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微生物大便培养SOP文件

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2024年3月16日发(作者:革慕蕊)

1.1、标本接收筛选方案:

大便标本:采用一次性无菌杯,杯盖严密,无明显灰尘、泥土或纸屑者为合格标本。

1.2、标本预处理:

1.2.3、大便标本:取绿豆大小的粪便标本加入生理盐水制成匀浆,用接种环取一环涂

片, 观察有无脓细胞,真菌孢子及菌丝,有真菌的须接种CHROMagar念珠菌培养基,

脓细胞++以上的接种粪便选择性培养基,已经经验应用抗生素的采用改良TTC增菌液或

Na2S2O3肉汤增菌液先进行增菌。留下涂片干燥后Gram染色,观察菌群情况,注意有

无菌群失调。对于无脓细胞的标本无须进行接种。

1.3、读片:

根据人体对细菌/真菌感染在早期主要以非特异性免疫的细胞免疫为主的特点,结合标

本来源部位系统器官生理病理特点,收寻20~30个视野中脓细胞聚集处的脓细胞胞浆中有

无吞噬的细菌及细菌的染色排列特征,菌体特征(如粗细、长短、扭曲)并作记录。粪便

标本:在观察吞噬现象的同时,作好菌群比例计算,并记录(菌群比例分析参照相关文件)。

1.4、 标本接种:

1.4.3、大便标本:一般感染性腹泻的粪便标本直接接种或增菌后接种:SS、SMC、TCBS;

怀疑为金黄色葡萄球菌性食物中毒或伪膜肠炎的加HSM(高盐甘露醇培养基),怀疑为真

菌性肠炎的加CHROMagar,怀疑为伪膜性肠炎的应作厌氧菌培养分离艰难梭菌。

1.5、读板:

1.5.2、大便:

①沙门菌:SS:中心黑色之乳糖阴性菌落(亚利桑拉群可以为阳性),SMC: 红色菌落

②志贺菌:SS、SMC均为无色透明之乳糖阴性菌落

③O-157大肠埃希菌:SS:为红色乳糖阳性菌落,SMC为无色透明之山梨醇阴性菌

▲其他致病性大肠埃希菌多数为:SS、SMC均为红色

▲其中A-D大肠埃希菌在SS上可能为无色菌落 ④霍乱弧菌:SS:无色菌落,TCBS:

黄色大菌落

▲其他弧菌:SS、TCBS均为无色或淡绿色菌落 ⑤小肠结肠耶尔森菌:SS为无色小

菌落,SMC为红色牛眼状小菌落 ⑥气单胞菌:所有气单胞菌转种血琼脂均呈现β溶血

▲嗜水气单胞菌,SS红色菌落,TCBS为黄色,SMC无色之大菌落

▲其他气单胞菌:SS无色菌落,TCBS为黄色,SMC无色之大菌落

⑦邻单胞菌:SS、TCBS及SMC均为无色菌落。

1.6、鉴定(在读碟的基础上进行)

① G+co:

2024年3月16日发(作者:革慕蕊)

1.1、标本接收筛选方案:

大便标本:采用一次性无菌杯,杯盖严密,无明显灰尘、泥土或纸屑者为合格标本。

1.2、标本预处理:

1.2.3、大便标本:取绿豆大小的粪便标本加入生理盐水制成匀浆,用接种环取一环涂

片, 观察有无脓细胞,真菌孢子及菌丝,有真菌的须接种CHROMagar念珠菌培养基,

脓细胞++以上的接种粪便选择性培养基,已经经验应用抗生素的采用改良TTC增菌液或

Na2S2O3肉汤增菌液先进行增菌。留下涂片干燥后Gram染色,观察菌群情况,注意有

无菌群失调。对于无脓细胞的标本无须进行接种。

1.3、读片:

根据人体对细菌/真菌感染在早期主要以非特异性免疫的细胞免疫为主的特点,结合标

本来源部位系统器官生理病理特点,收寻20~30个视野中脓细胞聚集处的脓细胞胞浆中有

无吞噬的细菌及细菌的染色排列特征,菌体特征(如粗细、长短、扭曲)并作记录。粪便

标本:在观察吞噬现象的同时,作好菌群比例计算,并记录(菌群比例分析参照相关文件)。

1.4、 标本接种:

1.4.3、大便标本:一般感染性腹泻的粪便标本直接接种或增菌后接种:SS、SMC、TCBS;

怀疑为金黄色葡萄球菌性食物中毒或伪膜肠炎的加HSM(高盐甘露醇培养基),怀疑为真

菌性肠炎的加CHROMagar,怀疑为伪膜性肠炎的应作厌氧菌培养分离艰难梭菌。

1.5、读板:

1.5.2、大便:

①沙门菌:SS:中心黑色之乳糖阴性菌落(亚利桑拉群可以为阳性),SMC: 红色菌落

②志贺菌:SS、SMC均为无色透明之乳糖阴性菌落

③O-157大肠埃希菌:SS:为红色乳糖阳性菌落,SMC为无色透明之山梨醇阴性菌

▲其他致病性大肠埃希菌多数为:SS、SMC均为红色

▲其中A-D大肠埃希菌在SS上可能为无色菌落 ④霍乱弧菌:SS:无色菌落,TCBS:

黄色大菌落

▲其他弧菌:SS、TCBS均为无色或淡绿色菌落 ⑤小肠结肠耶尔森菌:SS为无色小

菌落,SMC为红色牛眼状小菌落 ⑥气单胞菌:所有气单胞菌转种血琼脂均呈现β溶血

▲嗜水气单胞菌,SS红色菌落,TCBS为黄色,SMC无色之大菌落

▲其他气单胞菌:SS无色菌落,TCBS为黄色,SMC无色之大菌落

⑦邻单胞菌:SS、TCBS及SMC均为无色菌落。

1.6、鉴定(在读碟的基础上进行)

① G+co:

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