2024年9月8日发(作者：訾鹏程)
磷酸缓冲溶液PB的配制
1.用NaH2PO4和Na2HPO4配置体积1L 浓度0.05mol/L PH7.8的磷酸缓冲液 ,需要NaH2PO4
和Na2HPO4各多少克?写出解题方法和缓冲液配置过程。用NaH2PO4和Na2HPO4配置体积
1L 浓度0.05mol/L PH7.8的磷酸缓冲液 ,需要NaH2PO4和Na2HPO4各多少克?
写出解题方法和缓冲液配置过程
设NaH2PO4磷酸二氢钠, Na2HPO4磷酸氢二钠浓度分别为c1,c2mol/L.
由题意,c1+c2=0.05
再根据缓冲溶液ph计算公式：pH=pKa+lg(c碱/c酸)可得7.2+lg(c2/c1)=7.8
其中7.2是磷酸二氢根的pKa值,7.8是溶液的pH值.
联立解得c1=0.01,c2=0.04
所以磷酸二氢钠质量为0.01 * 120.0 = 1.20 克 m=nM=cvM
磷酸氢二钠质量为0.04 * 142 .0= 5.68 克
称取1.20克无水磷酸二氢钠(或1.38克一水磷酸二氢钠,1.56克二水磷酸二氢钠M156.01)
和5.68克无水磷酸氢二钠（或10.72克七水磷酸氢二钠,14.32克十二水磷酸氢二钠
M358.14）,置于烧杯中,加少量蒸馏水溶解.固体全部溶解后,将溶液转移到1000毫升容量瓶
中.用蒸馏水润洗溶解用的烧杯三次,润洗后的水也加入到容量瓶中,定容,即得。
2.
ph 7.40 磷酸盐缓冲溶液中一磷酸氢根和磷酸二氢根的比值
由反应式：
H2PO4 - = HPO4 2- + H+
即此缓冲溶液中的缓冲对是：H2PO4 - ~ HPO4 2-
计算式是：
pH = pKa2( H2PO4 -) - lg c( H2PO4 -) / c(HPO4 2- )
查得磷酸的二级电离常数 ：pKa2 = 7.20代入上式：
7.4 = 7.2 - lg c( H2PO4 -) / c(HPO4 2- )
c( H2PO4 -) / c(HPO4 2- ) = 0.63
磷酸缓冲溶液PBS的配制
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。以下是总结：
母液的配制：
0.2M Na
2
HPO
4
：称取 71.6g Na
2
HPO
4•
12H
2
O，溶于 1000mL水
0.2M NaH
2
PO
4
：称取 31.2g NaH
2
PO
4•
2H
2
O，溶于1000mL水
各种浓度PBS(pH=7.4)的配制：
先配 0.2M PBS (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的 NaH
2
PO
4
，81ml 0.2mol/L 的
Na
2
HPO
4
, 即可。
然后，只需将0.2M PBS (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可。如：
0.1M PBS（pH=7.4） ：取 500ml 0.2M PBS，加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PBS（pH=7.4）：取50ml 0.2M PBS，加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PBS（pH=7.4）：取100ml 0.2 M PBS，加水稀释至 1000ml 即可。
若需要NaCl的话，加入NaCl至0.9%（g/100mL）生理盐水即可。
另：其它各种PH值的 0.2M PBS(100mL)配方:
pH
5.7
5.8
5.9
6.0
6.1
6.2
6.3
6.4
6.5
6.6
6.7
6.8
6.9
7.0
7.1
7.2
7.3
7.4
7.5
7.6
7.7
7.8
7.9
8.0
0.2M NaH
2
PO
4
（mL）
93.5
92
90
87.7
85
81.5
77.5
73.5
68.5
62.5
56.5
51
45
38
33
28
23
19
16
13
10.5
8.5
7
5.3
0.2M Na
2
HPO
4
（mL）
6.5
8
10
12.3
15
18.5
22.5
26.5
31.5
37.5
43.5
49
55
62
67
72
77
81
84
87
89.5
91.5
93
94.7
2024年9月8日发(作者：訾鹏程)
磷酸缓冲溶液PB的配制
1.用NaH2PO4和Na2HPO4配置体积1L 浓度0.05mol/L PH7.8的磷酸缓冲液 ,需要NaH2PO4
和Na2HPO4各多少克?写出解题方法和缓冲液配置过程。用NaH2PO4和Na2HPO4配置体积
1L 浓度0.05mol/L PH7.8的磷酸缓冲液 ,需要NaH2PO4和Na2HPO4各多少克?
写出解题方法和缓冲液配置过程
设NaH2PO4磷酸二氢钠, Na2HPO4磷酸氢二钠浓度分别为c1,c2mol/L.
由题意,c1+c2=0.05
再根据缓冲溶液ph计算公式：pH=pKa+lg(c碱/c酸)可得7.2+lg(c2/c1)=7.8
其中7.2是磷酸二氢根的pKa值,7.8是溶液的pH值.
联立解得c1=0.01,c2=0.04
所以磷酸二氢钠质量为0.01 * 120.0 = 1.20 克 m=nM=cvM
磷酸氢二钠质量为0.04 * 142 .0= 5.68 克
称取1.20克无水磷酸二氢钠(或1.38克一水磷酸二氢钠,1.56克二水磷酸二氢钠M156.01)
和5.68克无水磷酸氢二钠（或10.72克七水磷酸氢二钠,14.32克十二水磷酸氢二钠
M358.14）,置于烧杯中,加少量蒸馏水溶解.固体全部溶解后,将溶液转移到1000毫升容量瓶
中.用蒸馏水润洗溶解用的烧杯三次,润洗后的水也加入到容量瓶中,定容,即得。
2.
ph 7.40 磷酸盐缓冲溶液中一磷酸氢根和磷酸二氢根的比值
由反应式：
H2PO4 - = HPO4 2- + H+
即此缓冲溶液中的缓冲对是：H2PO4 - ~ HPO4 2-
计算式是：
pH = pKa2( H2PO4 -) - lg c( H2PO4 -) / c(HPO4 2- )
查得磷酸的二级电离常数 ：pKa2 = 7.20代入上式：
7.4 = 7.2 - lg c( H2PO4 -) / c(HPO4 2- )
c( H2PO4 -) / c(HPO4 2- ) = 0.63
磷酸缓冲溶液PBS的配制
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。以下是总结：
母液的配制：
0.2M Na
2
HPO
4
：称取 71.6g Na
2
HPO
4•
12H
2
O，溶于 1000mL水
0.2M NaH
2
PO
4
：称取 31.2g NaH
2
PO
4•
2H
2
O，溶于1000mL水
各种浓度PBS(pH=7.4)的配制：
先配 0.2M PBS (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的 NaH
2
PO
4
，81ml 0.2mol/L 的
Na
2
HPO
4
, 即可。
然后，只需将0.2M PBS (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可。如：
0.1M PBS（pH=7.4） ：取 500ml 0.2M PBS，加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PBS（pH=7.4）：取50ml 0.2M PBS，加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PBS（pH=7.4）：取100ml 0.2 M PBS，加水稀释至 1000ml 即可。
若需要NaCl的话，加入NaCl至0.9%（g/100mL）生理盐水即可。
另：其它各种PH值的 0.2M PBS(100mL)配方:
pH
5.7
5.8
5.9
6.0
6.1
6.2
6.3
6.4
6.5
6.6
6.7
6.8
6.9
7.0
7.1
7.2
7.3
7.4
7.5
7.6
7.7
7.8
7.9
8.0
0.2M NaH
2
PO
4
（mL）
93.5
92
90
87.7
85
81.5
77.5
73.5
68.5
62.5
56.5
51
45
38
33
28
23
19
16
13
10.5
8.5
7
5.3
0.2M Na
2
HPO
4
（mL）
6.5
8
10
12.3
15
18.5
22.5
26.5
31.5
37.5
43.5
49
55
62
67
72
77
81
84
87
89.5
91.5
93
94.7