2024年4月11日发(作者：籍思菱)
北京索莱宝科技有限公司
一氧化氮（NO）含量检测试剂盒说明书可见分光光度法
货号：BC1470
规格：50T/24S
产品内容：
提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体6mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体6mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体12mL×1瓶，4℃避光保存。
产品说明：
NO（NitricOxide，NO）广泛分布于生物体内神经、循环、呼吸、消化、泌尿生殖等系统中，特别是
神经组织中较丰富。它作为细胞间及细胞内的信息物质，发挥信号传递的作用，是一种新型的生物信使分
子，在机体的生理、病理过程中起着重要的作用。
NO在体内或水溶液中极易氧化生成NO
2
，在酸性条件下，NO
2
与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物，进一
步与萘基乙烯基二胺偶合，产物在550nm处有特征吸收峰，测定其吸光值，可以计算NO含量。为了排除样品
色素等的影响，每个样品需做对照管。
自备实验用品及仪器
天平、研钵或匀浆器、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、蒸馏水。
操作步骤：
一、样品处理
1.组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提
取液）进行冰浴匀浆。12000rpm，4℃离心15min，取上清，置冰上待测。
2.细菌、真菌：按照细胞数量（10
4
个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加
入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后12000rpm，
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4℃，离心15min，取上清置于冰上待测。
3.体液和培养液等其它液态样品：直接测定。
二、测定步骤和操作表
对照管
样品（µL）
试剂一（µL）
试剂二（µL）
试剂三（µL）
250
250250
400
测定管
400
250
混匀，室温静置15min，以对照管调零，1mL玻璃比色皿，测定A550。
三、NO含量计算
标准曲线回归方程为：y=0.016x-0.0103，R
2
=0.9986
1、组织样品：
NO含量定义：25℃时，每克样品或每毫克蛋白15min生成1µmoLNO
2
-
，相当于1µmoLNO。
（1）按样本质量计算
NO含量（µmoL/g）=（A
550
+0.0103）÷0.016×V反总÷（V样÷V样总×W）×10
=0.14×（A
550
+0.0103）÷W
（2）按样本蛋白浓度计算
NO含量（µmoL/mgprot）=（A
550
+0.0103）÷0.016×V反总÷（V样×Cpr）×10
=0.14×（A
550
+0.0103）÷Cpr
2、其他样品：
NO含量定义：25℃时，每升样品15min生成1µmoLNO
2
，相当于1µmoLNO。
NO含量（µmoL/L）=（A
550
+0.0103）÷0.016×V反总÷V样
=140×（A
550
+0.0103）
V反总：反应总体积，0.9mL；
V样总：加入提取液体积，1mL；
V样：反应中样品体积，0.4mL；
W：样品质量，g；
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Cpr：蛋白浓度，mg/mL
注意事项：
1.试剂盒2-8℃保存。
2.尽量使用新鲜样品进行检测，试剂三有腐蚀性，操作时请做好防护措施。
3.若检测出得OD值在标准曲线范围外，请将样品进行适当的浓缩或稀释，并在计算公式中除以浓缩倍数
或者乘以稀释倍数。
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2024年4月11日发(作者：籍思菱)
北京索莱宝科技有限公司
一氧化氮（NO）含量检测试剂盒说明书可见分光光度法
货号：BC1470
规格：50T/24S
产品内容：
提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体6mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体6mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体12mL×1瓶，4℃避光保存。
产品说明：
NO（NitricOxide，NO）广泛分布于生物体内神经、循环、呼吸、消化、泌尿生殖等系统中，特别是
神经组织中较丰富。它作为细胞间及细胞内的信息物质，发挥信号传递的作用，是一种新型的生物信使分
子，在机体的生理、病理过程中起着重要的作用。
NO在体内或水溶液中极易氧化生成NO
2
，在酸性条件下，NO
2
与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物，进一
步与萘基乙烯基二胺偶合，产物在550nm处有特征吸收峰，测定其吸光值，可以计算NO含量。为了排除样品
色素等的影响，每个样品需做对照管。
自备实验用品及仪器
天平、研钵或匀浆器、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、蒸馏水。
操作步骤：
一、样品处理
1.组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提
取液）进行冰浴匀浆。12000rpm，4℃离心15min，取上清，置冰上待测。
2.细菌、真菌：按照细胞数量（10
4
个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加
入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后12000rpm，
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4℃，离心15min，取上清置于冰上待测。
3.体液和培养液等其它液态样品：直接测定。
二、测定步骤和操作表
对照管
样品（µL）
试剂一（µL）
试剂二（µL）
试剂三（µL）
250
250250
400
测定管
400
250
混匀，室温静置15min，以对照管调零，1mL玻璃比色皿，测定A550。
三、NO含量计算
标准曲线回归方程为：y=0.016x-0.0103，R
2
=0.9986
1、组织样品：
NO含量定义：25℃时，每克样品或每毫克蛋白15min生成1µmoLNO
2
-
，相当于1µmoLNO。
（1）按样本质量计算
NO含量（µmoL/g）=（A
550
+0.0103）÷0.016×V反总÷（V样÷V样总×W）×10
=0.14×（A
550
+0.0103）÷W
（2）按样本蛋白浓度计算
NO含量（µmoL/mgprot）=（A
550
+0.0103）÷0.016×V反总÷（V样×Cpr）×10
=0.14×（A
550
+0.0103）÷Cpr
2、其他样品：
NO含量定义：25℃时，每升样品15min生成1µmoLNO
2
，相当于1µmoLNO。
NO含量（µmoL/L）=（A
550
+0.0103）÷0.016×V反总÷V样
=140×（A
550
+0.0103）
V反总：反应总体积，0.9mL；
V样总：加入提取液体积，1mL；
V样：反应中样品体积，0.4mL；
W：样品质量，g；
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Cpr：蛋白浓度，mg/mL
注意事项：
1.试剂盒2-8℃保存。
2.尽量使用新鲜样品进行检测，试剂三有腐蚀性，操作时请做好防护措施。
3.若检测出得OD值在标准曲线范围外，请将样品进行适当的浓缩或稀释，并在计算公式中除以浓缩倍数
或者乘以稀释倍数。
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