2024年3月7日发(作者：笃景辉)

-2576

-中国老年学杂志2021年7月第41卷-基础研究•阿霉素致大鼠慢性心力衰竭模型建立张译心42纪凤兰2王鑫2王晓42刘博2温富春2

丁涛2徐惠波2(1长春中医药大学，吉林长春18613；2吉林省中医药科学院)〔摘要〕目的探讨建立稳定阿霉素(ADR)致大鼠慢性心力衰竭(CHF)模型的方法及规范模型评价指标。方法

Wotar大鼠分3批，每批分为空白组(A、D、G),模型组(B、E、H),阳性药组(C、F、))。试验开始后B、C组腹腔注射ADR

05

mg/kg,2次/w,连续9w,A组同时腹腔注射同体积生理盐水3

ml/kg；C组灌胃芪苈强心胶囊4. 83

g/kg,I次/0,连续

73

0,

A组、B组同时灌胃同体积蒸馏水3

ml/kg；E、F组腹腔注射ADR

6.

4

mg/2g,I次/w,连续4

w,D组同时腹腔注射同体

积生理盐水3

ml/kg；F组灌胃芪苈强心胶囊4.

33

g/kg,I次/0,连续0-

U,D、E组同时灌胃同体积蒸馏水14

ml/kg；H组、、组

腹腔注射ADR

3.

4

mg/kgh次/w,连续8

w,G组同时腹腔注射同体积生理盐水-4

ml/kg;)组灌胃芪苈强心胶囊4.

33

g/kg,

-次/0,连续56

U,G、H组同时灌胃同体积蒸馏水3

ml/kgo试验结束后观察大鼠存活率、心功能、心脏指数、心肌组织病理形

态改变及心肌细胞凋亡情况，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测心肌组织B型利钠肽(BNP)含量,Western印迹检测心肌组织

CaShaSeC,Bcl-9,Bcq蛋白表达。结果3.

4

mg/kg

ADR组大鼠存活率高于0

5、2.

4

mg/kg

ADR组。与空白组比较，模型组左

心室收缩压(LVSDP)、左心室内压最大上升/下降速率(±dy/kt

mcp)、心脏指数均显著降低(P<4.

4-

；P<4.

45),

BNP含量显著

升高(P<4.

41)；心肌出现病理损伤,左心室心肌壁厚度显著降低(P<4.

41),心肌凋亡指数显著升高(P<2

/-),心肌组织蛋白

Casyase3、Bax表达增加(P<4.45)

,BT-2表达降低(P<4.45)，心肌细胞凋亡明显(P<4.45)。芪苈强心胶囊治疗后，各项检测

指标与模型组比较均有显著改善(均P<4.45)。结论

采用腹腔注射ADR

3.

4

mg/kg,I次/w,连续8

w的方法可制备稳定的

CHF动物模型。〔关键词〕阿霉素;慢性心力衰竭;心功能;心脏指数〔中图分类号〕R995.

0；R272.

0

〔文献标识码〕A

〔文章编号〕10552252(2021

)12257626；do：053962/jissn.40552200.252001039Study

on

the

model

of

chronic

heart

failure

induced

by

adriamycin

in

ratsZHANG

Yi-Xin,

JI

Feag-Lan,

WANG

Xin,f

al・Changchun

University

of

Traditional

Chinesn

Medicine,

Changchun

1211,

Jilin,

China[Abstract

h

Objective

Ta

estab/sh

a

moPci of

chrosic

heart

failure

induced

bp

ab/amycik

anO

to

stanOaOize

the

evaluatiosindex

of

the

mohei.

Methodt

Wistar

rats

were

OivideO

into

three

gyups,

each

gyup

was

OiviOeO

into

blank

gyup

(

A

,

D

,

G)

,

mohei

gyup

(

B

,

E

,

H)

,

anO

positive

drup

(

/

,

F

,

I)

.

After

the

start

of

the

expe/oeot：

ayup

B

anO

ayup

/ were

intrape/toseally

injected

with

ab/amycik

-.

3

mg/kg

twice

a

weed

far

0

cossecutive

weeds,

while

group

A

was

intraye/pseally

injected

with

3 ml/kg

oormai

salike

of

the

same

volume.

Group

/

was

giveo

4.

83

g/kg

qi/qiapyxio

caysulo

osce

a

Oap

far

73

cossecutive

Oays.

Group

A

anO

group

B

were

giveo

3

ml/kg

of

Uisk/ed

water

of

the

same

volume

；

Group

E

anO

gohp

F

were

inWaye/Osevlly injected

with

ab/amycik

6.

4

mg/kg

osce

a weed

far

4

weeds,

while

group

D

was

intraye/pseally

injected

with

3 ml/kg

oormai

salike

of

the

same

volume.

Group

F

was

giveo

4.

33

g/kg

qi/qianyxio

caysulo

osce

a

Oap

far

0-

cossecutive

Oays.

Group

D

anO

goup

E

were

giveo

3 ml/kg

of

Oisk/ed

water

of

the

same

volume.

Ad/amycio

was

intrape/toseally injected

into

group

H

anO

group

I

at

3. 4

mg/kg osce a

weed

far

8

cossecutive

weeds.

Meanwh/e, 14

ml/kg

of

oormai

salioc

of

the

same

volume

was

inWaye/Osevlly

injected

into

group

G.

Goup

I was

giveo

4.

83

g/kg

qi/qiapyxio

capsule

osce

a

Oap

far

50

cossecutive

Oays.

Group

g

and

group

H were

giveo

3

ml/kg

of

Oisk/ed

water

of

the

same

volume.

After

the

eod

of

the

expe/oeot,

the

survival

op,

carOiac

fuoctios

,

carOiac

weight

OUex,

pathological

changes

of

myocarOial

tissue

anO

myocarOial

cell

apopPsis

were

ohseyeO.

The

costeot

of

B-ppe

oatriuretic

peptiUe

(

BNP

/

was

OePcPd

bp

ELISA

,

anO

the

pypiu

expyssioss

of

Caspase3

,

Bex

anO

BT-0

were

Oetecpd

bp

Western

blot.

Resnlts

The

survival

rates

of

rats

io

the

3.

4

mg/kg

group

were

higher thao

those

iu

the

1.3

mg/kg and

6.

4

mg/kg

groups.

CompareU

with

the

costrai

group

,

LVSP

,

土dp/

Ot

Mcx

anO

carUiac

weight

index

iu

the

3. 4

mg/kg

mohei

group

were

sionificaptly

lower

(P<1 4-

ar

P<<.

45/

,

while

BNP

costext

was

sionifican/y

higher

(P<4.

4-

/ :

The

myocardium

was

pathologically

Uamaaed.

The

thichoess

of

left

vextocular

myocarUial

wall

was

sig)基金项目:国家重大新药创制专项(2618ZX60711061-960-965)通信作者:徐惠波(365-),女，主任药师，硕士生导师，主要从事中药基础及应用开发研究。第一作者:张译心(394-),女，硕士在读,主要从事动物模型的制备研究。

张译心等

阿霉素致大鼠慢性心力衰竭模型建立

第12期•

2577

•nificaztly

decreased

(

P<2.

6)

1

,

myocardial

apopmsis

0©乂

was

siynifican/y

iocoased

(

P<2.

2)

)

,

the

expossCos

of

cardiac

tissue

proteios

Caspase

3

and

Bo

were

iocoased

(

P<2.

H1

,

and

the

expossioo

of

Bcl-0

was

decreased

(

P<2.

H)

,

which

promoted

the

ap­optosis

of

myocardial

cells.

By

positive

druu

qiCqianyxiu

capsule

Deatmext,

compared

with

the

mobei

youp,

the

test

indicators

haO

beex

siynificazhy

improved.

Conclusions

SwOW

azimai

mobels of

chrooic

heart

failure

were

popaon

by

inDape/mpeal

injeckoo

ofUoxoruUiciu

3.6

ms/0g

ooce

a

weed

for

8

weeds.

The

mobei

could

be

evaluated

objectively

by

detecting

cardiac

funckoo,

cardiac

mass

匚(乂，0BNP

coxtext

and

myocardial

pathologicai

chazyes.【Key

words]

DoxoruUiciu;Chrooic

heart

failure；Cardiac

fuoctiox;Cardiac

indey慢性心力衰竭（CHF）常见于各种心血管疾病

WLL2017D02。的终末期阶段，是一种具有高患病率和高死亡率的

1.2仪器

多导生物记录仪（AD仪器公司产品），

酶标仪（BcTed仪器有限产品、，紫外分光光度计

临床常见病⑴。阿霉素（ADR）属于蔥醌类药物，是

临床常用的一种高效肿瘤化疗药物，长期使用可损

害机体的心肌组织,具有严重的心脏毒性，引发剂量

依赖性不可逆的心肌损害和CHF2"〕，因此ADR致

大鼠CHF动物模型已经成为基础研究中常采用的

动物模型。虽然该模型应用的文献报道很多，但方

法不一，多种多样,也无统一的评价标准,本实验通

过采用ADR不同的造模方法，建立稳定的大鼠CHF

模型，并以治疗CHF的阳性药罠苈强心胶囊对造模

结果进行验证，旨在建立一种稳定可重复的ADR诱

导CHF动物模型,并规范模型评价指标，为该模型

在药理学研究中更好应用提供方法学依据。1材料与方法1.1

药物与试剂

ADR：批号：2703E3、1909E2,由

深圳万乐药业有限公司经销;罠苈强心胶囊:批号:

A207004,由石家庄以岭药业股份有限公司经销。注射用生理盐水购自吉林康乃尔药业有限公

司；乌来糖购自国药集团化学试剂有限公司;肝素钠

购自北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司；甲醛购

自天津市北联精细化学品开发有限公司；甲醇购自

北京化工厂;二喹咻甲酸（BCA）总蛋白定量测试盒

购自南京建成生物工程研究所;B型利钠肽（BNP）、

酶联免疫吸附试验（ELCA、试剂盒购自RD公司；

RIPA、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-

PAGE）上样缓冲液、T/s液、TBST均购自康为世纪

生物科技有限公司；GAPDH（G-9）IgG2、B细胞淋巴

瘤（Bel）

-0（

CD

/

IgG2、Bci-0

相关

X

蛋白（Boe）

（B-

2）1gG2b>Casyasa-3（C-0）1gG0o

均购自

Santo

Cruz

公

司；TUNEL试剂盒购自美国Rocha公司。1.2动物

健康7周龄SPF级WCtar大鼠,雌雄均

可，体重（220±20）g,购自长春市亿斯实验动物技术

有限责任公司J

SCXK（吉）D016D003〕,饲养于吉林

省中医药科学研究院屏蔽环境动物室〔SYXK（吉）

2015-0009〕，本实验经过吉林省中医药科学院动物

伦理委员会批准实施，伦理审批号JLSZKYD-（上海元析仪器有限公司产品），高速冷冻离心机

（安徽中科中佳科学仪器有限公司产品），六一电泳

仪（北京市六一仪器厂产品），Imager（

U/ro-EioWi

PoPucis

LW产品），石蜡切片机及石蜡包埋机（德国

Leicu公司产品），光学显微镜（日本Olympus公司

产品），图像分析系统（日本NIKON公司产品）。1.2造模与分组

WCtar大鼠150只,试验分3批

进行，每批均分空白组、模型组、阳性药组，随机分

组，共计9组。具体分组、造模及给药方法如下：第一批,ADR注射量为2.

0

mg/kg：试验分为空

白组（A组）17只,模型组（B组）24只，阳性药组（C

组）24只。试验开始后B组、C组腹腔注射ADR

2.0

mg/kg,次/w,连续9

w,

A组同时腹腔注射同

体积生理盐水17

mWkg;C组灌胃罠苈强心胶囊

0.

37

g/kg,《次/d,连续47

d,

A组和B组同时灌胃

同体积蒸馏水2

ml/0go第二批,ADR注射量为0.

0

mg/kg：试验分为空

白组（D组）10只，模型组（E组）25只，阳性药组（F

组）24只。试验开始后E组、F组腹腔注射ADR

0.

0

mg/kg,I次/w,连续18

w,D组同时腹腔注射同

体积生理盐水17

mWkg;C组灌胃罠苈强心胶囊

0.

37

g/kg,I次/d,连续92

d,D组、E组同时灌胃同

体积蒸馏水10

mWkgo第三批,ADR注射量为7.

0

mg/kg：试验分为空

白组（G组）13只,模型组（H组）24只，阳性药组（

组）24只。试验开始后H组、、组腹腔注射ADR

3.0

mg/kg,I次/w,连续8

w,G组同时腹腔注射同

体积生理盐水17

mWkg；I组灌胃罠苈强心胶囊

0.

37

g/kg,2次/d,连续56

d,G组、H组同时灌胃同

体积蒸馏水10

mWkgo1.2存活率计算各组记录初始动物数，试验结束

后记录各组存活动物数，计算各组动物的存活率。1.2心功能检测

末次给药后30

min,各组随机选

取2只大鼠，称重，腹腔注射乌来糖（2.2

g/kg、

2

mWky）麻醉，仰卧固定，右侧颈总动脉插管经压

•

2578

•中国老年学杂志2021年7月第41卷力换能器接生理记录仪，记录心率、收缩压（SBP）、

舒张压（DBP）后，继续将导管插至左心室，记录左心

室收缩末期压力（LVESP）、左心室舒张末期压力

2

结

果2.1

ADR致大鼠CHF对存活率的影响

A组存活

率为

10%

（12/1）

,D组存活率为01.07%

（11/

（LVEDP）、左心室内压最大上升/下降速率（土dy/dt

muc）

°1.2心脏指数测定心功能检测结束后，去除腹腔

2、，G组存活率为10%

（18/18

）

；

C组存活率为

62.

5%

（17/20），组存活率为

62.

5%

（17/20）

,1

组

内腹水后再次称重,计算腹水重量=体重-去腹水体

存活率为91.

7%

（22/24）

；

B组存活率为70.

58%

（17/24）

,

E组存活率为6& 00%

（17/25）

,

H组存活

率为37.90%

（21/24）,即模型组存活率：H组>B

重;取心脏,去除非心肌组织,洗净血液,滤纸吸干水

分,称全心重量。计算心脏指数（HW/BW）=全心

重量/体重。1.2心肌组织中BNP含量检测

每组随机选取1

组〉E组，说明8.

0

my/hy剂量组模型的制备动物存

活率较高。2.2

ADR致大鼠CHF对心功能的影响

ADR

只大鼠，腹主动脉取血，经8

000

Omic离心17

min,

分离血清，-80%：保存备用。ELISA检测血清中

1.

9

mghy组:与A组相比，B组心率、SBP显著下

BNP的含量。1.2心肌组织苏木素-伊红（HE）染色观察

每组

降，-dy/dt

muc有降低趋势，LVEDP显著升高（P<

0.01）,LVESP、+dy/dt

muc

显著降低（P<0.01）；与

B组相比，C组心率、SBP、LVESP均显著升高（P<

随机选取若干只大鼠,摘取心脏,称重后,将部分心

肌组织固定于1%甲醛溶液中,HE染色，光镜下心

肌细胞形态学观察,并测量心室壁厚度°0.01；P<0.

05）

°ADR

2.0

my/ky组：与D组相比,E组SBP和

1.10心肌组织凋亡率检测各组随机选取8只大

鼠，摘取心脏，将部分心肌组织固定于12%甲醛溶

LVESP

显著降低（P<0.

01

；P<0.

05）

,

LVEDP

显著升

高（P<0.

05）,

DBP有升高的趋势，土dy/dt

muc有降

低趋势（P>0.

05）；与E组相比，F组SBP、DBP、

LVESP、土dy/dt

max均显著升高（P<0.

01

,P<0.

05）,

液中，进行TUNEL染色，观察心肌细胞凋亡情况，计

算凋亡率。1.11心肌组织中相关蛋白的检测动物采血后，

取部分心肌组织,-80%保存备用,通过Wekeo印

LVEDP

显著降低（P<0.

05）

°ADR

/

0

my/hy

组:与

G

组相比,H

组

LVESP、

土dy/dt

max均显著降低（P<0.

01；P<0.

05）,心率有

降低的趋势，DBP和LVEDP有升高的趋势（P>

迹分析心肌组织中凋亡信号通路蛋白Casyase3、

BapBciA表达的变化。1.12统计学方法

采用SPSS22.

9软件统计进行t

0.05）；与H组相比6组心率和LVESP显著增加

（P<0.

05），土dp/dt

muc

增加（P<0.

05），见表

1

°检验。表1

ADR致大鼠CHF对心功能的影响（亍=

2）组别LVESPmmHgs)LVEDP(

mmHgs)

+dp/5-

muc(

mmHgs)

-dp/5-

muc(

mmHgs

-心率（次/min

-SBP(

mmHg

-DBP(

mmH//组160.

00±17.

2012.

68±15.

067159.

18±18.

7153-22.

42±5.21-15.

22±8.

56117 554.

58±e44.

986

98.

01±1

426.

825

905.59±955.655 798.

2/±1

110.77-5 229.

15±969.

56382.

00±53.

8138.

38±1.

918.

66±18.

728.

66±20.

8399.

47±18.

48B组D组E组F组6

2/6.

07±1

137.

827-4

453.

47±91.

197339.

30±42.

067125.77±1.

8/13-4 944.

87±696.

1391.61±33.

278314.

64±12.

675

3-4

985.49±388.

82-4 603.

61

±912.

0/363.

17±48.

79146.

34±1.

92-12.

11±7.

12-12.

43

±7.

27-8.

20±7.

47/

3-17.

25±12.

0573172.

95±)5.35152.41±9.

195

385.

17±21.

192. 52±1.

38372.

92±33.

12154.

07±7. 49/

3181.34±15. 0143G组171.54±22.

0319.

02±20.

7793-14.

20±12.

076

974.

02±1

340.

037

3-5

598.

75±584.

17

3341.59±38.

98129.

27±12.

397

3115.02±12.

697

314

765.

23

±4 604.

47-9

985.

60±3

331.39358.27±56.

4712.

93

±1.

7589. 95±1.

298

8/5.

14±2

739.

0293-6 295.41±1

755.

306

3334.

31±67. 151

954.

8±4

300.

00173-8 905.

8±3 060.

817

3392.

57±55.

34173H组I组-9.

32±9.

74-8.98±11.

59159.

17±23.

5511.69±29. 1212.

38±9.01173148.

38±11.27127.

97±1.

08与

A

组比较：1)P<0.91；与

B

组比较：2)P<0.

05,3)P<0.01；与

D

组比较：4)P<0.

05,5)P<0.01；与

E

组比较：6)P<0.

05,7)P<0.01；与

G

组比较/)P<0. 05,9)P<0.

91；与

H

组比较：1)P<0.

05,11)P<0.

91,表2,表5

同2.3

ADR致大鼠CHF对心脏重量及心脏指数的

影响

ADR

1.

9

mghy组:与A组相比,B组体重和

有升高的趋势（P>0.05）

°

ADR

2.

0

mghy组:与D

组相比,E组体重和心脏重量显著降低（P<0.

01）,

心脏重量均显著降低（P<0.

01），腹水重量和心脏指

腹水重量显著增加（P<0.01）（与E组比较,F组大

数有增加的趋势（P>0.

05）；与B组相比,C组体重

鼠体重有降低的趋势（P>0.05）O

ADR

8.0

my/hy

张译心等

阿霉素致大鼠慢性心力衰竭模型建立

第2期-2579

-组:与G组相比，H组体重、心脏重量、心脏指数均

显著升高（P<4.42）；与模型组比较，阳性药组BNP

显著降低（Pv2.2）;Pv2.

25）,腹水重量显著增加

（Pv2.

22）；与H组比较《组大鼠体重、心脏重量及

含量显著降低（P<2.

42）,见表3o表0

ADR致大鼠CHF对心脏指数的影响（丘土s,

=

12）组别体重（g）心脏重量（g）).21

±2.

26心脏指数均显著增加（Pv2.

2）

;Pv2.

25），腹水重量

显著降低（Pv2.

42）,见表0o2.4

ADR致大鼠CHF对血清BNP含量的影响ADR

）.5

mg/gg组:空白组与模型组比较无显著差

腹水重量（g）心脏指数（％）2. 92±3.

63A组543.

42±27.

30C组32).28±33.422.

107

±2.

0892.

239

±2.

2202.

242±2.

2162.

232±2.

2172.

222±2.

2152.32±2.

222B

组

207. 22±35.0)2)2.

71

±2.

21128.

82±22.

2627.

63

±12.

222. 25

±3.

072.

77

±2.

1)).27

±2.

1)异（P〉2.

25），与模型组比较，阳性药组BNP含量显

著降低（PV2.2））。ADR

2.4

mg/kg组：与空白组比

较,模型组BNP含量显著升高（P<2.4））;与模型组

D组553.

34±42.

42E

组

203.

93±25.

296)

2.

65±2.

080)32.

63±12.

406)2.

222±2.

217F组275.

2±32.

75G组345.

91

±24.

422.

61

±2.

082.

96

±2.

2727.

31

±15.

636.

13±).58比较，阳性药组BNP含量显著降低（PV2.25）。

ADR

3.

4

mg/kg组:与空白组比较,模型组BNP含量

H

组 216.

65±12.

260)

2.

43±2.

270)2).03±8.3)9)2.

292±2.

2258

1I

组

234.69±l).78n)2.

76±2.

O812)2.53±3.

8612)2.

322±2.

23217

1表9

ADR致大鼠CHF对血清BNP含量及左心室壁厚度的影响（x±^,

=

14,pg/ml）组别空白组模型组BNP(pg/ii)左心室壁厚度（pjn

）3.

2

is/kg425.78±4).9)1.

5

ig/kg2.

2

is/kg822.

52±92.

331128.

22±92.

20411.

5

ig/kg3

152.

63

±529.

252.

2

ig/kg3.

2

is/kg925.

02±135.46840.

32±22.

28749.

52±92.

87912

933.

52±419.

422

322.

24±185.

4912

215.

53±367.

162

242.

47±257.

3)1

617.

32±252. 384

11

798.

29±162.

230)75).92±62.

1541613.43±32.

369

12

355.44±227.492)1

617.

32±252.

38阳性药组974.

52±137.

6771与空白组比较：1）

P<2.

25

9）P<2.

2）；与模型组比较：3）

P<2. 25

9）P<2.

2）,表4同12

ADR致大鼠CHF对左心室壁厚度的影响

ADR

）.5

mg/kg组:与空白组比较，模型组左心室壁

厚度降低（PV2.25）。ADR

0.

4

mg/kg组:与空白组

比较，模型组左心室壁厚度显著降低（PV2.21）;

ADR

3.

4

mg/kg组:与空白组比较，模型组左心室壁

厚度显著降低（P<4.42）;与模型组比较，阳性药组

左心室壁厚度显著增加（Pv2.

25）,见表3o19

ADR致大鼠CHF对心肌组织形态学的影响HE染色结果显示：ADR

）.5

mg/kg组：A组心肌

细胞排列紧密，心肌间质可见轻微水肿、疏松;B组

心肌细胞体积变小，左心室壁厚度明显变薄,心肌间

质可见水肿;C组大鼠左心室壁变薄,心肌间质疏松

区域减少。ADR

0.

4

mg/kg组：D组可见局部少量

心肌间血管充血;E组左心室壁变薄,心肌间质可见

明显水肿、疏松;F组大鼠左心室壁变薄，心肌间质

水肿、疏松程度减轻。ADR

3.

2

mg/kg组:G组心肌

纤维排列规整,细胞核多位于肌纤维中央，心肌间质

C组

F组

I组未见渗出、未见水肿，心肌内血管未见扩张充血，心

图1

ADR致大鼠CHF对心肌组织形态学的影响（HE,x204）内膜、外膜亦未见炎细胞浸润；H组心肌细胞变性、

水肿;心肌间质间隙扩大;心肌纤维染色不均;左心

室壁厚度明显变薄,左心室腔变大;乳头肌处心肌纤

2.7

ADR致大鼠CHF对心肌组织凋亡指数的影

响分别与各自空白组比较，ADR

）.5、2.

2、

3.

2

mg/kg模型组心肌细胞凋亡指数均显著升高

（P<2.

2） ;Pv2.

25）;与模型组比较,）.5

mg/kg

阳性

药组心肌细胞凋亡指数有降低趋势（P〉2.

25）

,0.

2、

维变性明显,呈典型的心肌病改变，心外膜可见炎细

胞浸润;）组心肌典型的心肌病改变，心肌细胞变

性、水肿;心肌间质间隙扩大;血管扩张,心肌纤维染

色不均的程度有所减轻，见图）o3.

2

mg/kg阳性药组心肌细胞凋亡指数显著降低

-2584

-中国老年学杂志2221年7月第41卷（Pv4.

45

）o2

2

ADR致大鼠CHF对心肌组织凋亡相关蛋白

表达的影响

ADR

-.

5

mg/kg组，与A组比较,B组

TUNEL染色显示，ADR

-.5

mg/kg组：A组凋

亡细胞数较少，凋亡阳性细胞呈深棕色;B组深棕色

Bcl-9显著降低，Bax、Caspasc-3显著升高（均P

<4.45）

；与B组比较，C组Bcl-9组显著升高（P<

凋亡阳性细胞散在分布在未凋亡的心肌细胞间；C

组可见极少见的呈深棕黄色阳性染色的细胞分布在

正常心肌细胞间，观察视野内凋亡阳性染色细胞数

量极少；ADR

6.

4

mg/kg组:D组散在分布的深棕色

4.1）

,Bax

显著降低（Pv4.

45）。ADR 0.4

mg/kg

组，与D组比较,E组Bcl-9显著降低,BgpACasyasc-

3显著升高（均PV4.

/-）;与E组比较,F组Bci-2显

凋亡阳性细胞数较少;E组可观察到视野内呈深棕

著升高（Pv/./l）

,Bax

显著降低（PV4.45）。ADR3

.

4

mg/kg

组，与

G

组比较，H

组

BaxACaspasc-3

显

色凋亡阳性细胞分布增加；F组可见数个呈深棕黄

色阳性染色的细胞分布，观察视野内凋亡阳性染色

著升高,Bcl-9显著降低（均P<4.

45）；与H组比较,

细胞数量减少;ADR3.4

mg/kg组:G组可见极少见

的呈深棕黄色阳性染色的细胞分布在正常心肌细胞

间,观察视野内凋亡阳性染色细胞数量极少;H组可

见数个呈深棕黄色阳性染色的细胞分布，观察视野

内凋亡阳性染色细胞数量增加6组可见数个呈深

棕黄色阳性染色的细胞分布，观察视野内凋亡阳性

染色细胞数量减少，见表4、图6o表4

ADR致大鼠CHF对心肌组织细胞

凋亡指数的影响=

1）组别1.

5

mg/kg2. 4

mg/kg3.

4

mg/kg空白组2.

41

±2.

472.

29

±2.

444. 92±4.

4模型组4.

22±-.921-4.

96±4.

776

-4.

51

±2.

252

-阳性药组3.56±0

253.55±4.

738)2.

11±1.758

-1

A组

D组

G组/

:B组

E组1•1«C组

F组

图-阿霉素致大鼠CHF对心肌组织凋亡的■w

4H组I组影响（TUNEL

染色，x2（M））I组Bci-2显著升高（Pv/./l）

,Bax显著降低（P<4.45）

:Casyase-3

有降低趋势（P>4.

45

-,见图

3、

表

5

。与空白组相比：-）P<4.

45,2）P<4.

44与模型组相比：3）P<2.

45,4）

P<4.1图9

ADR致大鼠CHF对心肌组织凋亡

相关蛋白表达的影响表5

ADR致大鼠CHF对心肌组织凋亡

相关蛋白表达的影响（丘±）,=4,%）组别BT-2Caspasv-3BaxA组34.04±4.4434.04±4.0434.04±4.04B组54.54±7.

34153.52±15.0-1-35.75±9.221)C组33.75±5.468

-39.75±15.0535.04±5.36

-D组34.04±4.4434.04±4.0434.04±4.04E组73.54±7.2362165.75±2-.466

2132.25±6.546

2F组95.25±6.642)39.25±3.69119.04±6.656-G组34.04±4.4434.04±4.0434.04±4.04H组63.44±6.335

-19-.24±15.045

-34.04±3.245-I组144.44±15.3411)35.04±34.9432.04±11.023-9讨论CHF是指由各种致病因素导致的心脏结构和

功能发生异常,表现为心脏负荷过重,心肌舒缩力下

降,导致心排血量不足,引起一系列临床症状和体征

的复杂综合征〔~7〕。研究显示，心室重构是CHF发

生的基本机制。心室重构是由于心肌容量或压力负

荷过重或心肌损伤,使心肌结构和功能发生改变，从

张译心等

阿霉素致大鼠慢性心力衰蝎模型建立

第2期• 2581

•而直接导致心肌收缩和舒张功能减退、心肌纤维化

4参考文献1

Huana

MY,

Li

WW,

Wu

J,et

ad

The

diagnosPc

value

of

cioulatina

及心肌细胞凋亡等一系列病理生理变化〔〕°

ADR

与心肌具有较强的亲和性，可直接损伤心脏的结构

micro RNAs

in

head

fai/re〔J〕.

Exp

Theo

Med ,291

；

17

(3

)

:

1985­2073.和功能，累计用药可诱发心肌细胞坏死、凋亡等，导

致心室重构，严重时诱发CHFC3^17

°0

Aurigemma

GP.

Diastolic

head

fai/re-a

common

anU

lethal

conUition

bp

anp

Engl

J

Med

6706

；335

(3)

：508-12.研究表明,CHF发生的基本机制是心脏收缩和

舒张功能下降，土dy/dt

muc是反映心肌收缩和舒张

的最大速度,+dp/dt

max主要受心率及前后负荷的

9

Quiles

JL,Huedas

JR,Battino

M,et

ad AntioxiCant

000x0

anU

ab-

Oamycic

Uxicip]

J〕.

TwCco+gp,2002

；8(1)

：97-P5.4王楚盈，李玉梅，刘畅，等•附子人参有效组分配伍对阿霉素致慢

性心衰大鼠血流动力学的影响及其机制研究〔〕•中药新药与临

影响，反映左心室的收缩功能,当心肌的收缩能力下

降时，+dp/dt

muc值也下降；-dp/dt

muc反映心肌

床药理6015；26(1)

：39A3.5

Sweitzer

NK,

Airbad

S.

Neo

therabeatic

target in heart

failure:

achie­舒张时心肌纤维收缩成分延长的最大速率，反映左

心室的舒张功能，当心肌的舒张能力下降时，-dp/dt

max值也下降[12653

°

LVESP是反映左心室内压上

升时达到的最大值,LVEDP反映舒张末期的左心室

内压，心力衰竭时由于心脏收缩性减弱，LVESP降

低;由于舒张功能障碍，心室顺应性降低，导致左心

室舒张末期容积扩大，LVEDP升高。因此，常用

LVESP,LVEDP和土dy/dt

muc作为评价心肌舒缩功

能的重要指标。BNP是在心室容积扩张和压力负荷增加时，由

心肌细胞合成并从心室释放的一种神经激素。研究

表明，心力衰竭时BNP分泌迅速增加，从而延缓心

脏前负荷的增加;也可通过充盈心室减轻体液负荷

和静脉充血，进一步调节心功能障碍。由于BNP分

泌增加是在心功能障碍时突发的，不受其他因素干

扰，因此由血浆BNP水平反映心功能状态更具代表

性，常作为评价心力衰竭的金指标〔/65〕°心力衰竭导致心室重构,心肌细胞大量丢失,细

胞凋亡是心室重构致心肌细胞丢失表达的主要形

式。心力衰竭时神经内分泌系统激活，分泌物质可

诱导心肌细胞凋亡,心肌细胞减少，导致心肌收缩力

下降，心功能发生障碍,进一步加重心力衰竭〔4"8°

心力衰竭时由于心脏负荷加重，心室内压力增大导

致心肌细胞舒张变细,心室壁变薄;心肌细胞凋亡使

细胞数量减少，可进一步促进心室壁变薄。心力衰

竭时，由胶原、纤维黏连蛋白等组成的心肌细胞外基

质被破坏，出现心肌纤维化〔360〕°综上,ADR诱导CHF可导致心室重构,心脏舒

缩功能下降，心重指数下降,BNP含量升高,左心室

壁变薄，出现明显的心肌纤维化改变及心肌细胞凋

亡。8.

0

my/hy

ADR诱导CHF模型组各项指标检

测结果较1.

5

my/kg、2.

0

my/ky模型组结果更为显

著，并且造模周期短，动物存活率较高。因此，采用

腹腔注射ADR

8.

0

my/ky,1次/w,连续5

w的方法

制备大鼠CHF动物模型较理想。ving

an/ maintainina

normohalemia〔

J〕.

Cioulation

,2018 ；

157

(1)：

15312.6 Me

Cutcheon K,

Mata

P.

Left

¥6x1:009+0

remohellina

in

chronic

pri-

may

mitral

reyurgiPhon:implications

for

medical

theopy〔

J〕.

Cardio­vase

J

Ar,201

29(1)

：51-05.7金娟，崔璐，邹国良，等•参芪益心方对阿霉素诱导的慢性心力衰

竭大鼠心肌结构和细胞因子的影响〔J〕•中国实验方剂学杂志,

201；20(8)

：12322.9王学惠，刘慧兵,赵国安•神经调节蛋白10联合卡托普利对慢性

心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及相关基因表达的影响〔〕•中国病

理生理杂志

6717

；33(3)

：417A2.2吴思思，蒋维.20和Sioh在阿霉素诱导的心脏损伤中的作用

〔〕•生命科学6019

21

(7)

：605

20.2

李玉玲，杨建业,唐俊明，等•阿霉素诱导大鼠心衰模型不同方

案的比较〔〕•中国比较医学杂志,2009；1(2)

：93A.2

吴慧颖，才子斌，王芳，等•

Wioas大鼠慢性心力衰竭模型的制备

及指标判定〔〕•中国老年学杂志601222(4)

：778A2

杨宝峰，陈建国.药理学〔M〕•北京：人民卫生出版社,2015：

2/8

A3.2

金惠明.病理生理学〔M〕•第5版.北京:人民卫生出版社,

2001

：14.2

韩鹏飞，桂艺芳,鞠传余，等•联合检测H-FABP和BNP在慢性

心力衰竭患者预后及危险分层中的作用〔J〕•中国循证心血管

医学杂志,2715；9(4)：27821•2

Shawn

H,

ReyPaulk

BS,

Valentina

Canuone

MD,et

ad

DiOereatial

reyula/on

of

ANP

and

BNP

in

acute

yecompeasated

heart

failure:

de-

fiPeacy

of

ANP〔J〕.

JACC

Head

Fail,

2012

；2(

1)

：8912.2

魏玲,李慧萍，魏伟，等•慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡、心肌纤维

化及其相关性研究〔〕•西南国防医药6718;48(1)：a32•17李石清，宋洁6长春椿，等•参附注射液对慢性心衰大鼠心功能

及心肌细胞内Ca7+浓度的影响〔J〕.浙江中医杂志,2017；

52

(

6):4352702

韩额尔德木图，马月宏,王海燕，等•慢性心衰的病理生理及发

病机制研究进展〔〕〕•中西医结合心脑血管病杂志,2012；14

(12)

：14922.2

Li

I,

Zhao

Q,

Kona

W.

Extracel/las

matro

remohelina

anU

carbiac

fiboWs〔

J〕.

MatOc

Biol

,201

；1

(1)

：2-9.20

Evict

SP,

Wibiaprabj/

A.

Mast

cells:

dey

contObutou

tocarbiac

fibre-

Ws〔J〕.

At

J

MW

22

6018;2(1)

：231.〔20274746

修回〕(编辑李男)

2024年3月7日发(作者：笃景辉)

-2576

-中国老年学杂志2021年7月第41卷-基础研究•阿霉素致大鼠慢性心力衰竭模型建立张译心42纪凤兰2王鑫2王晓42刘博2温富春2

丁涛2徐惠波2(1长春中医药大学，吉林长春18613；2吉林省中医药科学院)〔摘要〕目的探讨建立稳定阿霉素(ADR)致大鼠慢性心力衰竭(CHF)模型的方法及规范模型评价指标。方法

Wotar大鼠分3批，每批分为空白组(A、D、G),模型组(B、E、H),阳性药组(C、F、))。试验开始后B、C组腹腔注射ADR

05

mg/kg,2次/w,连续9w,A组同时腹腔注射同体积生理盐水3

ml/kg；C组灌胃芪苈强心胶囊4. 83

g/kg,I次/0,连续

73

0,

A组、B组同时灌胃同体积蒸馏水3

ml/kg；E、F组腹腔注射ADR

6.

4

mg/2g,I次/w,连续4

w,D组同时腹腔注射同体

积生理盐水3

ml/kg；F组灌胃芪苈强心胶囊4.

33

g/kg,I次/0,连续0-

U,D、E组同时灌胃同体积蒸馏水14

ml/kg；H组、、组

腹腔注射ADR

3.

4

mg/kgh次/w,连续8

w,G组同时腹腔注射同体积生理盐水-4

ml/kg;)组灌胃芪苈强心胶囊4.

33

g/kg,

-次/0,连续56

U,G、H组同时灌胃同体积蒸馏水3

ml/kgo试验结束后观察大鼠存活率、心功能、心脏指数、心肌组织病理形

态改变及心肌细胞凋亡情况，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测心肌组织B型利钠肽(BNP)含量,Western印迹检测心肌组织

CaShaSeC,Bcl-9,Bcq蛋白表达。结果3.

4

mg/kg

ADR组大鼠存活率高于0

5、2.

4

mg/kg

ADR组。与空白组比较，模型组左

心室收缩压(LVSDP)、左心室内压最大上升/下降速率(±dy/kt

mcp)、心脏指数均显著降低(P<4.

4-

；P<4.

45),

BNP含量显著

升高(P<4.

41)；心肌出现病理损伤,左心室心肌壁厚度显著降低(P<4.

41),心肌凋亡指数显著升高(P<2

/-),心肌组织蛋白

Casyase3、Bax表达增加(P<4.45)

,BT-2表达降低(P<4.45)，心肌细胞凋亡明显(P<4.45)。芪苈强心胶囊治疗后，各项检测

指标与模型组比较均有显著改善(均P<4.45)。结论

采用腹腔注射ADR

3.

4

mg/kg,I次/w,连续8

w的方法可制备稳定的

CHF动物模型。〔关键词〕阿霉素;慢性心力衰竭;心功能;心脏指数〔中图分类号〕R995.

0；R272.

0

〔文献标识码〕A

〔文章编号〕10552252(2021

)12257626；do：053962/jissn.40552200.252001039Study

on

the

model

of

chronic

heart

failure

induced

by

adriamycin

in

ratsZHANG

Yi-Xin,

JI

Feag-Lan,

WANG

Xin,f

al・Changchun

University

of

Traditional

Chinesn

Medicine,

Changchun

1211,

Jilin,

China[Abstract

h

Objective

Ta

estab/sh

a

moPci of

chrosic

heart

failure

induced

bp

ab/amycik

anO

to

stanOaOize

the

evaluatiosindex

of

the

mohei.

Methodt

Wistar

rats

were

OivideO

into

three

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each

gyup

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OiviOeO

into

blank

gyup

(

A

,

D

,

G)

,

mohei

gyup

(

B

,

E

,

H)

,

anO

positive

drup

(

/

,

F

,

I)

.

After

the

start

of

the

expe/oeot：

ayup

B

anO

ayup

/ were

intrape/toseally

injected

with

ab/amycik

-.

3

mg/kg

twice

a

weed

far

0

cossecutive

weeds,

while

group

A

was

intraye/pseally

injected

with

3 ml/kg

oormai

salike

of

the

same

volume.

Group

/

was

giveo

4.

83

g/kg

qi/qiapyxio

caysulo

osce

a

Oap

far

73

cossecutive

Oays.

Group

A

anO

group

B

were

giveo

3

ml/kg

of

Uisk/ed

water

of

the

same

volume

；

Group

E

anO

gohp

F

were

inWaye/Osevlly injected

with

ab/amycik

6.

4

mg/kg

osce

a weed

far

4

weeds,

while

group

D

was

intraye/pseally

injected

with

3 ml/kg

oormai

salike

of

the

same

volume.

Group

F

was

giveo

4.

33

g/kg

qi/qianyxio

caysulo

osce

a

Oap

far

0-

cossecutive

Oays.

Group

D

anO

goup

E

were

giveo

3 ml/kg

of

Oisk/ed

water

of

the

same

volume.

Ad/amycio

was

intrape/toseally injected

into

group

H

anO

group

I

at

3. 4

mg/kg osce a

weed

far

8

cossecutive

weeds.

Meanwh/e, 14

ml/kg

of

oormai

salioc

of

the

same

volume

was

inWaye/Osevlly

injected

into

group

G.

Goup

I was

giveo

4.

83

g/kg

qi/qiapyxio

capsule

osce

a

Oap

far

50

cossecutive

Oays.

Group

g

and

group

H were

giveo

3

ml/kg

of

Oisk/ed

water

of

the

same

volume.

After

the

eod

of

the

expe/oeot,

the

survival

op,

carOiac

fuoctios

,

carOiac

weight

OUex,

pathological

changes

of

myocarOial

tissue

anO

myocarOial

cell

apopPsis

were

ohseyeO.

The

costeot

of

B-ppe

oatriuretic

peptiUe

(

BNP

/

was

OePcPd

bp

ELISA

,

anO

the

pypiu

expyssioss

of

Caspase3

,

Bex

anO

BT-0

were

Oetecpd

bp

Western

blot.

Resnlts

The

survival

rates

of

rats

io

the

3.

4

mg/kg

group

were

higher thao

those

iu

the

1.3

mg/kg and

6.

4

mg/kg

groups.

CompareU

with

the

costrai

group

,

LVSP

,

土dp/

Ot

Mcx

anO

carUiac

weight

index

iu

the

3. 4

mg/kg

mohei

group

were

sionificaptly

lower

(P<1 4-

ar

P<<.

45/

,

while

BNP

costext

was

sionifican/y

higher

(P<4.

4-

/ :

The

myocardium

was

pathologically

Uamaaed.

The

thichoess

of

left

vextocular

myocarUial

wall

was

sig)基金项目:国家重大新药创制专项(2618ZX60711061-960-965)通信作者:徐惠波(365-),女，主任药师，硕士生导师，主要从事中药基础及应用开发研究。第一作者:张译心(394-),女，硕士在读,主要从事动物模型的制备研究。

张译心等

阿霉素致大鼠慢性心力衰竭模型建立

第12期•

2577

•nificaztly

decreased

(

P<2.

6)

1

,

myocardial

apopmsis

0©乂

was

siynifican/y

iocoased

(

P<2.

2)

)

,

the

expossCos

of

cardiac

tissue

proteios

Caspase

3

and

Bo

were

iocoased

(

P<2.

H1

,

and

the

expossioo

of

Bcl-0

was

decreased

(

P<2.

H)

,

which

promoted

the

ap­optosis

of

myocardial

cells.

By

positive

druu

qiCqianyxiu

capsule

Deatmext,

compared

with

the

mobei

youp,

the

test

indicators

haO

beex

siynificazhy

improved.

Conclusions

SwOW

azimai

mobels of

chrooic

heart

failure

were

popaon

by

inDape/mpeal

injeckoo

ofUoxoruUiciu

3.6

ms/0g

ooce

a

weed

for

8

weeds.

The

mobei

could

be

evaluated

objectively

by

detecting

cardiac

funckoo,

cardiac

mass

匚(乂，0BNP

coxtext

and

myocardial

pathologicai

chazyes.【Key

words]

DoxoruUiciu;Chrooic

heart

failure；Cardiac

fuoctiox;Cardiac

indey慢性心力衰竭（CHF）常见于各种心血管疾病

WLL2017D02。的终末期阶段，是一种具有高患病率和高死亡率的

1.2仪器

多导生物记录仪（AD仪器公司产品），

酶标仪（BcTed仪器有限产品、，紫外分光光度计

临床常见病⑴。阿霉素（ADR）属于蔥醌类药物，是

临床常用的一种高效肿瘤化疗药物，长期使用可损

害机体的心肌组织,具有严重的心脏毒性，引发剂量

依赖性不可逆的心肌损害和CHF2"〕，因此ADR致

大鼠CHF动物模型已经成为基础研究中常采用的

动物模型。虽然该模型应用的文献报道很多，但方

法不一，多种多样,也无统一的评价标准,本实验通

过采用ADR不同的造模方法，建立稳定的大鼠CHF

模型，并以治疗CHF的阳性药罠苈强心胶囊对造模

结果进行验证，旨在建立一种稳定可重复的ADR诱

导CHF动物模型,并规范模型评价指标，为该模型

在药理学研究中更好应用提供方法学依据。1材料与方法1.1

药物与试剂

ADR：批号：2703E3、1909E2,由

深圳万乐药业有限公司经销;罠苈强心胶囊:批号:

A207004,由石家庄以岭药业股份有限公司经销。注射用生理盐水购自吉林康乃尔药业有限公

司；乌来糖购自国药集团化学试剂有限公司;肝素钠

购自北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司；甲醛购

自天津市北联精细化学品开发有限公司；甲醇购自

北京化工厂;二喹咻甲酸（BCA）总蛋白定量测试盒

购自南京建成生物工程研究所;B型利钠肽（BNP）、

酶联免疫吸附试验（ELCA、试剂盒购自RD公司；

RIPA、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-

PAGE）上样缓冲液、T/s液、TBST均购自康为世纪

生物科技有限公司；GAPDH（G-9）IgG2、B细胞淋巴

瘤（Bel）

-0（

CD

/

IgG2、Bci-0

相关

X

蛋白（Boe）

（B-

2）1gG2b>Casyasa-3（C-0）1gG0o

均购自

Santo

Cruz

公

司；TUNEL试剂盒购自美国Rocha公司。1.2动物

健康7周龄SPF级WCtar大鼠,雌雄均

可，体重（220±20）g,购自长春市亿斯实验动物技术

有限责任公司J

SCXK（吉）D016D003〕,饲养于吉林

省中医药科学研究院屏蔽环境动物室〔SYXK（吉）

2015-0009〕，本实验经过吉林省中医药科学院动物

伦理委员会批准实施，伦理审批号JLSZKYD-（上海元析仪器有限公司产品），高速冷冻离心机

（安徽中科中佳科学仪器有限公司产品），六一电泳

仪（北京市六一仪器厂产品），Imager（

U/ro-EioWi

PoPucis

LW产品），石蜡切片机及石蜡包埋机（德国

Leicu公司产品），光学显微镜（日本Olympus公司

产品），图像分析系统（日本NIKON公司产品）。1.2造模与分组

WCtar大鼠150只,试验分3批

进行，每批均分空白组、模型组、阳性药组，随机分

组，共计9组。具体分组、造模及给药方法如下：第一批,ADR注射量为2.

0

mg/kg：试验分为空

白组（A组）17只,模型组（B组）24只，阳性药组（C

组）24只。试验开始后B组、C组腹腔注射ADR

2.0

mg/kg,次/w,连续9

w,

A组同时腹腔注射同

体积生理盐水17

mWkg;C组灌胃罠苈强心胶囊

0.

37

g/kg,《次/d,连续47

d,

A组和B组同时灌胃

同体积蒸馏水2

ml/0go第二批,ADR注射量为0.

0

mg/kg：试验分为空

白组（D组）10只，模型组（E组）25只，阳性药组（F

组）24只。试验开始后E组、F组腹腔注射ADR

0.

0

mg/kg,I次/w,连续18

w,D组同时腹腔注射同

体积生理盐水17

mWkg;C组灌胃罠苈强心胶囊

0.

37

g/kg,I次/d,连续92

d,D组、E组同时灌胃同

体积蒸馏水10

mWkgo第三批,ADR注射量为7.

0

mg/kg：试验分为空

白组（G组）13只,模型组（H组）24只，阳性药组（

组）24只。试验开始后H组、、组腹腔注射ADR

3.0

mg/kg,I次/w,连续8

w,G组同时腹腔注射同

体积生理盐水17

mWkg；I组灌胃罠苈强心胶囊

0.

37

g/kg,2次/d,连续56

d,G组、H组同时灌胃同

体积蒸馏水10

mWkgo1.2存活率计算各组记录初始动物数，试验结束

后记录各组存活动物数，计算各组动物的存活率。1.2心功能检测

末次给药后30

min,各组随机选

取2只大鼠，称重，腹腔注射乌来糖（2.2

g/kg、

2

mWky）麻醉，仰卧固定，右侧颈总动脉插管经压

•

2578

•中国老年学杂志2021年7月第41卷力换能器接生理记录仪，记录心率、收缩压（SBP）、

舒张压（DBP）后，继续将导管插至左心室，记录左心

室收缩末期压力（LVESP）、左心室舒张末期压力

2

结

果2.1

ADR致大鼠CHF对存活率的影响

A组存活

率为

10%

（12/1）

,D组存活率为01.07%

（11/

（LVEDP）、左心室内压最大上升/下降速率（土dy/dt

muc）

°1.2心脏指数测定心功能检测结束后，去除腹腔

2、，G组存活率为10%

（18/18

）

；

C组存活率为

62.

5%

（17/20），组存活率为

62.

5%

（17/20）

,1

组

内腹水后再次称重,计算腹水重量=体重-去腹水体

存活率为91.

7%

（22/24）

；

B组存活率为70.

58%

（17/24）

,

E组存活率为6& 00%

（17/25）

,

H组存活

率为37.90%

（21/24）,即模型组存活率：H组>B

重;取心脏,去除非心肌组织,洗净血液,滤纸吸干水

分,称全心重量。计算心脏指数（HW/BW）=全心

重量/体重。1.2心肌组织中BNP含量检测

每组随机选取1

组〉E组，说明8.

0

my/hy剂量组模型的制备动物存

活率较高。2.2

ADR致大鼠CHF对心功能的影响

ADR

只大鼠，腹主动脉取血，经8

000

Omic离心17

min,

分离血清，-80%：保存备用。ELISA检测血清中

1.

9

mghy组:与A组相比，B组心率、SBP显著下

BNP的含量。1.2心肌组织苏木素-伊红（HE）染色观察

每组

降，-dy/dt

muc有降低趋势，LVEDP显著升高（P<

0.01）,LVESP、+dy/dt

muc

显著降低（P<0.01）；与

B组相比，C组心率、SBP、LVESP均显著升高（P<

随机选取若干只大鼠,摘取心脏,称重后,将部分心

肌组织固定于1%甲醛溶液中,HE染色，光镜下心

肌细胞形态学观察,并测量心室壁厚度°0.01；P<0.

05）

°ADR

2.0

my/ky组：与D组相比,E组SBP和

1.10心肌组织凋亡率检测各组随机选取8只大

鼠，摘取心脏，将部分心肌组织固定于12%甲醛溶

LVESP

显著降低（P<0.

01

；P<0.

05）

,

LVEDP

显著升

高（P<0.

05）,

DBP有升高的趋势，土dy/dt

muc有降

低趋势（P>0.

05）；与E组相比，F组SBP、DBP、

LVESP、土dy/dt

max均显著升高（P<0.

01

,P<0.

05）,

液中，进行TUNEL染色，观察心肌细胞凋亡情况，计

算凋亡率。1.11心肌组织中相关蛋白的检测动物采血后，

取部分心肌组织,-80%保存备用,通过Wekeo印

LVEDP

显著降低（P<0.

05）

°ADR

/

0

my/hy

组:与

G

组相比,H

组

LVESP、

土dy/dt

max均显著降低（P<0.

01；P<0.

05）,心率有

降低的趋势，DBP和LVEDP有升高的趋势（P>

迹分析心肌组织中凋亡信号通路蛋白Casyase3、

BapBciA表达的变化。1.12统计学方法

采用SPSS22.

9软件统计进行t

0.05）；与H组相比6组心率和LVESP显著增加

（P<0.

05），土dp/dt

muc

增加（P<0.

05），见表

1

°检验。表1

ADR致大鼠CHF对心功能的影响（亍=

2）组别LVESPmmHgs)LVEDP(

mmHgs)

+dp/5-

muc(

mmHgs)

-dp/5-

muc(

mmHgs

-心率（次/min

-SBP(

mmHg

-DBP(

mmH//组160.

00±17.

2012.

68±15.

067159.

18±18.

7153-22.

42±5.21-15.

22±8.

56117 554.

58±e44.

986

98.

01±1

426.

825

905.59±955.655 798.

2/±1

110.77-5 229.

15±969.

56382.

00±53.

8138.

38±1.

918.

66±18.

728.

66±20.

8399.

47±18.

48B组D组E组F组6

2/6.

07±1

137.

827-4

453.

47±91.

197339.

30±42.

067125.77±1.

8/13-4 944.

87±696.

1391.61±33.

278314.

64±12.

675

3-4

985.49±388.

82-4 603.

61

±912.

0/363.

17±48.

79146.

34±1.

92-12.

11±7.

12-12.

43

±7.

27-8.

20±7.

47/

3-17.

25±12.

0573172.

95±)5.35152.41±9.

195

385.

17±21.

192. 52±1.

38372.

92±33.

12154.

07±7. 49/

3181.34±15. 0143G组171.54±22.

0319.

02±20.

7793-14.

20±12.

076

974.

02±1

340.

037

3-5

598.

75±584.

17

3341.59±38.

98129.

27±12.

397

3115.02±12.

697

314

765.

23

±4 604.

47-9

985.

60±3

331.39358.27±56.

4712.

93

±1.

7589. 95±1.

298

8/5.

14±2

739.

0293-6 295.41±1

755.

306

3334.

31±67. 151

954.

8±4

300.

00173-8 905.

8±3 060.

817

3392.

57±55.

34173H组I组-9.

32±9.

74-8.98±11.

59159.

17±23.

5511.69±29. 1212.

38±9.01173148.

38±11.27127.

97±1.

08与

A

组比较：1)P<0.91；与

B

组比较：2)P<0.

05,3)P<0.01；与

D

组比较：4)P<0.

05,5)P<0.01；与

E

组比较：6)P<0.

05,7)P<0.01；与

G

组比较/)P<0. 05,9)P<0.

91；与

H

组比较：1)P<0.

05,11)P<0.

91,表2,表5

同2.3

ADR致大鼠CHF对心脏重量及心脏指数的

影响

ADR

1.

9

mghy组:与A组相比,B组体重和

有升高的趋势（P>0.05）

°

ADR

2.

0

mghy组:与D

组相比,E组体重和心脏重量显著降低（P<0.

01）,

心脏重量均显著降低（P<0.

01），腹水重量和心脏指

腹水重量显著增加（P<0.01）（与E组比较,F组大

数有增加的趋势（P>0.

05）；与B组相比,C组体重

鼠体重有降低的趋势（P>0.05）O

ADR

8.0

my/hy

张译心等

阿霉素致大鼠慢性心力衰竭模型建立

第2期-2579

-组:与G组相比，H组体重、心脏重量、心脏指数均

显著升高（P<4.42）；与模型组比较，阳性药组BNP

显著降低（Pv2.2）;Pv2.

25）,腹水重量显著增加

（Pv2.

22）；与H组比较《组大鼠体重、心脏重量及

含量显著降低（P<2.

42）,见表3o表0

ADR致大鼠CHF对心脏指数的影响（丘土s,

=

12）组别体重（g）心脏重量（g）).21

±2.

26心脏指数均显著增加（Pv2.

2）

;Pv2.

25），腹水重量

显著降低（Pv2.

42）,见表0o2.4

ADR致大鼠CHF对血清BNP含量的影响ADR

）.5

mg/gg组:空白组与模型组比较无显著差

腹水重量（g）心脏指数（％）2. 92±3.

63A组543.

42±27.

30C组32).28±33.422.

107

±2.

0892.

239

±2.

2202.

242±2.

2162.

232±2.

2172.

222±2.

2152.32±2.

222B

组

207. 22±35.0)2)2.

71

±2.

21128.

82±22.

2627.

63

±12.

222. 25

±3.

072.

77

±2.

1)).27

±2.

1)异（P〉2.

25），与模型组比较，阳性药组BNP含量显

著降低（PV2.2））。ADR

2.4

mg/kg组：与空白组比

较,模型组BNP含量显著升高（P<2.4））;与模型组

D组553.

34±42.

42E

组

203.

93±25.

296)

2.

65±2.

080)32.

63±12.

406)2.

222±2.

217F组275.

2±32.

75G组345.

91

±24.

422.

61

±2.

082.

96

±2.

2727.

31

±15.

636.

13±).58比较，阳性药组BNP含量显著降低（PV2.25）。

ADR

3.

4

mg/kg组:与空白组比较,模型组BNP含量

H

组 216.

65±12.

260)

2.

43±2.

270)2).03±8.3)9)2.

292±2.

2258

1I

组

234.69±l).78n)2.

76±2.

O812)2.53±3.

8612)2.

322±2.

23217

1表9

ADR致大鼠CHF对血清BNP含量及左心室壁厚度的影响（x±^,

=

14,pg/ml）组别空白组模型组BNP(pg/ii)左心室壁厚度（pjn

）3.

2

is/kg425.78±4).9)1.

5

ig/kg2.

2

is/kg822.

52±92.

331128.

22±92.

20411.

5

ig/kg3

152.

63

±529.

252.

2

ig/kg3.

2

is/kg925.

02±135.46840.

32±22.

28749.

52±92.

87912

933.

52±419.

422

322.

24±185.

4912

215.

53±367.

162

242.

47±257.

3)1

617.

32±252. 384

11

798.

29±162.

230)75).92±62.

1541613.43±32.

369

12

355.44±227.492)1

617.

32±252.

38阳性药组974.

52±137.

6771与空白组比较：1）

P<2.

25

9）P<2.

2）；与模型组比较：3）

P<2. 25

9）P<2.

2）,表4同12

ADR致大鼠CHF对左心室壁厚度的影响

ADR

）.5

mg/kg组:与空白组比较，模型组左心室壁

厚度降低（PV2.25）。ADR

0.

4

mg/kg组:与空白组

比较，模型组左心室壁厚度显著降低（PV2.21）;

ADR

3.

4

mg/kg组:与空白组比较，模型组左心室壁

厚度显著降低（P<4.42）;与模型组比较，阳性药组

左心室壁厚度显著增加（Pv2.

25）,见表3o19

ADR致大鼠CHF对心肌组织形态学的影响HE染色结果显示：ADR

）.5

mg/kg组：A组心肌

细胞排列紧密，心肌间质可见轻微水肿、疏松;B组

心肌细胞体积变小，左心室壁厚度明显变薄,心肌间

质可见水肿;C组大鼠左心室壁变薄,心肌间质疏松

区域减少。ADR

0.

4

mg/kg组：D组可见局部少量

心肌间血管充血;E组左心室壁变薄,心肌间质可见

明显水肿、疏松;F组大鼠左心室壁变薄，心肌间质

水肿、疏松程度减轻。ADR

3.

2

mg/kg组:G组心肌

纤维排列规整,细胞核多位于肌纤维中央，心肌间质

C组

F组

I组未见渗出、未见水肿，心肌内血管未见扩张充血，心

图1

ADR致大鼠CHF对心肌组织形态学的影响（HE,x204）内膜、外膜亦未见炎细胞浸润；H组心肌细胞变性、

水肿;心肌间质间隙扩大;心肌纤维染色不均;左心

室壁厚度明显变薄,左心室腔变大;乳头肌处心肌纤

2.7

ADR致大鼠CHF对心肌组织凋亡指数的影

响分别与各自空白组比较，ADR

）.5、2.

2、

3.

2

mg/kg模型组心肌细胞凋亡指数均显著升高

（P<2.

2） ;Pv2.

25）;与模型组比较,）.5

mg/kg

阳性

药组心肌细胞凋亡指数有降低趋势（P〉2.

25）

,0.

2、

维变性明显,呈典型的心肌病改变，心外膜可见炎细

胞浸润;）组心肌典型的心肌病改变，心肌细胞变

性、水肿;心肌间质间隙扩大;血管扩张,心肌纤维染

色不均的程度有所减轻，见图）o3.

2

mg/kg阳性药组心肌细胞凋亡指数显著降低

-2584

-中国老年学杂志2221年7月第41卷（Pv4.

45

）o2

2

ADR致大鼠CHF对心肌组织凋亡相关蛋白

表达的影响

ADR

-.

5

mg/kg组，与A组比较,B组

TUNEL染色显示，ADR

-.5

mg/kg组：A组凋

亡细胞数较少，凋亡阳性细胞呈深棕色;B组深棕色

Bcl-9显著降低，Bax、Caspasc-3显著升高（均P

<4.45）

；与B组比较，C组Bcl-9组显著升高（P<

凋亡阳性细胞散在分布在未凋亡的心肌细胞间；C

组可见极少见的呈深棕黄色阳性染色的细胞分布在

正常心肌细胞间，观察视野内凋亡阳性染色细胞数

量极少；ADR

6.

4

mg/kg组:D组散在分布的深棕色

4.1）

,Bax

显著降低（Pv4.

45）。ADR 0.4

mg/kg

组，与D组比较,E组Bcl-9显著降低,BgpACasyasc-

3显著升高（均PV4.

/-）;与E组比较,F组Bci-2显

凋亡阳性细胞数较少;E组可观察到视野内呈深棕

著升高（Pv/./l）

,Bax

显著降低（PV4.45）。ADR3

.

4

mg/kg

组，与

G

组比较，H

组

BaxACaspasc-3

显

色凋亡阳性细胞分布增加；F组可见数个呈深棕黄

色阳性染色的细胞分布，观察视野内凋亡阳性染色

著升高,Bcl-9显著降低（均P<4.

45）；与H组比较,

细胞数量减少;ADR3.4

mg/kg组:G组可见极少见

的呈深棕黄色阳性染色的细胞分布在正常心肌细胞

间,观察视野内凋亡阳性染色细胞数量极少;H组可

见数个呈深棕黄色阳性染色的细胞分布，观察视野

内凋亡阳性染色细胞数量增加6组可见数个呈深

棕黄色阳性染色的细胞分布，观察视野内凋亡阳性

染色细胞数量减少，见表4、图6o表4

ADR致大鼠CHF对心肌组织细胞

凋亡指数的影响=

1）组别1.

5

mg/kg2. 4

mg/kg3.

4

mg/kg空白组2.

41

±2.

472.

29

±2.

444. 92±4.

4模型组4.

22±-.921-4.

96±4.

776

-4.

51

±2.

252

-阳性药组3.56±0

253.55±4.

738)2.

11±1.758

-1

A组

D组

G组/

:B组

E组1•1«C组

F组

图-阿霉素致大鼠CHF对心肌组织凋亡的■w

4H组I组影响（TUNEL

染色，x2（M））I组Bci-2显著升高（Pv/./l）

,Bax显著降低（P<4.45）

:Casyase-3

有降低趋势（P>4.

45

-,见图

3、

表

5

。与空白组相比：-）P<4.

45,2）P<4.

44与模型组相比：3）P<2.

45,4）

P<4.1图9

ADR致大鼠CHF对心肌组织凋亡

相关蛋白表达的影响表5

ADR致大鼠CHF对心肌组织凋亡

相关蛋白表达的影响（丘±）,=4,%）组别BT-2Caspasv-3BaxA组34.04±4.4434.04±4.0434.04±4.04B组54.54±7.

34153.52±15.0-1-35.75±9.221)C组33.75±5.468

-39.75±15.0535.04±5.36

-D组34.04±4.4434.04±4.0434.04±4.04E组73.54±7.2362165.75±2-.466

2132.25±6.546

2F组95.25±6.642)39.25±3.69119.04±6.656-G组34.04±4.4434.04±4.0434.04±4.04H组63.44±6.335

-19-.24±15.045

-34.04±3.245-I组144.44±15.3411)35.04±34.9432.04±11.023-9讨论CHF是指由各种致病因素导致的心脏结构和

功能发生异常,表现为心脏负荷过重,心肌舒缩力下

降,导致心排血量不足,引起一系列临床症状和体征

的复杂综合征〔~7〕。研究显示，心室重构是CHF发

生的基本机制。心室重构是由于心肌容量或压力负

荷过重或心肌损伤,使心肌结构和功能发生改变，从

张译心等

阿霉素致大鼠慢性心力衰蝎模型建立

第2期• 2581

•而直接导致心肌收缩和舒张功能减退、心肌纤维化

4参考文献1

Huana

MY,

Li

WW,

Wu

J,et

ad

The

diagnosPc

value

of

cioulatina

及心肌细胞凋亡等一系列病理生理变化〔〕°

ADR

与心肌具有较强的亲和性，可直接损伤心脏的结构

micro RNAs

in

head

fai/re〔J〕.

Exp

Theo

Med ,291

；

17

(3

)

:

1985­2073.和功能，累计用药可诱发心肌细胞坏死、凋亡等，导

致心室重构，严重时诱发CHFC3^17

°0

Aurigemma

GP.

Diastolic

head

fai/re-a

common

anU

lethal

conUition

bp

anp

Engl

J

Med

6706

；335

(3)

：508-12.研究表明,CHF发生的基本机制是心脏收缩和

舒张功能下降，土dy/dt

muc是反映心肌收缩和舒张

的最大速度,+dp/dt

max主要受心率及前后负荷的

9

Quiles

JL,Huedas

JR,Battino

M,et

ad AntioxiCant

000x0

anU

ab-

Oamycic

Uxicip]

J〕.

TwCco+gp,2002

；8(1)

：97-P5.4王楚盈，李玉梅，刘畅，等•附子人参有效组分配伍对阿霉素致慢

性心衰大鼠血流动力学的影响及其机制研究〔〕•中药新药与临

影响，反映左心室的收缩功能,当心肌的收缩能力下

降时，+dp/dt

muc值也下降；-dp/dt

muc反映心肌

床药理6015；26(1)

：39A3.5

Sweitzer

NK,

Airbad

S.

Neo

therabeatic

target in heart

failure:

achie­舒张时心肌纤维收缩成分延长的最大速率，反映左

心室的舒张功能，当心肌的舒张能力下降时，-dp/dt

max值也下降[12653

°

LVESP是反映左心室内压上

升时达到的最大值,LVEDP反映舒张末期的左心室

内压，心力衰竭时由于心脏收缩性减弱，LVESP降

低;由于舒张功能障碍，心室顺应性降低，导致左心

室舒张末期容积扩大，LVEDP升高。因此，常用

LVESP,LVEDP和土dy/dt

muc作为评价心肌舒缩功

能的重要指标。BNP是在心室容积扩张和压力负荷增加时，由

心肌细胞合成并从心室释放的一种神经激素。研究

表明，心力衰竭时BNP分泌迅速增加，从而延缓心

脏前负荷的增加;也可通过充盈心室减轻体液负荷

和静脉充血，进一步调节心功能障碍。由于BNP分

泌增加是在心功能障碍时突发的，不受其他因素干

扰，因此由血浆BNP水平反映心功能状态更具代表

性，常作为评价心力衰竭的金指标〔/65〕°心力衰竭导致心室重构,心肌细胞大量丢失,细

胞凋亡是心室重构致心肌细胞丢失表达的主要形

式。心力衰竭时神经内分泌系统激活，分泌物质可

诱导心肌细胞凋亡,心肌细胞减少，导致心肌收缩力

下降，心功能发生障碍,进一步加重心力衰竭〔4"8°

心力衰竭时由于心脏负荷加重，心室内压力增大导

致心肌细胞舒张变细,心室壁变薄;心肌细胞凋亡使

细胞数量减少，可进一步促进心室壁变薄。心力衰

竭时，由胶原、纤维黏连蛋白等组成的心肌细胞外基

质被破坏，出现心肌纤维化〔360〕°综上,ADR诱导CHF可导致心室重构,心脏舒

缩功能下降，心重指数下降,BNP含量升高,左心室

壁变薄，出现明显的心肌纤维化改变及心肌细胞凋

亡。8.

0

my/hy

ADR诱导CHF模型组各项指标检

测结果较1.

5

my/kg、2.

0

my/ky模型组结果更为显

著，并且造模周期短，动物存活率较高。因此，采用

腹腔注射ADR

8.

0

my/ky,1次/w,连续5

w的方法

制备大鼠CHF动物模型较理想。ving

an/ maintainina

normohalemia〔

J〕.

Cioulation

,2018 ；

157

(1)：

15312.6 Me

Cutcheon K,

Mata

P.

Left

¥6x1:009+0

remohellina

in

chronic

pri-

may

mitral

reyurgiPhon:implications

for

medical

theopy〔

J〕.

Cardio­vase

J

Ar,201

29(1)

：51-05.7金娟，崔璐，邹国良，等•参芪益心方对阿霉素诱导的慢性心力衰

竭大鼠心肌结构和细胞因子的影响〔J〕•中国实验方剂学杂志,

201；20(8)

：12322.9王学惠，刘慧兵,赵国安•神经调节蛋白10联合卡托普利对慢性

心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及相关基因表达的影响〔〕•中国病

理生理杂志

6717

；33(3)

：417A2.2吴思思，蒋维.20和Sioh在阿霉素诱导的心脏损伤中的作用

〔〕•生命科学6019

21

(7)

：605

20.2

李玉玲，杨建业,唐俊明，等•阿霉素诱导大鼠心衰模型不同方

案的比较〔〕•中国比较医学杂志,2009；1(2)

：93A.2

吴慧颖，才子斌，王芳，等•

Wioas大鼠慢性心力衰竭模型的制备

及指标判定〔〕•中国老年学杂志601222(4)

：778A2

杨宝峰，陈建国.药理学〔M〕•北京：人民卫生出版社,2015：

2/8

A3.2

金惠明.病理生理学〔M〕•第5版.北京:人民卫生出版社,

2001

：14.2

韩鹏飞，桂艺芳,鞠传余，等•联合检测H-FABP和BNP在慢性

心力衰竭患者预后及危险分层中的作用〔J〕•中国循证心血管

医学杂志,2715；9(4)：27821•2

Shawn

H,

ReyPaulk

BS,

Valentina

Canuone

MD,et

ad

DiOereatial

reyula/on

of

ANP

and

BNP

in

acute

yecompeasated

heart

failure:

de-

fiPeacy

of

ANP〔J〕.

JACC

Head

Fail,

2012

；2(

1)

：8912.2

魏玲,李慧萍，魏伟，等•慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡、心肌纤维

化及其相关性研究〔〕•西南国防医药6718;48(1)：a32•17李石清，宋洁6长春椿，等•参附注射液对慢性心衰大鼠心功能

及心肌细胞内Ca7+浓度的影响〔J〕.浙江中医杂志,2017；

52

(

6):4352702

韩额尔德木图，马月宏,王海燕，等•慢性心衰的病理生理及发

病机制研究进展〔〕〕•中西医结合心脑血管病杂志,2012；14

(12)

：14922.2

Li

I,

Zhao

Q,

Kona

W.

Extracel/las

matro

remohelina

anU

carbiac

fiboWs〔

J〕.

MatOc

Biol

,201

；1

(1)

：2-9.20

Evict

SP,

Wibiaprabj/

A.

Mast

cells:

dey

contObutou

tocarbiac

fibre-

Ws〔J〕.

At

J

MW

22

6018;2(1)

：231.〔20274746

修回〕(编辑李男)