2024年3月9日发(作者:薄木)
细胞str鉴定报告
细胞STR鉴定报告
概述
细胞STR(Short Tandem Repeat)鉴定是一种常用的分子生物学技术,可以用于确定细胞系的身份和纯度。本报告旨在介绍细胞STR鉴定的原理、方法、数据分析和结果解释。
原理
STR是指短串联重复序列,即由2-6个碱基组成的重复序列。在人类基因组中,存在许多这样的STR位点,并且不同个体之间的STR位点序列也存在差异。利用PCR扩增这些位点,可以得到一个由不同长度的DNA片段组成的电泳图谱,称为STR分型图谱。比较不同样本之间的分型图谱可以确定它们是否来自同一来源。
方法
1. 提取DNA:将待检测细胞系中的DNA提取出来,并通过比色法或荧光法测量其浓度和纯度。
2. PCR扩增:选取一组标准化的STR位点进行PCR扩增,通常包括16个核心位点和1个性别鉴定位点。PCR反应体系包括模板DNA、引物、dNTPs、Taq聚合酶等成分。
3. 电泳分离:将PCR产物通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,并在荧光染料或银染剂下可视化。
4. 数据分析:将样本的STR分型图谱与数据库中的参考样本进行比对,确定其身份和纯度。常用的数据库包括ATCC、DSMZ、JCRB等。
结果解释
细胞STR鉴定结果通常以一个由数字和字母组成的序列来表示,每个数字代表一个STR位点上的长度,字母代表该位点上的等位基因。例如,“13, 14 / 12, 13”表示在D13S317位点上,该样本有13个重复单位长的等位基因和14个重复单位长的等位基因;在D7S820位点上,该样本有12个重复单位长的等位基因和13个重复单位长的等位基因。
根据STR分型图谱之间的相似程度可以判断不同细胞系之间是否存在交叉污染或混合污染。如果两个细胞系存在共同点,则它们很可能来自同一来源;如果两个细胞系完全不同,则它们来自不同来源;如果
两个细胞系存在一定程度的相似性,则需要进一步进行确认和排除可能存在的污染情况。
结论
通过对待检测细胞系进行STR鉴定,可以确定其身份和纯度,并且排除交叉污染和混合污染的可能性。STR鉴定是细胞系验证的重要手段,也是科学研究和药物研发中不可或缺的技术。
2024年3月9日发(作者:薄木)
细胞str鉴定报告
细胞STR鉴定报告
概述
细胞STR(Short Tandem Repeat)鉴定是一种常用的分子生物学技术,可以用于确定细胞系的身份和纯度。本报告旨在介绍细胞STR鉴定的原理、方法、数据分析和结果解释。
原理
STR是指短串联重复序列,即由2-6个碱基组成的重复序列。在人类基因组中,存在许多这样的STR位点,并且不同个体之间的STR位点序列也存在差异。利用PCR扩增这些位点,可以得到一个由不同长度的DNA片段组成的电泳图谱,称为STR分型图谱。比较不同样本之间的分型图谱可以确定它们是否来自同一来源。
方法
1. 提取DNA:将待检测细胞系中的DNA提取出来,并通过比色法或荧光法测量其浓度和纯度。
2. PCR扩增:选取一组标准化的STR位点进行PCR扩增,通常包括16个核心位点和1个性别鉴定位点。PCR反应体系包括模板DNA、引物、dNTPs、Taq聚合酶等成分。
3. 电泳分离:将PCR产物通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,并在荧光染料或银染剂下可视化。
4. 数据分析:将样本的STR分型图谱与数据库中的参考样本进行比对,确定其身份和纯度。常用的数据库包括ATCC、DSMZ、JCRB等。
结果解释
细胞STR鉴定结果通常以一个由数字和字母组成的序列来表示,每个数字代表一个STR位点上的长度,字母代表该位点上的等位基因。例如,“13, 14 / 12, 13”表示在D13S317位点上,该样本有13个重复单位长的等位基因和14个重复单位长的等位基因;在D7S820位点上,该样本有12个重复单位长的等位基因和13个重复单位长的等位基因。
根据STR分型图谱之间的相似程度可以判断不同细胞系之间是否存在交叉污染或混合污染。如果两个细胞系存在共同点,则它们很可能来自同一来源;如果两个细胞系完全不同,则它们来自不同来源;如果
两个细胞系存在一定程度的相似性,则需要进一步进行确认和排除可能存在的污染情况。
结论
通过对待检测细胞系进行STR鉴定,可以确定其身份和纯度,并且排除交叉污染和混合污染的可能性。STR鉴定是细胞系验证的重要手段,也是科学研究和药物研发中不可或缺的技术。