定
分别取
PAE
对照品溶液
、
空白
HP－
β
－CD
包合物的无水乙醇溶液
、
样品溶液
，
用紫外分光光度计
在
200～400nm
范围进行扫描
，
结果见图
1～3。
结果表明
PAE
在
274nm
处有最大吸收
，
而
HP－
β
－
CD
在此处对
PAE
的测定无干扰
，
故选取
274nm
为测定波长
。
图
1PAE
紫外扫描图图
2
空白
HP－
β
－CD
包合物紫外扫描图
图
3
样品溶液的紫外扫描图
2．3．2
工作曲线的绘制
20．0、40．0、60．0、
精密移取上述对照品储备液适量
，
以无水乙醇为稀释剂
，
配制成浓度为
10．0、
80．0
μ
g/mL
的系列对照品溶液
，
以无水乙醇为空白
，
在
274nm
波长处测吸光度
A，
以
A
为纵坐标
、
浓度
2
c
为横坐标进行线性回归
，
得回归方程为
A=0．0081c+0．0937（Ｒ=0．9997），
表明
PAE
浓度在
10．0～
80．0
μ
g/mL
范围内与吸光度线性关系良好
。
2．3．3
重复性实验
准确称取
PAE－HP－
β
－CD
包合物
5
份
，
照
2．2
项下方法制备样品溶液
，
分别测定各样品溶液的吸
0．485、0．489、0．483、0．485，ＲSD=0．47%（n=5），
光度
，
分别为
0．484、
表明测定方法的重复性良好
。
2．3．4
精密度实验
取浓度为
40．0
μ
g/mL
的
PAE
对照品溶液
，
于
274nm
处测定吸光度
，
连续测定
5
次
，
吸光度分别为
0．420、0．421、0．418、0．421、0．419，ＲSD=0．31%（n=5），
表明方法精密度良好
。
同条件下每隔
1d
0．419、0．420、0．423、0．418，ＲSD=0．46%（n=5），
测定一次
，
连续测定
5d，
吸光度分别为
0．421、
表明
方法日间精密度良好
。
2．3．5
稳定性实验
2、4、8、12h
时测定
，0．173、
取浓度为
10．0
μ
g/mL
的
PAE
对照品溶液于
1、
吸光度分别为
0．174、
0．170、0．169、0．172，ＲSD=1．21%（n=5），
说明样品在
12h
内基本稳定
，
满足测定的需要
。
2．3．6
加样回收实验
11
2、3mL，
准确吸取
9
份已知浓度的样品溶液适量
，
分别加入
60．0
μ
g/mL
对照品溶液
1、
无水乙醇定
ＲSD
为
0．32%，
容至
10mL，
在
274nm
波长处测定吸光度
。
求得平均回收率为
99．81%，
结果见表
1。
表
1
序号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
样品含量
（
μ
g）
151．26
151．26
151．26
151．26
151．26
151．26
151．26
151．26
151．26
加入量
（
μ
g）
60
60
60
120
120
120
180
180
180
PAE－HP－
β
－CD
包合物的加样回收率
测得量
（
μ
g）
211．11
211．41
210．14
270．80
269．93
271．04
330．31
330．85
331．05
回收率
（%）
99．93
100．07
99．47
99．83
99．51
99．92
99．71
99．88
99．94
99．810．32
平均回收率
（%）ＲSD（%）
2．4PAE－HP－
β
－CD
包合物的包合率测定
按
2．2
项下制备样品溶液
，
在
274nm
处测定吸光度
，
计算包合物中
PAE
的量
，
再按下式计算包合
PAE－HP－
β
－CD
包合物的平均包合率为
95．08%，
率
，
结果见表
2。
从表
2
中可得
，
包合效果好
。
包合率
=
X
1
×100%
X
0
式中
：X
0
—PAE
的投药总量
；X
1
—
包合物中
PAE
的量
。
表
2
批号
20121123
20121124
20121125
PAE－HP－
β
－CD
包合物包合率的测定结果
包合率
（%）
94．19
95．30
95．76
95．080．85
平均包合率
（%）ＲSD（%）PAE
投料总量
（mg）
包合物中
PAE（mg）
55．65
55．73
55．68
52．42
53．11
53．32
3
结论
本实验建立了
PAE－HP－
β
－CD
包合物包合率的测定方法
，
利用紫外分光光度法测定包合物经脱
进而计算其包合率
，
得到
PAE－HP－
β
－CD
包合物的平均包合率为
95．08%。
方法包后的药物含量
，
学验证结果表明
：
此方法简便易行
，
重现性好
，
准确度高
，
结果准确可靠
。
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责任编辑
：
寸晓非
］
12