2024年5月1日发(作者:孛听枫)
电泳缓冲液(10x):
Tris-Hcl:30.2g
Gly:187.7g
SDS:10g
定容至1L,稀释成1x:100ml电泳缓冲液(10x)+900ml单蒸水
电转缓冲液1x:
Tris-Hcl:3.03g
Gly:14.4
dH2O:900ml
100ml:甲醇,定容至1L
TBS(10x,1L)
Tris-Hcl:12.1g
Nacl:87.7g
调节pH至7.6,用时稀释10倍,加1ml Tween 20,即:TBST=100ml(10x TBS)
+900ml dH2O+1ml Tween 20容量为1L
5x SDS-page蛋白凝胶上样缓冲液(10ml)
1M Tris-Hcl:0.6ml
10% SDS:2ml
甘油:2.5ml
Beta-巯基乙醇:0.5ml
溴酚蓝:0.01g(先溶于4.4ml水中)
ddH2O:4.4ml
Western blot
样品制备以及蛋白质定量
1. 取冰,将4°C离心机提前降温。
2. 将死细胞收集到离心管:孔板内的细胞用PBS洗1-2遍,用适量的胰酶消化,用离
心管内的原培养液将孔板内细胞吹打下来,收集到离心管,室温离心1000rpm,5min。
2024年5月1日发(作者:孛听枫)
电泳缓冲液(10x):
Tris-Hcl:30.2g
Gly:187.7g
SDS:10g
定容至1L,稀释成1x:100ml电泳缓冲液(10x)+900ml单蒸水
电转缓冲液1x:
Tris-Hcl:3.03g
Gly:14.4
dH2O:900ml
100ml:甲醇,定容至1L
TBS(10x,1L)
Tris-Hcl:12.1g
Nacl:87.7g
调节pH至7.6,用时稀释10倍,加1ml Tween 20,即:TBST=100ml(10x TBS)
+900ml dH2O+1ml Tween 20容量为1L
5x SDS-page蛋白凝胶上样缓冲液(10ml)
1M Tris-Hcl:0.6ml
10% SDS:2ml
甘油:2.5ml
Beta-巯基乙醇:0.5ml
溴酚蓝:0.01g(先溶于4.4ml水中)
ddH2O:4.4ml
Western blot
样品制备以及蛋白质定量
1. 取冰,将4°C离心机提前降温。
2. 将死细胞收集到离心管:孔板内的细胞用PBS洗1-2遍,用适量的胰酶消化,用离
心管内的原培养液将孔板内细胞吹打下来,收集到离心管,室温离心1000rpm,5min。