2024年4月10日发(作者：侍幻翠)
OD260:OD280比值的应用
当你辛辛苦苦纯化出蛋白，准备下一步的实验时，如果后续实验的反应体系中涉及到
DNA或RNA或寡核苷酸，那么你就有必要在实验之前测定一下你的蛋白样品中是否有
核酸污染。那么，如何判断蛋白是否被核酸污染呢？用OD260:OD280比值！
Warburg和Christian（1942）提出OD260:OD280比值是蛋白制品被核酸所污染
程度的很好指标。当蛋白中掺入了核酸之后，OD260：OD280比值变化很明显，尤其是
纯的蛋白制品中掺入了一点点核酸后，变化最明显。例如：纯的蛋白样品，其OD260：
OD280比值为0.57，而掺入5%的核酸之后，该比值上升到了1.06。
但是反过来却是不成立的，即：这个比值不能用来指示核酸被蛋白污染的程度。因为
核酸在260nm和280nm处的消光系数比蛋白质高很多，即使有明显的蛋白污染也不会
大幅度改变核酸溶液的OD260：OD280比值。例如，纯的核酸的OD260：OD280比
值是2.0，当掺入了5%的蛋白质污染之后，OD260：OD280比值变成1.99，掺入20%
的蛋白质污染后，也才变成1.96。这就说明这个比值用来指示核酸被蛋白污染的程度是
非常不灵敏的。
从下面这个表中就可以明显看出来。
蛋白质／％ 核酸／％ OD260:OD280
100 0 0.57
95 5 1.06
90 10 1.32
85 15 1.48
80 20 1.59
75 25 1.67
70 30 1.73
65 35 1.78
60 40 1.81
55 45 1.84
50 50 1.87
45 55 1.89
40 60 1.91
35 65 1.93
30 70 1.94
2024年4月10日发(作者：侍幻翠)
OD260:OD280比值的应用
当你辛辛苦苦纯化出蛋白，准备下一步的实验时，如果后续实验的反应体系中涉及到
DNA或RNA或寡核苷酸，那么你就有必要在实验之前测定一下你的蛋白样品中是否有
核酸污染。那么，如何判断蛋白是否被核酸污染呢？用OD260:OD280比值！
Warburg和Christian（1942）提出OD260:OD280比值是蛋白制品被核酸所污染
程度的很好指标。当蛋白中掺入了核酸之后，OD260：OD280比值变化很明显，尤其是
纯的蛋白制品中掺入了一点点核酸后，变化最明显。例如：纯的蛋白样品，其OD260：
OD280比值为0.57，而掺入5%的核酸之后，该比值上升到了1.06。
但是反过来却是不成立的，即：这个比值不能用来指示核酸被蛋白污染的程度。因为
核酸在260nm和280nm处的消光系数比蛋白质高很多，即使有明显的蛋白污染也不会
大幅度改变核酸溶液的OD260：OD280比值。例如，纯的核酸的OD260：OD280比
值是2.0，当掺入了5%的蛋白质污染之后，OD260：OD280比值变成1.99，掺入20%
的蛋白质污染后，也才变成1.96。这就说明这个比值用来指示核酸被蛋白污染的程度是
非常不灵敏的。
从下面这个表中就可以明显看出来。
蛋白质／％ 核酸／％ OD260:OD280
100 0 0.57
95 5 1.06
90 10 1.32
85 15 1.48
80 20 1.59
75 25 1.67
70 30 1.73
65 35 1.78
60 40 1.81
55 45 1.84
50 50 1.87
45 55 1.89
40 60 1.91
35 65 1.93
30 70 1.94